二級生物安全

1、第一章總則第一條為加強本市二級生物安全防護實驗室生物安全管理，防止病原微生物通過實驗室向外環(huán)境擴散和實驗室感染，保護公眾和實驗室工作人員的健康，根據(jù)中華人民共和國 傳染病防治法、病原微生物實驗室生物安全管理條例、實驗室生物安全通用要求（GB19489-2008）等有關(guān)法律法規(guī)制定本規(guī)范。第二條本規(guī)范所指的二級生物安全防護實驗室（BSL-2實驗室，以下簡稱實驗室）是指從事衛(wèi)生部人間傳染的病原微生物名錄（下稱名錄）中所規(guī)定的適用于二級生物安全防護等級的病原微生物相關(guān)實驗活動的場所。本規(guī)范所指的實驗活動是指實驗室從事名錄中規(guī)定的適用于二級生物安全防護等級的病原微生物菌（毒）種或樣本有關(guān)的研究、教學(xué)、

2、檢測、診斷等活動。第三條本規(guī)范適用于本市行政區(qū)域內(nèi)的與人體健康有關(guān)的二級生物安全防護實驗室及 其實驗活動。第四條本市二級生物安全防護實驗室實行“預(yù)防為主、單位負責、突出重點、保障安全”的管理原則。第二章管理要求第一節(jié)組織管理第五條實驗室設(shè)立單位負責本單位實驗室的生物安全管理，負責建立本單位生物安全管理體系和管理制度， 落實生物安全管理責任部門或責任人；定期召開生物安全管理會議，對實驗室生物安全重大事項作出決策； 批準和發(fā)布實驗室生物安全手冊、風險評估等重要文件； 加強實驗室日?；顒拥墓芾磲t(yī) 、學(xué)教育網(wǎng)整理，對生物安全規(guī)定的落實情況進行檢查等。實驗室設(shè)立單位的法人代表應(yīng)對本單位實驗室生物安全負責

3、。第六條實驗室設(shè)立單位應(yīng)設(shè)立生物安全管理委員會，負責組織專家對實驗室生物安全進行咨詢、指導(dǎo)、評估和監(jiān)督等相關(guān)事宜。第七條實驗室生物安全管理責任部門的主要職責為：（一）負責組織制（修）訂和實施實驗室生物安全手冊、生物安全規(guī)章制度、操作規(guī)范 和標準操作規(guī)程，對研究方案進行審查和風險評估，并提出風險控制的措施；（二）監(jiān)督實驗室生物安全管理體系的落實，負責本單位實驗室生物安全防護，病原微生物菌（毒）種或樣本的保存、使用以及銷毀等，實驗室生物安全操作，實驗室排放廢氣、 廢水、廢棄物處置和消毒滅菌等規(guī)章制度實施情況進行監(jiān)督、檢查，并評估實施效果；（三）負責監(jiān)督實驗室工作人員健康狀況和健康監(jiān)測的開展；（四）

4、組織生物安全知識培訓(xùn)和演練，并評估效果；（五）負責制訂生物安全應(yīng)急處置預(yù)案。第八條實驗室負責人為實驗室生物安全第一責任人，其主要職責為：（一）全面負責實驗室生物安全工作；（二）決定并授權(quán)進入實驗室的工作人員；（三）督促有關(guān)法律法規(guī)、 生物安全規(guī)章制度和生物安全操作規(guī)程的執(zhí)行，糾正違規(guī)行為并有權(quán)作出停止實驗的決定；（四）任命實驗室生物安全管理員具體落實實驗室生物安全管理工作；（五）負責培訓(xùn)和實施實驗室生物安全應(yīng)急處置預(yù)案；（六）負責實驗室安全事故的現(xiàn)場處置和調(diào)查，并將調(diào)查結(jié)果以及處理意見向設(shè)立單位生物安全管理責任部門或責任人報告；（七）負責制定涉及感染性物質(zhì)的研究計劃、方案、操作程序、風險評估報

5、告、安全及 應(yīng)急措施、項目組人員培訓(xùn)及健康監(jiān)督計劃、安全保障和資源要求等；（八）負責實施實驗室工作人員健康監(jiān)護。第九條實驗室生物安全管理員的主要職責為：（一）負責實驗室生物安全保障以及技術(shù)規(guī)章方面的具體指導(dǎo)；（二）負責對菌（毒）種或樣本運輸管理、技術(shù)方法、程序、設(shè)施和設(shè)備進行日常的安 全檢查；（三）糾正違反生物安全操作規(guī)程的行為；（四）在出現(xiàn)潛在感染性物質(zhì)溢出或其他事故時，及時報告處置并協(xié)助事故調(diào)查；（五）檢查和監(jiān)督實驗室廢棄物的有效管理與安全處置；（六）檢查和監(jiān)督實驗室各項消毒滅菌措施的落實情況。第十條實驗室應(yīng)建立健全生物安全管理制度，編寫生物安全手冊，手冊應(yīng)包括（但不限于）以下內(nèi)容：（一）

6、實驗室生物安全管理體系；（二）生物因子生物危害評估；（三）實驗室人員和項目準入制度；（四）生物危險標識使用規(guī)定；（五）實驗室人員生物安全行為規(guī)范醫(yī)、學(xué)教育網(wǎng)整理；（六）實驗室生物安全應(yīng)急處置預(yù)案（包括泄漏處理、人員意外傷害、設(shè)施設(shè)備失效等 應(yīng)急處置預(yù)案）；（七）實驗活動生物安全標準操作規(guī)程；（八）人員健康監(jiān)護制度；（九）事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報告制度；（十）生物安全檢查制度；（十一）人員培訓(xùn)考核制度；（十二）實驗室內(nèi)務(wù)管理制度；（十三）實驗室菌（毒）種或樣本安全保管、使用、銷毀和檔案管理制度；（十四）菌（毒）種或樣本外送檢測和運輸管理制度；（十五）實驗室廢棄物管理制度；（十六）實驗室消毒

7、隔離制度；（十七）生物安全柜的使用和維護管理制度；（十八）其他必要的管理性和技術(shù)性文件。第二節(jié)備案第H一條在建設(shè)實驗室或開展實驗活動之前，實驗室設(shè)立單位的生物安全責任部門或責任人應(yīng)組織相關(guān)專業(yè)人員依照衛(wèi)生部名錄對擬操作的生物因子的危害程度、實驗活動的危險性、氣溶膠傳播的可能性、預(yù)防治療的獲得性、防護屏障的安全性、應(yīng)急預(yù)案的有效性等因素進行風險評估，確定相應(yīng)的生物安全防護水平等級。第十二條新建、改建或者擴建的實驗室應(yīng)當向所在區(qū)縣的衛(wèi)生行政部門備案。第十三條實驗室向所在區(qū)縣衛(wèi)生行政部門備案時，實驗室設(shè)施設(shè)備應(yīng)具備以下條件：（一）可以設(shè)置在共用建筑物內(nèi)，但應(yīng)相對獨立，入口處應(yīng)有二級生物安全防護水平實

8、 驗室標識、標明負責人、聯(lián)系電話。（二）實驗室的門應(yīng)有可視窗， 并應(yīng)可自動關(guān)閉；實驗室主入口的門應(yīng)有進入控制措施。（三）實驗室布局應(yīng)合理，設(shè)置清潔區(qū)、緩沖區(qū)和實驗操作區(qū)，實驗室的人流、物流應(yīng) 避免交叉。（四）墻壁、天花板和地面應(yīng)平整、不滲水、易清潔并耐化學(xué)品和消毒劑的腐蝕。實驗 臺和櫥柜應(yīng)牢固穩(wěn)定，實驗臺面防水、耐腐蝕、耐熱、易消毒。（五）實驗室必須設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近實驗操作區(qū)出口處，洗手龍頭應(yīng)為自動感應(yīng)式、長手柄式或腳踏式，備有洗手消毒皂液，必要時配備快速手消毒液。（六）實驗室可以利用自然通風。如果采用機械通風，必須避免交叉污染，不宜與大樓共用公共的中央空調(diào)系統(tǒng)。（七）如有可開啟式窗戶，

9、應(yīng)安裝可防蚊蟲的紗窗。（八）應(yīng)在實驗操作區(qū)配備生物安全柜。（九）應(yīng)按產(chǎn)品的設(shè)計要求安裝和使用生物安全柜。如果生物安全柜的排風在室內(nèi)循環(huán)，室內(nèi)應(yīng)具備通風換氣的條件； 如果使用需要管道排風的生物安全柜，應(yīng)通過獨立于建筑物其他公共通風系統(tǒng)的管道排出。（十）實驗操作區(qū)內(nèi)應(yīng)配備洗眼裝置，必要時應(yīng)設(shè)緊急噴淋裝置。（十一）應(yīng)在實驗室或其所在的建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器或其他適當?shù)南緶缇O(shè) 備，所配備的消毒滅菌設(shè)備應(yīng)以風險評估為依據(jù)。（十二）室內(nèi)應(yīng)有空氣和物體表面消毒的設(shè)備或設(shè)施醫(yī)' 學(xué)教育網(wǎng)整理。第十四條BSL-2實驗室向所在區(qū)縣的衛(wèi)生行政部門備案時應(yīng)提交以下材料：（一）備案登記表；（二）設(shè)立單位法

10、人資格證明資料（復(fù)印件）；（三）實驗室平面布局圖；（四）實驗室從事涉及病原微生物檢驗的項目或病原體名稱；（五）實驗室基本情況一覽表；（六）承諾書；（七）其他資料。第十五條各區(qū)縣衛(wèi)生行政部門應(yīng)當對實驗室提交的備案申請材料及時審查，對申請材料不齊全或者不符合法定形式的， 應(yīng)當在5日內(nèi)出具申請材料補正通知書； 申請材料齊全且符 合法定形式的，應(yīng)當在 20日內(nèi)作出備案登記決定。第三節(jié)實驗室管理第十六條實驗室或?qū)嶒炇以O(shè)立單位應(yīng)建立工作人員生物安全上崗考核制度和培訓(xùn)檔案。所有與實驗活動相關(guān)的人員都應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)并經(jīng)考核合格后方可上崗，取得上崗資格的人員每年應(yīng)接受培訓(xùn)。 實驗室負責人應(yīng)通過市衛(wèi)生行政部門

11、組織的生物安全培訓(xùn)，并考核合格。培訓(xùn)對象應(yīng)包括實驗室管理人員、操作人員、樣本運輸人員、消毒工作人員、廢棄物處置人員、儀器設(shè)備維修人員、外來進修人員等實驗室全體工作人員。培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)包括實驗室生物安全的基本知識、基本技能和應(yīng)急處置預(yù)案、生物危險和實 驗室感染預(yù)防、菌（毒）種或樣本管理、廢棄物處置、消毒隔離與職業(yè)個人防護等。第十七條實驗室應(yīng)每年對實驗人員開展與其從事實驗活動相關(guān)的健康體檢并建立人員 健康檔案，必要時進行免疫接種。 實驗室工作人員應(yīng)在身體狀況良好的情況下進入操作區(qū)工 作，若出現(xiàn)疾病、過度疲勞或其他意外狀況，不宜進入操作區(qū)。第十八條對可能使病原微生物及其毒素濺出或產(chǎn)生氣溶膠的操作，應(yīng)在生

12、物安全柜內(nèi)進行；如無法在生物安全柜內(nèi)進行而必須采取外部操作時，應(yīng)加裝負壓罩。生物安全柜的型號應(yīng)根據(jù)實驗的項目和對象確定。生物安全柜的使用應(yīng)做好使用記錄， 包括開機時間、使用時間、消毒方法及時間。生物安全柜安裝后、移位后、更換高效過濾器后應(yīng)對其生物安全性能進行檢測，正常使用后每年必須由具有專項資質(zhì)的第三方進行檢測，保存檢測記錄。檢測不合格的應(yīng)立即停止使用，并進行維修。第十九條對會產(chǎn)生氣溶膠或高濃度或大容量感染性物質(zhì)進行離心、混勻、超生霧化和劇烈攪拌等，應(yīng)使用密封的離心機轉(zhuǎn)子、安全的離心杯或樣本儲存容器， 在生物安全柜或負壓 罩中開閉、裝載和操作。第二十條禁止非工作人員進入實驗室。特殊情況下，非工

13、作人員進入實驗室須經(jīng)實驗室負責人批準，由專人陪同，并做好登記。第二十一條進出實驗應(yīng)更換工作服， 操作時應(yīng)佩戴手套、戴防護帽和口罩，必要時使用 面部保護裝置。當防護用品破損或污染物潑濺時應(yīng)立即更換。 應(yīng)著防護工作鞋。每次實驗結(jié) 束后和離開實驗室前應(yīng)及時洗手和消毒。第二十二條實驗室應(yīng)配備足夠的個人防護用品并有專柜存放。第二十三條實驗操作區(qū)禁止存放食品、飲料及其他非實驗用品。第二十四條實驗室檢測報告，應(yīng)采用電子通訊方式在清潔區(qū)打印、發(fā)放，如沒有條件， 檢測報告必須消毒后發(fā)放。第二十五條實驗室應(yīng)根據(jù)實驗活動的類型，生物因子的種類、污染程度和被消毒物品的特性選擇可靠的消毒方法。應(yīng)采用有效手段定期開展消毒

14、效果監(jiān)測，并要作好書面記錄。第二十六條實驗室實驗器材和廢棄物處置應(yīng)由專人負責。實驗棄置的菌（毒）種或樣本、培養(yǎng)物和被污染的廢棄物必須在實驗室或其所在的建筑 內(nèi)消毒滅菌，達到生物學(xué)安全后再按感染性廢棄物收集處理。經(jīng)消毒滅菌后處理的廢棄物包裝必須符合醫(yī)療廢物管理條例的規(guī)定。實驗廢棄物最終處置必須交由經(jīng)市環(huán)保部門資質(zhì)認定的醫(yī)療廢物處置單位集中處置。實驗用非一次性個人防護用品和實驗器材，必須經(jīng)過消毒滅菌后方可清洗。運送過程中應(yīng)防止有害生物因子的擴散。第二十七條實驗室空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)定期維護、清洗消毒，并有書面記錄。第二十八條實驗室必須執(zhí)行法定傳染病的報告，定期開展生物安全突發(fā)事件的應(yīng)急處置演練工作。第二十九

15、條實驗室應(yīng)建立實驗檔案，記錄實驗室使用情況和安全監(jiān)督情況醫(yī)' 學(xué)教育網(wǎng)整理。保存期限符合國家有關(guān)法律法規(guī)或標準的要求。第四節(jié)病原微生物菌（毒）種或樣本管理第三十條樣本采集人員應(yīng)掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能，并具有與采集病原微生物樣本危害等級相適應(yīng)的生物安全防護裝備和防止擴散污染的措施。樣本采集人員應(yīng)做好對樣本的來源、采集時間、檢測內(nèi)容、采集人等的記錄。第三十一條實驗室應(yīng)制定病原微生物菌（毒）種或樣本運輸?shù)闹贫群统绦?，包括實驗室?nèi)部、單位內(nèi)部和單位外部的運輸，必須符合有關(guān)規(guī)定；建立菌（毒）種或樣本接收和運出 的清單，清單應(yīng)記錄菌（毒）種或樣本性質(zhì)、數(shù)量、交接時間、交接人、 地點、狀態(tài)等項目

16、， 確保菌（毒）種或樣本出入的可追溯性。第三十二條高致病性或疑似高致病性的病原微生物菌（毒）種或樣本運輸必須按可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定執(zhí)行。第三十三條非高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸應(yīng)由專人負責，專車運送，不得通過公共交通工具運輸，護送人員應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)，且考核合格方能上崗。運輸過程應(yīng)采取相應(yīng)的防護措施。運輸?shù)陌b要求使用專用的生物樣本運送箱，外包裝應(yīng)有生物危險標簽、標識、警告用語、提示用語以及申請單位的名稱、地址、聯(lián)系人和聯(lián)系電話等。運輸過程中發(fā)生意外狀況，運輸單位、護送人員、接收機構(gòu)應(yīng)按病原微生物實驗室生物安全管理條例中的有關(guān)規(guī)定，及時報告并采

17、取嚴格的應(yīng)急處置措施。單位內(nèi)部運輸樣本應(yīng)采用符合生物安全要求，且專用、密閉的包裝箱（盒），并張貼生 物安全標識。第三十四條實驗室不得保存高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，保存非高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定，不得以任何理由向單位或個人提供菌（毒）種 或樣本。實驗室保存的菌（毒）種或樣本必須集中保存，專人負責，實行雙人雙鎖管理，并建立 所儲存的菌（毒）種或樣本使用和銷毀記錄清單。第三十五條保存的菌（毒）種或樣本應(yīng)建立專冊，詳細記錄名稱、編號、來源、入庫時 間、使用記錄、流向等，專冊（卡）應(yīng)長期保存。第三十六條實驗室應(yīng)建立菌（毒）種或樣本的銷毀制度并記錄完整，銷毀保存的菌（毒）

18、種或樣本應(yīng)經(jīng)實驗室負責人批準，并在專冊上注銷并注明原因、時間、方法、數(shù)量、經(jīng)辦人第三十七條病原微生物菌（毒）種或樣本的出入境，按照衛(wèi)生部和國家質(zhì)檢總局關(guān)于 加強醫(yī)用特殊物品出入境管理衛(wèi)生檢疫的通知執(zhí)行。第三章附則第三十八條本規(guī)范自 2012年10月1日起施行，有效期為五年。第三十九條市衛(wèi)生局 2006年9月19日頒布的關(guān)于在本市開展病原微生物實驗室備案 工作的通知（滬衛(wèi)科教200628號）、2006年10月17日頒布的上海市一、二級病 原微生物實驗室生物安全管理規(guī)范（滬衛(wèi)科教200634號）的有關(guān)規(guī)定與本規(guī)范不一致處，以本規(guī)范為準。附錄一：病原微生物危害等級分類本規(guī)范采用病原微生物實驗室安全管

19、理條例的病原微生物危害等級分類方法，與實驗室生物安全通用要求（ GB19489-2008）和WHO實驗室生物安全手冊的分類方法對應(yīng) 關(guān)系見表1.表1:病原微生物的危害等級劃分與標準1病原微生物實驗室生物安全管理條例實驗室生物安全通用要求GB19489-2008WHO實驗室生物安全手冊（第三版 2004 ）四類在通常情況下不會引起人類或 者動物疾病的微生物。I級（低個體危害，低群體危害） 不會導(dǎo)致健康工作者和動物致病的 細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因 子。I級（無或極低的個體和群體危險） 不太可能引起人或動物致病的微生 物。三類能夠引起人類或者動物疾病， 但一般情況下對人、動物或者環(huán)境 不構(gòu)成

20、嚴重危害，傳播風險有限， 實驗室感染后很少引起嚴重疾病， 并且具備有效治療和預(yù)防措施的微 生物。n級（中等個體危害，有限群體危害） 能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下 對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不 會引起嚴重危害的病原微生物。實驗室感染不導(dǎo)致嚴重疾病，具備有效治 療和預(yù)防措施，并且傳播風險有限。n級（個體危險中等，群體危險低） 病原微生物能夠?qū)θ嘶騽游镏虏。?但對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜 或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴重危害。實驗室 暴露也許會引起嚴重感染,但對感 染有有效的預(yù)防和治療措施，并且 疾病傳播的危險有限。二類能夠引起人類或者動物嚴重疾 病，比較容易直接或者間接在人與 人、動物與人、動物與動物

21、間傳播 的微生物。田級（高個體危害，低群體危害） 能引起人類或動物嚴重疾病， 或造成 嚴重經(jīng)濟損失，但通常不能因偶爾接 觸而在個體間傳播，或能使用抗生 素、抗寄生蟲藥物治療的病原微生 物。田級（個體危險高，群體危險低） 病原微生物通常能引起人或者動物 的嚴重疾病，但一般不會發(fā)生感染 個體向其他個體的傳播，并且對感 染由有效的預(yù)防和治療措施。一類能夠引起人類或者動物非常嚴 重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā) 現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。IV級（高個體危害，高群體危害）能 引起人或動物非常嚴重疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或偶然接觸 在人與人，或動物與人，或人與動物， 或動物與動物間傳播的病原微生

22、物。IV級（個體和群體危險均高）病原 微生物通常能引起人或動物的嚴重 疾病，并且很容易發(fā)生個體之間的 直接或間接傳播，對感染一般沒有 有效的預(yù)防和治療措施。附錄二：生物安全柜選型原則實驗室應(yīng)根據(jù)所需保護的實驗對象的類型；針對操作感染性物質(zhì)所需的個體防護要求； 暴露于放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)品時的個體防護要求；或其他特殊性的工作要求來選擇生物安全柜的類型。一般在二級生物安全防護水平實驗室中主要使用n級生物安全柜（A1型、A2型、B1型、B2型），常用的是 A2型和B2型。生物安全柜的選型遵循原則見表2.表2:生物安全柜選型原則保護類型生物安全柜選擇個人防護，針對危害程度一、二、三類的微生物n級

23、各型生物安全柜少量揮發(fā)性放射性核素/化學(xué)品防護n級B1型或外排式n級 A2型生物安全柜揮發(fā)性放射性核素/化學(xué)品防護n級B2型生物安全柜附錄三：消毒、滅菌方法的選擇和基本程序一般根據(jù)物品的種類和污染后的危害程度來選擇消毒、滅菌方法。消毒首選物理方法， 不能用物理方法消毒的方可選化學(xué)方法。對于菌（毒）種、生物樣本、其他感染性材料和污染物等，應(yīng)選用高壓蒸汽滅菌法處理。對于實驗防護服、實驗器具等，可選用高壓蒸汽滅菌、化學(xué)浸泡法處理。對于實驗儀器，臺面和實驗室環(huán)境等，可選用化學(xué)消毒劑或紫外線照射的方法處理。但若有病原微生物污染時，應(yīng)采用更為有效的消毒法（如甲醛熏蒸等）。對于被菌（毒）種、生物樣本或其他感染性材料污染的器材和物品應(yīng)先消毒后清洗，使用前再按物品危險性的種類，選擇適當?shù)南?、滅菌方法進行消毒或滅菌處理。附錄四：消毒、滅菌效果監(jiān)測的方法及周期實驗室必須對消毒、滅菌效果定期進行監(jiān)測。