實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十 、細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)(二)

1、LOGOLOGOCompany name 實(shí)驗(yàn)十實(shí)驗(yàn)十 細(xì)菌的生理生化反應(yīng)細(xì)菌的生理生化反應(yīng)www.themegallery.coCompany Logo一、目的一、目的1 1、了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細(xì)菌鑒定中的重、了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細(xì)菌鑒定中的重要作用；要作用；2 2、了解吲哚、甲基紅、伏、了解吲哚、甲基紅、伏- -普反應(yīng)的原理及其普反應(yīng)的原理及其在腸道菌鑒定中的意義和方法。在腸道菌鑒定中的意義和方法。www.themegallery.coCompany Logo二、基本原理二、基本原理 糖分解試驗(yàn)是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng)，在腸糖分解試驗(yàn)是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng)，在腸道細(xì)菌的

2、鑒定上尤為重要。道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。 絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們?cè)诜纸馓穷愇镔|(zhì)的能力上有很大的差異。它們?cè)诜纸馓穷愇镔|(zhì)的能力上有很大的差異。 發(fā)酵培養(yǎng)基含有蛋白胨，指示劑，倒置的德漢氏小發(fā)酵培養(yǎng)基含有蛋白胨，指示劑，倒置的德漢氏小管和不同的糖類。管和不同的糖類。 www.themegallery.coCompany Logo 當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí)，溴甲酚紫指示劑可由紫色（當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí)，溴甲酚紫指示劑可由紫色（pH6.8pH6.8）變?yōu)辄S色（變?yōu)辄S色（pH5.2pH5.2）。）。 氣體的產(chǎn)生可由倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明氣體的產(chǎn)

3、生可由倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。 吲哚、甲基紅、伏吲哚、甲基紅、伏- -普這三個(gè)試驗(yàn)主要是用來快速鑒別普這三個(gè)試驗(yàn)主要是用來快速鑒別大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌，多用于水的細(xì)菌學(xué)檢查。大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌，多用于水的細(xì)菌學(xué)檢查。 大腸桿菌雖非致病菌，但在飲用水中若超過一定數(shù)量，大腸桿菌雖非致病菌，但在飲用水中若超過一定數(shù)量，則表示受糞便污染。則表示受糞便污染。 產(chǎn)氣桿菌也廣泛存在于自然界中，因此檢查水時(shí)要將產(chǎn)氣桿菌也廣泛存在于自然界中，因此檢查水時(shí)要將兩者分開。兩者分開。www.themegallery.coCompany Logo三、實(shí)驗(yàn)材料三、實(shí)驗(yàn)材料1 1、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、變形桿菌等

4、。、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、變形桿菌等。2 2、培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基，、培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基，PDAPDA液體培養(yǎng)基、葡萄糖液體培養(yǎng)基、葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管、蛋白胨水培養(yǎng)基、葡萄發(fā)酵培養(yǎng)基試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管、蛋白胨水培養(yǎng)基、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基糖蛋白胨水培養(yǎng)基3 3、試劑：呂氏堿性美蘭染色液、中性紅染色液、碘液、甲、試劑：呂氏堿性美蘭染色液、中性紅染色液、碘液、甲 基紅基紅指示劑，指示劑，4040KOHKOH，5 5-萘酚，乙醚，吲哚試劑等。萘酚，乙醚，吲哚試劑等。4 4、儀器或其他用具：、儀器或其他用具： 顯微鏡、酒精燈、載玻片、蓋玻片等。顯微鏡

5、、酒精燈、載玻片、蓋玻片等。www.themegallery.coCompany Logo四、操作步驟四、操作步驟1 1、細(xì)菌的生理生化反應(yīng)：、細(xì)菌的生理生化反應(yīng)： 將供試菌株分別接種在相應(yīng)的培養(yǎng)液中，置適宜的溫箱中將供試菌株分別接種在相應(yīng)的培養(yǎng)液中，置適宜的溫箱中恒溫培養(yǎng)。在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)，選用相應(yīng)的指示劑測(cè)定和觀察恒溫培養(yǎng)。在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)，選用相應(yīng)的指示劑測(cè)定和觀察試驗(yàn)結(jié)果。試驗(yàn)結(jié)果。（1 1）糖發(fā)酵試驗(yàn)）糖發(fā)酵試驗(yàn) 菌株菌株 糖液中糖液中 培養(yǎng)培養(yǎng) 觀察結(jié)果觀察結(jié)果 www.themegallery.coCompany Logo (2) v-p(2) v-p試驗(yàn)（伏試驗(yàn)（伏- -普試驗(yàn)）普

6、試驗(yàn)） 菌株菌株 葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 培養(yǎng)培養(yǎng) 取培養(yǎng)液取培養(yǎng)液2ml+2mlv-p2ml+2mlv-p試劑試劑 混合均勻混合均勻 3737度培養(yǎng)度培養(yǎng)3030分鐘分鐘 觀察結(jié)果觀察結(jié)果 (3)(3)甲基紅試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn) 菌株菌株 葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 培養(yǎng)培養(yǎng) 取培養(yǎng)液取培養(yǎng)液2ml+22ml+2滴甲基紅試劑滴甲基紅試劑 混合均勻混合均勻 觀察結(jié)果觀察結(jié)果 (4)(4)吲哚試驗(yàn)吲哚試驗(yàn) 菌株菌株 蛋白胨水培養(yǎng)基蛋白胨水培養(yǎng)基 培養(yǎng)培養(yǎng) 取乙醚取乙醚2ml2ml加入到加入到培養(yǎng)液培養(yǎng)液 觀察結(jié)果觀察結(jié)果www.themegallery.coCompany Logowww.themegallery.coCompany Logowww.themegallery.coCompany Logo吲哚試驗(yàn)吲哚試驗(yàn)www.themegallery.coCompany Logowww.themegallery.coCompany Logo乙酰甲基甲醇試驗(yàn)（伏乙酰甲基甲醇試驗(yàn)（伏- -普試驗(yàn)）普試驗(yàn)）www.themegallery.coCompany Logowww.themegallery.coCompany Logo五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告 1 1、列表說明各供試菌對(duì)糖類的分解利用情、列表說明各供試菌對(duì)