動物源性細菌

1、第15章動物源性細菌動物源性細菌是人畜共患病的病原菌，即由一種病原菌同時可引起動物和人類的某些傳染病，稱為人畜（獸）共患病，其中絕大多數(shù)是以動物作為傳染源的稱為動物源性疾?。▃oonosis）。由于人類直接接觸病畜或其污染物及媒介動物叮咬等途徑感染而致病，這些病主要發(fā)生在畜牧區(qū)或自然疫源地。動物源性細菌主要有布魯菌、鼠疫耶氏菌和炭疽芽胞桿菌。第一節(jié)布魯菌屬布魯菌屬（Brucella）細菌是一類人畜共患傳染病的病原菌，有4個生物種、13個生物型，因最早由美國醫(yī)師DavidBruce首先分離出，故得名。本屬使人致病的有牛布魯菌（B.abortus又稱流產(chǎn)布魯菌）、羊布魯桿菌（B.melitensi

2、s）、豬布魯桿菌（B.suis）和犬布魯桿菌（B.canis），在我國流行占絕對優(yōu)勢的是羊布魯菌病，其次為牛布魯菌病。一、生物學性狀形態(tài)與染色革蘭陰性小球桿菌或短桿菌。大小為0.40.8Jmx0.51.5無芽胞，無鞭毛，光滑型菌有微莢膜。革蘭染色經(jīng)常著色不佳，故復染時間應(yīng)適當延長至3min左右。培養(yǎng)特性需氧菌，牛布魯菌在初分離時需5%10%CO營養(yǎng)要求較高，在普通培養(yǎng)基上生長緩慢，如加入血清或肝侵液，或加硫胺、煙酸和生長素等可促進生長。最適生長溫度為3537C，最適pH為6.66.8。經(jīng)37C培養(yǎng)48h可長出微小、透明、無色的光滑型（S）菌落，經(jīng)人工傳代培養(yǎng)后可轉(zhuǎn)變成粗糙型（R）菌落。兩種菌落

3、可用吖啶黃玻片凝聚試驗鑒別，S型在1:1000的吖啶黃中呈均勻混濁，而R型菌出現(xiàn)凝塊。布魯菌在血瓊脂平板上不溶血，在液體培養(yǎng)基中可形成輕度混濁并有沉淀。生化反應(yīng)大多能分解尿素和產(chǎn)生H2S。根據(jù)產(chǎn)生H2S的多少和在含堿性染料培養(yǎng)基中的生長情況，可鑒別羊、牛、豬等三種布魯菌。（表15-1）抗原構(gòu)造與分型布魯菌含有兩種抗原物質(zhì)，即A抗原和M抗原。兩種抗原在不同的布魯菌中含量不同，牛布魯菌含A（abortus）抗原多，故又稱牛布魯菌抗原；羊布魯菌含M（melitensis）抗原多故又稱羊布魯菌抗原。兩種抗原量的比例不同可對菌種進行區(qū)別，如牛布魯菌A:M=20:1，而羊布魯菌A:M=1:20,豬布魯菌A

4、:M=2:1。用A與M因子血清進行凝集試驗可鑒別三種布魯菌（表15-1）。表15-1主要布氏桿魯?shù)奶匦耘c鑒別CO菌種2需<脲酶試驗H2S含染料培養(yǎng)基中生長凝集試驗產(chǎn)生復紅（1:50000）硫堇（1:20000)抗A因子抗M因子羊布魯菌不定+牛布魯菌+豬布魯菌+/-+抵抗力抵抗力較強，在土壤、毛皮、病畜的臟器和分泌物、肉和乳制品中可生存數(shù)周至數(shù)月。但在濕熱60C、20min,日光直接照射下20min可死亡；對常用消毒劑均較敏感，如3%來蘇作用數(shù)分鐘可殺死。對常用的廣譜抗生素也較敏感。二、致病性與免疫性致病物質(zhì)布魯菌的主要致病物質(zhì)是內(nèi)毒素。莢膜與侵襲酶（透明質(zhì)酸酶、過氧化氫酶等）增強了該菌的

5、侵襲力，使細菌能通過完整皮膚、粘膜進入宿主體內(nèi)，并在機體臟器內(nèi)大量繁殖和快速擴散入血流。所致疾病布魯菌感染家畜引起母畜流產(chǎn)，病原體可隨流產(chǎn)的胎畜和羊水大量排出；病畜還可表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、乳腺炎、子宮炎等，隱性感染的動物也可經(jīng)乳汁、糞、尿等長期排菌，人類對布魯菌易感，主要通過接觸病畜及其分泌物或接觸被污染的畜產(chǎn)品，經(jīng)皮膚、粘膜、眼結(jié)膜、消化道、呼吸道等不同途徑感染。布魯菌侵入機體經(jīng)16周的潛伏期，此期細菌被中性粒細胞和巨噬細胞吞噬，成為胞內(nèi)寄生菌，隨淋巴流達局部淋巴結(jié)生長繁殖形成感染灶。當細菌繁殖達一定數(shù)量，突破淋巴結(jié)而侵入血流，出現(xiàn)菌血癥。由于內(nèi)毒素的作用致患者發(fā)熱，隨后細菌進入肝、脾、骨

6、髓和淋巴結(jié)等臟器細胞，發(fā)熱也漸消退。細菌在細胞內(nèi)繁殖到一定程度可再度入血，又出現(xiàn)菌血癥而致體溫升高。如此反復形成的菌血癥，使患者的熱型呈波浪式，臨床上稱為波浪熱。感染易轉(zhuǎn)為慢性，在全身各處引起遷徙性病變，伴隨發(fā)熱、關(guān)節(jié)痛和全身乏力等癥狀，體征有肝、脾腫大。人類感染布魯菌不引起流產(chǎn)，原因可能是易感動物的生殖器官和胎膜上含有大量赤蘚醇，刺激細菌生長而引起流產(chǎn)，而人類胎盤中不含有赤蘚醇，故不會引起流產(chǎn)。另外，布魯菌的致病與本菌引起的W型超敏反應(yīng)有關(guān)；還有菌體抗原成分與相應(yīng)抗體形成的免疫復合物，可導致急性炎癥和壞死，病灶中有大量中性粒細胞浸潤，可能是一種川型超敏反應(yīng)（Arthus反應(yīng)）。免疫性機體感染

7、布魯菌后可產(chǎn)生免疫力，且各菌種和生物型之間有交叉免疫。一般認為此免疫力是有菌免疫，即當機體內(nèi)有布魯菌存在時，對再次感染則有較強免疫力。但近來認為隨著病程的延續(xù)，機體免疫力不斷增強，病菌不斷被消滅，最終可變?yōu)闊o菌免疫。由于布魯菌為細胞內(nèi)寄生，故其免疫以細胞免疫為主。病后機體產(chǎn)IgM和IgG型抗體，可發(fā)揮免疫調(diào)理作用。此外，細胞免疫和W型超敏反應(yīng)所導致的免疫保護及病理損害，在慢性與反復發(fā)作的病程中往往交織存在。三、微生物學檢查標本血液是最常用的標本，急性期血培養(yǎng)陽性率高達70%。骨髓在急性期、亞急性期病人均可分離陽性。病畜的子宮分泌物、羊水，流產(chǎn)動物的肝、脾、骨髓等也可作為分離培養(yǎng)的標本。分離培養(yǎng)

8、與鑒定將標本接種于雙相肝浸液培養(yǎng)基（液相為肝浸液的瓊脂斜面）置37C、5%10%G孵箱中培養(yǎng)。菌落大多在47d形成，若30d時仍無菌生長可報告為陰性。若有菌生長，可根據(jù)涂片染色鏡檢，CO的要求，H2S產(chǎn)生，染料抑菌試驗，玻片凝集等確定型別。血清學試驗1.凝集試驗：發(fā)病17d后血清中開始出出現(xiàn)IgM抗體，將患者血清作倍比稀釋，標準菌量為1x109個/ml，進行玻片凝集試驗，1:200有診斷意義。但當效價1:100時應(yīng)重復進行試管凝集試驗，需要在37T水浴1620d后觀察結(jié)果，以1:2001:400血清凝集者為陽性。用膠乳凝集試驗可在6min內(nèi)判定結(jié)果，方法簡易可靠。2 .抗球蛋白試驗（Coomb

9、式驗）：布魯菌感染患者常出現(xiàn)不完全抗體，需用Coomb試驗才能檢出。在病程中凝集效價出現(xiàn)增長者有診斷意義。3 補體結(jié)合試驗：一般發(fā)病3周后出現(xiàn)IgG抗體，由于此抗體能維持較長時間，故對診斷慢性布魯菌病意義較大。此試驗特異性高，試驗結(jié)果以1:10為陽性。皮膚試驗取布魯菌素（brucellin）或布魯菌蛋白提取物0.1ml作皮內(nèi)注射，2448d后觀察結(jié)果.局部紅腫浸潤直徑12cm者為弱陽性，23cm為陽性，36cm為強陽性。若紅腫在46d內(nèi)消退者為假陽性。皮試陽性可診斷慢性或曾患過布魯菌病。四防治原則控制和消滅家畜布魯菌病，切斷傳播途徑和免疫接種是三項主要的預防措施。免疫接種以畜群為主，疫區(qū)人群也

10、應(yīng)接種減毒活疫苗(104M株疫苗皮上劃痕接種)，有效期約一年。急性病人用抗生素治療，慢性者除繼續(xù)用抗生素治療外，應(yīng)采用綜合療法以增強機體免疫力，也可用特異性疫苗進行脫敏治療。第二節(jié)耶爾森菌屬耶爾森菌屬(Yersinia)細菌屬于腸桿菌科，是一類革蘭陰性小桿菌。包括11個菌種，其中鼠疫耶氏菌、小腸結(jié)腸炎耶氏菌與假結(jié)核耶氏菌等三種肯定是人類致病菌。本屬細菌通常先引起嚙齒動物、家畜和鳥類等動物感染，人類通過接觸動物、被節(jié)肢動物叮咬或食入污染食物等途徑感染。一鼠疫耶氏菌鼠疫耶氏菌(Y.pestis)俗稱鼠疫桿菌，是鼠疫的病原菌。鼠疫是一種自然疫源性的烈性傳染病，歷史上曾發(fā)生過三次世界性大流行。人類鼠疫

11、是被疫鼠的鼠蚤叮咬而受染，19891998年世界各地報告鼠疫病例共5440余例，死亡681人，病死率11%因此，鼠疫依然威脅著人類。(一) 生物學性狀形態(tài)與染色為形兩端濃染的卵圓短桿菌。大小為0.50.8X1am般單個散在，偶爾成雙或呈短鏈。有莢膜，無鞭毛，無芽胞。革蘭染色陰性。從死于鼠疫的尸體或動物新鮮內(nèi)臟制備的印片或涂片，形態(tài)典型，有時可見到吞噬細胞內(nèi)外均有本菌。但在化膿或潰瘍性病灶及腐敗材料中可見菌體膨大成球形，且著色不佳。如在陳舊培養(yǎng)物或生長在含高鹽(30g/LNaCI)的培養(yǎng)基上則呈多形態(tài)性，有球形、桿形、棒形和啞鈴狀等，亦可見到著色極淺的細菌輪廓，稱菌影(ghost)。培養(yǎng)特性兼性

12、厭氧，最適生長溫度為2730C，最適pH為6.97.2。在普通培養(yǎng)基上能生長，但生長緩慢。在含血液或組織液的培養(yǎng)基上生長，2448h可形成柔軟、粘稠的粗糙型菌落。在肉湯培養(yǎng)基中開始呈混濁，24h后表現(xiàn)為沉淀生長，48h后逐漸形成菌膜，稍加搖動菌膜呈“鐘乳石”狀下沉，此特征有一定鑒別意義?？乖Y(jié)構(gòu)鼠疫耶氏菌的抗原結(jié)構(gòu)復雜，至少有18種抗原，重要的有F1、V-W外膜蛋白和MT等四種抗原（圖151）圖1511 F1（fraction1）抗原是鼠疫耶氏菌的莢膜抗原，于37°C時產(chǎn)生，具有抗吞噬和活化補體的作用。F1的抗原性強，特異性高，其相應(yīng)抗體具有免疫保護作用。但F1抗原是一種不耐熱的糖蛋

13、白，100C15min即失去抗原性。2 .V和W抗原系毒力質(zhì)粒DNA編碼。W抗原位于菌體表面，是一種脂蛋白；V抗原存在于細胞質(zhì)中，為可溶性蛋白。兩種抗原總是一起產(chǎn)生，與細菌毒力有關(guān)，使細菌具有形成肉芽腫損傷和在細胞內(nèi)存活的能力，且有免疫抑制作用。3 .外膜蛋白（Yersiniaoutermembraneproteins,Yop）其編碼基因與V-W基因存在于同一質(zhì)粒上，在37C和含ca條件下能產(chǎn)生數(shù)種外膜蛋白，這些蛋白能使細菌在突破宿主的防御機制，導致機體發(fā)病等方面具有重要作用。4 .鼠毒素（murinetoxin,MT）為可溶性蛋白，是一種外毒素，對鼠類有劇烈毒性，1g即可使鼠致死，它可阻斷動

14、物腎上腺能神經(jīng)和引起心臟損害，但對人的損傷作用尚不清楚。MT具有良好的抗原性，用0.2%甲醛處理可使其脫毒制成類毒素，用于免疫動物制備抗毒素。5 .內(nèi)毒素其性質(zhì)與腸道桿菌內(nèi)毒素相似，可致機體發(fā)熱，產(chǎn)生休克和DIC等。抵抗力對理化因素抵抗力較弱。濕熱7080C10min或100C1min死亡，5%來蘇或5%5炭酸20min內(nèi)可將痰液中病菌殺死，但在自然環(huán)境中的痰液中能存活36d,在蚤糞和土壤中能存活1年左右。變異性鼠疫耶氏菌通過自發(fā)或誘發(fā)性突變、轉(zhuǎn)座子移位及基因轉(zhuǎn)移等機制發(fā)生變異，其生化特性、毒力、耐藥性和抗原構(gòu)造等均可出現(xiàn)變異菌株。與多數(shù)腸道菌光滑（S）型菌落致病性強的特征不同，野生菌株的菌落

15、呈粗糙（R）型。經(jīng)人工傳代培養(yǎng)后菌落逐漸變?yōu)镾型，其毒力也隨之減弱。（二）致病性與免疫性致病物質(zhì)鼠毒素主要對鼠類致病，具外毒素性質(zhì)，但只有當細菌自溶裂解后才釋放。鼠疫耶氏菌的毒力很強，少數(shù)幾個細菌即可使人致病，其致病性主要與F1抗原、V-W抗原、外膜抗原及內(nèi)毒素等相關(guān)。所致疾病鼠疫是自然疫源性傳染病，一般先在鼠類間發(fā)病和流行，通過鼠蚤的叮咬而傳染人類，尤其當大批病鼠死亡后，失去宿主的鼠蚤轉(zhuǎn)向人群。人患鼠疫后，又可通過人蚤或呼吸道等途徑在人群間流行。臨床常見有腺型、肺型和敗血癥型鼠疫。鼠疫耶氏菌侵入人體，被吞噬細胞吞噬后能在細胞內(nèi)生長繁殖，并沿淋巴流到達局部淋巴結(jié)，引起嚴重的淋巴結(jié)炎。犯及的淋巴

16、結(jié)多在腹股溝，一般為單側(cè)，并引起腫脹、出血和壞死，稱為腺鼠疫。如吸入染菌的塵埃則引起原發(fā)性肺鼠疫，也可由腺型或敗血癥型鼠疫蔓延而致繼發(fā)性肺鼠疫。病人高熱寒戰(zhàn)，咳嗽、胸痛、喀血、呼吸困難，全身衰竭而出現(xiàn)嚴重中毒癥狀，多于24d內(nèi)死亡。病人死亡后皮膚常呈黑紫色，故有“黑死病”之稱。重癥腺型或肺型鼠疫患者的病原菌可侵入血流，導致敗血癥型鼠疫，體溫升高至3940C，發(fā)生休克和DIC,皮膚粘膜見出血點及淤斑，常并發(fā)支氣管肺炎和腦膜炎等癥狀，多迅速惡化而死亡。免疫性鼠疫感染后能獲得牢固免疫力，再次感染罕見。主要產(chǎn)生針對F1抗原、V-W抗原的抗體等，具有調(diào)理促吞噬、凝集細菌及殺菌等作用。另外，尚依賴于吞噬細

17、胞吞殺細菌等細胞免疫的作用。（三）微生物學檢查標本按不同病型采取淋巴結(jié)穿刺液、痰、血液等。人或動物尸體取肝、脾、肺、腫大淋巴結(jié)和心血等。陳舊尸體取骨髓。因鼠疫為法定甲類烈性傳染病，其傳染性極強，除標本采取時要嚴格無菌操作和控制外，標本必須送指定的具有嚴格防護措施的專門實驗室，并按嚴格操作規(guī)程進行。直接涂片鏡檢檢材直接涂片或印片，分別進行革蘭染色和美藍染色，鏡檢觀察典型形態(tài)與染色性。免疫熒光試驗用于快速診斷。分離培養(yǎng)與鑒定將檢材接種于血瓊脂平板或0.025%亞硫酸鈉瓊脂平板等，經(jīng)24h孵育后形成針尖樣小菌落，經(jīng)48h后才形成11.5mm灰白色較粘稠的粗糙型菌落。在液體培養(yǎng)基中孵育48h可形成“鐘

18、乳石”現(xiàn)象。當分離出可疑菌落時，可作涂片鏡檢，噬菌體裂解試驗，血清凝集試驗等進一步鑒定。（四）防治原則滅鼠滅蚤是切斷鼠疫傳播環(huán)節(jié)，消滅鼠疫源的根本措施。我國目前應(yīng)用EV無毒株生產(chǎn)活菌疫苗，多用皮下、皮內(nèi)接種或皮上劃痕，免疫力可維持810個月。此外，應(yīng)加強國境、海關(guān)檢疫。治療必須早期足量用藥，采用磺胺類、鏈霉素、氯霉素、氨基糖苷類抗生素等均有效。二、小腸結(jié)腸炎耶氏菌小腸結(jié)腸炎耶氏菌（Y.enterocolitica）是引起人類嚴重的小腸結(jié)腸炎的病原菌。本菌天然集居在多種動物體內(nèi)，如鼠、兔、豬等，通過污染食物（牛奶、肉類等）和水，經(jīng)糞口途徑感染或因接觸染疫動物而感染。近年來本菌中某些血清型引起的腸

19、道感染正逐漸上升。（一）生物學性狀形態(tài)與染色革蘭陰性球桿菌，偶見兩端濃染。無芽胞、無莢膜，25C培養(yǎng)時有周身鞭毛，但37°C培養(yǎng)時則很少或無鞭毛。培養(yǎng)特性兼性厭氧。耐低溫，在4C能生長，但最適溫度為2028C,最適pH7.6。在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長良好。某些菌株在血瓊脂平板上可出現(xiàn)溶血環(huán)，在腸道菌選擇培養(yǎng)基上形成不發(fā)酵乳糖的無色半透明、扁平的小菌落。血清型根據(jù)菌體0抗原可分為50多種血清型，但僅幾種血清型與致病有關(guān)，且致病型別各地區(qū)也不同。我國主要為0:9、0:8、0:5和0:3等。此外有毒力菌株大都具有V和W抗原、外毒素蛋白等。（二）致病性致病物質(zhì)本菌為一種腸道致病菌，具有侵襲性及

20、產(chǎn)毒素性。V-W抗原具有抗吞噬作用。0:3、0:8、0:9等菌株產(chǎn)生耐熱性腸毒素，與大腸埃希菌腸毒素ST相似。另外，某些菌株的0抗原與人體組織有共同抗原，可刺激機體產(chǎn)生自身抗體，引起自身免疫性疾病。所致疾病本菌為人畜共患病原菌。人類通過食用污染的食物和水而受染，潛伏期37d,臨床表現(xiàn)以小腸、結(jié)腸炎為多見，也見有敗血癥者。臨床上可出現(xiàn)發(fā)熱，腹瀉為粘液或水樣便，易與志賀菌痢混淆。根據(jù)病變位置與發(fā)病機制不同，可將小腸結(jié)腸炎分為四型：胃腸炎（或小腸結(jié)腸炎）型；回腸末端炎、闌尾炎和腸系膜淋巴結(jié)炎型；結(jié)節(jié)性紅斑與關(guān)節(jié)炎型（自身免疫病）；敗血癥型。（三）微生物學檢查標本取糞便、血液和剩余食物等，根據(jù)該菌嗜冷

21、特性，將標本置pH7.47.8的磷酸鹽緩沖鹽水中,于4C增菌23w再用耶氏菌專用選擇培養(yǎng)基置25C培養(yǎng)2448h,挑取可疑菌落進行鑒定。主要鑒定依據(jù)為25C培養(yǎng)時動力陽性，嗜冷性、脲酶陽性、HS陽性及血清學鑒定等。三、假結(jié)核耶氏菌假結(jié)核耶氏菌(Y.pseudotuberculosis)存在于多種動物的腸道中,人類感染較少，主要通過食用患病動物污染的食物而感染。由于該菌在動物感染的臟器中形成粟粒狀結(jié)核結(jié)節(jié)，在人的感染部位形成結(jié)核樣肉芽腫，故稱假結(jié)核耶氏菌。本菌具多形態(tài)性，呈球狀或短桿狀。革蘭陰性。無莢膜、無芽胞，在病變組織中菌體兩端濃染。需氧或兼性厭氧，最適生長溫度為25C，且出現(xiàn)動力，37C培

22、養(yǎng)動力消失。本菌的生化反應(yīng)與鼠疫耶氏菌相似，引起的疾病與小腸結(jié)腸炎耶氏菌相似。根據(jù)耐熱的菌體0抗原將細菌分為6個血清型，引起人類感染的主要是01血清型。毒力菌株大部分具有V和W抗原。假結(jié)核耶氏菌對豚鼠、家兔、鼠類等有很強的致病性，患病動物的肝、脾、肺和淋巴結(jié)等可形成多發(fā)性粟粒狀結(jié)核結(jié)節(jié)。人類感染多為胃腸炎，腸系膜淋巴結(jié)肉芽腫，回腸末端炎等，后者的癥狀與闌尾炎相似，多發(fā)生于515歲的學齡兒童，并易發(fā)展為敗血癥。少數(shù)表現(xiàn)為高熱、紫癜，并伴有肝、脾腫大，類似腸傷寒的癥狀。并有呈結(jié)節(jié)性紅斑等自身免疫病癥的。臨床取糞便、血液等標本進行微生物學檢查。多采用腸道選擇性鑒別培養(yǎng)基進行分離培養(yǎng)，25E培養(yǎng)48h

23、,根據(jù)生化反應(yīng)及動力等，作出初步判斷，最后用血清學試驗進行鑒定。本菌感染應(yīng)用廣譜抗生素進行治療。第三節(jié)芽胞桿菌屬芽胞桿菌屬(Bacillus)是一群需氧，能形成芽胞的革蘭陽性大桿菌。本屬中主要的致病菌為炭疽芽胞桿菌，是引起動物和人類炭疽的病原菌。蠟樣芽胞桿菌可產(chǎn)生腸毒素引起食物中毒。其它大多為腐生菌，主要存在于土壤、水和塵埃中，如枯草芽胞桿菌等。一般不致病，當機體免疫力低下時，偶爾可引起結(jié)膜炎、虹膜炎及全眼炎等。又如多粘芽孢桿菌能產(chǎn)生多粘菌素(polymyxin)；嗜熱脂肪芽孢桿菌的抗?jié)駸崮芰O強，常用作熱力滅菌實驗的代表菌株，以試滅菌器的效果等。這些腐生菌也常是實驗室及制劑生產(chǎn)車間的主要污染

24、菌。一、炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌(B.anthracis)是動物和人類炭疽病的病原菌，是人類歷史上第一個被發(fā)現(xiàn)的病原菌，俗稱炭疽桿菌。牛與羊等食草動物的發(fā)病率最高，人可通過攝食或接觸患炭疽病的動物及畜產(chǎn)品而感染，傳播方式多樣，多見皮膚炭疽，也有腸炭疽、肺炭疽和腦膜炎炭疽等。（一）生物學性狀形態(tài)與染色炭疽芽胞桿菌是致病菌中最大的革蘭陽性粗大桿菌，510X13m兩端截平，無鞭毛。取自病人或病畜新鮮標本直接涂片時，常單個或呈短鏈，經(jīng)培養(yǎng)后則形成長鏈，呈竹節(jié)樣排列（圖15-2）。芽胞在有氧條件下形成，呈橢圓形，位于菌體中央。有毒菌株在人和動物體內(nèi)或含血清的培養(yǎng)基中可形成莢膜。圖15-2培養(yǎng)特性需氧或兼

25、性厭氧，最適溫度為3035C,在普通瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h,形成灰白色粗糙型菌落，邊緣不整齊，在低倍鏡下觀察邊緣呈卷發(fā)狀。在血瓊脂平板上不溶血。在肉湯培養(yǎng)基中由于形成長鏈而呈絮狀沉淀生長。在明膠培養(yǎng)基中經(jīng)37C培養(yǎng)24h可使表面液化呈漏斗狀，由于細菌沿穿刺線向四周擴散成倒松樹狀。有毒菌株在含NaHCO勺血瓊脂平板上，置5%CO孵箱37T孵育2448h可產(chǎn)生莢膜，變?yōu)檎骋盒跃?，用接種針挑取時可見拉絲狀。而無毒株仍形成粗糙型菌落?？乖Y(jié)構(gòu)炭疽芽胞桿菌的抗原分為兩部分，一部分是結(jié)構(gòu)抗原，包括莢膜、菌體和芽胞等抗原成分，另一部分是外毒素復合物。1 莢膜多肽抗原由D谷氨酸多肽所組成。具抗吞噬作用，與細

26、菌毒力有關(guān)。若以高效價抗莢膜多肽血清作莢膜腫脹試驗，對鑒定本菌有一定意義。2 菌體多糖抗原由D-葡萄糖胺、D-半乳糖組成，與毒力無關(guān)。由于耐熱，此抗原在病畜皮毛或腐敗臟器中雖經(jīng)長時間煮沸仍可與相應(yīng)抗體發(fā)生沉淀反應(yīng)，稱Ascoli熱沉淀反應(yīng)，對追溯炭疽芽胞桿菌病原方面起了很大作用。但由于此抗原特異性不高，與其它需氧性芽胞桿菌、14型肺炎鏈球菌，甚至人類A血型抗原之間發(fā)生交叉反應(yīng)，故Ascoli反應(yīng)目前已很少使用。3 芽胞抗原由芽胞的外膜、皮質(zhì)等組成的芽胞特異性抗原，具有免疫原性和血清學診斷價值。4.炭疽毒素由保護性抗原、致死因子和水腫因子三種蛋白質(zhì)組成的復合物，注射給實驗動物可出現(xiàn)炭疽病的典型中

27、毒癥狀。但致死因子和水腫因子單獨作用不會發(fā)揮生物學活性,都必須與保護性抗原組合后才能引起實驗動物的水腫和致死。炭疽毒素具有抗吞噬作用和免疫原性，免疫注射后使豚鼠對炭疽芽胞桿菌的感染具有一定的保護作用。抵抗力由于本菌能產(chǎn)生芽胞，故抵抗力很強，煮沸10min或干熱140C需3h才能殺滅。芽胞對化學消毒劑的抵抗力也很強，如5%石炭酸需5天始可殺死。但對碘及氧化劑較敏感，1:2500碘液10min、3%H2O21h、0.5%過氧乙酸10min即可殺死。細菌芽胞在干燥土壤或皮毛中能存活數(shù)年至20余年，牧場一旦被污染，傳染性可持續(xù)數(shù)十年。本菌對青霉素、紅霉素、氯霉素等均敏感。若在含微量（0.050.5單位

28、/ml）青霉素的培養(yǎng)基上，鏈桿菌排列的細菌形態(tài)發(fā)生變異，變成大而均勻呈鏈狀的串珠狀，稱串珠試驗。對本菌有鑒別意義，其他需氧芽胞桿菌無此現(xiàn)象。（二）致病性與免疫性致病性炭疽芽胞桿菌主要致病物質(zhì)是莢膜和炭疽毒素?？刂魄v膜產(chǎn)生的基因在質(zhì)粒DNA上。莢膜有抗吞噬作用，有利于細菌在宿主組織內(nèi)繁殖擴散。炭疽毒素是造成感染者致病和死亡的主要原因，毒性作用直接損傷微血管內(nèi)皮細胞，增加血管通透性而形成水腫。由于有效循環(huán)血量不足，微循環(huán)障礙致感染性休克和DIC，甚至致死。所致疾病炭疽芽胞桿菌主要為食草動物（牛、羊、馬等）炭疽病的病原菌，人因接觸患病動物或受染毛皮而引起皮膚炭疽，食入未煮熟的病畜肉類、奶或被污染食物

29、引起腸炭疽，或吸入含有大量病菌芽胞的塵?？砂l(fā)生肺炭疽。上述三型均可并發(fā)敗血癥，偶見引起炭疽性腦膜炎，死亡率極高。皮膚炭疽最為多見，細菌由顏面、四肢等皮膚小傷口侵入，經(jīng)一天左右局部出現(xiàn)小痂，繼而周圍形成水皰、膿瘡、最后形成壞死、潰瘍并形成特有的黑色焦痂，故名炭疽。腸炭疽出現(xiàn)連續(xù)性嘔吐，腸麻痹及血便，但以全身中毒為主，23d死于毒血癥。肺炭疽出現(xiàn)呼吸道癥狀，很快也出現(xiàn)全身中毒癥狀而死亡。免疫性感染炭疽后可獲得持久性免疫力。一般認為免疫與機體針對保護性抗原產(chǎn)生保護性抗體及增強吞噬細胞的吞噬功能有關(guān)。（三）微生物學檢查標本根據(jù)炭疽病型采取不同標本。人類皮膚炭疽取水泡、膿皰內(nèi)容物或血液；腸炭疽取糞便、血

30、液及畜肉等；肺炭疽取痰、胸腔滲出液及血液等；腦膜炎炭疽取腦脊液。炭疽動物尸體嚴禁室外剖檢，以防形成芽胞污染牧場及環(huán)境;一般在無菌條件下割取耳尖或舌尖組織送檢直接涂片鏡檢取標本涂片進行革蘭染色，發(fā)現(xiàn)有莢膜的呈竹節(jié)狀排列的革蘭陽性大桿菌，或用特異性熒光抗體染色鏡檢，結(jié)合臨床癥狀可作出初步診斷。分離培養(yǎng)與鑒定檢材接種于血瓊脂平板和碳酸氫鈉瓊脂平板，孵育后觀察菌落，用青霉素串珠試驗、噬菌體裂解試驗等進行鑒定。此外，也可用免疫熒光法檢查病人的莢膜抗體，用ELISA檢查保護性抗體。必要時進行動物試驗。本菌與其他需氧芽胞桿菌的鑒別見表15-2。表15-2炭疽芽胞桿菌與其他需氧芽胞桿菌的鑒別性狀炭疽芽胞桿菌其

31、他需氧芽胞桿菌莢膜+一動力一+血平板不溶血或微溶血多為迅速而明顯溶血NaHCO3瓊脂平板粘液型菌落（有毒株）粗糙型菌落青霉素串珠試驗+一噬菌體裂解試驗+一動物致病力試驗+一/+（四）防治原則炭疽的預防重點應(yīng)放在家畜感染的防治和牧場的衛(wèi)生防護上。病畜應(yīng)嚴格隔離或處死深埋，杜絕在無防護條件下現(xiàn)場剖檢取材，死畜嚴禁剝皮或煮食，必經(jīng)焚毀或深埋2m以下。對易感染家畜應(yīng)進行預防接種。特異性預防用炭疽減毒活疫苗，皮上劃痕接種，免疫力可持續(xù)1年。接種對象是疫區(qū)皮革、毛紡工人、牧民、屠宰牲畜人員、獸醫(yī)等。治療以青霉素首選，也可選用其他廣譜抗生素。二、蠟樣芽胞桿菌蠟樣芽胞桿菌（B.cereus）為革蘭陽性大桿菌，

32、生長6h后即形成橢圓形芽胞，位于菌體中央或次末端。在普通瓊脂平板上生長良好，菌落較大，灰白色，表面粗糙似融蠟狀，故名。本菌廣泛分布于土壤、水、塵埃、淀粉制品、乳和乳制品等食品中。蠟樣芽胞桿菌引起食物中毒必須達到一定的感染量即食物中含菌量達106/g以上才能發(fā)病。食物中毒分兩種類型：嘔吐型：由耐熱的腸毒素引起，于進餐16h發(fā)病,主要是惡心、嘔吐，僅有少數(shù)有腹瀉。類似于葡萄球菌的食物中毒，病程平均不超過10h。腹瀉型：由不耐熱腸毒素引起，進食后發(fā)生胃腸炎癥狀，主要為腹痛、腹瀉和里急后重，偶有嘔吐和發(fā)熱。此外，該菌有時也是外傷后眼部感染的常見病原菌，引起全眼球炎。在免疫功能低下或應(yīng)用免疫抑制藥的患者

33、中還可引起心內(nèi)膜炎、菌血癥和腦膜炎等。發(fā)生食物中毒時采取可疑食物或收集糞便及嘔吐物進行檢驗。除進行分離培養(yǎng)外，須作活菌計數(shù)，因暴露于空氣中的食物會在一定程度上受本菌污染，故不能因分離出蠟樣芽胞桿菌就認為是食物中毒的病原菌。根據(jù)形態(tài)、染色性、菌落特征及生化型、血清型和噬菌體分型作鑒定。本菌對紅霉素、氯霉素和慶大霉素敏感，對青霉素、磺胺類耐藥。第四節(jié)弗朗西絲菌屬弗朗西絲菌屬(Francisella)是一類呈多形性的革蘭陰性小桿菌，本屬有土拉弗氏菌和新兇手弗氏菌兩個種。其中土拉弗氏菌(F.tularesis)為土拉熱的病原體，有兩個主要的生物型。本菌引起一些野生動物的感染，特別常見于野兔中，故俗稱野兔熱桿菌，人類常因接觸野生動物或病畜引起土拉熱。土拉弗氏菌生物學特性球桿狀小桿菌，大小為0.20.3X0.30.7m。經(jīng)人工培養(yǎng)后呈顯著多形態(tài)性。無芽胞、無動力，在動物組織內(nèi)有莢