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1、1現(xiàn)代生物科技專題復(fù)習(xí)2工具工具基因工程基因工程操操作作程程序序應(yīng)用應(yīng)用限制酶:來(lái)源、特點(diǎn)、作用限制酶:來(lái)源、特點(diǎn)、作用DNA連接酶:種類、作用連接酶:種類、作用載體:作用、必需具備的條件、種類載體:作用、必需具備的條件、種類獲取目的基因獲取目的基因:3種方法;種方法;PCR原理、前提、條件、過(guò)程,原理、前提、條件、過(guò)程,結(jié)果結(jié)果構(gòu)建基因表達(dá)載體:構(gòu)建基因表達(dá)載體:作用;組成及各組分的作用;作用;組成及各組分的作用;導(dǎo)入受體細(xì)胞:導(dǎo)入受體細(xì)胞:植物、動(dòng)物、微生物植物、動(dòng)物、微生物目的基因的檢測(cè)和鑒定:目的基因的檢測(cè)和鑒定:分子水平(存在;轉(zhuǎn)錄;分子水平(存在;轉(zhuǎn)錄;翻譯);個(gè)體水平翻譯);個(gè)體
2、水平動(dòng)物動(dòng)物植物植物醫(yī)療衛(wèi)生:醫(yī)療衛(wèi)生:乳腺生物反應(yīng)器、基因治療乳腺生物反應(yīng)器、基因治療3植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程細(xì)細(xì)胞胞工工程程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞核移植技術(shù)體細(xì)胞核移植技術(shù)與克隆動(dòng)物與克隆動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體單克隆抗體過(guò)程過(guò)程條件條件應(yīng)用應(yīng)用概念概念過(guò)程過(guò)程應(yīng)用前景應(yīng)用前景概念概念過(guò)程過(guò)程應(yīng)用應(yīng)用植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)原理、過(guò)程、條件原理、過(guò)程、條件過(guò)程、概念優(yōu)勢(shì)過(guò)程、概念優(yōu)勢(shì)4胚胎工程胚胎工程體內(nèi)受精體內(nèi)受精和早期胚和早期胚胎發(fā)育胎發(fā)育精子和卵精子和卵子的發(fā)生子的發(fā)生受精受精精子的發(fā)生精子的發(fā)生卵子
3、的發(fā)生卵子的發(fā)生準(zhǔn)備階段準(zhǔn)備階段受精階段受精階段體外受精體外受精和早期胚和早期胚胎培養(yǎng)胎培養(yǎng)試管動(dòng)物技術(shù)試管動(dòng)物技術(shù)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)精子的采集和獲能精子的采集和獲能受精受精體外受精體外受精胚胎移植的現(xiàn)狀和意義胚胎移植的現(xiàn)狀和意義早期胚胎培養(yǎng)早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植胚胎移植胚胎工程胚胎工程的應(yīng)用及的應(yīng)用及前景前景精子的獲能精子的獲能卵子的準(zhǔn)備卵子的準(zhǔn)備早期胚胎發(fā)育早期胚胎發(fā)育胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)胚胎移植的基本程序胚胎移植的基本程序胚胎分割胚胎分割胚胎干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞51、原理:細(xì)胞的全能性、原理:細(xì)胞的全能性2、過(guò)程:、過(guò)程:離體的植物器官離體的植物器官組
4、織或細(xì)胞組織或細(xì)胞愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體試管苗試管苗脫分化脫分化再分化再分化植株植株無(wú)菌條件無(wú)菌條件植物組織培養(yǎng)條件植物組織培養(yǎng)條件: 離體、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、植物激素、一定離體、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、植物激素、一定的溫度、適合的的溫度、適合的PHPH、適時(shí)光照、無(wú)菌環(huán)、適時(shí)光照、無(wú)菌環(huán)境。境。植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)6雜雜種種植植株株融合的融合的原生質(zhì)原生質(zhì)體體AB再再生生出出細(xì)細(xì)胞胞壁壁脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化1、過(guò)程、過(guò)程植物細(xì)胞的融合植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞植物細(xì)胞A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A雜種雜種細(xì)胞細(xì)胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導(dǎo)導(dǎo)植物
5、細(xì)胞植物細(xì)胞B植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)72、概念、概念 將不同種的植物體細(xì)胞,在一定條件下融合成將不同種的植物體細(xì)胞,在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。3、優(yōu)勢(shì)和未解決的問(wèn)題、優(yōu)勢(shì)和未解決的問(wèn)題 優(yōu)勢(shì)優(yōu)勢(shì)(與有性雜交方法比較與有性雜交方法比較) :打破了不同種生打破了不同種生物間的生殖隔離限制,大大擴(kuò)展了可用于雜交的物間的生殖隔離限制,大大擴(kuò)展了可用于雜交的親本組合范圍。親本組合范圍。未解決的問(wèn)題未解決的問(wèn)題:未能讓雜種植物按照人們未能讓雜種植物按照人們 的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。植物體
6、細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)8(一)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)(一)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng) 幼齡動(dòng)物幼齡動(dòng)物取動(dòng)物器官取動(dòng)物器官和組織和組織剪碎組織剪碎組織胰蛋白酶處理胰蛋白酶處理細(xì)胞培細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù):是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ) 原理:原理:細(xì)胞增殖(有絲分裂)細(xì)胞增殖(有絲分裂)93、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程:、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程:動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官物的組織、器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代細(xì)胞代細(xì)胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)50代細(xì)胞代細(xì)胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞株無(wú)限傳代無(wú)限傳代細(xì)胞系細(xì)胞系單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞
7、加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變未改變遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)已改變已改變(分解細(xì)胞)(分解細(xì)胞)102 2、培養(yǎng)條件:、培養(yǎng)條件:無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境、無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境、充足營(yíng)養(yǎng)、充足營(yíng)養(yǎng)、適宜溫度、適宜溫度、PHPH氣體環(huán)境;氣體環(huán)境;3、 應(yīng)用應(yīng)用(1)生產(chǎn)有價(jià)值的蛋白質(zhì)制品,(如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體、動(dòng)物激素)(2)檢測(cè)有毒物質(zhì)(3)用于生理、病理、藥理等方面的研究(一)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(一)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)11(二)細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(二)細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的胚胎
8、,的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體(克隆動(dòng)物克隆動(dòng)物)分分類類胚胎細(xì)胞核移植:胚胎細(xì)胞核移植:體細(xì)胞核移植:體細(xì)胞核移植:細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性容易細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性容易 細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性不容易細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性不容易1 、動(dòng)物細(xì)胞核移植概念:、動(dòng)物細(xì)胞核移植概念:12131、在畜牧業(yè)中可以加速家畜在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程遺傳改良的進(jìn)程2、保護(hù)瀕危物種保護(hù)瀕危物種3、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官的移植白質(zhì)及組織器官的移植4、了解胚胎發(fā)育和衰老過(guò)程;了
9、解胚胎發(fā)育和衰老過(guò)程;追蹤研究疾病的發(fā)展過(guò)程和治追蹤研究疾病的發(fā)展過(guò)程和治療疾病療疾病3、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景(二)細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(二)細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物14(三)動(dòng)物細(xì)胞融合(三)動(dòng)物細(xì)胞融合1、概念、概念:指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程的過(guò)程。2、過(guò)程:、過(guò)程:動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo),融合雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞有絲分裂(膜融合、質(zhì)融合)(核融合)注意:動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起,讓注意:動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起,讓它們隨機(jī)融合后,再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞它們隨機(jī)融合后,
10、再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞3、應(yīng)用、應(yīng)用:成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。和生物新品種培育等的重要手段。 特別是利用雜特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體交瘤技術(shù)制造單克隆抗體151、原理、原理:雜交瘤細(xì)胞雙親的遺傳特性,即能迅速大量雜交瘤細(xì)胞雙親的遺傳特性,即能迅速大量繁殖,又能分泌專一抗體。繁殖,又能分泌專一抗體。2、過(guò)程、過(guò)程B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合B-B細(xì)胞細(xì)胞B-瘤細(xì)胞瘤細(xì)胞瘤瘤-瘤細(xì)胞瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞( B-瘤細(xì)胞瘤細(xì)胞)克隆化培養(yǎng)專一抗體檢測(cè)雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增
11、殖小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體單克隆抗體(四)單克隆抗體(四)單克隆抗體單克隆抗體的單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備:特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備163.應(yīng)用:應(yīng)用: 作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì),并與作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì),并與特異性結(jié)合特異性結(jié)合 優(yōu)點(diǎn):優(yōu)點(diǎn):準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速用于用于運(yùn)載藥物:制成運(yùn)載藥物:制成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療治療疾病:主要用于癌癥治療(四)單克隆抗體(四)單克隆抗體171 1下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。(1)(1) 技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)
12、的基礎(chǔ)。技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。(2)(2)根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類,圖中根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類,圖中HATHAT培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(3)(3)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是是 。(4)(4)動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用誘導(dǎo)劑外,還可以采動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用誘導(dǎo)劑外,還可以采用用 。(5)(5)選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的 特點(diǎn),又具備淋特點(diǎn),又具備淋巴細(xì)胞的巴細(xì)胞的 特點(diǎn)。特點(diǎn)。(6)(6)淋巴細(xì)胞是由動(dòng)物體淋巴細(xì)胞是由動(dòng)物體 中的中的
13、 細(xì)胞分化、發(fā)育而來(lái)。細(xì)胞分化、發(fā)育而來(lái)。(7)(7)雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)選擇選擇 特異性強(qiáng),靈敏度高特異性強(qiáng),靈敏度高 滅活的病毒滅活的病毒 在體外大量增殖在體外大量增殖 分泌特異性抗體分泌特異性抗體骨髓骨髓 造血干細(xì)胞造血干細(xì)胞 主動(dòng)運(yùn)輸主動(dòng)運(yùn)輸 182. 2.回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問(wèn)題。回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問(wèn)題。(1 1)用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為)用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為_。(2 2)組織培養(yǎng)中的細(xì)胞,從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過(guò)程稱)組織培養(yǎng)中的細(xì)胞,從分
14、化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過(guò)程稱為為_。(3 3)生產(chǎn)上用試管苗保留植物的優(yōu)良性狀,其原因是)生產(chǎn)上用試管苗保留植物的優(yōu)良性狀,其原因是_ _ _。(4 4)培養(yǎng)過(guò)程中必需的營(yíng)養(yǎng)條件是)培養(yǎng)過(guò)程中必需的營(yíng)養(yǎng)條件是_ _ _,另外還需要另外還需要_ _ 等調(diào)節(jié)類物質(zhì)。等調(diào)節(jié)類物質(zhì)。(5 5)此種方法獲得的胡蘿卜的突出優(yōu)點(diǎn)是)此種方法獲得的胡蘿卜的突出優(yōu)點(diǎn)是_,更,更有利于人體的健康有利于人體的健康 外植體外植體脫分化脫分化 組織培養(yǎng)形成試管苗的過(guò)程屬于無(wú)性生殖,后代不發(fā)生性狀分離。組織培養(yǎng)形成試管苗的過(guò)程屬于無(wú)性生殖,后代不發(fā)生性狀分離。水、無(wú)機(jī)鹽和小分子的有機(jī)物水、無(wú)機(jī)鹽和小分子的有機(jī)物生長(zhǎng)素和
15、細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素植株無(wú)病毒植株無(wú)病毒 19203、上圖是制備分泌抗原、上圖是制備分泌抗原X抗體的過(guò)程,根據(jù)圖解回答問(wèn)題:抗體的過(guò)程,根據(jù)圖解回答問(wèn)題:制備單克隆抗體的步驟:制備單克隆抗體的步驟:將將 注入小鼠體內(nèi),從小鼠脾臟中獲得淋巴細(xì)胞,其注入小鼠體內(nèi),從小鼠脾臟中獲得淋巴細(xì)胞,其中至少中至少1個(gè)淋巴細(xì)胞帶有抗該抗原的抗體。個(gè)淋巴細(xì)胞帶有抗該抗原的抗體。將步驟將步驟獲得的獲得的B淋巴細(xì)胞與步驟淋巴細(xì)胞與步驟培養(yǎng)的骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融培養(yǎng)的骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合。合。將誘導(dǎo)后產(chǎn)生的多種細(xì)胞,放在將誘導(dǎo)后產(chǎn)生的多種細(xì)胞,放在 培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng),篩選。上培養(yǎng),篩選。這
16、樣獲得的雜交瘤細(xì)胞具有這樣獲得的雜交瘤細(xì)胞具有B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 的能力。的能力。檢測(cè)和分離帶有抗檢測(cè)和分離帶有抗X抗體的陽(yáng)性細(xì)抗體的陽(yáng)性細(xì) 胞,培養(yǎng)板中每孔放一個(gè)胞,培養(yǎng)板中每孔放一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。將陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行增殖,從而制備出大量抗該抗原的單克隆抗將陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行增殖,從而制備出大量抗該抗原的單克隆抗體。體。抗原抗原X選擇性選擇性產(chǎn)生專一抗體又能迅速大量繁殖產(chǎn)生專一抗體又能迅速大量繁殖21單克隆抗體是由同樣的抗體分子組成,與一般的單克隆抗體是由同樣的抗體分子組成,與一般的血清抗體相比,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是血清抗體相比,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是 。 用本法制備出的單克隆抗體仍具有局限性,
17、因?yàn)橛帽痉ㄖ苽涑龅膯慰寺】贵w仍具有局限性,因?yàn)樗怯眯∈蟮乃怯眯∈蟮?細(xì)胞制備的,其化學(xué)本質(zhì)細(xì)胞制備的,其化學(xué)本質(zhì)是是 ,對(duì)人類有異物性和免疫原性。,對(duì)人類有異物性和免疫原性。靈敏度高、特異性強(qiáng)靈敏度高、特異性強(qiáng)B淋巴淋巴蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)22植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖 動(dòng)物血清動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果植物體植物體細(xì)胞株、細(xì)胞
18、系細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的快速繁殖、培育快速繁殖、培育無(wú)病毒植株無(wú)病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白分泌蛋白23植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、 細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法 去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法物理(離心、振蕩、物理(離心、振蕩、電刺激)電刺激)化學(xué)(聚乙二醇)化學(xué)(聚乙二醇)物理、化學(xué)方法物
19、理、化學(xué)方法(同左)(同左)滅活的病毒滅活的病毒用途用途獲得雜種植株獲得雜種植株制備單克隆抗體制備單克隆抗體24精原細(xì)胞精原細(xì)胞有絲分裂有絲分裂初級(jí)精母細(xì)胞初級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞精子細(xì)胞精子細(xì)胞精子精子M第一階段第一階段第二階段第二階段第三階段第三階段M精精子子發(fā)發(fā)生生的的過(guò)過(guò)程程多個(gè)精原細(xì)胞多個(gè)精原細(xì)胞染色體復(fù)制染色體復(fù)制變形變形25卵原細(xì)胞卵原細(xì)胞有絲分裂有絲分裂多個(gè)卵原細(xì)胞多個(gè)卵原細(xì)胞染色體復(fù)制染色體復(fù)制初級(jí)卵母細(xì)胞初級(jí)卵母細(xì)胞M第一極體第一極體次級(jí)卵母細(xì)胞次級(jí)卵母細(xì)胞兩個(gè)第二極體兩個(gè)第二極體第二極體第二極體卵子卵子退化消失退化消失卵子發(fā)生過(guò)程卵子發(fā)生過(guò)程M排卵前后排卵前后
20、完成完成在受精在受精過(guò)程完過(guò)程完成成被卵泡細(xì)胞包圍被卵泡細(xì)胞包圍, ,形成卵泡形成卵泡胎兒時(shí)期完成胎兒時(shí)期完成261)1)精子獲能精子獲能: : 精子必須在雌性動(dòng)物的生殖道發(fā)生相應(yīng)的生精子必須在雌性動(dòng)物的生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后理變化后, ,才獲得受精能力的生理現(xiàn)象才獲得受精能力的生理現(xiàn)象. .2)2)卵子的準(zhǔn)備卵子的準(zhǔn)備: : 在輸卵管中發(fā)育到減數(shù)第二次分裂的中期在輸卵管中發(fā)育到減數(shù)第二次分裂的中期, ,才才具有與精子受精的能力具有與精子受精的能力受精前的準(zhǔn)備階段受精前的準(zhǔn)備階段271)1)頂體反應(yīng)頂體反應(yīng) 頂體內(nèi)的酶釋放出來(lái)并溶解放射冠內(nèi)的卵丘細(xì)胞。頂體內(nèi)的酶釋放出來(lái)并溶解放射冠內(nèi)的卵丘
21、細(xì)胞。2)2)透明帶反應(yīng)透明帶反應(yīng) 透明帶反應(yīng)是防止多精入卵受精的第一道屏障透明帶反應(yīng)是防止多精入卵受精的第一道屏障2)2)卵黃膜封閉作用卵黃膜封閉作用 卵黃膜封閉作用是防止多精入卵受精的第二道屏卵黃膜封閉作用是防止多精入卵受精的第二道屏障障3)3)雌、雄原核形成雌、雄原核形成 雄原核形成和雌原核形成雄原核形成和雌原核形成4)4)原核融合形成合子原核融合形成合子 雌雄原核融合形成合子雌雄原核融合形成合子( (受精卵受精卵) )受精過(guò)程受精過(guò)程28試管動(dòng)物試管動(dòng)物供體公牛精子供體公牛精子供體母牛的卵子供體母牛的卵子精子體外獲能精子體外獲能卵子的體外培養(yǎng)卵子的體外培養(yǎng)體外受精體外受精體外胚胎培養(yǎng)體
22、外胚胎培養(yǎng)胚胎移植胚胎移植受體母牛子宮受體母牛子宮產(chǎn)仔產(chǎn)仔29體外受精體外受精1.1.卵母細(xì)胞的收集和培養(yǎng)卵母細(xì)胞的收集和培養(yǎng)對(duì)不同動(dòng)物對(duì)不同動(dòng)物, ,采取卵母細(xì)胞的方法不同采取卵母細(xì)胞的方法不同1)1)用促性腺激素處理用促性腺激素處理 2)2)從屠宰的動(dòng)物卵巢中采集從屠宰的動(dòng)物卵巢中采集3)3)活體采卵活體采卵302.2.精子的收集和獲能精子的收集和獲能 1)1)收集的方法收集的方法: :假陰道法假陰道法, ,手握法手握法, ,電刺激電刺激 2)2)獲能處理獲能處理: : 培養(yǎng)法:培養(yǎng)法:嚙齒動(dòng)物、家兔和豬嚙齒動(dòng)物、家兔和豬化學(xué)誘導(dǎo)法化學(xué)誘導(dǎo)法:牛、羊:牛、羊體外受精體外受精313.3.受精
23、受精 體外受精體外受精 獲能的精子和成獲能的精子和成熟的卵子在熟的卵子在獲能溶液獲能溶液或或?qū)S玫氖芫芤簩S玫氖芫芤褐兄型瓿墒芫^(guò)程完成受精過(guò)程32受精卵受精卵卵卵裂裂期期桑椹胚桑椹胚囊胚囊胚原腸胚原腸胚組織器官形成組織器官形成:在透明帶內(nèi)進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷在透明帶內(nèi)進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎總體積并不增加,或略有減少。增加,但胚胎總體積并不增加,或略有減少。:由具有全能性細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞數(shù)在:由具有全能性細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞數(shù)在3232個(gè)左右,個(gè)左右,排列緊密,形似桑椹排列緊密,形似桑椹內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒各組織內(nèi)細(xì)胞團(tuán):發(fā)育成胎兒各組織滋養(yǎng)層細(xì)胞:發(fā)育成胎膜和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞
24、:發(fā)育成胎膜和胎盤 最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂外胚層外胚層中胚層中胚層內(nèi)胚層內(nèi)胚層原腸腔原腸腔胚胎的早期培養(yǎng)胚胎的早期培養(yǎng)33胚胎移植的概胚胎移植的概念念 1.概念概念:將雌性動(dòng)物的早期胚胎將雌性動(dòng)物的早期胚胎,或者通過(guò)其或者通過(guò)其他方式得到的胚胎他方式得到的胚胎,移植到同種的移植到同種的.生理狀生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之發(fā)育為使之發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)新個(gè)體的技術(shù). 供體:提供胚胎的個(gè)體。供體:提供胚胎的個(gè)體。 受體:接受胚胎的個(gè)體。受體:接受胚胎的個(gè)體。34選擇選擇供體母牛供體母牛受體母牛受體母牛同期發(fā)情處理同期發(fā)情處理超數(shù)排
25、卵超數(shù)排卵供體公牛供體公牛配種配種沖卵沖卵質(zhì)量檢查、培養(yǎng)質(zhì)量檢查、培養(yǎng)胚胎移植胚胎移植妊娠檢查妊娠檢查分娩(胚胎移植的犢牛)分娩(胚胎移植的犢牛)胚胎移植的基本胚胎移植的基本程序程序35胚胎分割胚胎分割1. 1.概念概念: :采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2 2等份等份,4 ,4等份或等份或8 8等份等等份等, ,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)技術(shù). .2. 2.特點(diǎn)特點(diǎn): :后代具有相同的遺傳物質(zhì)后代具有相同的遺傳物質(zhì). .克隆克隆. .3. 3.選擇的胚胎選擇的胚胎: :發(fā)育良好的發(fā)育良好的, ,形態(tài)正常的桑椹胚或形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚囊胚. .4. 4.使用的主要儀器:實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀使用的主要儀器:實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀36胚胎干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞1.1.概念概念: :簡(jiǎn)稱簡(jiǎn)稱ESES
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