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文檔簡(jiǎn)介
1、玉米小斑病菌對(duì)碳氮源的利用材料與方法11病菌來(lái)源從河南省新鄉(xiāng)市洪門(mén)鎮(zhèn)的發(fā)病田中采集病葉,經(jīng)分離培養(yǎng)、形態(tài)鑒定、致病性鑒定,確定病菌為玉米小斑病菌玉蜀黍平臍蠕抱。1.2 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基的制備1L馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基配方:200g馬鈴薯、20g葡萄糖、17g瓊脂,補(bǔ)足蒸儲(chǔ)水至1000mL。先將海爭(zhēng)去皮的馬鈴薯切碎,加1000mL水煮沸O.Sh;用紗布濾去馬鈴薯,加水補(bǔ)充至1000mL,然后加糖、瓊脂,加熱使瓊脂完全溶化后,趁熱用紗布過(guò)濾,分裝在三角瓶中,加棉塞后滅菌。1.3 不同碳源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響基礎(chǔ)培養(yǎng)基選用組合培養(yǎng)基,根據(jù)等量代換原則,1L要出培養(yǎng)基配方為:20g蔗
2、糖、5g硝酸鉀、2g磷酸鈉、1g硫酸鎂、12g瓊脂,補(bǔ)足蒸播水至1000mL。分別用等量的葡萄糖、麥芽糖、淀粉、孚牖、甘露醇5種碳源與其中的蔗糖置換,配置成不同的碳源培養(yǎng)基,對(duì)照(CK)選用不加糖的培養(yǎng)基。從形成的菌落邊緣挑取菌絲體移至到上述7種培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi),倒置于28qC恒溫培養(yǎng)箱中,于接種7d后測(cè)量菌落直徑,每個(gè)處理重復(fù)3次,求平均值。1.4 不同氮源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響。在"1.3”節(jié)中基礎(chǔ)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,分別用等量的硫酸鐵、蛋白陳、氯化核、尿素4種氮源與其中的硝酸鉀置換以配置成不同的氮源培養(yǎng)基,對(duì)照(cK)選用不加氮源培養(yǎng)基。從形成菌落的邊緣擬黑菌絲體移至到上述6種培養(yǎng)
3、基的培養(yǎng)皿內(nèi),倒置于28恒溫培養(yǎng)箱中,于接種7d后測(cè)量菌落直徑,每個(gè)處理重復(fù)3次,求平均值。2 .結(jié)果與分析2.1 不同碳源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響由表1可以看出,在供試的6種碳源中,菌絲都可以生長(zhǎng),但是不同碳源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)影響不同。在接種7d后可見(jiàn)玉米小斑病菌對(duì)碳源的利用有明顯的差異,麥芽糖、淀粉作為碳源時(shí),病菌菌絲生長(zhǎng)速度最快而且菌絲稠密,菌落平均直徑分別為69.4、67.6mm;其次是蔗糖、孚腐、甘露醇,菌落平均直徑分別為66.2、65.0、63.0mm;葡萄糖作為碳源時(shí),病菌菌絲生長(zhǎng)速度最慢且菌絲稀少,菌落平均直徑為58.9mm。2.2 不同氮源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響由表2可以看出,
4、在供試的5種氮源中,菌絲都可以生長(zhǎng),但是不同氮源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響不同。在接種7d后,玉米小斑病菌對(duì)氮源的利用有明顯的差異,氯化核作為氮源時(shí),病菌菌絲生長(zhǎng)速度最快而且菌絲稠密,菌落平均直徑73.8mm;其次是蛋白月東,菌落平均直徑為67.6mm;硝酸鉀、硫酸核作為氮源時(shí),病菌菌絲生長(zhǎng)速度較慢且菌絲稀少,菌落平均直徑分別為49.7、47.5mm;玉米小斑病菌在尿素為氮源培養(yǎng)基中生長(zhǎng)最慢,菌落平均直徑為27.7mm。3 .結(jié)論與討論碳源是構(gòu)成細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中碳架的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),也是玉米小斑病菌生理活動(dòng)所需要的能源,合適的碳源更有利于病菌菌絲的生長(zhǎng)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,麥芽糖、葡萄糖、淀粉、學(xué)糜、甘露醇、蔗糖均可被該病原菌利用,其中淀粉、麥芽糖作為碳源時(shí)菌落平均直徑最大,菌絲生長(zhǎng)速度最快,且菌絲濃密健壯、長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng);葡萄糖作為碳源時(shí),菌落平均直徑最小,菌絲生長(zhǎng)速度最慢。氮是蛋白質(zhì)的基本成分,也是核酸和酶類(lèi)的重要物質(zhì)元素,玉米小斑病菌菌絲對(duì)供試的氮均可利用,但利用程度不同:以硫酸核、硝酸鉀、蛋白月東、氯化核、尿素作為氮源時(shí),氨化核、蛋白月東最有利于病原菌菌絲的生長(zhǎng),尿素最不利于菌絲的生長(zhǎng)。因此可以看出,病原菌對(duì)碳源的利用以淀粉、麥芽糖最佳,對(duì)葡萄糖的利用較差;病原菌對(duì)氮源的利用以氯化鐵、蛋白月東最佳,對(duì)尿素的利用較差。本研究探討了不同的碳源和
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