貼壁培養(yǎng)與懸浮培養(yǎng)的區(qū)別

1、貼壁細胞培養(yǎng)與懸浮細胞培養(yǎng)的區(qū)別蔓荊子2013.11.08 1. 概念概念2. 細胞類型細胞類型3. 接種方式接種方式4. 培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件5. 細胞形態(tài)細胞形態(tài)6. 生長過程生長過程7. 傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)1.貼壁細胞培養(yǎng)：細胞貼附在一定的固相表面進行的培養(yǎng)。2.懸浮細胞培養(yǎng)：細胞生長不依賴于支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長。1 概念概念2 細胞類型細胞類型 適合貼壁培養(yǎng)的細胞：包括原代細胞在內(nèi)的大多數(shù)細胞類型。主要包括正常細胞和腫瘤細胞，比如成纖維細胞，骨骼組織（骨及軟骨），心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經(jīng)膠質(zhì)細胞，內(nèi)分泌細胞，黑色素細胞及各種腫瘤細胞等 適合懸浮培養(yǎng)的細胞：適應懸

2、浮培養(yǎng)的細胞及無粘附的細胞。一些取自血、脾或骨髓的培養(yǎng)細胞，尤其是血液白細胞，淋巴細胞。植物細胞。3 接種方式接種方式 貼壁培養(yǎng) PBS沖洗血液，去掉脂肪組織，切成小塊，消化液消化，培養(yǎng)液培養(yǎng)。 植物細胞的懸浮培養(yǎng) 由完整的植物器官分離單細胞 機械法 酶解法 由愈傷組織分離單細胞水曲柳懸浮細胞系的建立1 丁小萌，閆俊崎，周 博，齊鳳慧。水曲柳愈傷組織誘導及懸浮細胞系的建立。中國農(nóng)學通報，2013,29（25）:21-25香花槐愈傷組織及懸浮培養(yǎng)的細胞1胡海英，趙亞美，閻曉磊，王華芳。香花槐愈傷組織及細胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)。北京林業(yè)大學學報，2007,29（5）:26-304 培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件貼壁細胞

3、培養(yǎng)貼壁細胞培養(yǎng)懸浮細胞培養(yǎng)懸浮細胞培養(yǎng)容器需要使用經(jīng)過組織培養(yǎng)處理的容器使用未經(jīng)過組織培養(yǎng)處理的容器，但需攪拌或搖晃設(shè)備貼壁細胞培養(yǎng)貼壁細胞培養(yǎng)懸浮細胞培養(yǎng)懸浮細胞培養(yǎng)溫度人和哺乳動物細胞系：36-37昆蟲細胞系：27禽類細胞系：38.5冷血動物：15-26植物懸浮細胞系：23-27pH哺乳動物系：7.0-7.4成纖維細胞系：7.4-7.7植物細胞：5.6-6.0培養(yǎng)基需血清懸浮培養(yǎng)基可不需血清5 細胞形態(tài)細胞形態(tài)貼壁培養(yǎng)細胞：成纖維細胞型 上皮細胞型 游走細胞型 多型細胞型懸浮培養(yǎng)細胞：懸浮型 成纖維細胞型成纖維細胞型 名稱名稱：凡在培養(yǎng)中形態(tài)與成纖維細胞類似的。來源來源：由中胚層間充質(zhì)組

4、織起源的組織如：真正的成纖維細胞，心肌，平滑肌，成骨細胞，血管內(nèi)皮。形態(tài)形態(tài)：似體內(nèi)成纖維細胞的形態(tài)，胞體梭形或不規(guī)則三角形，胞質(zhì)向外伸出23個長短不等的突起，中有卵圓形核。生長特點生長特點：排列成放射狀，漩渦狀，并不緊靠連成片，細胞細胞接觸易斷開而單獨行動，游離的單獨的成纖維樣細胞，常有幾個伸長的細胞突起。人心肌細胞人絨毛間充質(zhì)成纖維細胞上皮細胞型上皮細胞型 名稱名稱：僅形態(tài)上似體內(nèi)，實際上不完全相同。來源來源：來源于外胚層、內(nèi)胚層細胞, 如：皮膚及其衍生物,消化道，乳腺，肺泡, 上皮性腫瘤。形態(tài)形態(tài)：類似體內(nèi)的上皮細胞扁平，不規(guī)則多角形，中有圓形核。生長特點生長特點：易相連成片，相靠緊密相

5、連成薄層鋪石狀生長時呈膜狀移動，很少脫離細胞群而單個活動。人大腸上皮粘膜癌細胞人小氣道上皮細胞游走細胞型游走細胞型生長特點生長特點：呈散在生長，一般不連成片，胞質(zhì)常突起，呈活躍游走或變形運動，方向不規(guī)則。此型細胞不穩(wěn)定，有時難以和其他細胞相區(qū)別。小鼠腹腔分離的單核巨噬細胞多型細胞型多型細胞型生長特點生長特點：有一些細胞，如神經(jīng)細胞難以確定其規(guī)律和穩(wěn)定的形態(tài)，可統(tǒng)歸于此類。大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細胞胎鼠神經(jīng)干細胞皮層神經(jīng)細胞人PBMC細胞懸浮培養(yǎng)細胞淋巴母細胞T淋巴細胞白血病細胞岷江百合細胞繼代4次后的文冠果細胞懸浮培養(yǎng)初期的棉花細胞分裂旺盛的胡蘿卜細胞1 姜新超，劉春。岷江百合懸浮細胞系的建立及植株再生

6、。園藝學報，2011,38（2）:327-3342 劉磊，顧玉紅。文冠果懸浮細胞系建立及細胞生長特性。林業(yè)科學，2011,46（9）：79-836 生長過程生長過程潛伏期潛伏期：懸浮,胞質(zhì)回縮, 全部細胞變?yōu)閳A球形。貼附底物。有運動活動,基本無增殖, 少見分裂相。指數(shù)增長期指數(shù)增長期：是細胞增生最活躍、活力最旺盛的階段培養(yǎng)物中細胞數(shù)量呈指數(shù)增長,細胞群體均一。停滯期停滯期：細胞數(shù)量達飽和密度后，細胞遂停止增殖，進入停滯期。7 傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)貼壁細胞貼壁細胞酶消化法傳代：棄去培養(yǎng)液，加胰酶消化，加培養(yǎng)液終止胰酶作用，離心，去上清，吹打成懸液，分裝傳代。懸浮細胞懸浮細胞離心法傳代：離心，棄上清液，加新鮮培養(yǎng)基，分裝傳代。直接傳代法：待細胞沉淀，傾去1/3-2/3培養(yǎng)液，用吸管吹打形成細胞懸液再傳代。貼壁培養(yǎng)貼壁培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)適合包括原代細胞在內(nèi)的大多數(shù)細胞類型適合已適應懸浮培養(yǎng)的細胞以及其他一些無粘附性的細胞需要定期傳代，但是易于通過倒置顯微鏡觀察。顯微鏡下觀察形態(tài)多種?；蝿优囵B(yǎng)液時，細胞不動較易傳代，但是需要每天進行細胞計數(shù)和存活率測定。顯微鏡下觀察呈圓形?；蝿优囵B(yǎng)液時，細胞也隨著漂動利用酶或機械方法解離細胞無需通過酶或機械方法解離細胞需要使用經(jīng)過組織培養(yǎng)處