材料青霉素G的抗菌作用快而強(qiáng)

1、得分評(píng)卷人一、共 20 分 材料：青霉素材料：青霉素 G 的抗菌作用快而強(qiáng)，低濃度抑菌，高濃度殺菌。其抗菌譜較窄，的抗菌作用快而強(qiáng)，低濃度抑菌，高濃度殺菌。其抗菌譜較窄，主要對(duì)革蘭氏陽性及陰性球菌、革蘭氏陽性桿菌、主要對(duì)革蘭氏陽性及陰性球菌、革蘭氏陽性桿菌、螺旋體螺旋體及及放線菌放線菌有強(qiáng)大的抗菌作有強(qiáng)大的抗菌作用。對(duì)革蘭氏陰性桿菌的作用較弱。對(duì)結(jié)核桿菌、用。對(duì)革蘭氏陰性桿菌的作用較弱。對(duì)結(jié)核桿菌、真菌、立克次氏體、病毒真菌、立克次氏體、病毒等均無等均無效。效。細(xì)菌細(xì)菌對(duì)青霉素對(duì)青霉素 G 可產(chǎn)生耐藥性，尤其是金黃色葡萄球菌的耐藥性較為常見。可產(chǎn)生耐藥性，尤其是金黃色葡萄球菌的耐藥性較為常見。

2、青霉素青霉素 G 毒性很低，最主要的不良反應(yīng)是過敏反應(yīng)。毒性很低，最主要的不良反應(yīng)是過敏反應(yīng)。請(qǐng)將本材料中提到的微生物（下標(biāo)線標(biāo)示的）按照細(xì)胞水平進(jìn)行分類；（3）1比較細(xì)菌、放線菌、真菌、病毒在繁殖（或增殖）方式方面的區(qū)別；（4）2結(jié)合所學(xué)的微生物學(xué)知識(shí)，闡述青霉素的藥理；（4）3闡述耐藥性產(chǎn)生的可能遺傳機(jī)制及生化機(jī)制；（5）4結(jié)合所學(xué)的免疫學(xué)知識(shí)，闡述青霉素過敏反應(yīng)的機(jī)理；（4）5答：原核細(xì)胞型微生物：細(xì)菌、螺旋體、放線菌、立克次氏體(1)1 真核細(xì)胞型微生物：真菌(1) 非細(xì)胞型微生物：病毒(1) 細(xì)菌：二分裂無性繁殖(1)2 放線菌：以產(chǎn)生無性孢子繁殖為主(1) 真菌：以產(chǎn)生無性孢子和有

3、性孢子繁殖為主(1)病毒：以復(fù)制的方式增殖(1)無論是 G+細(xì)菌還是 G-細(xì)菌細(xì)胞壁中都有肽聚糖成分。(1)青霉素的作用是抑3制肽聚糖合成最后階段的交聯(lián)作用轉(zhuǎn)肽反應(yīng)，不論 G+細(xì)菌還是 G-細(xì)菌都是一樣，只不過具體作用位點(diǎn)不同。這樣，細(xì)菌不能形成完整的細(xì)胞壁而裂解死亡。(2)由于 G-細(xì)菌外膜的通透屏障作用，使青霉素不易達(dá)到它的作用靶位，從而使 G-細(xì)菌對(duì)青霉素不敏感(1) 遺傳機(jī)制：自發(fā)突變加藥物選擇(1)；細(xì)胞間抗藥性的基因轉(zhuǎn)移(1) 4生化機(jī)制：產(chǎn)生使抗生素結(jié)構(gòu)改變的酶(即鈍化酶) (1)；作用靶位的改變(1)；細(xì)胞通透性的改變(1)青霉素分子量較小，單獨(dú)不能使機(jī)體產(chǎn)生抗體，其降解物青霉

4、噻唑酸或青霉烯酸，5都能與人體蛋白結(jié)合，獲得免疫原性(1)，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性 IgE 抗體(1)，其Fc 段與肥大細(xì)胞和/或嗜堿性粒細(xì)胞上 FcR 結(jié)合，使機(jī)體致敏(1)。當(dāng)再次接觸青霉素時(shí)，即可能發(fā)生過敏性休克(1)。青霉素稀釋成溶液后，一般在 612 小時(shí)可降解，因而使用青霉素要新鮮配制。少數(shù)情況下，初次注射青霉素也可發(fā)生過敏性休克，其原因可能是吸入過青霉菌孢子或曾使用青霉素污染的注射器而被致敏。青霉素過敏與過敏體質(zhì)有密切關(guān)系。據(jù)統(tǒng)計(jì)約 30%青霉素過敏患者曾有其它過敏史，如哮喘，過敏性鼻炎等。得分評(píng)卷人二、共 15 分材料：材料：1998 年，年，Ermak TH 等報(bào)道利用基因敲除等

5、報(bào)道利用基因敲除(gene knockout)的的 MHC I 類分子類分子缺陷小鼠、缺陷小鼠、II 類分子缺陷小鼠、類分子缺陷小鼠、B 細(xì)胞免疫反應(yīng)缺陷小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分別以幽門螺細(xì)胞免疫反應(yīng)缺陷小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分別以幽門螺桿菌桿菌(Hp)尿素酶和粘膜佐劑尿素酶和粘膜佐劑 LT 免疫小鼠，發(fā)現(xiàn)免疫小鼠，發(fā)現(xiàn) B 細(xì)胞免疫反應(yīng)缺陷小鼠與野生型細(xì)胞免疫反應(yīng)缺陷小鼠與野生型小鼠一樣獲得免疫保護(hù)，改變了人們最初關(guān)于保護(hù)性免疫一定是由小鼠一樣獲得免疫保護(hù)，改變了人們最初關(guān)于保護(hù)性免疫一定是由 Hp 特異性抗體特異性抗體所介導(dǎo)的看法，提示了所介導(dǎo)的看法，提示了 CD4+T 細(xì)胞細(xì)胞(TH 細(xì)胞細(xì)胞)在抗在抗

6、 Hp 感染中的重要作用。感染中的重要作用。請(qǐng)畫出免疫球蛋白(抗體)的基本結(jié)構(gòu)圖并標(biāo)出各個(gè)功能區(qū)及木瓜蛋白酶和胃蛋白1酶的酶切片斷（6）由抗體介導(dǎo)的免疫是體液免疫還是細(xì)胞免疫？抗體介導(dǎo)的生物學(xué)效應(yīng)有哪些(6)2請(qǐng)解釋 MHC、B 細(xì)胞、TH 細(xì)胞在免疫應(yīng)答中的各自作用。 （3）3答：1 體液免疫(2)，抗體介導(dǎo)的生物學(xué)效應(yīng)有： 中和作用與粘膜免疫作用2(1)； 激活補(bǔ)體溶解抗原靶細(xì)胞(1)；通過調(diào)理作用促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬清除抗原(1)；以 ADCC 途徑殺傷抗原靶細(xì)胞(1) MHC 參與處理與遞呈抗原(1)，B 細(xì)胞活化增殖為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞分泌抗體3從而介導(dǎo)體液免疫(1)，TH1 細(xì)胞即遲發(fā)性超

7、敏反應(yīng) T 細(xì)胞，是細(xì)胞免疫的效應(yīng)細(xì)胞，TH2 細(xì)胞輔助 B 細(xì)胞活化(1)。得分評(píng)卷人三、共 10 分某廠生產(chǎn)的一批維生素 C 片劑需要進(jìn)行微生物限度檢查（按照藥典規(guī)定，合格產(chǎn)品細(xì)菌數(shù)1000 個(gè)/g,霉菌、酵母菌數(shù)100 個(gè)/g,大腸桿菌不得檢出） ，請(qǐng)根據(jù)你所學(xué)的微生物學(xué)知識(shí)設(shè)計(jì)試驗(yàn)檢驗(yàn)該批產(chǎn)品是否合格。答：1、細(xì)菌和霉菌總數(shù)待測(cè)用滅菌生理鹽水梯度稀釋成 1:10、1:100、1:1000 的濃度(2)。分別吸取上述 10 倍稀釋的溶液各 1ml 于無菌平皿中，再加入 15ml 恒溫于 45的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，混勻，待凝固后將平皿于 3035倒置培養(yǎng) 48h，進(jìn)行平板活菌計(jì)數(shù)測(cè)定細(xì)菌總數(shù)。

8、霉菌總數(shù)和酵母菌總數(shù)的測(cè)定則需分別采用霉菌培養(yǎng)基（玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基）和酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。每個(gè)稀釋度應(yīng)取 3 個(gè)平皿作平行試驗(yàn)。細(xì)菌和霉菌的平板活菌計(jì)數(shù)法應(yīng)按規(guī)定報(bào)告結(jié)果。細(xì)菌宜選取平均菌落數(shù)在30300 之間的稀釋級(jí), 霉菌宜選取平均菌落數(shù)在 30100 之間的稀釋級(jí)作為報(bào)告菌落計(jì)算的依據(jù)。(2)2、控制菌檢查取膽鹽乳糖培養(yǎng)基 3 份，每份各 100ml，2 份分別加入規(guī)定量的供試液，其中 1份加入對(duì)照菌液作陽性對(duì)照，第 3 份加入與供試液等量的稀釋劑作空白對(duì)照。培養(yǎng)1824 h（必要可延至 48 h） 。空白對(duì)照應(yīng)無菌生長(1)。其余 2 份培養(yǎng)物劃線接種于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂平板或

9、麥康凱瓊脂平板，培養(yǎng) 1824 h。當(dāng)陽性對(duì)照的平板呈現(xiàn)陽性菌落時(shí)，供試品的平板無菌落生長，或有菌落但不同于下表所列的特征，可判為未檢出大腸桿菌(2)。培養(yǎng)基菌落形態(tài)曙紅亞甲藍(lán)瓊脂呈紫黑色、淺紫色、藍(lán)紫色或粉紅色，菌落中心深紫色或無明顯暗色中心，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤，常有金屬光澤。麥康凱瓊脂鮮桃紅色或微紅色，菌落中心深桃紅色，圓型，扁平，邊緣整齊，表面光滑，濕潤。如生長菌落與表 20-4 所列特征相符或疑似者，應(yīng)挑選 23 個(gè)菌落分別接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面，培養(yǎng) 18 h，作以下檢查：革蘭染色、乳糖發(fā)酵試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn) 、乙酰甲基甲醇生成試驗(yàn)（V-P 試驗(yàn)） 、枸櫞酸鹽利用

10、試驗(yàn)。當(dāng)空白對(duì)照試驗(yàn)呈陰性，供試品檢查為革蘭陰性無芽胞桿菌；乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣或產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；IMViC試驗(yàn)為陽性、陽性、陰性、陰性或陰性、陽性、陰性、陰性, 判為檢出大腸桿菌。對(duì)可疑反應(yīng)的菌株，應(yīng)重新分離培養(yǎng)后，再作生化試驗(yàn)證實(shí)(3)。得分評(píng)卷人四、共 15 分配置液體培養(yǎng)基（配方見下表） ，接入大腸桿菌培養(yǎng)，測(cè)定生長曲線。請(qǐng)回答： 葡萄糖 1.0 g 什么是生長曲線？ （1）1生長曲線包括哪些時(shí)期（圖示）？ （4）2生長曲線對(duì)發(fā)酵生產(chǎn)及科學(xué)研究有什么意義？（至少舉 3 例） (3)3如果在上述培養(yǎng)基中再添加 1.0 g 乳糖，然后接入大腸桿菌培養(yǎng)，則大腸桿菌的4生長曲線會(huì)發(fā)生什么變化（圖示）？

11、根據(jù)所學(xué)的微生物學(xué)知識(shí)解釋這一現(xiàn)象（文字說明加圖示） 。 （7）答：將一定量的純種單細(xì)胞微生物接種到適宜的定量液體培養(yǎng)基中，在適宜的條1件下培養(yǎng)，每隔一定時(shí)間取樣，測(cè)算菌數(shù)，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，可繪制一條群體有規(guī)律的生長曲線，這就是微生物的典型生長曲線（growth curve） 。生長曲線代表了細(xì)菌在適宜的環(huán)境中生長繁殖直至衰老全過程的動(dòng)態(tài)變化(1)典型的生長曲線可分為延滯期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期四個(gè)時(shí)期，正確認(rèn)2識(shí)和掌握生長曲線各期的特點(diǎn)對(duì)指導(dǎo)發(fā)酵生產(chǎn)和科學(xué)研究是十分必要的。(4)細(xì)菌群體生長中，延滯期的出現(xiàn)無疑是必須的。但在工業(yè)發(fā)酵和科研中，延3滯期會(huì)使生產(chǎn)周期延長而產(chǎn)

12、生不利影響，因此，深入了解延滯期產(chǎn)生的原因，影響延滯期長短的因素，采取有效縮短延滯期的措施，具有十分重要的意義。(1)對(duì)數(shù)期（logarithmic phase）細(xì)胞是研究菌體生物學(xué)性狀如形態(tài)、大小、染色性和基本代謝、生理的良好材料，是噬菌體吸附的最適菌齡，也是發(fā)酵生產(chǎn)用作種子的最適菌齡。(1)穩(wěn)定期（stationary phase）抗生素等次級(jí)代謝產(chǎn)物開始大量形成，抗生素發(fā)酵生產(chǎn)中應(yīng)考慮發(fā)酵液在此期放罐。(1)會(huì)表現(xiàn)二次生長現(xiàn)象(1)。4得分評(píng)卷人五、共 10 分材料：金黃色葡萄球菌是一種細(xì)菌，多數(shù)為非致病菌，少數(shù)可導(dǎo)致疾病。細(xì)胞球形，材料：金黃色葡萄球菌是一種細(xì)菌，多數(shù)為非致病菌，少數(shù)可

13、導(dǎo)致疾病。細(xì)胞球形，直徑直徑 1.0um 左右，排列成葡萄狀。金黃色葡萄球菌無鞭毛，無芽胞，幾乎所有金黃左右，排列成葡萄狀。金黃色葡萄球菌無鞭毛，無芽胞，幾乎所有金黃色葡萄球菌菌株的表面有莢膜多糖抗原的存在。色葡萄球菌菌株的表面有莢膜多糖抗原的存在。寫出金黃色葡萄球菌的學(xué)名（雙名法）(1) 1名詞解釋：芽孢、莢膜、抗原（3）2金黃色葡萄球菌能否運(yùn)動(dòng)？如何證明（至少兩種方法）？（3）3寫出革蘭氏染色法的過程及金黃色葡萄球菌革蘭氏染色的結(jié)果（3） 4答：Staphylococcus aureus (1) 1 某些細(xì)菌在一定營養(yǎng)條件下可向細(xì)胞壁表面分泌一層松散透明、粘度極大的2膠狀物質(zhì)即為莢膜(1)

14、；某些細(xì)菌，特別是 G+桿菌，生長到一定階段，在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形的、折光性強(qiáng)的特殊休眠結(jié)構(gòu)稱為芽胞，又稱內(nèi)生孢子(endospore) (1)；抗原（antigen, Ag）亦稱免疫原（immunogen）是指能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物（抗體或致敏淋巴細(xì)胞）在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)(1)。 不能(1)；鞭毛的功能主要是作為細(xì)菌運(yùn)動(dòng)的“器官”，可采用懸滴法和暗視3野映光法觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)狀況，還可以采用半固體瓊脂法穿刺培養(yǎng)，從細(xì)菌生長擴(kuò)散情況就可以初步判斷細(xì)菌能否運(yùn)動(dòng)。(2) 過程：涂片、干燥、固定結(jié)晶紫初染碘液媒染95乙醇脫色 4復(fù)紅復(fù)染(2)；金黃色葡

15、萄球菌革蘭氏染色后為紫色，是G+(1)得分評(píng)卷人六、共 10 分科學(xué)家篩選出了兩種不同營養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌 K12 突變株，其中菌株是組氨酸營養(yǎng)缺陷型，菌株是半胱氨酸氨酸營養(yǎng)缺陷型，將它們?cè)谕耆囵B(yǎng)基上混合培養(yǎng)后，再涂布于基本培養(yǎng)基（不含任何氨基酸）上。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在基本培養(yǎng)基上出現(xiàn)了的原養(yǎng)型菌落，而分別涂布的兩種親本菌株對(duì)照組都不出現(xiàn)任何菌落。解釋什么是菌株，什么是營養(yǎng)缺陷型菌株；（2）1解釋轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合這三種基因重組方式的差別（3）2設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明該實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象到底是由轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)還是接合引起的。 （5）3答：菌株是同種而不同來源的微生物的純培養(yǎng)物(1)1 營養(yǎng)缺陷型菌株是由于基因突變喪失了合成

16、某種生長因子的能力，必須依靠外界提供的菌株(1)三者根本區(qū)別在于 DNA 轉(zhuǎn)移的方式不同 2轉(zhuǎn)化：供體 DNA 片斷注入受體細(xì)胞，通過細(xì)胞膜(1) 接合：供體進(jìn)入受體通過性纖毛(1)轉(zhuǎn)導(dǎo)：供體 DNA 片斷通過媒介噬菌體攜帶進(jìn)入受體 (1) U 形管(3)DNA 酶(2)3得分評(píng)卷人七、10 分關(guān)于病毒：闡述病毒結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成（2）1根據(jù)核酸基因組類型和合成方法不同可將病毒分為哪些類型？（3）2試以 dsDNA 病毒為例，解釋病毒合成的基本過程（圖示） 。 （5）3答：病毒主要由核酸和蛋白質(zhì)組成。核酸位于病毒的中心，為病毒核酸基因組，其攜帶病毒復(fù)制所需的遺傳信息。蛋白質(zhì)是病毒的外殼，包圍著病毒

17、核酸基因組，構(gòu)成病毒一定的形態(tài)。病毒的蛋白質(zhì)可分為結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白。結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)成病毒的外殼、包膜子粒和存在于病毒體中的酶蛋白等，賦予病毒各種不同的形態(tài)；非結(jié)構(gòu)蛋白在病毒復(fù)制增殖過程中起一定的作用。所有的病毒蛋白基因均由病毒基因組編碼。(2)根據(jù)核酸基因組類型和 mRNA 合成方法不同可將病毒分成 6 類： dsDNA(DNA)、ssDNA(+DNA)、dsRNA(RNA)、ssRNA(+RNA)、ssRNA(-RNA)、逆轉(zhuǎn)錄病毒 ssRNA(+RNA) (3)得分評(píng)卷人八、八、共 10 分現(xiàn)有大腸桿菌的兩種以雙鏈 DNA 為遺傳物質(zhì)的烈性噬菌體 A 和 B?？茖W(xué)家提取了 A 的核心(用3

18、2P 標(biāo)記)和 B 的外殼（用35S 標(biāo)記）組裝成雜交病毒 C。用 C 感染一般培養(yǎng)液中的無標(biāo)記大腸桿菌，經(jīng)過短時(shí)間保溫以后(細(xì)胞尚未裂解)，用組織搗碎器攪拌接著進(jìn)行離心，分別測(cè)定沉淀物（主要是細(xì)胞）和上清液（主要是蛋白質(zhì)等分子）中的同位素標(biāo)記。請(qǐng)問32P、35S 分別存在于離心物的哪個(gè)部分？（2）1比較烈性噬菌體、溶源噬菌體的生活史（5）2如果本實(shí)驗(yàn)改為長時(shí)間保溫，請(qǐng)問產(chǎn)生的子代噬菌體是哪一種噬菌體？（3）3答：32P 存在于沉淀物中，35S 存在于上清液(2)1 噬菌體感染宿主細(xì)胞后，在細(xì)胞內(nèi)迅速增殖，最后使細(xì)胞裂解而死亡，這2類噬菌體稱為烈性噬菌體(virulent phage)。(1)噬菌體感染宿主細(xì)胞后，并不立即引起宿主細(xì)胞裂解，噬菌體與細(xì)胞建立穩(wěn)定的共存關(guān)系，噬菌體 DNA 整合(integration)至細(xì)菌染色體中，并隨宿主細(xì)胞的分裂而一代一代傳下去，這類噬菌體稱為溫和性噬菌體(temperate phage)或溶源噬菌體（lysogenic phage）(2)。通常把整合到宿主細(xì)胞染色體上，并隨同宿主一起復(fù)制的