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文檔簡(jiǎn)介
1、紫外分光光度法一、原理可見(jiàn)光、紫外線照射某些物質(zhì),主要是由于物質(zhì)分子中價(jià)電子能級(jí)躍遷 對(duì)輻射的吸收,而產(chǎn)生化合物的可見(jiàn)紫外吸收光譜?;谖镔|(zhì)對(duì)光的選擇性吸收 的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯一一比耳定律 為根底。文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索A=lg1/T=Kbc式中A為吸收度;T為透光率;E為吸收系數(shù),采用的表示方法是El%lcm,其物理意義為當(dāng)溶液濃 度為1% g/ml,液層厚度為1cm時(shí)的吸收度數(shù)值;文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索C為100ml溶液中所含被測(cè)物質(zhì)的重量按枯燥品或無(wú)水物計(jì)算,g;L為液層厚度,cm。二、使用范圍凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物, 根據(jù)在特定吸收波長(zhǎng)處
2、所測(cè)得的吸 收度,可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測(cè)定。文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索三、儀器可見(jiàn)-紫外分光光度計(jì)。其應(yīng)用波長(zhǎng)范圍為 200400nm的紫外光區(qū)、 400850nm的可見(jiàn)光區(qū)。主要由輻射源光源、色散系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、吸收 池、數(shù)據(jù)處理機(jī)、自動(dòng)記錄器及顯示器等部件組成。 文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索本儀器是根據(jù)相對(duì)測(cè)量的原理工作的,即先選定某一溶劑或空氣、試樣作為 標(biāo)準(zhǔn)空白或稱參比溶液,并認(rèn)為它的透光率為 100%或吸收度為0,而 被測(cè)的試樣透光率或吸收度是相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)溶液而言,實(shí)際上就是由出射狹縫 射出的單色光,分別通過(guò)被測(cè)試樣和標(biāo)準(zhǔn)溶液, 這兩個(gè)光能量之比值,就是在一 定波長(zhǎng)下對(duì)于被測(cè)試樣的透光率或吸
3、收度。文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索本儀器可精密測(cè)定具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物、有色物質(zhì)或在適當(dāng)條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質(zhì)。文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索?中華人民共和國(guó)藥典 ?2005年版 第一部 附錄VA P附錄28:文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索儀器的校正和檢定1波長(zhǎng) 由于環(huán)境因素對(duì)機(jī)械局部的影響,儀器的波長(zhǎng)經(jīng)常會(huì)略有 變動(dòng),因此除應(yīng)定期對(duì)所用的儀器進(jìn)行全面校正檢定外,還應(yīng)于測(cè)定前校正測(cè)定波長(zhǎng)。常用汞燈中的較強(qiáng)譜線237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm 與576.
4、96nm,或用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進(jìn)行校正,欽玻璃在 279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、 536.2nm與637.5nm波長(zhǎng)處有鋒利吸收峰,也可作波長(zhǎng)校正用,但因來(lái)源不 同或隨著時(shí)間的推移會(huì)有微小的差異,使用時(shí)應(yīng)注意。文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索2吸光度的準(zhǔn)確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120C枯燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60mg,精密稱定 ,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml,在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定并計(jì)算其吸收系數(shù),并與規(guī)定的吸 收系數(shù)比擬,應(yīng)符合表中的規(guī)定。文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜
5、索波長(zhǎng)/nm235 最小257 最大313 最小350 最大吸收系數(shù)的規(guī)定值124.5144.048.62106.6吸收系數(shù)的許可范圍123.0 126.0142.8 146.247.0 50.3105.5 108.53雜散光的檢查可按下頁(yè)表的試劑和濃度,配制成水溶液,置1cm石英吸收池中,在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定透光率,應(yīng)符合表中的規(guī)定。文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索試劑濃度 % (g/ml )測(cè)定用波長(zhǎng)nm透光率%碘化鈉1.00220<0.8亞硝酸鈉5.00340<0.8紫外可見(jiàn)分光光度法-特點(diǎn)分光光度法對(duì)于分析人員來(lái)說(shuō),可以說(shuō)是最有用的工具之一。幾乎每一個(gè)分析實(shí)驗(yàn)室都離不開(kāi)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。
6、分光光度法的主要特點(diǎn)為:文檔來(lái)自于網(wǎng)絡(luò)搜索1 應(yīng)用廣泛由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。 到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表 上的所有元素除少數(shù)放射性元素和惰性元素 之外均可采用此 法。2 靈敏度高由于相應(yīng)學(xué)科的開(kāi)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展, 從而對(duì)元素測(cè)定的 靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種外表活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密 度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比擬高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用, 在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的 研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。3 選擇性好目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比擬滿意的方法了。4 準(zhǔn)確度高對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范
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