
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
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1、實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 食品中抗壞血酸含量測(cè)定食品中抗壞血酸含量測(cè)定 n食物中抗壞血酸有還原型和脫氫型兩種形式,兩者可通過氧化還原互變,均具有生物活性,合稱為總抗壞血酸。n通??箟难嵩谒嵝詶l件下以還原型存在,易氧化成脫氫型抗壞血酸。目的:目的: 新鮮食物中的抗壞血酸主要以還原型形式存在,測(cè)定還原型抗壞血酸可粗略了解該食品中抗壞血酸的濃度。 通過本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),使學(xué)生掌握還原型抗壞血酸的測(cè)定原理及其測(cè)定方法。一、還原型抗壞血酸的測(cè)定一、還原型抗壞血酸的測(cè)定 (2,6-二氯酚靛酚滴定法)二氯酚靛酚滴定法)實(shí)驗(yàn)原理 n用標(biāo)準(zhǔn)碘酸鉀溶液標(biāo)定抗壞血酸溶液;n用已標(biāo)定的抗壞血酸溶液標(biāo)定2,6-二氯酚靛酚染料,再用此
2、染料滴定樣品中的抗壞血酸。3C6H6O6+KIO3C6H4O6+KI+3H2O H0-C=C-OH具有強(qiáng)還原性,極容易被氧化,能把+5價(jià)的碘還原成-1價(jià)的碘離子 用標(biāo)準(zhǔn)碘酸鉀溶液標(biāo)定抗壞血酸溶液IO3-+5I-+6H+=3I2+3H2OCCCCCH2OHOHOHHOHOCOH+CCCCCH2OHOOHOHOCOHNOHClClHOH+ONOHClCl2 2,6-二氯酚靛酚6-二氯酚靛酚2 2,6-二氯二對(duì)酚胺6-二氯二對(duì)酚胺還原型維生素C還原型維生素C氧化脫氫維生素C氧化脫氫維生素C滴定樣品標(biāo)定溶液【實(shí)驗(yàn)儀器與試劑】n1.儀器:組織搗碎機(jī)、5.0ml微量滴定管、100m1容量瓶、50m1具塞量
3、筒。n2.試劑n(1) 1%草酸溶液、2%草酸溶液、白陶土。n(2) 0.01mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:n(3) 0.0001mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液: n(4) 1%淀粉溶液:n(5) 6%碘化鉀溶液: n(6) 抗壞血酸溶液:n(7) 碳酸氫鈉溶液: n(8) 2,6-二氯酚靛酚溶液:【操作步驟】n(1) 標(biāo)定抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液:吸取抗壞血酸溶液(20g/m1)5.0m1于錐形瓶中,加入6%碘化鉀溶液0.5m1,1%淀粉溶液3滴,再以0.000lmol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,終點(diǎn)為藍(lán)色。210528. 0)ml/mg(VV 抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度 V1滴定時(shí)所消耗0.001mol/L碘酸鉀
4、溶液的體積(ml)V2所取抗壞血酸溶液的體積(ml)0.05280.0001mol/L的碘酸鉀1.0ml相當(dāng)于抗壞血酸0.0528mg(2)標(biāo)定2,6-二氯酚靛酚溶液:n取已標(biāo)定的抗壞血酸溶液5.0m1,1%草酸溶液5.0m1于錐形瓶中,搖勻,用欲標(biāo)定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至呈淡紅色,15s不褪色為止。21mg6 , 2ml0 . 1VVC數(shù)血酸的二氯酚靛酚相當(dāng)于抗壞C抗壞血酸溶液的濃度(mg/ml)V1抗壞血酸溶液的體積(ml)V2滴定時(shí)消耗的2,6-二氯酚靛酚的體積(ml) 2. 樣品測(cè)定n(1) 取樣品100g剪碎后置搗碎機(jī)中,按1:1(w/v)加入2%草酸制成勻漿。n(2) 稱取勻漿10g于小燒杯中,倒入50m1具塞量筒中,用1%草酸溶液沖洗燒杯,稀釋至刻度,振搖。如有泡沫影響定容可加數(shù)滴戊醇。2. 樣品測(cè)定n(3) 將振搖后上層清液約20m1倒入100m1錐形瓶中,加白陶士一勺,振搖數(shù)次,使充分脫色,靜置。同時(shí),取一錐形瓶,加入1%草酸20m1,加白陶士一勺,振搖數(shù)次作為空白。n(4) 取靜置后上清液過濾,吸取濾液5.0m1,以標(biāo)定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定,至溶液呈淡紅色,l5s內(nèi)不變化,記錄染料的用量?!緦?shí)驗(yàn)計(jì)算】式中:nV0空白實(shí)驗(yàn)消耗的染料體積(m1)nV1滴定樣品消耗的染料體積(m
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