基因工程的工具

1、第一節(jié)基因工程的工具酶和載體【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1. 能夠描述基因工程的概念和目的。2. 能說出基因工程的三種基本工具及各工具的的特點(diǎn)和用途?！灸繕?biāo)達(dá)成】活動(dòng)一：基因工程的工具（一） “分子手術(shù)刀” 一一 （自主學(xué)習(xí)）1、 來源：主要從 中分離。2、 功能：能夠識(shí)別雙鏈 DNA分子的特種序列，并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的斷開。3、 結(jié)果：切割后的末端有 和。4、 特點(diǎn)： ，即識(shí)別特點(diǎn)脫氧核苷酸序列，在特點(diǎn)位點(diǎn)上切割DNA分子。（識(shí)別序列特點(diǎn)：）【練一練】寫出下表中四種限制酶切割后的結(jié)果，并分析限制酶所識(shí)別的DNA序列有什么特點(diǎn)？限制酶Kfsg I 相BamH INjbig I 茯Sina I

2、爾切卩 f立點(diǎn)心-GGATCC*-CCTAGTG-* GATC-C1AGT CCCGGG一 GGGTCCC4（二） “分子搬運(yùn)車” 一一1、 作用： 作為工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中。在受體細(xì)胞中復(fù)制，從而使目的基因也大量 。2、條件：（以質(zhì)粒為例） 含有，能在宿主細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制并穩(wěn)定地保存。 有一個(gè)或多個(gè) ，可使目的基因插入到載體上。 具有，如四環(huán)素抗性基因、 氨芐青霉素抗性基因或某些生化表型等，用于鑒定和選擇重組 DNA分子。3、 種類： （最常用）、。（三）“分子針線” _ 1、 作用：將DNA雙鏈片段縫合起來，恢復(fù)被 切開的兩個(gè)核苷酸之間的，拼接成新的DNA分子。2、 E- COl

3、i DNA連接酶，只能連接 ，不能連接 。T4 DNA連接酶，既可以連接 ，又可以連接 。活動(dòng)二：構(gòu)建重組質(zhì)粒（小組合作）請(qǐng)利用所示限制酶對(duì)目的基因、質(zhì)粒分別進(jìn)行切割，并構(gòu)建重組質(zhì)粒，各小組展示成果?；顒?dòng)三：對(duì)基因工程概念的理解【目標(biāo)檢測(cè)】1、 限制酶切割 DNA時(shí)（）A. 專一識(shí)別特定的核苷酸序列B.C.任意切割，沒有特定的核苷酸序列D.2、不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是（A. 能復(fù)制B .有多個(gè)限制酶切點(diǎn)切斷的是堿基對(duì)之間的氫鍵識(shí)別多種核苷酸序列，但切口只有一個(gè)）C 具有標(biāo)記基因D 它是環(huán)狀 DNA基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平原理結(jié)果基本過程3、 下面是3種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)

4、 DNA分子的識(shí)別序列和剪切位點(diǎn)圖，錯(cuò)誤的是（）限制酶 1 : - J GATC-;限制酶 2： -CCGCJ GG-;限制酶 3： -G J GATCC-A. 不同的限制酶有不同的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，體現(xiàn)了酶的專一性B. 限制酶2和3識(shí)別的序列都包含 6個(gè)堿基對(duì) C.限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同C. 能夠識(shí)別和切割 RNA分子內(nèi)一小段核苷酸序列的酶只有限制酶24、 限制酶 BamH和Bgl I識(shí)別序列及切割位點(diǎn)依次為GJ GATC（和AJ GATCT用BamH切割目的基因，Bgl I切割質(zhì)粒，并連接得到重組質(zhì)粒相關(guān)敘述正確的是（）A. 酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應(yīng)時(shí)間等因素B. 目的基因經(jīng)BamHI切割后