血細胞分析在臨床中的應用

1、2021/3/261n血細胞分析在臨床中 的應用 2021/3/262血細胞分析的發(fā)展n近年來,隨著科學技術(shù)的飛速發(fā)展及計算機在血液分析儀中的廣泛應用,各種先進的血液分析儀逐漸普及. 2021/3/2631913 - 19981913 - 1998Model AHigh speed automatic blood cell count and cell size analyzer2021/3/264原理n血液分析儀主要是利用阻抗原理進行細胞計數(shù)的. 不同體積的血細胞,因其電 阻大小不同,而產(chǎn)生相應大小的脈沖,分別進入到儀器設置的不同通道2021/3/2652021/3/266CBC(全血細胞計

2、數(shù))+DIFF(WBC分類)模式下WBC計數(shù)分類nWBC/DIFF通道對WBC計數(shù)和分類時,使用的兩個信號:n細胞經(jīng)半導體激光激發(fā)產(chǎn)生側(cè)向熒光強度n側(cè)向散射光強度信號2021/3/267n使用的兩種試劑:n溶血素(4DL):將RBC完全溶解,同時在WBC膜表面打孔n熒光染料(4DS,聚次甲基熒光染料)通過 小孔進入WBC內(nèi),對胞漿和胞核中的核酸物質(zhì)進行染色2021/3/268測定n經(jīng)過核酸熒光染色后的WBC在633nm激光的照射下,產(chǎn)生側(cè)向熒光信號和側(cè)向散射光信號。n側(cè)向熒光強度與WBC的核酸(DNA/RNA)含量成正比,側(cè)向散射光強度反映了細胞內(nèi)容物的復雜程度(核的分葉,胞漿顆粒的大小,數(shù)量

3、,分布均勻程度)。2021/3/269123459鞘流技術(shù)激光計數(shù)原理示意圖鞘流技術(shù)激光計數(shù)原理示意圖1 1 流通池流通池2 2 梭頭梭頭3 3 樣本頭樣本頭4 4 鞘流頭鞘流頭5 5 透鏡透鏡6 6 吸收光吸收光7 7 低角度散射光檢測低角度散射光檢測8 8 高角度散射光檢測高角度散射光檢測9 9 光源光源8762021/3/26102021/3/26112021/3/2612Side Scatter (Internal structure) 淋巴淋巴細細胞胞 單單核核細細胞胞 嗜中性嗜中性細細胞胞 嗜酸嗜酸細細胞胞 Fluorescence (RNA ,DNA)RBC ghost 嗜堿細胞

4、嗜堿細胞2021/3/2613RBC和PLT檢測原理n全血標本稀釋后分配到RBC/PLT計數(shù)池,鞘流技術(shù)產(chǎn)生的層流使這個電阻信號轉(zhuǎn)化為脈沖信號記錄下來,脈沖的高度反映了細胞的大小,每個脈沖信號代表一個細胞,收集信號得到RBC和PLT的直方圖。2021/3/26142021/3/26152021/3/2616SLS血紅蛋白檢測方法n檢測使用的主要成份為十二烷基磺酸鈉n表面活性劑先將RBC溶解,釋放出Hb分子nHb分子中的Fe2+被氧化為Fe3+,與SLS結(jié)合形成SLS-Hb有色基團,在535nm有最大吸收峰。2021/3/2617SLS血紅蛋白檢測方法特點n不含氰化物,無毒具有環(huán)保性nSLS是一

5、種脂溶性試劑,可減少脂血和高WBC總數(shù)造成的濁度對血紅蛋白檢測的影響2021/3/2618數(shù)據(jù)異常信息2021/3/2619中性粒細胞增多n感染（急性細菌感染）n組織損傷（心肌梗塞 .手術(shù)）n惡性血液病n藥物使用(腎上腺素.類固醇)n生理性增高2021/3/2620淋巴細胞增多n惡性血液病n感染(百日咳.傳單.病毒性風疹)n應激狀態(tài)(急性心衰.心臟梗塞.過敏反應)n自身免疫性疾病.腫瘤.吸煙2021/3/2621單核細胞增多n感染(細胞性.敗血癥)n膠原病n妊娠性WBC增多n霍奇金氏病n惡性腫瘤2021/3/2622嗜酸性細胞增多n過敏反應(藥物.尋麻疹)n寄生蟲病n皮膚病n纖維瘤n內(nèi)分泌病感

6、染(結(jié)核病)2021/3/2623中性粒細胞減少n嚴重的細菌感染n白血病.腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移n藥物n血液惡液質(zhì)n過敏性休克.酒精中毒2021/3/2624淋巴細胞減少n流行性感冒.敗血病n藥物(抗腫瘤藥物.腎上腺皮質(zhì)激素)n腫瘤晚期.霍奇金氏病n膠原性疾病(系統(tǒng)性紅斑狼瘡.類風濕性關(guān)節(jié)炎)2021/3/2625n干擾因素造成假性增高(降低)2021/3/2626WBC假性增高nPLT聚集n冷凝集n有核紅細胞n難溶紅細胞n冷球蛋白2021/3/2627PLT假性增高n紅細胞碎片n小紅細胞n冷白蛋白2021/3/2628PLT假性降低n血小板聚集n巨大血小板2021/3/2629RBC假性增高n白細胞增

7、多n巨大血小板2021/3/2630RBC假性降低n紅細胞碎片n冷凝集n小紅細胞2021/3/2631急性粒細胞白血病急性粒細胞白血病Auer小體小體2021/3/2632出現(xiàn)原始粒細胞nDIFF散點圖顯示:淋巴細胞.單核細胞和原始細胞區(qū)域出現(xiàn)大量散點且連成一片,大部分原始細胞由于異常增殖含有過多的DNA/RNA2021/3/2633出現(xiàn)異常淋巴細胞n散點圖顯示:有大量的異常淋巴細胞,熒光強度較弱而側(cè)向 散射光強度稍強2021/3/2634RBC雙峰分布n表示出現(xiàn)大小不同的兩群紅細胞2021/3/2635缺鐵性貧血診斷與鐵劑治療后缺鐵性貧血診斷與鐵劑治療后直方圖動態(tài)變化直方圖動態(tài)變化- -療效

8、觀察療效觀察 鐵劑治療鐵劑治療2 2周后周后鐵劑治療鐵劑治療4 4周后周后2021/3/2636特發(fā)性PLT減少性紫癲(ITP)nPLT直方圖分布上,在40fl附近出現(xiàn)一個高峰,提示有大型PLT,因此反映細胞大小的直方圖無法將PLT準確檢測出來,許多大的PLT被計數(shù)成RBC2021/3/2637需要鏡檢的情況2021/3/2638n、國際血液學復檢專家組推薦的41條自動CBC和DC復檢規(guī)則: 1.新生兒:（1）復檢條件:首次檢測標本;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 2.WBC、RBC、Hb、PLT、網(wǎng)織紅細胞（Ret）：（1）復檢條件：超出線性范圍;（2）復檢要求：稀釋標本后重新測定。 3.WBC

9、、PLT：（1）復檢條件：低于實驗室確認的儀器線性范圍;（2）復檢要求：按實驗室標準操作規(guī)程（SOP）進行。 2021/3/2639n4.WBC、RBC、Hb、PLT:（1）復檢條件:無結(jié)果;（2）復檢要求:檢查標本是否有凝塊,重測標本,如果維持不變,用替代方法計數(shù)。 5.WBC：（1）復檢條件：首次結(jié)果30.0 x10e9/L;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 6.WBC：（1）復檢條件：3天內(nèi)Delta值超限，并30.0 x10e9/L;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2640n7.PLT:（1）復檢條件:首次結(jié)果1000.0 x10e9/L;（2）復檢要求:涂片鏡檢。 8.PLT：（

10、1）復檢條件：Delta值超限的任何結(jié)果;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 9.Hb：（1）復檢條件：首次結(jié)果其年齡和性別參考范圍上限20g/L;（2）復檢要求：涂片鏡檢,確認標本是否符合要求。 10.平均紅細胞體積（MCV）：（1）復檢條件：24h內(nèi)標本的首次結(jié)果105fl（成人）；（2）復檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2641n11.MCV:（1）復檢條件:24小時以上的成人標本105fl;（2）復檢要求:涂片鏡檢觀察大紅細胞相關(guān)變化,如無大紅細胞相關(guān)變化,要求重送新鮮血標本,如無新鮮血標本，報告中注明。 12.MCV：（1）復檢條件：24h內(nèi)標本的Delta值超限的任何結(jié)果;（2）復檢要求

11、：確認標本是否符合要求。 13.平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）：（1）復檢條件：參考范圍上限20g/L;（2）復檢要求：檢查標本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細胞。 2021/3/2642n1622條為白細胞分類的復檢規(guī)則: 16.無白細胞分類計數(shù)（DC）結(jié)果或DC結(jié)果不全:（1）復檢條件:無條件復檢;（2）復檢要求：人工分類和涂片鏡檢。 17.中性粒細胞絕對計數(shù)（Neut）：（1）復檢條件：首次結(jié)果20.0 x10e9/L;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 18.淋巴細胞絕對計數(shù)（Lym）：（1）復檢條件：首次結(jié)果5.0 x10e9/L（成人）或7.0 x10e9/L（1.5x10e9/

12、L（成人）或3.0 x10e9/L（2.0 x10e9/L;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 21.嗜堿粒細胞絕對計數(shù)（Baso）：（1）復檢條件：首次結(jié)果0.5x10e9/L;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2644n22.有核紅細胞絕對計數(shù)（NRBC）:（1）復檢條件:首次出現(xiàn)任何結(jié)果;（2）復檢要求:涂片鏡檢。 23條為網(wǎng)織紅細胞的復檢規(guī)則： 23.網(wǎng)織紅細胞絕對計數(shù)（Ret）：（1）復檢條件：首次結(jié)果0.10 x10e9/L;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2645n2441條為可以提示的復檢規(guī)則: 24.懷疑性報警不成熟粒細胞(IG)/桿狀核中性粒細胞（Band）報警提

13、示除外:（1）復檢條件:首次成人結(jié)果出現(xiàn)陽性報警;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 25.懷疑性報警：（1）復檢條件：首次兒童結(jié)果出現(xiàn)陽性報警;（2）復檢要求：涂片鏡檢。 26.WBC結(jié)果不可靠報警：（1）復檢條件：陽性報警;（2）復檢要求：確認標本是否符合要求并重測標本,如出現(xiàn)同樣報警提示,檢查儀器,如需要，進行人工分類。 27.RBC碎片：（1）復檢條件：陽性報警；（2）復檢要求：涂片鏡檢。 28.雙形RBC：（1）復檢條件：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；（2）復檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2646注意事項n儀器為篩選試驗,不能從測定結(jié)果直接 診斷疾病n遇到異常提示時及時鏡檢n儀器定期保養(yǎng),保證日

14、常工作正常進行2021/3/26472021/3/2648 （二）血細胞形態(tài)變化的一般規(guī)律二）血細胞形態(tài)變化的一般規(guī)律 1. 1.細胞大小及形態(tài)細胞大小及形態(tài) 大小大小: :由大到小。由大到小。2 2個例外個例外: :巨核細胞及早幼粒細巨核細胞及早幼粒細胞。胞。 形態(tài)形態(tài): :紅細胞始終圓形紅細胞始終圓形, ,粒細胞圓形或橢圓形粒細胞圓形或橢圓形, ,單單核細胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形核細胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形, ,巨核細胞由巨核細胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。 2.2.細胞核細胞核 大小大小：由大到小。巨核細胞除外。：由大到小。巨核細胞除外。 核形核形：各系細胞有不同表現(xiàn)。

15、：各系細胞有不同表現(xiàn)。 核位置核位置：紅系核居中，粒、單系核偏位，淋巴：紅系核居中，粒、單系核偏位，淋巴細胞核一側(cè)著邊，僅一側(cè)有胞漿。細胞核一側(cè)著邊，僅一側(cè)有胞漿。2021/3/2649 核染色質(zhì)核染色質(zhì): :顏色由淺到深顏色由淺到深, ,染色質(zhì)由細致染色質(zhì)由細致疏松到粗糙密集疏松到粗糙密集, ,最后緊縮成塊。最后緊縮成塊。 核膜核膜: :不明顯到明顯。不明顯到明顯。 核仁核仁: :清晰、模糊、消失。清晰、模糊、消失。 3.3.細胞漿細胞漿 量量：由少到多。：由少到多。 顏色顏色：粒、紅、巨核由深藍或淺藍到：粒、紅、巨核由深藍或淺藍到淺紅淺紅; ;淋巴、單核保持淺藍或灰藍色淋巴、單核保持淺藍或

16、灰藍色; ;漿漿細胞由灰藍變?yōu)樯钏{。細胞由灰藍變?yōu)樯钏{。 顆粒顆粒：從無到有：從無到有, ,由非特異性到特異性。由非特異性到特異性。2021/3/26502021/3/26512021/3/26522021/3/2653（中幼、晚幼、桿狀核、分葉核2021/3/2654n嗜堿粒細胞（早幼、中幼、晚幼、桿狀核、分葉核）2021/3/2655n原淋（Lymphoblast）n幼淋（prolymphocyte）n淋巴（lymphocyte）n大淋巴細胞n小淋巴細胞原淋巴細胞幼淋巴細胞:大淋巴細胞小淋巴細胞2021/3/2656n原漿（plasmablast）n幼漿（proplasmacyte）n漿細

17、胞（plasmacyte）原漿細胞幼漿細胞漿細胞2021/3/2657nA.原單（monoblast）nB.幼單（promonocyte）nC.單核（monocyte）nD.吞噬（maerophage）ABC原單核細胞幼單核細胞單核細胞2021/3/2658n原巨（megakaryoblast）n幼巨（promegakaryocyte）n顆粒巨（granular megakaryocyte）n產(chǎn)板巨（thrombacytogenous megakaryocyte）n裸核（naked nucleous）原巨核細胞幼巨核細胞顆粒型巨核細胞產(chǎn)血小板型巨核細胞2021/3/2659推片推片推片、染片的

18、推片、染片的質(zhì)量質(zhì)量 2021/3/2660正常骨髓象（油鏡）2021/3/26612021/3/26622021/3/26632021/3/2664地中海貧血2021/3/2665慢性ITP骨髓象（高倍鏡）2021/3/2666幼紅細胞形態(tài)異常2021/3/2667核間橋（細胞內(nèi)）核間橋（細胞內(nèi)）2021/3/26682021/3/2669核間橋（細胞外）核間橋（細胞外）2021/3/26702021/3/2671核出芽2021/3/2672不對稱雙核2021/3/2673三核幼紅三核幼紅2021/3/2674多核幼紅、點彩多核幼紅、點彩2021/3/2675不對稱核分裂象不對稱核分裂象2021/3/2676核碎裂核碎裂2021/3/2677幼紅細胞多偽足幼紅細胞多偽足2021/3/2678核畸形2021/3/2679巨大成熟紅細胞2