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文檔簡(jiǎn)介

1、緒論一、名詞解釋:1.分子生物學(xué):是一門在分子水平上研究生命現(xiàn)象、生命本質(zhì)、生命活動(dòng)及其規(guī)律的科學(xué)。主要對(duì)遺傳、生殖、生長(zhǎng)和發(fā)育等生命特征的分子機(jī)理進(jìn)行說明,從而為利用和改造生物奠定理論根底和提供新手段。2.功能基因?qū)W:基因組功能信息的提取、鑒定和開發(fā)利用,以及與此相關(guān)的數(shù)據(jù)資料、基因材料和技術(shù)手段的貯存和使用。二、問答題1.分子生物學(xué)與生物化學(xué)的關(guān)系及區(qū)別:分子生物學(xué)及生物化學(xué)關(guān)系最為密切,稱為“生物化學(xué)與分子生物學(xué),但兩者還是有區(qū)別:生物化學(xué)是從化學(xué)水平研究生命現(xiàn)象,主要研究生物分子的結(jié)構(gòu),新陳代謝及生理功能。分子生物學(xué)是從分子水平研究生命現(xiàn)象,主要研究核酸與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)及功能,生命信息的

2、傳遞和調(diào)控。2.人類基因組方案參加參加國(guó)?人類基因組作幾張圖?參加國(guó):中國(guó)、美國(guó)、日本、英國(guó)、法國(guó)、德國(guó)六個(gè)國(guó)家。圖譜:遺傳圖譜、物理圖譜、轉(zhuǎn)錄圖譜、序列圖譜。3.功能基因?qū)W研究?jī)?nèi)容?功能基因?qū)W是指基因組功能信息的提取、鑒定和開發(fā)利用,以及與此相關(guān)的數(shù)據(jù)資料、基因材料和技術(shù)手段的貯存和使用。研究?jī)?nèi)容包括:研究基因結(jié)構(gòu),鑒定基因編碼序列和調(diào)控序列;說明所有基因產(chǎn)物的功能;研究基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制,分析基因與基因產(chǎn)物的相互作用,繪制基因表達(dá)調(diào)控的網(wǎng)絡(luò)圖;在基因組水平上比較生物,揭示生命起源和進(jìn)化。蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)組學(xué)名詞解釋鹽析:高濃度中性鹽使蛋白質(zhì)從溶液中析出沉淀的方法蛋白質(zhì)變性:在一些因素平衡,蛋

3、白質(zhì)的天然構(gòu)象被破壞,從面導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變,生物活性喪失的現(xiàn)象。亞基:在有些蛋白質(zhì)由幾條甚至幾十條肽鏈構(gòu)成,肽鏈之間沒有共價(jià)鍵連接,每一條肽鏈都形成相對(duì)獨(dú)立的三級(jí)結(jié)構(gòu)稱為亞基構(gòu)象:指一類不涉及共價(jià)鍵改變的立體結(jié)構(gòu)。如蛋白質(zhì)的一、壞蛋三、級(jí)結(jié)構(gòu)。構(gòu)型:指一類涉及共價(jià)鍵改變的立體結(jié)構(gòu)如氨基酸和L-型和D-型。模序:在許多蛋白質(zhì)分子中 ,可出現(xiàn)兩個(gè)或三個(gè)具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的肽段,在空間上相互靠近,形成一個(gè)具有特殊功能的空間結(jié)構(gòu)。協(xié)同效應(yīng):指一個(gè)亞基與其配體結(jié)合后,能影響此寡聚體中另一個(gè)亞基與配體的結(jié)合能力變構(gòu)效應(yīng):一個(gè)蛋白質(zhì)分子中的一個(gè)亞基與其配體結(jié)合后,引起亞基構(gòu)象發(fā)生變化,這種現(xiàn)象叫做變構(gòu)效應(yīng)蛋白伴

4、侶:在細(xì)胞骨參與其他多肽鏈的折疊的組裝和組裝完畢后與之別離,并不成為所組裝蛋白質(zhì)的組成成分。蛋白印跡:把電泳別離的蛋白組分轉(zhuǎn)到固定膜如硝酸纖維素膜、尼龍膜或PVDF膜上的技術(shù)。蛋白質(zhì)組:是在一種細(xì)胞內(nèi)存在的全蛋白質(zhì),包括了基因組表達(dá)的蛋白質(zhì)和修飾后的各種形式的蛋白質(zhì),是細(xì)胞內(nèi)所有蛋白質(zhì)的集合體。蛋白質(zhì)變構(gòu) 是寡聚蛋白與配基結(jié)合改變蛋白質(zhì)的構(gòu)象,導(dǎo)致蛋白質(zhì)生物活性改變的現(xiàn)象。簡(jiǎn)答題:1為什么說蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)根底?蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)根底,是一切細(xì)胞和組織的重要組成成分。從最簡(jiǎn)單的病毒到最復(fù)雜的人體,但凡生物體無不含有蛋白質(zhì)。不同蛋白質(zhì)具有不同的生理功能。例如:體內(nèi)新陳代謝所進(jìn)行的各種化學(xué)反響幾

5、乎都要由酶來催化,而酶的化學(xué)本質(zhì)就是蛋白質(zhì);肽類激素和蛋白質(zhì)激素參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝調(diào)節(jié);免疫球蛋白和干擾素參與機(jī)體的免疫保護(hù)。此外,物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、肌肉收縮、血液凝固、損傷修復(fù)、生長(zhǎng)和繁殖、遺傳和變異甚至高等動(dòng)物的識(shí)別和記憶、感覺和思維等生命現(xiàn)象均有蛋白質(zhì)參與完成。因此,一切生命活動(dòng)都離不開蛋白質(zhì)。2.蛋白質(zhì)平均含氮量多少?如何根據(jù)測(cè)出的含氮量計(jì)算樣品中蛋白質(zhì)的含量?蛋白質(zhì)主要有C、H、O、N四種元素組成,有些蛋白質(zhì)還含有S、P,還有些蛋白質(zhì)含有Fe、Cu、Mn、Co、Mo和I等。N是蛋白質(zhì)的特征性元素,各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近,平均值為16%,所以只要測(cè)定生物樣品的含氮量就可以大致算出其蛋白質(zhì)含量

6、:生物樣品蛋白質(zhì)含量=樣品含氮量X 6.25,式中6.25是16%的倒數(shù),為1克N所代表的蛋白質(zhì)的量克3.組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸都是L-a-氨基酸,共有多少種,據(jù)R基的極性可分為哪幾類?在20種標(biāo)準(zhǔn)氨基酸中只有脯氨酸為亞氨基酸,其他氨基酸都是a-氨基酸。據(jù)R基極性及水溶性可分為以下幾類:非極性疏水R基氨基酸:這類氨基酸有九種,其R基是非極性疏水的。其中異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸和丙氨酸的R基在蛋白質(zhì)分子內(nèi)可以通過疏水作用結(jié)合在一起,以穩(wěn)定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。甘氨酸的結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單,它的R基太小,因而與其他氨基酸無疏水作用。甲硫氨酸是兩種含硫氨基酸之一,它的R基含有非極性甲巰基。脯氨酸R基形成環(huán)狀結(jié)構(gòu),這種結(jié)

7、構(gòu)具有剛性,在蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)中具有特殊意義。極性不帶電荷R基氨基酸:這類氨基酸共六種,其R基是極性親水的,可以與水形成氫鍵半氨酸除外。因此,與非極性疏水R基氨基酸相比它們較易溶于水。絲氨酸和蘇氨酸的極性源于其羥基,半胱氨酸源于其巰基,天冬酰胺和谷氨酰胺那么源于其酰胺基。帶正電荷R基氨基酸:這類氨基酸有三種,其中賴氨酸R基所含的氨基、精氨酸R基所含的胍基和組氨酸R基所含的咪唑基在生理?xiàng)l件下可以結(jié)合氫離子而帶正電荷。組氨酸咪唑基的pK=6,接近pH7,所以在酶促反響中咪唑基既可以作為氫離子供體也可以作為氫離子受體,發(fā)揮多元催化作用。4.氨基酸主要理化性質(zhì)有哪些?蛋白質(zhì)分子中氨基酸間的作用力除肽鍵

8、外,還有次級(jí)鍵,次級(jí)鍵包括哪些?它們?cè)诘鞍踪|(zhì)空間結(jié)構(gòu)中起什么作用?氨基酸的性質(zhì):紫外吸收特征:根據(jù)氨基酸的吸收光譜,色氨酸和酪氨酸在280nm波長(zhǎng)附近存在吸收峰。由于大多數(shù)蛋白質(zhì)含有酪氨酸和色氨酸,所以測(cè)定蛋白質(zhì)溶液對(duì)280nm紫外線的吸光度可以快速簡(jiǎn)便地分析溶液中蛋白質(zhì)含量。兩性解離與等電點(diǎn):氨基酸都含有氨基和羧基,氨基可以結(jié)合氫離子而帶正電荷,羧基可以結(jié)合氫離子而帶負(fù)電荷,所以氨基酸是兩性電解質(zhì),氨基酸的這種解離特性成為兩性解離。在生理?xiàng)l件下,氨基酸是一種同時(shí)帶兩種電荷的離子,這種離子稱為兼性離子。茚三酮反響:氨基酸和水合茚三酮發(fā)生氧化反響和縮合反響,最終生成藍(lán)紫色化合物,該化合物在570

9、nm波長(zhǎng)存在吸收峰。茚三酮反響可以用于氨基酸定量分析。蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象是由多種化學(xué)鍵共同維持的,這些化學(xué)鍵包括肽鍵、二硫鍵、氫鍵、疏水作用、離子鍵、范德華力,后四種化學(xué)鍵屬于非共價(jià)鍵。次級(jí)鍵及其作用:二硫鍵:胱氨酸含有二硫鍵,其作用是穩(wěn)定蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)。氫鍵:是蛋白質(zhì)分子內(nèi)數(shù)量最多的非共價(jià)鍵。是維持蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要化學(xué)鍵。疏水作用:是指疏水性分子或基團(tuán)為減少與水接觸而彼此聚集的一種相對(duì)作用力。疏水作用對(duì)穩(wěn)定蛋白質(zhì)構(gòu)象非常重要,蛋白質(zhì)分子內(nèi)部主要聚集了疏水性氨基酸。其作用為穩(wěn)定蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)。離子鍵:蛋白質(zhì)分子內(nèi)包含可解離帶電基團(tuán),帶電基團(tuán)之間存在著離子的相互作用,表現(xiàn)為同性電荷排斥,異

10、性電荷吸引。穩(wěn)定蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)。范德華力:是任何兩個(gè)原子保持范德華半徑距離時(shí)都存在的一種作用力。5.蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)都有哪些?a螺旋:肽平面圍繞Ca旋轉(zhuǎn)盤繞形成右手螺旋結(jié)構(gòu),稱a螺旋。螺旋上升一圈大約需要3.6個(gè)氨基酸,螺距0.54nm,螺徑0.5nm。氨基酸R基分布在螺旋外側(cè),堿基及氫鍵在內(nèi)側(cè),氫鍵維持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。折疊:多肽鏈局部肽段的主鏈呈鋸齒狀伸展?fàn)顟B(tài),稱之。一個(gè)折疊單位包括兩個(gè)氨基酸,其R基交錯(cuò)排列折疊兩側(cè)。相鄰折疊肽段的肽鍵之間形成的氫鍵是維持折疊穩(wěn)定性的主要作用力。轉(zhuǎn)角:位于肽鏈進(jìn)行回折時(shí)的轉(zhuǎn)角部位,由四個(gè)氨基酸構(gòu)成,其中第二個(gè)常為脯氨酸,第一個(gè)氨基酸羰基O和第四個(gè)氨基酸氨基H形成氫

11、鍵。無規(guī)那么卷曲:蛋白質(zhì)多肽鏈的一些肽段的構(gòu)象沒有規(guī)律性,稱為無規(guī)那么卷曲。超二級(jí)結(jié)構(gòu):又稱模體,是指二級(jí)結(jié)構(gòu)單元進(jìn)一步聚集和組合在一起,形成規(guī)那么的二級(jí)結(jié)構(gòu)聚集體。其形成進(jìn)一步降低了蛋白質(zhì)分子的內(nèi)能,使其更加穩(wěn)定,它是蛋白質(zhì)在二級(jí)結(jié)構(gòu)根底上形成三級(jí)結(jié)構(gòu)時(shí)經(jīng)過的一個(gè)新的結(jié)構(gòu)層次。測(cè)量蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的主要意義6.試述蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。舉例說明?蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)決定其構(gòu)象,進(jìn)而決定其生理功能。改變蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)可以直接影響其功能。蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)決定其構(gòu)象:每一種蛋白質(zhì)分子都有自己特定的氨基酸組成和排列順序即一級(jí)結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)包含了指導(dǎo)其形成天然構(gòu)象所需的全部信息。例如:核

12、糖核酸酶由124個(gè)氨基酸組成,其中8個(gè)半胱氨酸,它們?cè)诜肿觾?nèi)形成4個(gè)二硫鍵。用巰基乙醇和尿素處理核糖核酸酶,可以復(fù)原二硫鍵,破壞非共價(jià)鍵,使肽鏈完全展開,結(jié)果酶的催化活性完全喪失。如果用透析法出去巰基乙醇和尿素,可以重新形成二硫鍵和非共價(jià)鍵,重新形成活性構(gòu)象,核糖核酸酶的催化活性和理化性質(zhì)也完全恢復(fù)。同源蛋白質(zhì)存在序列同源現(xiàn)象:不同種屬來源的一些蛋白質(zhì)的氨基酸序列非常類似,構(gòu)象也相似,功能也一致,這些蛋白質(zhì)稱為同源蛋白質(zhì)。改變蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)可以直接影響其功能:基因突變改變蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu),從而改變蛋白質(zhì)的生物活性甚至生理功能而導(dǎo)致疾病。由基因突變?cè)斐傻牡鞍踪|(zhì)結(jié)構(gòu)或合成量異常而導(dǎo)致的疾病成為分子

13、病。例如:鐮狀細(xì)胞病是由血紅蛋白分子結(jié)構(gòu)異常而導(dǎo)致的分子病。正常成人血紅蛋白是HbS,HbS的亞基與HbA相差一個(gè)氨基酸,即N端6號(hào)谷氨酸被纈氨酸取代。谷氨酸R基石極性的,帶一負(fù)電荷;而纈氨酸R基是非極性的,不帶電荷。因此HbS比HbA少兩個(gè)負(fù)電荷,并且極性低。正是這種變化使得HbS的溶解度降低,在脫氧狀態(tài)下能形成棒狀復(fù)合體,使得紅細(xì)胞扭曲成鐮狀,這一過程會(huì)損害細(xì)胞膜,使其易被脾臟去除,發(fā)生溶血性貧血。7.引起蛋白質(zhì)變性的因素有哪些?蛋白質(zhì)變性protein denaturation是指蛋白質(zhì)在某些物理和化學(xué)因素作用下其特定的空間構(gòu)象被改變,從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)的改變和生物活性的喪失,這種現(xiàn)象稱

14、為蛋白質(zhì)變性。變性作用是蛋白質(zhì)受物理或化學(xué)因素的影響,改變其分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的作用。一般認(rèn)為蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)有了改變或遭到破壞,都是變性的結(jié)果。能使蛋白質(zhì)變性的化學(xué)方法有加強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬鹽、尿素、乙醇、丙酮等;能使蛋白質(zhì)變性的物理方法有加熱(高溫)、紫外線及X射線照射、超聲波、劇烈振蕩或攪拌等。8.蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定因素是什么?蛋白質(zhì)溶液是一種比較穩(wěn)定的膠體溶液,電荷和水化膜是其主要穩(wěn)定因素。如果這兩種因素被破壞,就會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。沉淀蛋白質(zhì)的方法有鹽析、重金屬離子沉淀、生物堿試劑及某些酸類沉淀、有機(jī)溶劑沉淀。9.鐮刀形貧血是怎么樣引起的?鐮狀細(xì)胞病是由血紅蛋白分子結(jié)構(gòu)異常

15、而導(dǎo)致的分子病。正常成人血紅蛋白是HbS,HbS的亞基與HbA相差一個(gè)氨基酸,即N端6號(hào)谷氨酸被纈氨酸取代。谷氨酸R基石極性的,帶一負(fù)電荷;而纈氨酸R基是非極性的,不帶電荷。因此HbS比HbA少兩個(gè)負(fù)電荷,并且極性低。正是這種變化使得HbS的溶解度降低,在脫氧狀態(tài)下能形成棒狀復(fù)合體,使得紅細(xì)胞扭曲成鐮狀,這一過程會(huì)損害細(xì)胞膜,使其易被脾臟去除,發(fā)生溶血性貧血。10別離純化蛋白質(zhì)的意義:研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能:要求純度高,不變性;提取活性的酶或蛋白質(zhì):必須保持天然活性狀態(tài);作為藥物或食品添加劑:純度要求一般。一般步驟:材料的選擇原料的預(yù)處理蛋白質(zhì)的提取從抽提液中沉淀蛋白質(zhì)純化蛋白質(zhì)的結(jié)晶。11氨

16、基酸序列是蛋白質(zhì)功能的分子根底 一級(jí)結(jié)構(gòu)是研究間接的根底,包含了形成特定空間結(jié)構(gòu)所需要的全部信息;蛋白質(zhì)氨基酸序列的改變是眾多遺傳病的物質(zhì)根底; 研究氨基酸序列的相似性可以說明物種之間的進(jìn)化關(guān)系 ,可以為人工合成蛋白質(zhì)提供參考須序。12.引起蛋白質(zhì)變性的因素包括物理因素和化學(xué)因素。物理因素有高溫、高壓、振蕩、紫外線和超聲波等;化學(xué)因素有強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、乙醇、丙酮、尿素、重金屬和去污劑等。在保存蛋白質(zhì)生物制品時(shí)需要主要防止與上述因素接觸。13.蛋白質(zhì)與茚三酮、雙縮脲及酚試劑可發(fā)生呈色反響。與茚三酮反響呈紫藍(lán)色;與雙縮脲反響呈紅色;與酚試劑反響呈深藍(lán)色。通常用于蛋白質(zhì)定量分析。第三章名詞解釋核苷-戊糖

17、與 嘧啶或嘌呤堿基 以糖苷鍵連接 就稱為核苷。核苷酸-核苷分子中的戊糖羥基與磷酸通過磷酸酯鍵結(jié)合就形成了核苷酸。核酸-許多核苷酸通過35 -磷酸二酯鍵連接形成的高分子化合物。核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)-核酸分子中核苷酸或者脫氧核苷酸殘基的排列順序?;匚男蛄?DNA某一片段旋轉(zhuǎn)180º后 順序不變的序列。回文序列中的單鏈可形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。組蛋白-真核生物染色體上的根本結(jié)構(gòu)蛋白,屬堿性蛋白,有五種,即H1 H2A H2B H3 H4。非組蛋白-染色體根本結(jié)構(gòu)的別種蛋白,屬酸性蛋白質(zhì)。核小體-染色體的根本結(jié)構(gòu)單位。單順反子-真核生物的一段mRNA一般只是一種蛋白質(zhì)合成的模板,這種mRNA被稱為單順反子。

18、多順反子-原核生物的一種mRNA往往能編碼功能相關(guān)的幾種蛋白質(zhì),這種mRNA被稱為多順反子。衛(wèi)星DNA-DNA的主峰旁顯示一個(gè)小峰,此小峰稱為衛(wèi)星峰,即衛(wèi)星DNA。逆轉(zhuǎn)座子-在基因組內(nèi)存在著通過DNA轉(zhuǎn)錄為RNA后,再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄成為cDNA并插入到基因組的新位點(diǎn)上的因子,被稱為逆轉(zhuǎn)座子retrotransponsons。是真核生物基因結(jié)構(gòu)中重復(fù)序列中的一類可移動(dòng)的片段,它們可能在進(jìn)化過程中發(fā)揮重要作用。結(jié)構(gòu)基因-資料答案在真核細(xì)胞中,除組蛋白外,其他所有蛋白質(zhì)都是由DNA中這種單拷貝序列決定的。這種序列大小不等,每一個(gè)順序決定一個(gè)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。?正確答案?結(jié)構(gòu)基因是決定合成某一種蛋白質(zhì)或RNA分

19、子結(jié)構(gòu)相應(yīng)的一段DNA。結(jié)構(gòu)基因的功能是把攜帶的遺傳信息轉(zhuǎn)錄給mRNA信使核糖核酸,再以mRNA為模板合成具有特定氨基酸序列的蛋白質(zhì)或RNA。內(nèi)含子-真核生物基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄加工時(shí)被切除的RNA序列和相對(duì)應(yīng)的DNA序列即:不變碼蛋白質(zhì)的間隔序列。外顯子-真核生物基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄加工后保存于中的序列和相應(yīng)的序列即:編碼蛋白質(zhì)的間隔序列。  核酶(ribozyme)-具有催化活性的RNA, 即化學(xué)本質(zhì)是核糖核酸(RNA), 卻具有酶的催化功能?;?有遺傳效應(yīng)的DNA片段,是控制生物性狀的根本遺傳單位。其本質(zhì)是DNA序列,能表達(dá)一定的功能產(chǎn)物,產(chǎn)物包括蛋白質(zhì)和RNA。染色體組-生物體細(xì)

20、胞內(nèi)一套完整的染色單體?;蚪M-基因組指單倍體細(xì)胞中包括編碼序列和非編碼序列在內(nèi)的全部DNA分子。斷裂基因-真核生物結(jié)構(gòu)基因,由假設(shè)干個(gè)編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成,去除非編碼區(qū)再連接后,可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整蛋白質(zhì),這些基因稱為斷裂基因splite gene。假基因-原始活化基因突變,形成穩(wěn)定的無活性的拷貝。之所以不能產(chǎn)生有功能的產(chǎn)物是因?yàn)椋簡(jiǎn)?dòng)子錯(cuò)誤;剪接信號(hào)缺陷;框架中引入了終止信號(hào);插入或缺失導(dǎo)致移碼等。轉(zhuǎn)座子-轉(zhuǎn)座子是一類在細(xì)菌的染色體,質(zhì)?;蚴删w之間自行移動(dòng)的遺傳成分,是基因組中一段特異的具有轉(zhuǎn)位特性的獨(dú)立的DNA序列。 它是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和

21、位移的根本單位。單核苷酸多態(tài)性-單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP),主要是指在基因組水平上由單個(gè)核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性。它是人類可遺傳的變異中最常見的一種。SNP所表現(xiàn)的多態(tài)性只涉及到單個(gè)堿基的變異,這種變異可由單個(gè)堿基的轉(zhuǎn)換(transition)或顛換(transversion)所引起,也可由堿基的插入或缺失所致。但通常所說的SNP并不包括后兩種情況。問答題核酸有什么功能?答:核酸是生物大分子,天然存在的核酸包括DNA和RNA兩大類。DNA主要存在于核內(nèi),是遺傳信息的攜帶者,與生物的繁殖、遺傳與變異有密切關(guān)系。RNA主要存在

22、于胞質(zhì)中,主要參與蛋白質(zhì)的合成。對(duì)于某些病毒,RNA是遺傳物質(zhì)。DNA堿基組成的共同規(guī)律是什么?答:a 無論來源種屬如何,DNA堿基組成中A摩爾含量=T摩爾含量,G=C,A+G=C+T。b 不同生物來源的DNA堿基組成不同,表現(xiàn)在A+T/G+C比值的不同。c 同一生物的不同組織的DNA堿基組成相同。d 一種生物DNA堿基組成不隨生物體的年齡、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)或者環(huán)境變化而改變。3,DNA與RNA的根本組成單位各是什么?答:DNA的根本組成單位是脫氧核苷酸,脫氧核糖+堿基ATCG+磷酸;RNA的根本組成單位是核苷酸,核糖+堿基AUCG+磷酸。4, DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)?答:a 反向平行,右手螺旋,大溝

23、1.2nm,小溝0.6nm;b 堿基在螺旋內(nèi)側(cè),磷酸核糖的骨架在外側(cè);c 直徑2nm,螺距3.4nm,一圈10個(gè)堿基對(duì);d A,T間形成兩個(gè)氫鍵,G,C間形成三個(gè)氫鍵,堿基對(duì)垂直于雙螺旋軸 居于雙螺旋內(nèi)側(cè);e 氫鍵從橫向,堿基堆砌力從縱向穩(wěn)定雙螺旋。5,DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)的生物學(xué)意義?答:DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)是超螺旋結(jié)構(gòu)。分為負(fù)超螺旋,正超螺旋,環(huán)狀雙鏈超螺旋。其生物學(xué)意義:a 超螺旋DNA具有更緊密的形狀,因此在DNA組裝中具有重要作用;b 使DNA 的結(jié)構(gòu)具有動(dòng)態(tài)性,超螺旋的程度介導(dǎo)了這種結(jié)構(gòu)的變化,這有利于其功能的發(fā)揮;c DNA是一種熱力學(xué)上的穩(wěn)定結(jié)構(gòu),超螺旋的引入提高了他的能量水平。6,細(xì)胞

24、內(nèi)的RNA主要有哪三種?各有何特點(diǎn)?答:mRNA ,tRNA,rRNA三種。特點(diǎn):mRNA:1)mRNA從DNA轉(zhuǎn)錄遺傳信息指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成;2種類多,分子大小不均,差異大,壽命短;3在真核生物mRNA的3末端有多聚腺苷酸結(jié)構(gòu),5末端以7-甲基鳥嘌呤-三磷酸核苷為起始結(jié)構(gòu)。tRNA:1)tRNA是蛋白質(zhì)合成中的氨基酸的載體,將氨基酸轉(zhuǎn)呈給mRNA;2)含有多種稀有堿基;3莖環(huán)結(jié)構(gòu)具有形似三葉草的二級(jí)結(jié)構(gòu)和到L型的三級(jí)結(jié)構(gòu);43末端是CCA-OH結(jié)構(gòu),連接氨基酸;5反密碼子識(shí)別mRNA的密碼子。rRNA:1)參與蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所核糖體的組成;2胞內(nèi)含量最多,含G最多,合成代謝較慢;3各種rRNA

25、分子都由一條多核苷酸鏈構(gòu)成,核苷酸殘基及其順序各不相同,有特定的二級(jí)結(jié)構(gòu),也可以形成三級(jí)結(jié)構(gòu)。7,RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)分為五局部,各局部的作用?答:RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)為三葉草形。有氨基酸臂;DHU環(huán);反密碼環(huán),TC環(huán);額外環(huán)。1氨基酸臂上的3CCA-OH結(jié)構(gòu)有連接氨基酸的作用;2反密碼環(huán)上的反密碼子可以解讀密碼子,把正確的氨基酸引入合成位點(diǎn);3其他局部的作用是維持RNA的空間結(jié)構(gòu)和幫助實(shí)現(xiàn)RNA生物學(xué)功能。8,核酶的特點(diǎn)及生理學(xué)意義?答:特點(diǎn):1化學(xué)本質(zhì)為RNA;2分子大小不一,每種核酶分子都有自己的活性序列或活性中心;3催化效率比蛋白酶低;4催化活性也具有特異性;5)Mg ²+與維持核酶的

26、活性中心的構(gòu)象有關(guān),故核酶催化反響時(shí)需要鎂離子參加;6核酶的底物種類比較少,大都是自身RNA。意義:1使我們對(duì)RNA的生理功能有了進(jìn)一步認(rèn)識(shí);2其催化活性的發(fā)現(xiàn)對(duì)于了解生物進(jìn)化過程有著重要意義;3根據(jù)核酶活性中心的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),可以人工改造核酶,用于降解病原體。核酶作用已經(jīng)成為基因治療的策略之一。9,原核生物mRNA和真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)?答:原核生物:1大多為多順反子;2在編碼序列間有間隔序列,在53端有非翻譯區(qū);3一般不含修飾核苷酸。真核生物:為單順反子,有帽子和尾巴結(jié)構(gòu)。1)5帽子:真核生物mRNA的核苷酸幾乎都是通過3 -5-磷酸二酯鍵連接,但5端的兩個(gè)核苷酸例外,是由核糖的5-

27、羥基通過一個(gè)三聚磷酸連接,而且5端的核苷酸都是甲基化鳥苷酸,該結(jié)構(gòu)稱為真核生物mRNA的帽子,用m7GpppNp表示。23poly(A)尾:除組蛋白以外,真核生物mRNA的3端都有poly(A)序列,其長(zhǎng)度因mRNA不同而異,一般為80-250個(gè)腺苷酸,稱為poly(A)尾。10,原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征答:1通常由單一閉環(huán)的雙鏈DNA分子構(gòu)成,形成類核;2DNA只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn);3所含基因數(shù)量多,且形成操縱子結(jié)構(gòu);4編碼序列一般不重疊;5基因是連續(xù)的,無內(nèi)含子;6編碼序列約占基因組的50%;7非編碼序列主要是一些調(diào)控序列;8多拷貝基因很少;9基因組中存在轉(zhuǎn)座子;10)DNA分子中存在各種特異

28、序列,包括復(fù)制起點(diǎn)、復(fù)制終止區(qū)、轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子和終止子等。11,真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征答:1DNA為線性分子,其末端序列構(gòu)成端粒;2DNA有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn);3)真核生物有完整的細(xì)胞核、染色體結(jié)構(gòu);4)每一種真核生物的染色體數(shù)目都是一定的,體細(xì)胞一般是二倍體;5基因組序列90%以上是非編碼序列;6)基因組含大量的重復(fù)序列;7真核生物的基因是斷裂基因;8轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是單順反子mRNA;9)基因組中存在各種基因家族;10真核生物DNA存在轉(zhuǎn)座子,其中一局部轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座機(jī)制與原核生物相似。四章DNA 半保存復(fù)制是:DNA 在進(jìn)行復(fù)制的時(shí)候鏈間氫鍵斷裂,雙鏈解旋分開,每條鏈作為模板在其上合成互補(bǔ)鏈,經(jīng)過一系列

29、酶DNA聚合酶、解旋酶、鏈接酶等的作用生成兩個(gè)新的DNA分子。 子代DNA分子 其中的一條鏈來自親代DNA ,另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?,這種方式稱半保存復(fù)制。領(lǐng)頭鏈 順解鏈方向連續(xù)復(fù)制下去的子鏈,其復(fù)制是連續(xù)進(jìn)行的,所得到一條連續(xù)片段的子鏈。 隨從鏈 復(fù)制方向與解鏈方向相反,須等待解開足夠長(zhǎng)度的模板鏈才能繼續(xù)復(fù)制,所得到一條友不連續(xù)片段組成的子鏈。半不連續(xù)復(fù)制:DNA復(fù)制時(shí),前導(dǎo)鏈上DNA的合成是連續(xù)的,后隨鏈上是不連續(xù)的,故稱為半不連續(xù)復(fù)制。岡崎片段,相比照擬短的DNA鏈大約1000核苷酸殘基,是在DNA的滯后鏈的不連續(xù)合成期間生成的片段逆轉(zhuǎn)錄 過程是依賴RNA的DNA合成作用;以RNA為模板,由

30、dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)聚合成DNA分子點(diǎn)突變 指DNA分子上一個(gè)堿基的變異轉(zhuǎn)換 發(fā)生在同型堿基之間,即嘌呤代替另一嘌呤,或嘧啶代替另一嘧啶。顛換 發(fā)生在異型堿基之間,即嘌呤換成嘧啶,或嘧啶變嘌呤??蛞仆蛔?在為蛋白質(zhì)編碼的序列中如果缺失或插入核苷酸,那么發(fā)生讀框移動(dòng),使其后譯讀的氨基酸序列全部混亂,這種現(xiàn)象稱框移突變端粒Telomere是真核生物染色體末端的一種特殊結(jié)構(gòu),其實(shí)也是DNA,只不過端粒是染色體頭部和尾部重復(fù)的DNA。端粒酶Telomerase是一種由RNA和蛋白質(zhì)組成的核糖核蛋白復(fù)合體,屬于逆轉(zhuǎn)錄酶,只存在于真核細(xì)胞中細(xì)胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因

31、控制的細(xì)胞自主的有序的死亡一 試述DNA損傷和修復(fù)的幾種類型DNA損傷也稱為DNA突變,包括以下幾個(gè)類型。點(diǎn)突變指DNA分子上一個(gè)堿基的變異轉(zhuǎn)換 發(fā)生在同型堿基之間,即嘌呤代替另一嘌呤,或嘧啶代替另一嘧啶。顛換 發(fā)生在異型堿基之間,即嘌呤換成嘧啶,或嘧啶變嘌呤。二缺失、插入、框移突變 1 缺失:一個(gè)堿基或一段核苷酸從DNA大分子上消失。2、插入:原來沒有的堿基或一段核苷酸鏈插入到DNA大分子中間??蛞仆蛔?重排 DNA分子內(nèi)發(fā)生較大片段的交換。DNA修復(fù)是對(duì)已發(fā)生分子改變的補(bǔ)償措施,使其恢復(fù)為原有的天然狀態(tài)。主要類型:光修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù)二 簡(jiǎn)述端粒和端粒酶的作用及其在DNA

32、復(fù)制中的意義 端粒 真核生物染色體顯性DNA分子末端的結(jié)構(gòu)。維持染色體的穩(wěn)定性,維持DNA復(fù)制的完整性。 端粒酶 合成端粒DNA。復(fù)制終止時(shí),染色體線性DNA末端確有可能縮短,但通過端粒酶的作用,可以補(bǔ)償這種由去除引物引起的末端縮短。第五章RNA的生物合成一.名詞解釋.轉(zhuǎn)錄:生物體以DNA為模板,4*NTP為原料,在DNA指導(dǎo)下的RNA聚合酶的催化下,合成RNA的過程。.不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄:是指以雙鏈DNA中的一條鏈作為模板進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,從而將遺傳信息由DNA傳遞給RNA。對(duì)于不同的基因來說,其轉(zhuǎn)錄信息可以存在于兩條不同的DNA鏈上。二.問答題1.試從模板、參與酶、合成方式、合成原料、產(chǎn)物、等幾個(gè)方面表達(dá)

33、DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的異同點(diǎn)。分類模板合成方式合成原料參與酶產(chǎn)物DNA復(fù)制單鏈DNA半保存復(fù)制dNTPDNA聚合酶,拓?fù)洚悩?gòu)酶,引物酶,DNA連接酶,DNADNA轉(zhuǎn)錄單鏈DNA選擇性轉(zhuǎn)錄NTP,Mg離子,Mn離子RNA聚合酶RNA2.試述逆轉(zhuǎn)錄的根本過程以RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的參與下生成DNA-RNA雜化雙鏈,雜化雙鏈在RNA酶的作用下生成單鏈DNA,單鏈DNA再在逆轉(zhuǎn)錄酶的參與下生成雙鏈DNA的過程。蛋白質(zhì)的生物合成一.名詞解釋1.密碼子:mRNA分子上,從53,每3 個(gè)相鄰的堿基構(gòu)成三聯(lián)體,分別代表某種氨基酸或肽鏈合成的起始信號(hào)或終止信號(hào),這種三聯(lián)體稱為遺傳密碼。2.反密碼子:位于tRNA

34、二級(jí)結(jié)構(gòu)與-C-C-A三聯(lián)體相反一端稱為反密碼子,其中間三個(gè)堿基構(gòu)成反密碼子,反密碼子能識(shí)別mRNA分子中的密碼子,把a(bǔ)a氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)到一定的位置上。3.核糖體循環(huán):在翻譯起始復(fù)合體形成的根底上,活化氨基酸在核蛋白體上反復(fù)翻譯mRNA上的密碼并縮合生成多肽的循環(huán)反響過程。二.問答題1.什么是遺傳密碼的通用行大量研究證明,整個(gè)生物界從低等到高等生物根本上都使用同一套遺傳密碼,這說明生命有共同的起源。不過,個(gè)別遺傳密碼有變異,例如,在人線粒體DNA中,UGA不是終止密碼子,而是編碼色氨酸。2.什么是遺傳密碼的方向性指信使RNA(mRNA分子上從5'端到3'端方向,由起始密碼子AUG開

35、始,每三個(gè)核苷酸組成的三聯(lián)體。它決定肽鏈上每一個(gè)氨基酸和各氨基酸的合成順序,以及蛋白質(zhì)合成的起始、延伸和終止。3什么是遺傳密碼的連續(xù)性在mRNA的編碼區(qū),每個(gè)堿基都參與構(gòu)成一個(gè)密碼子,即密碼子之間沒有標(biāo)點(diǎn)符號(hào),每個(gè)堿基只參與構(gòu)成一個(gè)密碼子,即密碼子之間沒有重疊,因此,如果發(fā)生插入或缺失突變,并且插入或缺失的不是3n個(gè)堿基,突變點(diǎn)之后就會(huì)發(fā)生移碼突變。4.什么是遺傳密碼的簡(jiǎn)便性指不同密碼子可以編碼同一種氨基酸,并且只編碼1種氨基酸。5.簡(jiǎn)述氨基酸的活化過程氨基酸活化指氨基酰-tRNA合成酶的催化下,消耗ATP,生成氨基酰-tRNA的過程,需要鎂離子的參與,活化過程如下:6.簡(jiǎn)述核糖體循環(huán)過程整個(gè)

36、核糖體循環(huán)過程包括起始、延長(zhǎng)、終止三個(gè)階段,在進(jìn)行蛋白質(zhì)合成以前,核糖體的大小兩個(gè)亞基是別離的,當(dāng)進(jìn)行蛋白質(zhì)的生物合成時(shí),在起始因子的作用下才與mRNA的起始密碼子部位聚集在一起,經(jīng)過延長(zhǎng)階段的進(jìn)位、成肽和轉(zhuǎn)位三個(gè)步驟使肽鏈不斷延長(zhǎng),直到出現(xiàn)終止密碼子,然后在釋放因子的作用下,多肽鏈被水解下來,大小亞基解聚,又在mRNA的起始部位重新聚合,參與另一條多肽鏈的合成,構(gòu)成一個(gè)循環(huán),稱為核糖體循環(huán)。7.什么是多核糖體循環(huán)在一條mRNA鏈上可同時(shí)結(jié)合多個(gè)核糖體,即多個(gè)核糖體可在一條mRNA鏈上同時(shí)合成幾條多肽鏈,稱為多核糖體循環(huán),越是接近mRNA 3-端的核糖體,其合成的多肽鏈越長(zhǎng)。多核糖體循環(huán)大大提

37、高了翻譯的效率?;虮磉_(dá)及其調(diào)控基因表達(dá)及其調(diào)控1. 名詞解釋基因表達(dá):是基因通過轉(zhuǎn)錄和翻譯等一系列復(fù)雜過程,指導(dǎo)合成具有特異生物功能的產(chǎn)物。基因組:是指一套完整的單倍體的染色體DNA和線粒體DNA的全部序列。管家基因:某些基因產(chǎn)物對(duì)生命全過程都是必需的或必不可少,這類基因在一個(gè)生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá),通常稱之為管家基因。操縱子:是原核生物絕大多數(shù)基因的表達(dá)單位,即一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位。順式作用元件:指參與調(diào)控存在于同一DNA分子中的基因轉(zhuǎn)錄活性的特異堿基序列。啟動(dòng)子:是結(jié)構(gòu)基因上游的能夠結(jié)合RNA pol的DNA序列。增強(qiáng)子:指真核細(xì)胞中能夠增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的特異DNA堿基序列。反式作用

38、因子:指能夠直接或間接與順式作用元件結(jié)合,調(diào)控特異基因轉(zhuǎn)錄的一類調(diào)節(jié)蛋白。可誘導(dǎo)基因:在特定環(huán)境信號(hào)刺激下,相應(yīng)的基因被激活而開放或增強(qiáng)表達(dá),是基因表達(dá)產(chǎn)物增加,這種基因是可誘導(dǎo)的??勺瓒艋颍涸谔囟ōh(huán)境信號(hào)刺激下,如果相應(yīng)的基因?qū)Νh(huán)境信號(hào)應(yīng)答時(shí)被抑制,而關(guān)閉或降低表達(dá)的基因,這種基因是可阻遏的。2. 問答題 (1)什么叫基因表達(dá)?舉例說明基因表達(dá)的階段特異性和組織特異性。答:基因表達(dá):基因轉(zhuǎn)錄為RNA及翻譯為蛋白質(zhì)的過程。 基因表達(dá)的時(shí)間特異性是指基因表達(dá)嚴(yán)格按照特定的時(shí)間順序發(fā)生,以適應(yīng)細(xì)胞或個(gè)體分化、發(fā)育各階段的需要,故又稱階段特異性。如一個(gè)受精卵含有發(fā)育成一個(gè)成熟個(gè)體的全部遺傳信息,在

39、個(gè)體發(fā)育分化的各個(gè)階段,各種基因高度有序地表達(dá),一般在胚胎時(shí)期基因開放的數(shù)量最多,隨著分化開展細(xì)胞中某些基因關(guān)閉、某些基因轉(zhuǎn)向開放。 基因表達(dá)的空間特異性是指多細(xì)胞生物個(gè)體在某一特定生長(zhǎng)發(fā)育階段,同一基因的表達(dá)在不同的細(xì)胞或組織器官不同,從而導(dǎo)致特異性的蛋白質(zhì)分布于不同的細(xì)胞或組織器官,故又稱為細(xì)胞特異性或組織特異性。例如肝細(xì)胞中涉及編碼鳥氨酸循環(huán)酶類的基因表達(dá)水平高于其他組織細(xì)胞,其中某些酶(如精氨酸酶)為肝臟所特有,這些酶蛋白的基因表達(dá)均呈細(xì)胞特異性。(2)舉例說明什么是管家基因及其基因表達(dá)的方式。答:在一個(gè)生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)的基因通常被稱為管家基因。例如,三羧酸循環(huán)是一樞紐

40、性代謝途徑,催化該反響過程的酶蛋白編碼基因就屬這類基因。管家基因較少受環(huán)境因素影響,在個(gè)體各生長(zhǎng)階段的大多數(shù)或幾乎全部組織中持續(xù)表達(dá),或變化很小。這類基因表達(dá)只受啟動(dòng)子與RNA聚合酶相互作用的影響,而不受其他機(jī)制調(diào)節(jié)3簡(jiǎn)述乳糖操縱子結(jié)構(gòu),解釋阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)機(jī)制,CAP的調(diào)節(jié)機(jī)制及其生長(zhǎng)條件下的協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)。答:操縱子結(jié)構(gòu)包括結(jié)構(gòu)基因、操縱基因、啟動(dòng)子和調(diào)節(jié)基因。負(fù)性調(diào)節(jié):阻遏戴白與操縱序列O結(jié)合,阻止RNA聚合酶與啟動(dòng)序列結(jié)合,轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)被抑制。大腸桿菌在沒有乳糖的環(huán)境中生存時(shí),lac操縱子處于阻遏狀態(tài);當(dāng)有乳糖存在時(shí)基因轉(zhuǎn)錄開放。細(xì)菌優(yōu)先利用葡萄糖作為能源,有葡萄糖:cAMPCAP無活性不促進(jìn)

41、轉(zhuǎn)錄;無葡萄糖:cAMPCAP有活性促進(jìn)轉(zhuǎn)錄。CAP是同二聚體,在其分子內(nèi)有DNA結(jié)合區(qū)及cAMP結(jié)合位點(diǎn)。當(dāng)沒有葡萄糖存在時(shí),cAMP,cAMP與CAP結(jié)合,CAP結(jié)合在lac啟動(dòng)序列附近的CAP位點(diǎn),可刺激RNA聚合酶活性。當(dāng)有葡萄糖存在時(shí),cAMP,cAMP與CAP結(jié)合受阻,lac操縱子表達(dá)。正性調(diào)控與負(fù)性調(diào)控的協(xié)調(diào)調(diào)節(jié):當(dāng)阻遏蛋白與操縱序列結(jié)合而封閉后,CAP不能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄;當(dāng)阻遏蛋白脫離操縱序列而解除封閉后,如果沒有CAP也不能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。4、簡(jiǎn)述原核生物基因表達(dá)的調(diào)控的特點(diǎn)。答:每個(gè)原核生物都是獨(dú)立的生物體,其一切代謝活動(dòng)都是為了使自己適應(yīng)環(huán)境,更好的生存、生長(zhǎng)和繁殖。基因以操縱子為單

42、位進(jìn)行轉(zhuǎn)錄;基因轉(zhuǎn)錄的特異性由因子決定基因表達(dá)既存在正調(diào)控,也存在負(fù)調(diào)控基因表達(dá)存在衰減子調(diào)控機(jī)制基因表達(dá)存在應(yīng)急反響調(diào)控5、簡(jiǎn)述真核生物基因表達(dá)的調(diào)控的特點(diǎn)。答:一DNA、染色體水平的變化特點(diǎn) 1染色質(zhì)結(jié)構(gòu) 2組蛋白的作用 3DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)變化 4DNA甲基化 5轉(zhuǎn)錄活性區(qū)對(duì)核酸酶敏感 二正性調(diào)節(jié)占主導(dǎo) 三翻譯與轉(zhuǎn)錄分隔進(jìn)行 四轉(zhuǎn)錄后加工6、什么是順式元件與反式作用因子?簡(jiǎn)述真核基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄調(diào)控的一般原理。答:1順式元件又稱分子內(nèi)作用元件,是基因周圍能與特異轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合而作用的DNA序列。反式作用因子又稱分子間作用分子,是指能夠直接或間接與順式作用元件結(jié)合,調(diào)控特異基因轉(zhuǎn)錄的一類調(diào)節(jié)蛋白。

43、2#暫缺# 以下內(nèi)容僅供參考真核基因組比原核大得多,結(jié)構(gòu)更復(fù)雜,含有許多重復(fù)序列,基因組的大局部序列不是為蛋白質(zhì)編碼的,而為蛋白質(zhì)編碼的基因絕大多數(shù)是不連續(xù)的。真核生物根本上是采取逐個(gè)基因調(diào)控表達(dá)的形式。真核基因表達(dá)調(diào)控的環(huán)節(jié)更多,轉(zhuǎn)錄前可以有基因的擴(kuò)增或重排,并涉及染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變、基因激活過程。轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的方式也很多,但仍以轉(zhuǎn)錄起始調(diào)控為主。正性調(diào)控是真核基因調(diào)控的主導(dǎo)方面,RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄活性依賴于根本轉(zhuǎn)錄因子,在轉(zhuǎn)錄前先形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合體,其轉(zhuǎn)錄效率受許多蛋白因子的影響,協(xié)調(diào)表達(dá)更為復(fù)雜。7、論述原核生物與真核生物在基因表達(dá)調(diào)控方面的差異。原核生物基因表達(dá)調(diào)控真核生物基因表達(dá)調(diào)控啟動(dòng)子因

44、子決定RNA聚合酶識(shí)別的特異性TFD決定RNA聚合酶識(shí)別的特異性轉(zhuǎn)錄激活操縱子、調(diào)節(jié)蛋白順式作用元件、轉(zhuǎn)錄因子主要機(jī)制操縱子模型具有普遍性主要為負(fù)性調(diào)節(jié)阻遏調(diào)節(jié)順式作用元件具有普遍性主要為正性調(diào)節(jié)特有機(jī)制轉(zhuǎn)錄衰減為其特有機(jī)制染色體結(jié)構(gòu)變化為其特有機(jī)制共同點(diǎn)基因表達(dá)都有時(shí)間特異性和空間特異性基因調(diào)控的多層次和復(fù)雜性轉(zhuǎn)錄起始是基因表達(dá)的根本調(diào)控點(diǎn)核酸的體外擴(kuò)增名詞解釋:核酸的體外擴(kuò)增:指通過無細(xì)胞體系的化學(xué)反響實(shí)現(xiàn)目的DNA的擴(kuò)增。問答題:簡(jiǎn)述PCR的根本原理和特點(diǎn)。根本原理:DNA的變性、復(fù)性、半保存復(fù)制。特點(diǎn):a、特異性強(qiáng)擴(kuò)增的目的DNA,可以是DNA混合物中的某個(gè)特定分子,也可以是DNA大分

45、子的某段特定序列。 b、靈敏度高應(yīng)用PCR技術(shù)可以對(duì)一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中得到的DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增、分析、鑒定。在病毒學(xué)檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU空斑形成單位;在細(xì)菌學(xué)檢測(cè)中,PCR的最小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。c、簡(jiǎn)便快捷PCR技術(shù)使用的是耐高溫的TaqDNA聚合酶,且已有各種的PCR擴(kuò)增儀供應(yīng)。只需將反響液一次性地加好,然后設(shè)置一定的程序,即可在DNA擴(kuò)增儀中進(jìn)行變性-退火-延伸的反響,一般在2-4小時(shí)就完成d、對(duì)樣品要求低病毒、細(xì)菌、培養(yǎng)細(xì)胞。其DNA或RNA粗制品均可作為擴(kuò)增模板。擴(kuò)增樣品可以是新鮮的,也可以是陳舊的;可直接用臨床標(biāo)本進(jìn)行擴(kuò)增,如血液、體腔液、洗漱液、毛發(fā)

46、、細(xì)胞、活組織等簡(jiǎn)述PCR的體系組成和反響條件。體系組成:10x擴(kuò)增緩沖液;4種dNTP混合物;引物;模板DNA;TaqDNA聚合酶;Mg2+;加雙或三蒸水至。反響條件:一反響溫度和時(shí)間:1變性溫度與時(shí)間:95、30秒鐘或97、15秒鐘第一次變性5-7分鐘2)溫度和時(shí)間:退火溫度一般在45-55之間,最適退火溫度=4G+C+2(A+T)-(510)。退火時(shí)間一般為3060秒鐘。3延伸溫度和時(shí)間:延伸的溫度一般選擇在7075之間,常用溫度為72。延長(zhǎng)時(shí)間可以根據(jù)目的DNA的長(zhǎng)度來確定。 二循環(huán)次數(shù):PCR循環(huán)次數(shù)的設(shè)定主要取決于初始目的DNA的濃度。一般循環(huán)次數(shù)選在30-40次數(shù)之間。 PCR技

47、術(shù)在分子生物學(xué)中的應(yīng)用。PCR技術(shù)建立以來不斷的開展,并與其他技術(shù)聯(lián)合,建立了許多新技術(shù),包括逆轉(zhuǎn)錄PCR、定量PCR、多重PCR、重組PCR、不對(duì)稱PCR、原位PCR、反向PCR、共享引物PCR、等位基因特異PCR、克隆PCR、PCR-RFLP、PCR-ASOH和PCR-SSCP等。細(xì)胞通訊和信息轉(zhuǎn)導(dǎo)名詞解釋內(nèi)分泌:指由特殊分化的內(nèi)分泌細(xì)胞分泌的激素。旁分泌:指這類信息分子通過擴(kuò)散,直接作用于鄰近的靶細(xì)胞相應(yīng)受體而發(fā)揮作用。自分泌:指這類信息分子作用于分泌它們的細(xì)胞自身受體而發(fā)揮作用。受體:是位于細(xì)胞膜或細(xì)胞內(nèi)能夠特意識(shí)別并結(jié)合配體的蛋白質(zhì)。配體:是指與受體特異結(jié)合的各種信息分子。如神經(jīng)遞質(zhì)

48、、神經(jīng)肽、激素、細(xì)胞因子等。第二信使:許多化學(xué)信號(hào)第一信使與細(xì)胞膜受體結(jié)合,觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生小分子物質(zhì),包括cAMP、cGMP、DAG、IP3、Ca2+等,這些物質(zhì)稱為第二信使。第三信使:負(fù)責(zé)細(xì)胞核內(nèi)外信息傳遞的物質(zhì)稱為第三信使。鈣調(diào)蛋白:鈣調(diào)蛋白是真核生物細(xì)胞中的胞質(zhì)溶膠蛋白,由148個(gè)氨基酸組成單條多肽,相對(duì)分子質(zhì)量為16.7kDa。問答題試述腎上腺素與受體結(jié)合后調(diào)節(jié)糖原代謝的信息傳遞過程。以下圖所占篇幅較大,請(qǐng)自行參考簡(jiǎn)化腎上腺素+-AR腎上腺素-AR 無活性GS有活性GS 無活性的AC有活性的AC ATPcAMP5-AMP 無活性PKA有活性PKA 無活性磷酸有活性磷酸 有活性糖無活性糖

49、化酶b激酶 化酶b激酶 原合酶2 原合酶D 無活性糖原有活性糖原 磷酸化酶b 磷酸化酶b 糖原葡萄糖-1-磷酸 糖原分解加強(qiáng) 糖原合成抑制 血糖升高受體與激素、細(xì)胞因子的結(jié)合特征是什么?高度特異性高度親和力可逆性可飽和性受體與激素、細(xì)胞因子的結(jié)合量與配體的生物學(xué)效應(yīng)呈正比關(guān)系簡(jiǎn)述cAMP-蛋白激酶A途徑?;瘜W(xué)信號(hào)GPCRGsACcAMPPKA關(guān)鍵酶/功能蛋白細(xì)胞效應(yīng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+是如何作為第二信使起作用的?Ca2+與細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)游離的PKC結(jié)合,引導(dǎo)其向細(xì)胞膜胞質(zhì)面轉(zhuǎn)運(yùn),并與細(xì)胞膜內(nèi)層脂上的DAG結(jié)合,徹底激活PKC。Ca2+還與細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)的鈣調(diào)蛋白CaM結(jié)合形成復(fù)合物,激活另一種蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶。那些物質(zhì)是第二信使?通常將Ca2+、DAG、IP3、Cer、cAMP、cGMP等這類在細(xì)胞內(nèi)傳遞信息的小分子化合物稱為第二信使。cAMP的生成與分解分別是有何種酶催化?生成cAMP的底物是什么?cAMP分解的產(chǎn)物是什么?ATP經(jīng)腺苷酸環(huán)化酶催化合成cAMP,由磷酸二酯酶分解cAMP生成5-AMP說明G蛋白有幾種類型,是如何調(diào)控細(xì)胞膜上腺苷酸環(huán)化酶的活性的?G蛋白的類型 功能Gs 激活腺苷酸環(huán)化酶

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