常見病原微生物的檢測ppt課件

1、編輯版ppt1常見病原微生物的檢測編輯版ppt2第一節(jié) 禽流感病毒n禽流感禽流感是禽流行性感冒（AvianInfluenza，AI）的簡稱，這是一種由甲型流感病毒的一種亞型引起的傳染性疾病綜合征，被國際獸疫局定為類傳染病，又稱真性雞瘟或歐洲雞瘟。 編輯版ppt3n一、生物學特性 n1、形態(tài)學特點n禽流感病毒是正粘病毒，流感病毒屬的一個成員。n禽流感病毒具有A型抗原,屬于A型流感病毒,列為禽流感病毒類。本病毒顆粒呈球形、桿狀或長絲狀,為多形性。其直徑為80120nm,表面有一層棒狀和蘑菇狀的纖突，有囊膜,囊膜下面有一層膜蛋白,緊緊地包裹著呈螺旋狀對稱的核衣殼。編輯版ppt4n2、禽流感病毒的分型

2、n流感病毒分為三個不同的抗原型,即A、B、C三型。其中B、C兩型僅能對人致病,A型可對人、豬、馬和禽致病。n依據(jù)病毒表面的兩種糖蛋白血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA可將A型流感病毒分成若干亞型。目前已有15種HA和9種NA。 編輯版ppt5n 3、抵抗力n對熱的抵抗力較低，6010分鐘，702分鐘即可致弱，普通消毒劑能很快將它殺死。n低溫凍干或甘油保存可使病毒存活多年。編輯版ppt6n4、流行病學n禽流感在家禽中以雞和火雞及某些野禽的易感性最高，并呈急性致死性傳染病。n鴨、鵝及其它水禽類的易感性較差，多為隱性感染或帶毒，有時也能大批死亡。鴿子可帶毒，但很少自然發(fā)病。編輯版ppt7n5、臨床癥狀和病理

3、變化n禽流感的癥狀極為復雜.根據(jù)禽類的種類雞、火雞、鴨、鵝及野鳥等以及病毒的亞型類別的不同，表現(xiàn)各種各樣的變化：有最急性、急性、亞急性及隱性感染等。n潛伏期一般較短，通常為45天，體溫急劇上升至43.344.4.c，精神沉郁、拒食、病雞很快陷于昏睡狀態(tài)，有些頸部出現(xiàn)向后扭轉(zhuǎn)的神經(jīng)癥狀。病雞多呈急性死亡，有的也可能出現(xiàn)呼吸道癥狀，咳嗽、打噴嚏，氣管出現(xiàn)咯音，流淚等癥狀，羽毛蓬松，產(chǎn)蛋率下降，死亡率高低不等。編輯版ppt8n二、診斷 1、病原的分離n病原的分離和鑒定可以從活體或尸體分離病毒。n用棉拭子法常可從活體的氣管和泄殖腔中分離到病毒，可用不同大小的棉拭子擦取氣管或泄殖腔，然后將拭子放入滅菌的

4、保存液2550%甘油鹽水、肉湯或1000u/ml青霉素和10mg/mL鏈霉素的細胞維持液中。n病料的采取時間很重要,一般在感染初期或發(fā)病急性期采取。如轉(zhuǎn)為后期則因機體已形成足夠的抗體而不易分離到病毒.編輯版ppt9n2、病毒分離n通常用雞胚來進行。n接種910日齡雞胚尿囊腔，繼續(xù)孵育4872h。n如材料中含有病毒時，則接種48h雞胚死亡，但在多數(shù)情況下初代分離時雞胚多不死，為此需將經(jīng)72h未死的雞胚置冰箱內(nèi)凍死后，收集尿囊液作第二代接種。如第二代接種的雞胚仍不死亡，即可判定分離病毒為陰性。編輯版ppt10三、介紹高致病性禽流感的其他知識n鑒定高致病性禽流感的標準: 最近國際上評價禽流感病毒致病

5、力的經(jīng)典方法是接種易感雞。按照國際標準，能引起接種雞死亡75以上的分離株，是高致病性毒株。盡管接種雞是確定致病的“黃金標準”，但它不能反應(yīng)致死率小于75%的H5或H7亞型病毒的潛在致病力。因此0IE(國際獸疫局根據(jù)科學家的建議,推出新鑒定標準。 1 任何分離到A型流感病毒，用0.2mL1:10稀釋的無菌尿囊液靜脈或肌肉注射8只48周齡易感雞,10天內(nèi)的死亡率不低于75%。 2.對所有低致病的H5、H7毒株,血凝素切割位點的氨基酸序列與高致病性禽流感病毒一致。 3.H5、H7以外的A型流感病毒,可以致死15只雞,在缺乏胰蛋白酶的情況下,能在細胞上生長形成蝕斑。編輯版ppt11禽流感的傳播途徑是什

6、么？n禽流感的傳播有病禽和健康禽直接接觸和病毒污染物間接接觸兩種。n禽流感病毒存在于病禽和感染禽的消化道、呼吸道和禽體臟器組織中。因此病毒可隨眼、鼻、口腔分泌物及糞便排出體外，含禽病毒的分泌物、糞便、死禽尸體污染的任何物體，如飼料、飲水、雞舍、空氣、籠具、飼養(yǎng)管理用具，運輸車輛、昆蟲以及各種攜帶病毒的鳥類等均可機械性傳播。健康禽通過呼吸道和消化道感染，引起發(fā)病。編輯版ppt12如何防范禽流感如何防范禽流感 n禽流感被國際獸疫局定為類傳染病，且變異后的病毒能威脅人類健康，但各國專家們說，及時、適當?shù)念A防措施可以使人類避免感染。 n 1、避免直接接觸病禽及其排泄物、分泌物等能有效防止感染病毒。 n

7、 2、飼養(yǎng)員、屠宰工人等經(jīng)常與活禽密切接觸的人，必須做好保護工作，包括穿防護服、佩戴防護用具、及時接種流感疫苗、工作前后徹底消毒等。 n3、注重自身健康、保持良好的免疫力也是避免感染禽流感病毒的有效措施。n4、不要去疫區(qū)旅游。n5、食用烹熟的家禽肉、蛋不會傳染禽流感。 編輯版ppt13禽流感與其他流感有什么關(guān)系？禽流感與其他流感有什么關(guān)系？n除禽流感以外，常見的流感還有人流感、馬流感和豬流感等。禽流感與人流感和人類健康的關(guān)系非常密切。由于豬與人的種間差異較小，禽流感病毒可以在中間宿主(豬)體內(nèi)與人流感病毒雜交，并產(chǎn)生能感染人的新的流感病毒。編輯版ppt14禽流感病毒為何消滅不了？禽流感病毒為何

8、消滅不了？n流感病毒為了生存而不斷發(fā)生變異，以逃脫動物產(chǎn)生的特異性抵抗力。人們?yōu)榱祟A防禽流感也研制出了各種疫苗。但機體在產(chǎn)生特異性抗體后，病毒為逃脫機體的撲殺而不斷地發(fā)生著變異，這樣原有的抗體即失去作用，病毒就可使動物重新發(fā)病。因此就目前的防疫技術(shù)和手段而言，禽流感病毒是消滅不了的。編輯版ppt15第二節(jié) 瘋牛病病毒編輯版ppt16一、 認識瘋牛病認識瘋牛病n牛海綿狀腦?。˙ovine spongiform encephalopathy, BSE），又稱瘋牛病，是一種侵犯牛中樞神經(jīng)系統(tǒng)的慢性的致命性疾病，由一種非常規(guī)的病毒朊病毒（Prion）引起的一種亞急性海綿狀腦病，這類病還包括綿羊的搔癢病

9、、人的克-雅氏?。–reutzfeldt-Jakob Syndrome , CJD） （又稱早老癡呆癥） 、庫魯病以及最近發(fā)現(xiàn)的致死性家庭性失眠癥等等。n 共同特征是：生物體的認知和運動功能嚴重衰退直至死亡。其中人的克-雅氏病是一種罕見的主要發(fā)生在50-70歲的可傳播的腦病，產(chǎn)生的危害極大。 編輯版ppt17二、認識朊病毒認識朊病毒n朊病毒是一類非正常的病毒，它不含有通常病毒所含有的核酸，而是一種不含核酸僅有蛋白質(zhì)的蛋白感染因子。 編輯版ppt18n對蛋白酶具有抗性，易溶于去污劑、有致病力和不誘發(fā)抗體等特性 ；n朊病毒顆粒耐高溫，即使加熱到360仍有感染力，植物油的沸點（160一170）也不足

10、以滅活，耐甲醛、強堿；朊病毒顆粒對一些理化因素的抵抗力之強，大大高于已知的各類微生物和寄生蟲，其傳染性強、危害性大的特性極不利于人類和動物的健康。n法國專家發(fā)現(xiàn)，導致瘋牛病等疾病的朊病毒從一類動物傳染給另一類動物后，即這種病毒跨物種傳播后，其毒性更強，潛伏期更短。編輯版ppt19n三、癥狀癥狀臨床表現(xiàn)為腦組織的海綿體化、空泡化，星形膠質(zhì)細胞和微小膠質(zhì)細胞的形成以及致病型蛋白積累，無免疫反應(yīng)。病原體通過血液進入人的大腦，將人的腦組織變成海綿狀，如同糨糊，完全失去功能。受感染的人會出現(xiàn)睡眠紊亂、失語癥、肌肉萎縮和進行性癡呆等癥狀，并且會在發(fā)病的一年內(nèi)死亡。該病有常染色體家族遺傳傾向，并且有一個新的

11、克雅氏病的報道（該病與牛海綿狀腦病有潛在的聯(lián)系）。此病的病理學特征包括以小腦和大腦皮層為主的海綿樣變性和朊病毒的出現(xiàn)。編輯版ppt20n四、瘋牛病的傳染與防治瘋牛病的傳染與防治牛的感染過程通常是：被瘋牛病病原體感染的肉和骨髓制成的飼料被牛食用后，經(jīng)胃腸消化吸收，經(jīng)過血液到大腦，破壞大腦，使失去功能呈海綿狀，導致瘋牛病。編輯版ppt21n人類感染通常是因為下面幾個因素：1、食用感染了瘋牛病的牛肉及其制品也會導致感染，特別是從脊椎剔下的肉（一般德國牛肉香腸都是用這種肉制成）；2、某些化妝品除了使用植物原料之外，也有使用動物原料的成分，所以化妝品也有可能含有瘋牛病病毒（化妝品所使用的牛羊器官或組織成

12、分有：胎盤素、羊水、膠原蛋白、腦糖）；3、而有一些科學家認為“瘋牛病”在人類變異成“克-雅氏病”的病因，不是因為吃了感染瘋牛病的牛肉，而是環(huán)境污染直接造成的。認為環(huán)境中超標的金屬錳含量可能是“瘋牛病”和“克-雅氏病”的病因。編輯版ppt22第三節(jié) 布魯氏桿菌n一、生物學性狀n1、形態(tài)染色n本菌屬初次分離培養(yǎng)時多呈小球桿狀，毒力菌株有莢膜，經(jīng)傳代培養(yǎng)漸呈桿狀，革蘭氏染色陰性。編輯版ppt23n2、培養(yǎng)特性n本菌為嚴格需氧菌。n牛布氏桿菌在初次分離時，需在510%CO2環(huán)境中才能生長，最適溫度37，最適的pH6.67.1,營養(yǎng)要求高，生長時需硫胺素，煙草酸和生物素，泛酸鈣等，實驗室常用肝浸液培養(yǎng)基

13、或改良厚氏培養(yǎng)基。n此菌生緩慢，培養(yǎng)48小時后才出現(xiàn)透明的小菌落，雞胚培養(yǎng)也能生長。n編輯版ppt24n3、抵抗力n在自然界中抵抗力較強，在病畜的臟器和分泌物中，一般能存活4個月左右，在食品中約能生存2個月。對低溫的抵抗力也強，對熱和消毒劑抵抗力弱。對鏈霉素、氯霉素和四環(huán)素等均敏感。n編輯版ppt25n二、致病性和免疫性n本菌侵入人體后，被吞噬細胞吞噬，由于本菌具有莢膜，能抵抗吞噬細胞的吞噬消毀，并能在該細胞內(nèi)增殖。反復出現(xiàn)菌血癥。由于內(nèi)毒素的作用，病人出現(xiàn)發(fā)熱、無力等中毒癥狀，血流中細菌逐步消失，體溫也逐漸消退。細菌在細胞內(nèi)繁殖至一定程度時，再次進入血流又出現(xiàn)菌血癥，體溫再次上升，反復呈波浪

14、波浪熱型熱型。n本菌多為細胞內(nèi)寄生，治療難于徹底，易轉(zhuǎn)為慢性及反復發(fā)作，在全身各處引起遷徒性病變。編輯版ppt26三、主要癥狀n人感染布氏桿菌較家畜嚴重，病情復雜，表現(xiàn)乏力，全身軟弱，食欲不振，失眠，咳嗽，有白色痰，可聽到肺部干鳴，多呈波浪熱，也有稽留熱、不規(guī)則熱或不發(fā)熱。盜汗或大汗，一個或多個關(guān)節(jié)發(fā)生無紅腫熱的疼痛，肌肉酸痛，應(yīng)用一般鎮(zhèn)痛藥不能緩解，由于關(guān)節(jié)和肌肉疼痛難忍，即使不發(fā)燒也不能勞動，成為能吃不能活懶漢，故該病又被稱作懶漢病。病灶發(fā)生在生殖器官，影響生育，嚴重者可引起死亡。n家畜患病沒有治療價值。應(yīng)全部淘汰，消滅傳染源。 編輯版ppt27四、微生物學檢驗n本菌傳染性大，要注意防止實

15、驗室污染。n（一）分離培養(yǎng)n急性期采集血液，慢性期采取骨髓，接種于雙相肝浸液培養(yǎng)基（一半斜面，一半液體）置37n10%CO2環(huán)境中培養(yǎng)，每隔2天檢查一次，如無細菌生長則搖蕩培養(yǎng)基，使液體浸過斜面上，有細菌生長，可依鑒定項目確定是否為布氏桿菌。經(jīng)一月培養(yǎng)無細菌生長，可報告陰性。n編輯版ppt28n（二）血清學檢查n通常作凝集試驗，判定凝集效價1：50可疑，1：100以上為陽性。效價增高4倍以上時，更有診斷價值。編輯版ppt29第四節(jié)炭疽桿菌n炭疽桿菌（Bacillus anthraci）屬于需氧芽胞桿菌屬，能引起羊、牛、馬等動物及人類的炭疽病。炭疽桿菌曾被帝國主義作為致死戰(zhàn)劑之一。平時，牧民、農(nóng)

16、民、皮毛和屠宰工作者易受感染。皮膚炭疽在我國各地還有散在發(fā)生，不能放松警惕。編輯版ppt30n一、生物學性狀n（一）形態(tài)染色n炭疽桿菌菌體粗大。排列似竹節(jié)狀，無鞭毛，無動力，革蘭氏染色陽性，本菌在氧氣充足，溫度適宜（2530）的條件下易形成芽胞。n在活體或未經(jīng)解剖的尸體內(nèi)，則不能形成芽胞。芽胞呈橢圓形，位于菌體中央，其寬度小于菌體的寬度。形成莢膜是毒性特征。n炭疽桿菌受低濃度青霉素作用，菌體可腫大形成園珠，稱為“串珠反應(yīng)”。這也是炭疽桿菌特有的反應(yīng)。編輯版ppt31n（二）培養(yǎng)特性n1、本菌專性需氧，在普通培養(yǎng)基中易繁殖。n2、最適溫度為37，最適pH為7.27.4n3、在瓊脂平板培養(yǎng)24小時

17、,粗糙菌落。菌落呈毛玻璃狀，邊緣不整齊，呈卷發(fā)狀，有一個或數(shù)個小尾突起，這是本菌向外伸延繁殖所致n4、在510%綿羊血液瓊脂平板上，菌落周圍無明顯的溶血環(huán)，但培養(yǎng)較久后可出現(xiàn)輕度溶血。菌落有粘性，用接種針鉤取可拉成絲，稱為“拉絲”現(xiàn)象。n5、在普通肉湯培養(yǎng)1824小時，管底有絮狀沉淀生長，無菌膜，菌液清亮。有毒株在碳酸氫鈉平板，20%CO2培養(yǎng)下，形成粘液狀菌落（有莢膜），而無毒株則為粗糙狀。編輯版ppt32n（三）抵抗力n繁殖體抵抗力不強，易被一般消毒劑殺滅，而芽胞抵抗力強，在干燥的室溫環(huán)境中可存活數(shù)十年，在皮毛中可存活數(shù)年。牧場一旦被污染，芽胞可存活數(shù)年至數(shù)十年。煮沸10分鐘或干熱1403

18、小時可將芽胞殺死。炭疽芽胞對碘特別敏感，對青霉素、先鋒霉素、鏈霉素、卡那霉素等高度敏感。編輯版ppt33二、致病性與免疫性n（一）致病性n人類主要通過工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)而感染。機體抵抗力降低時，接觸污染物品可發(fā)生下列疾?。簄1皮膚炭疽 最常見，多發(fā)生于屠宰、制革或毛刷工人及飼養(yǎng)員。本菌由體表破損處進入體內(nèi)，開始在入侵處形成水癤、水皰、膿皰、中央部呈黑色壞死，周圍有浸潤水腫、如不及時治療，細菌可進一步侵入局部淋巴結(jié)或侵入血流，引起敗血癥死亡。n2縱隔障炭疽 少見，由吸入病菌芽胞所致，多發(fā)生于皮毛工人，病死率高。病初似感冒，進而出現(xiàn)嚴重的支氣管肺炎，可在23天內(nèi)死于中毒性休克。n3腸炭疽 由食入病獸肉制品所致，以全身中毒癥狀為主，并有胃腸道潰瘍、出血及毒血癥，發(fā)病后23日內(nèi)死亡。n上述疾病若引起敗血癥時，可繼發(fā)“炭疽性腦膜炎”。炭疽桿菌的致病性取決于莢膜和毒素的協(xié)同作用。編輯版ppt34n（二）免疫性n注射炭疽外毒素中保護性抗原于機體，能形成抗毒素免疫，對受染咴疽有保護作用。但單純的莢膜抗體對機體沒有保護作用。病后可獲較強的免疫力。編輯版ppt35三、微生物學檢查n采集皮膚炭疽的膿液、滲出物，吸入性炭疽的咯痰，腸炭