生物組織中還原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定課件

1、實驗：組成生物體的實驗：組成生物體的還原性糖、蛋白質(zhì)、脂肪的鑒定還原性糖、蛋白質(zhì)、脂肪的鑒定還原性糖鑒定還原性糖鑒定脂肪鑒定脂肪鑒定蛋白質(zhì)鑒定蛋白質(zhì)鑒定一、實驗材料一、實驗材料1. 1. 、還原糖的鑒定實驗：應該選擇含糖量高、還原糖的鑒定實驗：應該選擇含糖量高. .顏色為白色或近于白色的顏色為白色或近于白色的 植物組織，以蘋果植物組織，以蘋果. .梨為最好。梨為最好。 、脂肪鑒定實驗：含脂肪豐富的花生種子。、脂肪鑒定實驗：含脂肪豐富的花生種子。 、蛋白質(zhì)鑒定實驗：含蛋白質(zhì)豐富的大豆或雞蛋清溶液。、蛋白質(zhì)鑒定實驗：含蛋白質(zhì)豐富的大豆或雞蛋清溶液。 （避免材料自身的顏色對實驗變化顏色的掩蓋）（避免

2、材料自身的顏色對實驗變化顏色的掩蓋）2.2.斐林試劑：甲液：質(zhì)量濃度為斐林試劑：甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 乙液：質(zhì)量濃度為乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/ml0.05g/ml的的CuSO4CuSO4溶液溶液3.3.蘇丹蘇丹或蘇丹或蘇丹溶液。溶液。4.4.雙縮脲試劑雙縮脲試劑A A：質(zhì)量濃度為：質(zhì)量濃度為0.1g/ml0.1g/ml的的 NaOHNaOH溶液溶液 雙縮脲試劑雙縮脲試劑B B：質(zhì)量濃度為：質(zhì)量濃度為0.01g/ml0.01g/ml的的CuSO4CuSO4溶液（分開加）溶液（分開加）二、實驗原理二、實驗原理1 1、還原性糖、還原性糖+ +斐

3、林試劑斐林試劑 磚磚紅色沉淀紅色沉淀 2 2、脂肪、脂肪+ +蘇丹蘇丹染液染液 橘黃色橘黃色 脂肪脂肪+ +蘇丹蘇丹染液染液 紅色紅色 3 3、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)+ +雙縮脲試劑雙縮脲試劑 紫色紫色水浴加熱水浴加熱4 4、斐林試劑和雙縮脲試劑的比較：、斐林試劑和雙縮脲試劑的比較：現(xiàn)配現(xiàn)用，先現(xiàn)配現(xiàn)用，先混合再使用混合再使用先加先加A液后加液后加B液液需加熱煮沸需加熱煮沸不需加熱不需加熱還原性糖中醛基被氫氧化銅氧還原性糖中醛基被氫氧化銅氧化，氫氧化銅被還原為氧化銅化，氫氧化銅被還原為氧化銅具有兩個以上肽鍵的化合物在具有兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與堿性條件下與CU2+形成絡合物形成絡合物磚紅色磚

4、紅色紫色紫色都有都有NaOHNaOH和和CUSOCUSO4 4兩種成兩種成分分顏色顏色不同點不同點斐林試劑斐林試劑雙縮脲試劑雙縮脲試劑使用方法使用方法反應條件反應條件反應原理反應原理相同點相同點選材：含糖量較高、白色或近于白色的植物組織選材：含糖量較高、白色或近于白色的植物組織制備組織液制備組織液 （制漿（制漿 過濾過濾 取液）取液）呈色反應（加剛配置的斐林試劑）藍色呈色反應（加剛配置的斐林試劑）藍色 水浴加熱水浴加熱 磚紅色磚紅色結(jié)論：植物組織中含有還原糖結(jié)論：植物組織中含有還原糖1、還原糖的鑒定：、還原糖的鑒定：三、實驗過程：三、實驗過程：注入注入2ML2ML蘋果組蘋果組織樣液織樣液注入注

5、入2ML2ML剛配制剛配制好的斐林試劑好的斐林試劑振蕩、混合搖勻振蕩、混合搖勻溶液藍色溶液藍色沸水浴沸水浴2MIN2MIN試管中磚紅試管中磚紅色沉淀色沉淀2、脂肪的鑒定：、脂肪的鑒定：取材：花生種子取材：花生種子(浸泡浸泡34h），將子葉削成薄片），將子葉削成薄片 取最理想的薄片取最理想的薄片制片制片 在薄片上滴蘇丹在薄片上滴蘇丹染液（染液（23min） 去浮色（用去浮色（用50酒精）酒精） 制成臨時裝片制成臨時裝片 觀察：低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒，然后用高倍鏡觀察，可看觀察：低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒，然后用高倍鏡觀察，可看到橘黃色圓形小顆粒到橘黃色圓形小顆粒雙縮脲試劑雙縮脲試

6、劑 B34滴滴選材：黃豆種子（蛋白液）選材：黃豆種子（蛋白液）制備組織樣液：大豆組織研磨液或蛋白質(zhì)稀釋液制備組織樣液：大豆組織研磨液或蛋白質(zhì)稀釋液 呈色反應：組織樣液呈色反應：組織樣液2ml(無色）無色） 結(jié)論結(jié)論：組織樣液中有蛋白質(zhì)：組織樣液中有蛋白質(zhì) 選材：黃豆種子（蛋白液）選材：黃豆種子（蛋白液）制備組織樣液：大豆組織研磨液或蛋白質(zhì)稀釋液制備組織樣液：大豆組織研磨液或蛋白質(zhì)稀釋液 呈色反應：組織樣液呈色反應：組織樣液2ml(無色）無色） 結(jié)論結(jié)論：組織樣液中有蛋白質(zhì)：組織樣液中有蛋白質(zhì) 3、蛋白質(zhì)的鑒定：、蛋白質(zhì)的鑒定：雙縮脲試劑雙縮脲試劑A2ml震蕩搖勻震蕩搖勻紫色紫色3、蛋白質(zhì)的鑒定

7、：、蛋白質(zhì)的鑒定：雙縮脲試劑雙縮脲試劑A2ml注意：事先留出大豆組織樣液，與化學試劑發(fā)生反應后的顏色對比注意：事先留出大豆組織樣液，與化學試劑發(fā)生反應后的顏色對比四、實驗注意：四、實驗注意：1 1只有可溶于水且具備還原性的糖才能與斐林試劑發(fā)生特殊的顏色反應（葡萄糖、只有可溶于水且具備還原性的糖才能與斐林試劑發(fā)生特殊的顏色反應（葡萄糖、 果糖、麥芽糖）果糖、麥芽糖）2 2斐林試劑必須現(xiàn)配現(xiàn)用，否則，斐林試劑很不穩(wěn)定，時間一長，沉淀在底部無法斐林試劑必須現(xiàn)配現(xiàn)用，否則，斐林試劑很不穩(wěn)定，時間一長，沉淀在底部無法 發(fā)生反應。發(fā)生反應。3 3可溶性糖的選材要選擇可溶性糖的選材要選擇含糖量較高、顏色白色

8、或接近白色的植物組織，以蘋果、含糖量較高、顏色白色或接近白色的植物組織，以蘋果、 梨最好，這樣顏色反應就明顯。若選用色素較深的材料，對顏色反應就會起掩蓋作用。梨最好，這樣顏色反應就明顯。若選用色素較深的材料，對顏色反應就會起掩蓋作用。4 4斐林試劑在使用時應先把甲和乙混合，然后再加入。因為我們所要的就是新制的斐林試劑在使用時應先把甲和乙混合，然后再加入。因為我們所要的就是新制的 CuSO4CuSO4，加入后的顏色是由淺藍色，加入后的顏色是由淺藍色 棕色棕色 磚紅色沉淀。磚紅色沉淀。5 5沸水浴加熱時切記試管底部不要與燒杯底部相接觸，以免試管受熱不均而發(fā)生爆裂。沸水浴加熱時切記試管底部不要與燒杯

9、底部相接觸，以免試管受熱不均而發(fā)生爆裂。6 6蛋白質(zhì)鑒定時所加試劑應先加雙縮脲試劑蛋白質(zhì)鑒定時所加試劑應先加雙縮脲試劑A A，再加雙縮脲試劑，再加雙縮脲試劑B B，因為雙縮脲試劑的本，因為雙縮脲試劑的本 質(zhì)就是在堿性環(huán)境下的質(zhì)就是在堿性環(huán)境下的Cu2+Cu2+，而且，而且B B液要求量適中，否則多余的液要求量適中，否則多余的B B液將會與液將會與A A液發(fā)生反應液發(fā)生反應 生成生成CuCu（OHOH）2 2顯色而遮蓋原有的顏色。顯色而遮蓋原有的顏色。7 7用于蛋白質(zhì)鑒定的蛋清必須稀釋，以免實驗后粘住試管壁，不易洗刷。用于蛋白質(zhì)鑒定的蛋清必須稀釋，以免實驗后粘住試管壁，不易洗刷。8 8鑒定可溶性

10、還原性糖和蛋白質(zhì)時要留下部分組織樣液為對照，這樣更有說服力。鑒定可溶性還原性糖和蛋白質(zhì)時要留下部分組織樣液為對照，這樣更有說服力。9 9脂肪的鑒定中選切片時，要選最薄的切片，否則細胞相互重疊，看不清實驗效果。脂肪的鑒定中選切片時，要選最薄的切片，否則細胞相互重疊，看不清實驗效果。1010注意區(qū)分斐林試劑和雙縮脲試劑的不同。注意區(qū)分斐林試劑和雙縮脲試劑的不同。課堂檢測課堂檢測:1、在過氧化氫酶中加入雙縮脲試劑，其結(jié)果應該是（、在過氧化氫酶中加入雙縮脲試劑，其結(jié)果應該是（ ） A、產(chǎn)生氣泡、產(chǎn)生氣泡 B、溶液呈藍色、溶液呈藍色 C、溶液呈紫色、溶液呈紫色 D、產(chǎn)生磚紅色沉淀、產(chǎn)生磚紅色沉淀 2、用

11、斐林試劑可以鑒定還原糖的存在，用雙縮脲試劑可以鑒定蛋白質(zhì)的、用斐林試劑可以鑒定還原糖的存在，用雙縮脲試劑可以鑒定蛋白質(zhì)的存在，在醫(yī)學上，還常用上述兩種試劑進行疾病的診斷。能夠診斷的存在，在醫(yī)學上，還常用上述兩種試劑進行疾病的診斷。能夠診斷的疾病是（疾病是（ ） A、糖尿病、腸炎、糖尿病、腸炎 B、糖尿病、胃炎、糖尿病、胃炎 C、腎炎、胃炎、腎炎、胃炎 D、糖尿病、腎炎、糖尿病、腎炎3、鑒定脫脂奶粉是否為偽劣產(chǎn)品、鑒定脫脂奶粉是否為偽劣產(chǎn)品,不需要用的化學試劑是不需要用的化學試劑是( ) A 斐林試劑斐林試劑 B蘇丹蘇丹IV染液染液 C 雙縮脲試劑雙縮脲試劑 D紅墨水紅墨水4、在還原糖、脂肪、蛋

12、白質(zhì)的鑒定實驗中，最佳的一組實驗材料是（、在還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗中，最佳的一組實驗材料是（ ） 甘蔗的莖甘蔗的莖 油菜籽油菜籽 花生種子花生種子 梨梨 甜菜的塊根甜菜的塊根 豆?jié){豆?jié){ 雞蛋清雞蛋清 A、 B 、 C、 D、 CDDD6、生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機物的鑒定中、實驗中，以下操作錯誤的是、生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機物的鑒定中、實驗中，以下操作錯誤的是 （ ）A只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡B用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)有需要加熱用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)有需要加熱C使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)

13、配現(xiàn)用D可溶性還原糖的鑒定，應用沸水浴加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀可溶性還原糖的鑒定，應用沸水浴加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀7用顯微鏡觀察時，如果由低倍鏡換高倍鏡后，視野的變化是（用顯微鏡觀察時，如果由低倍鏡換高倍鏡后，視野的變化是（ ）。）。A由暗變亮，觀察到的細胞小由暗變亮，觀察到的細胞小 B由亮變暗，觀察到的細胞大由亮變暗，觀察到的細胞大C由暗變亮，觀察到的細胞多由暗變亮，觀察到的細胞多 D由亮變暗，觀察到的細胞多由亮變暗，觀察到的細胞多5將乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和適量水混合，裝入一容器內(nèi)，調(diào)整將乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和適量水混合，裝入一容器內(nèi)，調(diào)整PH至至 20，保存于，保存于

14、37的水浴鍋內(nèi)，過一段時間后，容器內(nèi)剩余的物質(zhì)是（的水浴鍋內(nèi)，過一段時間后，容器內(nèi)剩余的物質(zhì)是（ ）。）。 A淀粉、胃蛋白酶、多肽、水淀粉、胃蛋白酶、多肽、水 B唾液淀粉酶、麥芽糖酶、胃蛋白酶、多肽、水唾液淀粉酶、麥芽糖酶、胃蛋白酶、多肽、水 C唾液淀粉酶、胃蛋白酶、多肽、水唾液淀粉酶、胃蛋白酶、多肽、水 D唾液淀粉酶、淀粉、胃蛋白酶、水唾液淀粉酶、淀粉、胃蛋白酶、水ABBA和和CC淀粉酶在淀粉酶在40時活性相對較高，淀粉酶催化淀粉水解產(chǎn)生的還原糖多時活性相對較高，淀粉酶催化淀粉水解產(chǎn)生的還原糖多E酶失活酶失活剩余的淀粉遇碘變藍剩余的淀粉遇碘變藍答：在答：在20和和100之間每隔一定溫度設置一

15、個實驗組，其它實驗條件保持一致。之間每隔一定溫度設置一個實驗組，其它實驗條件保持一致。以反應液和上述試劑（或答碘液或答班氏試劑或答斐林試劑）發(fā)生顏色反應的程度以反應液和上述試劑（或答碘液或答班氏試劑或答斐林試劑）發(fā)生顏色反應的程度為指標確定最適溫度。為指標確定最適溫度。8、將某種玉米子粒浸種發(fā)芽后研磨勻漿、過濾，得到提取液。取、將某種玉米子粒浸種發(fā)芽后研磨勻漿、過濾，得到提取液。取6支試管分別加入等量的淀支試管分別加入等量的淀粉溶液后，分為粉溶液后，分為3組并分別調(diào)整到不同溫度，如圖所示，然后在每支試管中加入等量的玉米組并分別調(diào)整到不同溫度，如圖所示，然后在每支試管中加入等量的玉米子粒提取液，保持各組溫度子粒提取液，保持各組溫度30分鐘后，繼續(xù)進行實驗（提取液中還原性物質(zhì)忽略不）：分鐘后，繼續(xù)進行實驗（提取液中還原性物質(zhì)忽略不）：（1）若向）若向A、C、E三支試管中分別加入適量的班氏試劑或斐林試劑，沸水浴一段時間，觀三支試管中分別加入適量的班氏試劑或斐林試劑，沸水浴一段時間，觀察該三支試管，其中液體顏色呈磚紅色的試管是察該三支試管，其中液體顏色呈磚紅色的試管是_；磚紅色較深的試管是；磚紅色較深的試管是_，顏，顏色較深的原因是色較深的原因是_ _；不變；不變色的試管是色的試管是_，不變色的原因是，不變色的原因是_。（2）若向）若向B、D、F