保健食品原料目錄褪黑素的技術(shù)要求及起草說明(2019版)

1、保健食品原料目錄褪黑素原料名稱每日用量功效技術(shù)要求名稱用量范圍適宜人群不適宜人群注意事項褪黑素1-3mg成人少年兒童、孕婦、乳母從事駕駛、機械作 業(yè)或危險操作者， 不要在操作前或操 作中食用和自身免 疫癥（類風(fēng)濕等） 及甲亢患者慎用。改善睡眠見附件r ItKSk礴蚯電氧上幗辿眄胭褪黑素原料技術(shù)要求褪黑素原料是以合成的5-甲氧基色胺經(jīng)過乙?；频??；衔锩Q為N-乙?；?5- 甲氧基色胺，分子式為C13H16N2 O2。應(yīng)符合表1 規(guī)定。表 1 感官指標(biāo)項目要求色澤白色或類白色狀態(tài)結(jié)晶狀顆?；蚍勰┰跇?biāo)志性成分指標(biāo)項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應(yīng)與對照品溶液主峰應(yīng)符合表2 規(guī)定。表

2、2 理化指標(biāo)項目指標(biāo)檢驗方法5- 甲氧基色胺，%0.11 5- 甲氧基色胺的測定干燥失重，%0.52 干燥失重的測定熾灼殘渣，%0.13 熾灼殘渣的測定鉛（以Pb 計） ， mg/kg2.0GB 5009.12總砷 （以As 計），mg/kg1.0GB 5009.11總汞 （以Hg 計），mg/kg0.3GB 5009.171 5- 甲氧基色胺的測定1.1 試劑和材料1.1.1 5- 甲氧基色胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。1.1.2 甲醇溶液：70 %。1.1.3 甲醇：色譜純。1.1.4 三氟乙酸：分析純。1.2 儀器和設(shè)備1.2.1 電子天平。1.2.2 超聲清洗器。1.2.3 高效液相色譜儀。1.3 對照

3、品溶液的制備精密稱定5-甲氧基色胺約50mg，置50mL量瓶中，加70%甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取適量上述溶液，用流動相定量稀釋制成每1 mL中含1 g 的溶液，作為對照品溶液。1.4 供試品溶液的制備精密稱定褪黑素原料約 100 mg，置于10 mL量瓶中，加70 %甲醇溶液溶解并稀釋至刻度， 搖勻。 精密量取適量上述溶液，用流動相定量稀釋制成每1 mL中含 1 mg的溶液，作為供試品溶液。1.5 測定色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；色譜柱規(guī)格：4.6mm× 150 mm， 5 m；流動相為甲醇：0.1%三氟乙酸水溶液=35:65 。檢測波長：

4、222 nm；流速 :1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 L。 將上述溶液依次注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以保留時間定性，分別測量對照品和供試品溶液峰面積。 1.6 結(jié) 果計算5- 甲氧基色胺含量計算:W = (Au / A s)× (c s × V / m) × 100%式中：W： 5- 甲氧基色胺含量，%；Au：供試品溶液的峰面積；As：標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積；m：原料的稱樣量(g) ；V：定容體積(mL) ；4cs：標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度（mg/mL） 。2 干燥失重的測定2.1 試劑和材料干燥劑：五氧化二磷、無水氯化鈣或硅膠。2.2 儀器和設(shè)備2.2.1 電子天

5、平。2.2.2 扁形稱量瓶。2.2.3 烘箱。2.2.4 干燥器。2.3 分析步驟取潔凈鋁制或玻璃制的扁形稱量瓶，置于101 - 105 烘箱中，瓶蓋置于瓶邊，加熱1.0 h ，取出蓋好，置干燥器內(nèi)冷卻，稱量，重復(fù)干燥1 h 以上，至前后兩次質(zhì)量差不超過0.3 mg ，即為恒重。精密稱取1 g 試樣，放入此稱量瓶中，試樣厚度不超過5 mm，加蓋，精密稱量后，置于101 - 105 干燥箱中，瓶蓋置于瓶邊，干燥2 h-4 h 后，蓋好取出，放入干燥器內(nèi)冷卻0.5 h 后稱量。重復(fù)以上操作干燥1 h 以上，至前后兩次質(zhì)量差不超過0.3 mg 。2.4 結(jié)果計算干燥失重的計算:X=（ m1-m2）

6、/（ m1-m3）×100%式中：X：干燥失重（%） ；m1：稱量瓶和試樣的質(zhì)量（g） ；m2：稱量瓶和試樣干燥恒重后的質(zhì)量（g） ；m3：稱量瓶干燥恒重后的質(zhì)量（g） 。3 熾灼殘渣的測定3.1 試劑和材料3.1.1 硫酸，分析純。3.1.2 干燥劑：五氧化二磷、無水氯化鈣或硅膠。3.2 儀器和設(shè)備83.2.1 電子天平。3.2.2 坩堝。3.2.3 電熱板。3.2.4 馬弗爐。3.2.5 干燥器。3.3 分析步驟將洗凈的坩堝置于馬弗爐內(nèi)，在700 - 800 下熾灼30 min 以上，后在干燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱重， 精確至 0.0001g 。 重復(fù)熾灼30 min 以上， 至前后

7、兩次質(zhì)量差不超過0.3 mg，即為恒重。稱取 1 g-2 g 試樣放入此坩堝中，加蓋， 精密稱量后，將其蓋半掩置于電熱板上，以小火加熱使試樣充分炭化至無煙，放冷，加硫酸0.5-1 mL 使?jié)駶?，低溫加熱至硫酸蒸汽除盡后， 700 - 800 下熾灼1 h 以上，使完全灰化，移置干燥器內(nèi)，放冷，精密稱定。重復(fù)熾灼30 min 以上，至前后兩次質(zhì)量差不超過0.3 mg 。3.4 結(jié)果計算熾灼殘渣計算:X=（ m1-m2） /（ m3-m2）×100%式中：X：熾灼殘渣（%） ；m1：坩堝和灰分恒重后的質(zhì)量（g） ；m2：坩堝恒重后的質(zhì)量（g） ；m3：坩堝和試樣的質(zhì)量（g） ?！疚⑸镏?/p>

8、標(biāo)】應(yīng)符合表3 規(guī)定。表 3 微生物指標(biāo)項目指標(biāo)檢驗方法菌落總數(shù)，CFU/g1000GB 4789.2霉菌和酵母，CFU/g50GB 4789.15大腸菌群，MPN/g0.92GB 4789.3 MPN 計數(shù)法沙門氏菌0/25gGB 4789.4金黃色葡萄球菌0/25gGB 4789.10應(yīng)符合表4 規(guī)定。表 4 標(biāo)志性成分指標(biāo)項目指標(biāo)檢驗方法褪黑素含量，%99.54 褪黑素的含量測定4 褪黑素的含量測定4.1 試劑和材料4.1.1 褪黑素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。4.1.2 甲醇溶液：70 %。4.1.3 甲醇：色譜純。4.1.4 三氟乙酸：分析純。4.2 儀器和設(shè)備4.2.1 電子天平。4.2.2 超聲清

9、洗器。4.2.3 高效液相色譜儀。4.3 供試品溶液的制備精密稱定褪黑素原料約100 mg，置于100 mL 量瓶中，加70 %甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取適量上述溶液，用流動相定量稀釋制成每1 mL 中含 0.1 mg 的溶液，作為供試品溶液。4.4 對照品溶液的制備精密稱定褪黑素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)約100 mg，置于100 mL 量瓶中，加70 %甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。 精密量取適量上述溶液，用流動相定量稀釋制成每1 mL 中含 0.1 mg 的溶液，作為對照品溶液。4.5 儀器檢測4.6 mm色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；色譜柱規(guī)格：× 1

10、50 mm， 5 m； 流動相為甲醇：0.1%三氟乙酸水溶液=35:65 。 檢測波長：222 nm； 流速 :1.0mL/min；進(jìn)樣量：10 L。將上述溶液依次注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以保留時間定性，分別測量對照品和供試品溶液峰面積。4.6 結(jié)果計算褪黑素含量計算:W = （Au / A s）× （cs× V / m） × 100%式中：W：褪黑素含量，%；Au：供試品溶液的峰面積；As：標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積；m：原料的稱樣量（g） ； ；V：定容體積（mL） ；cs：標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度（mg/mL） ?！緝Υ妗勘芄狻⒚荛]，在陰涼處保存。【 建議產(chǎn)品的劑型

11、】 片劑、顆粒劑、硬膠囊、軟膠囊【其他】產(chǎn)品配方中除褪黑素和必要的輔料（賦形劑）外，不得添加其他成分（維生素B6 除外）12起草說明一、 起草概況褪黑素的原料目錄信息列表主要是依據(jù)2017 年保健食品原料目錄中標(biāo)單位中國食品藥品檢定研究院的研究結(jié)果、 2005 年發(fā)布的 氨基酸螯合物等保健食品申報與審評規(guī)定（試行）第四條（下稱規(guī)定） ，以及多次專家論證的基礎(chǔ)上形成的。二、褪黑素原料目錄信息表說明（一）原料名稱褪黑素的名稱與規(guī)定中一致。（二）每日用量1. 用量范圍根據(jù) 規(guī)定 要求， “ 褪黑素的推薦食用量為1-3mg/日” ，我國已批準(zhǔn)的褪黑素保健食品每日用量范圍是1-3mg。結(jié)合以上情況、科學(xué)

12、文獻(xiàn)檢索、加拿大天然保健產(chǎn)品管理局推薦用量（每日用量0.1-10mg） 、歐盟食品安全委員會推薦用量（每日用量0.5mg） ，以及其他國家法規(guī)作為參考，最終確定了褪黑素的每日推薦量1-3mg。92. 適宜人群、不適宜人群、注意事項結(jié)合我國已批準(zhǔn)產(chǎn)品的情況、加拿大和澳大利亞的管理法規(guī)等國外法規(guī)、科學(xué)文獻(xiàn)，適宜人群限定為成人。將少年兒童、孕婦、乳母列為不適宜人群。注意事項的要求與規(guī)定要求相同。（三）功效規(guī)定中，褪黑素的申報功能暫限定為改善睡眠，且已批準(zhǔn)的產(chǎn)品均為此功能，故結(jié)合國內(nèi)外文獻(xiàn)報道，本次修訂仍將功效定為改善睡眠。（四）原料技術(shù)要求原料技術(shù)要求的制定延續(xù)了規(guī)定與褪黑素質(zhì)量相關(guān)的條款， 同時參

13、考了美國藥典USP40 、英國藥典BP2018中的指標(biāo)確定各項指標(biāo)及其限值。具體說明如下：1. 來源經(jīng)研究單位的市場調(diào)研，褪黑素原料目前均以化學(xué)合成法制得。國內(nèi)作為保健食品原料的褪黑素是以丙二酸二乙酯為原料，經(jīng)過加成、偶合、成環(huán)、開環(huán)、脫羧、?；确磻?yīng)而成。因此總結(jié)為“褪黑素是以合成的 5- 甲氧基色胺，經(jīng)過10乙?；频谩?。2. 感官指標(biāo)根據(jù)實際原料情況進(jìn)行描述。3. 鑒別4. 理化指標(biāo)5- 甲氧基色胺采用褪黑素含量測定方法體系檢測，與USP 40、 BP 2018 等標(biāo)準(zhǔn)的檢測方式基本一致。干燥減重參考中國藥典2015 年版的分析方法，和USP 40、 BP 2018 等標(biāo)準(zhǔn)中方法基本一致。熾灼殘渣參考中國藥典2015 年版的分析方法，和USP 40、 BP 2018 等標(biāo)準(zhǔn)中方法基本一致。鉛、砷、汞指標(biāo)的檢測方法和限值按照食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 保健食品(GB16740-2014)制定。5. 微生物指標(biāo)檢測方法和限值按照食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)保健食品( GB16740-2014)制定。6. 標(biāo)志性成分指標(biāo)11各國標(biāo)準(zhǔn)對褪黑素原料中褪黑素含量的規(guī)定不同，我國的規(guī)定中要求褪黑素純度應(yīng)達(dá)到99.5%以上。根據(jù)研究單位的市場調(diào)研，結(jié)合我國褪黑素原料生產(chǎn)、檢測水平現(xiàn)狀，本次修訂