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1、血球計(jì)數(shù)板的構(gòu)造和使用 血球計(jì)數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四條下凹的槽,構(gòu)成三個(gè)平臺(tái).中間的平臺(tái)較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面,刻有一個(gè)方格網(wǎng).方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格,其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室,供微生物計(jì)數(shù)用.這一大方格的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為0.1mm3.計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)格.一種是大方格內(nèi)分為16中格,每一中格又分為25小格;另一種是大方格內(nèi)分為25中格,每一中格又分為16小格.但是不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造;它們都有一個(gè)共同的特點(diǎn),即每一大方格都是由16×25=25×16=400個(gè)小方格組成,見
2、圖. 血球計(jì)數(shù)板的使用以計(jì)數(shù)酵母菌為例(1)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個(gè)數(shù).(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù),以每小方格內(nèi)含有4-5個(gè)酵母細(xì)胞為宜,一般稀釋10倍即可.(3)將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的厚玻片.(4)將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室內(nèi).(5)計(jì)數(shù)時(shí),如果使用16格×25格規(guī)格的計(jì)數(shù)室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個(gè)中格(即100個(gè)小格)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為25格×16格的計(jì)數(shù)板,除了取其4個(gè)對角方位外,還需再數(shù)中央的一個(gè)中格(即80個(gè)小方格)的酵母菌數(shù).(6)當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計(jì)數(shù)大方格的上方和右方線上的酵母細(xì)胞(或只計(jì)數(shù)下方和左方線上的酵母細(xì)胞).(7)對每個(gè)樣品計(jì)數(shù)三次,取其平均值,按下列公式計(jì)算每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù). 3.計(jì)算公式(1)16格×25格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式:酵母細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/100×400×104×稀釋倍數(shù)(2)25格x16格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式
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