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文檔簡介
1、生物安全評估和管理 烏魯木齊人民醫(yī)院 生物安全手冊(888年第一版) 烏魯木齊人民醫(yī)院1生物安全管理體系1-11.1緊急事件電話和辦公室聯(lián)系方式1.2生物安全管理機(jī)構(gòu)1.3職責(zé)2生物安全評估和管理2-12.1風(fēng)險(xiǎn)評估和風(fēng)險(xiǎn)管理表2.2暴露途徑2.3生物安全等級3標(biāo)志3-13.1 墻面標(biāo)志3.2 門上標(biāo)志3.3 標(biāo)貼和顏色3.4 外送維修或處理的設(shè)備4生物安全要求和人員管理4-14.1生物物質(zhì)的使用登記4.2生物安全柜4.3人員管理5醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序5-15.1暴露于結(jié)核桿菌員工的篩選5.2免疫5.3醫(yī)學(xué)限制5.4員工血清貯存6個(gè)人防護(hù)裝備(PPE)6-16.1實(shí)驗(yàn)服、隔離衣6.2手套6.3工作鞋6
2、.4護(hù)目鏡6.5口罩、帽子7實(shí)驗(yàn)室設(shè)備7-17.1生物安全柜7.2 離心沉淀程序7.3 化學(xué)吸附真空管和過濾器7.4注射器和針頭7.5移液管7.6攪拌機(jī)、混勻器、超聲波清洗和粉碎機(jī)7.7 凍干7.8其它設(shè)備(水浴箱、冷藏箱、振蕩器)8實(shí)驗(yàn)室操作8-18.1與實(shí)驗(yàn)室事故相關(guān)的人為因素和態(tài)度8.2 一級生物安全8.3 二級生物安全8.4 生物危害物的運(yùn)輸(實(shí)驗(yàn)室間或物體間)8.5 基礎(chǔ)生物安全操作8.6內(nèi)務(wù)管理8.7菌(毒)種和生物樣本管理9意外9-19.1暴露事件的緊急處理9.2 報(bào)告事件9.3 醫(yī)療援助9.4 實(shí)驗(yàn)室事件的調(diào)查9.5應(yīng)急處置10溢出反應(yīng)10-110.1 一個(gè)基礎(chǔ)溢出試劑盒的組成
3、10.2 1級生物安全實(shí)驗(yàn)室溢出10.3 2級生物安全實(shí)驗(yàn)室溢出11消毒和滅菌處理過程11-111.1 實(shí)驗(yàn)室材料的清潔11.2 消除局部環(huán)境的污染11.3 清除生物安全柜的污染11.4 洗手/清除手部污染11.5 去污(凈化)方法11.6 高壓滅菌器程序11.7 化學(xué)去污劑的特征(特性)11.8廢棄物處理12運(yùn)送12-112.1 傳染性物質(zhì)的包裝和運(yùn)送13. 化學(xué)品、火和電的安全13-12. 生物安全評估和管理在建設(shè)實(shí)驗(yàn)室或開展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)之前,生物安全辦公室應(yīng)參照衛(wèi)生部名錄組織各相關(guān)方面的專家對擬操作的生物因子的危害程度、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的危險(xiǎn)性、氣溶膠傳播的可能性、預(yù)防治療的獲得性、防護(hù)屏障的安全性
4、、應(yīng)急預(yù)案的有效性等因素進(jìn)行評估,確定相應(yīng)的生物安全防護(hù)水平等級。實(shí)驗(yàn)室生物危害評估結(jié)果應(yīng)由中心的法定代表人簽字認(rèn)可,并歸檔保存。生物安全負(fù)責(zé)人最終對實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的安全負(fù)責(zé),其職責(zé)之一是指導(dǎo)現(xiàn)行工作以判斷潛在的危害(生物安全評估),職責(zé)之二是實(shí)驗(yàn)開始前采用合適的安全程序(風(fēng)險(xiǎn)管理)。特定的實(shí)驗(yàn)開始前需要預(yù)先進(jìn)行登記和通過生物安全負(fù)責(zé)人的批準(zhǔn)。風(fēng)險(xiǎn)評估和風(fēng)險(xiǎn)管理的5個(gè)“P”是指:u Pathogen 病原體 危險(xiǎn)的生物因子u Procedures 規(guī)程 推薦的實(shí)驗(yàn)操作和安全的操作規(guī)范u Personnel 人員 相應(yīng)的培訓(xùn)與技能u Protective equipment 防護(hù)設(shè)備 防護(hù)衣和安全設(shè)備
5、u Place 地點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)室所在位置實(shí)驗(yàn)室工作的每一方面都應(yīng)考慮風(fēng)險(xiǎn)評估和風(fēng)險(xiǎn)管理的5個(gè)“P”。正確地指導(dǎo)和風(fēng)險(xiǎn)評估能幫助免受生物危害的暴露,以及最大程度減少實(shí)驗(yàn)室受到感染的可能性。2.1 風(fēng)險(xiǎn)評估和風(fēng)險(xiǎn)管理表風(fēng)險(xiǎn)評估風(fēng)險(xiǎn)管理病原體u 傳染因子類型 (見附錄A)u 感染途徑u 感染性疾病發(fā)生過程病毒性、致病性、數(shù)量、濃度、人群中影響程度、昆蟲媒介的存在u 登記n 生物安全辦公室n 感染機(jī)構(gòu)n 約束機(jī)構(gòu)n 疾控中心 選擇機(jī)構(gòu)規(guī)程u 氣溶膠風(fēng)險(xiǎn):超聲、離心 、混勻、混合、振動(dòng)u 經(jīng)皮風(fēng)險(xiǎn): 針頭、注射器、玻璃吸液管、解剖刀、低溫刀片/刀等u 飛濺/濺潑風(fēng)險(xiǎn): 吸液管、接種環(huán)u 建立一套結(jié)合安全使用
6、的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程u 遵守基本的生物安全規(guī)則u 實(shí)驗(yàn)室、工作區(qū)域、 BSL-2或更高傳染因子實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的設(shè)備貼上標(biāo)識u 指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室操作和檢查實(shí)驗(yàn)設(shè)備u 用非傳染性材料做嘗試性試驗(yàn),以測試新的規(guī)程/設(shè)備人員u 人員免疫n 贅生物疾病n 感染n 免疫抑制治療n 年齡、種族、性別、妊娠n 手術(shù) (脾、胃切除)u 免疫力u 后暴露預(yù)防u 血清庫u 對安全的態(tài)度u 安慰u 外傷、破損皮膚、濕疹、皮炎u(yù) 安全培訓(xùn)u 以前從事生物危害的經(jīng)歷u 技術(shù)的熟練程度u 立即向生物安全負(fù)責(zé)人和生物安全辦公室報(bào)告所有的暴露事件、被忽視的事件以及相關(guān)疾病的癥狀u 調(diào)查/核實(shí)事件/飛濺等,以防止再次發(fā)生防護(hù)設(shè)備u 防護(hù):l 氣溶
7、膠-可以吸入粒子直徑<5µml 飛濺/濺潑l 銳器u 個(gè)人防護(hù)設(shè)備 (PPE):u 口罩 HEPA, N-99, N-95,等u 面部(眼、鼻、嘴)防護(hù)-面具和安全眼鏡、或蓋住下頜的面罩、前面無縫外衣或?qū)嶒?yàn)室外衣u 手套u(yù) 生物安全柜u 安全離心管/轉(zhuǎn)子地點(diǎn)u 風(fēng)險(xiǎn)組/生物安全等級、設(shè)備u 氣溶膠風(fēng)險(xiǎn)u 受限制的過道u 基本的實(shí)驗(yàn)室-門、易清潔的地方、沖眼器、窗戶u 標(biāo)簽u 用直接氣流預(yù)防2.2 暴露途徑生物因子要導(dǎo)致疾病發(fā)生,首先必須有足夠數(shù)量的因子進(jìn)入或侵入人體,進(jìn)入的途徑有經(jīng)口、呼吸道、黏膜及與動(dòng)物的接觸(叮、抓傷),當(dāng)生物危害物進(jìn)入人體,它產(chǎn)生疾病還需滿足其它條件,它們
8、必須在人體細(xì)胞、組織和/或器官內(nèi)生長繁殖,克服人體的自然免疫機(jī)制和變異或適合人體的變化。年齡、免疫狀況、職業(yè)、物理或地理環(huán)境等因素會(huì)導(dǎo)致個(gè)體對疾病的不同易感性。在涉及生物危害時(shí),確定其最低感染量是很困難的。同一病原體相同劑量在一個(gè)人身上可能無癥狀,而在另一人身上可能導(dǎo)致嚴(yán)重的癥狀甚至致命。有些微生物只要一個(gè)進(jìn)入到人體就足以侵入并促使疾病的發(fā)生,結(jié)核桿菌就是一個(gè)例子。暴露途徑的更多信息見下圖。24感染因子的傳播途徑黏膜:通過飛濺或?yàn)R潑暴露眼、鼻、嘴里的黏膜Mucous Membranes:吞咽;口腔吸入、吃、喝、在實(shí)驗(yàn)室里抽煙Exposures to mucous membranes of th
9、e eyes, nose and mouth through splashes or splatters.Ingestion:Mouth pipetting, eating, drinking, smoking in the lab.吸入:吸入氣溶膠粒子 (直徑<5µm), 離心滲漏物、溢出物、吸液等Inhalation:Breathing in respirable sized aerosols (<5µm), centrifuge leaks, spills, pipetting, etc.經(jīng)皮:被感染過的銳器刺傷完好或破損皮膚、動(dòng)物叮咬、抓傷、濕疹Perc
10、utaneous:Through intact or non-intact skin via needlestick, puncture with contaminated sharp object, animal scratch or bite, through wounds abrasions, or eczema.接觸 (間接傳播):通過接觸污染面(如凳子、電話、電腦、設(shè)備把手等)的手來觸摸黏膜或破損皮膚,或?qū)嶒?yàn)后洗手不徹底Contact (indirect transmission):Via mucous membranes or nonintact skin from hands t
11、hat have been in contact with a contaminated surface (i.e. benches, phones, 消毒、滅菌和廢棄物的處理過程 2.2.1 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傳染因子的傳播途徑 暴露途徑 防護(hù)措施黏膜:通過飛濺或?yàn)R潑暴露眼、鼻、嘴里的黏膜通過以下方式進(jìn)行面部的預(yù)防:u 戴護(hù)眼鏡或面罩u 在生物安全柜內(nèi)或保護(hù)罩后工作u 進(jìn)行規(guī)范的微生物操作吸入:由于離心滲漏、溢出或產(chǎn)生氣溶膠的操作如吸液、混勻等而吸入了可吸入的氣溶膠粒子 (直徑<5µm)。 通過以下方式避免暴露氣溶膠: u 在生物安全柜內(nèi)工作u 離心時(shí)使用密封轉(zhuǎn)子或杯u 進(jìn)行規(guī)范的微生
12、物操作吞咽;口腔吸入、吃、喝、在實(shí)驗(yàn)室里抽煙通過以下方式防止經(jīng)吞咽產(chǎn)生的暴露:u 不在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吃、喝或吸煙u 始終使用手工吸液u 進(jìn)行規(guī)范的微生物操作經(jīng)皮:被感染過的銳器刺傷完好或破損皮膚、動(dòng)物叮咬、抓傷、濕疹通過以下方式防止皮膚破損:u 用塑料制品代替玻璃制品u 使用銳器要非常小心u 用后立即將銳器丟棄在堅(jiān)固防漏容器內(nèi)u 適當(dāng)限制動(dòng)物u 戴不易劃破的手套、袖套、u 用防水繃帶包扎好破損皮膚并戴雙層手套接觸 (間接傳播):通過接觸污染面(如凳、電話、電腦、設(shè)備把手等)的手來觸摸黏膜或破損皮膚,或?qū)嶒?yàn)后洗手不徹底。通過以下方式防止間接暴露:u 工作臺面消毒u 工作后、脫去手套后總是洗手。u 不要
13、用戴手套或不戴手套的手觸摸臉部(良好的個(gè)人習(xí)慣)u 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不使用化妝品。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的任何時(shí)候始終執(zhí)行以下工作制度:u 不在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吃、喝或吸煙u 工作結(jié)束后或脫去手套后總是洗手u 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿戴好個(gè)人防護(hù)設(shè)備,離開實(shí)驗(yàn)室前務(wù)必脫去個(gè)人防護(hù)設(shè)備u 不用口吸、始終用手工吸液u 使用銳器格外小心u 用合適的設(shè)備抑制氣溶膠的產(chǎn)生u 對工作臺面、溢出物和廢棄物進(jìn)行消毒2.3 生物安全等級國家和衛(wèi)生部對微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室確立了從事生物危害工作對應(yīng)的生物安全等級。提供了微生物操作、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和安全設(shè)施的結(jié)合使用,以及所選的感染因子與使用推薦的四種生物安全等級的實(shí)驗(yàn)室操作。以下是1-4級生物安全所要求的實(shí)
14、驗(yàn)室操作、防護(hù)設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施和傳染因子的概括。2.3.1 所推薦的生物安全等級與相應(yīng)感染因子生物安全等級感染因子規(guī) 程安全設(shè)備(第一道屏障)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備(第二道屏障)BSL-1已知對健康成人 和動(dòng)物不造成疾病。標(biāo)準(zhǔn)微生物操作。不需要。u 開放工作臺。u 防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物進(jìn)入。u 實(shí)驗(yàn)室靠近出口處有洗手池。u 實(shí)驗(yàn)室的窗戶有紗窗。u 適當(dāng)?shù)南驹O(shè)備。BSL-2能引起人或動(dòng)物發(fā)病,但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害的病原體。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病,具備有效治療和預(yù)防措施,并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。BSL-1操作加:u 限制進(jìn)入u 生物危害警示標(biāo)記u 銳器謹(jǐn)慎使用u 制定安全
15、手冊,確定所有廢物消毒和醫(yī)療監(jiān)督計(jì)劃I 級or II級生物安全柜或其它物理防護(hù)設(shè)備,這些設(shè)備應(yīng)用于可能會(huì)產(chǎn)生飛濺或氣溶膠的感染因子的操作;個(gè)人防護(hù)設(shè)備:外套、手套、所需要的面部防護(hù)BSL-1加:u 實(shí)驗(yàn)室門應(yīng)帶鎖并可自動(dòng)關(guān)閉。u 應(yīng)設(shè)洗眼設(shè)施、高壓滅菌鍋。BSL-3能引起人或動(dòng)物嚴(yán)重疾病,或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失,但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播,或能用抗生素抗寄生蟲藥治療的病原體。BSL-2操作加:u 控制進(jìn)入u 所有廢棄物消毒u 實(shí)驗(yàn)室衣服洗之前對其進(jìn)行消毒II級(B2)或級生物安全柜和用于所有感染因子操作的其它物理防護(hù)設(shè)備;個(gè)人防護(hù)設(shè)備:防護(hù)衣、手套、需要的呼吸道防護(hù)。清潔區(qū)設(shè)置淋浴裝置。B
16、SL-2加:u 自成隔離區(qū),進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的過道用物理方式隔開。u 入口處采用自動(dòng)關(guān)閉雙層門。u 獨(dú)立的送排風(fēng)系統(tǒng),空氣排至室外,不在室內(nèi)循環(huán)。u 實(shí)驗(yàn)室負(fù)壓u 實(shí)驗(yàn)室污染區(qū)內(nèi)設(shè)不排蒸汽的高壓蒸汽滅菌器。BSL-4能引起人或動(dòng)物非常嚴(yán)重的疾病,一般不能治愈,容易直接、間接或因偶然接觸在人與人,或動(dòng)物與人,或人與動(dòng)物,或動(dòng)物與 動(dòng)物之間傳播的病原體。BSL-3操作加:u 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前更衣u 出口處沖淋u 所有材料在出口處消毒按照級生物安全的所有步驟進(jìn)行,全身穿上有空氣供應(yīng)系統(tǒng)、正壓個(gè)人防護(hù)衣。BSL-3加:u 遠(yuǎn)離建筑物或單獨(dú)的區(qū)域u 安裝供應(yīng)、排放真空系統(tǒng)u BMBL上的其它需求根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB
17、19489-2004實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求編制2.3.2生物安全評估目前實(shí)驗(yàn)室內(nèi)開展的病原體檢測的范圍為:病毒名稱危害程度分類未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作英文名中文名分類學(xué)地位Hepatitis A virus甲型肝炎病毒小RNA病毒科第三類BSL-2Hepatitis B virus乙型肝炎病毒嗜肝DNA病毒科第三類BSL-2Hepatitis C virus丙型肝炎病毒黃病毒科第三類BSL-2Hepatitis D virus丁型肝炎病毒衛(wèi)星病毒第三類BSL-2Hepatitis E virus戊型肝炎病毒嵌杯病毒科第三類BSL-2序號病原菌名稱危害程度分類樣本檢測所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級別學(xué)名中
18、文名1.Mycobacterium bovis牛型分枝桿菌第二類BSL-22.Mycobacterium tuberculosis結(jié)核分枝桿菌第二類BSL-23.Vibrio cholerae霍亂弧菌第二類BSL-24.Staphylococcus spp葡萄球菌屬第三類BSL-25.Streptococcus spp鏈球菌屬第三類BSL-26.Enterococcus spp腸球菌屬第三類BSL-27.Micrococcus spp微球菌屬第三類BSL-28.Moraxella spp莫拉菌屬第三類BSL-29.Neisseria spp奈瑟菌屬第三類BSL-210.Corynebacter
19、ium spp棒狀桿菌屬第三類BSL-211.Bacillus spp芽胞桿菌屬第三類BSL-212.Listeria spp李斯特菌屬第三類BSL-213.Erysipelothrix spp丹毒絲菌屬第三類BSL-214.Rhodococcus equi馬紅球菌第三類BSL-215.Nocardia spp諾卡菌屬第三類BSL-216.Eikenella corrodens嚙蝕艾肯菌第三類BSL-217.Enterobacteriaceae腸桿菌科第三類BSL-218.Vibrio spp弧菌屬(除霍亂弧菌)第三類BSL-219.Aeromonas spp氣單胞菌屬第三類BSL-220.P
20、lesiomonas spp鄰單胞菌屬第三類BSL-221.Pseudomonas spp假單胞菌屬第三類BSL-222.Acinetobacter spp不動(dòng)桿菌屬第三類BSL-223.Flavobacterium spp黃桿菌屬第三類BSL-224.Haemophilus spp嗜血菌屬第三類BSL-225.Pasteurella spp巴斯德菌屬第三類BSL-226.Gardnerella spp加德納菌屬第三類BSL-227.Legionella pneumophila嗜肺軍團(tuán)菌第三類BSL-228.Campylobacter spp彎曲菌屬第三類BSL-229.Helicobacte
21、r spp螺桿菌屬第三類BSL-230.Clostridium spp梭菌屬第三類BSL-231.Bacteroides spp擬桿菌屬第三類BSL-232.Fusobacterium spp梭桿菌屬第三類BSL-233.Peptostreptococcus anaerobius厭氧消化鏈球菌第三類BSL-234.Actinomadura spp放線菌屬第三類BSL-235.Arcanobacterium spp隱秘桿菌屬第三類BSL-236.Chlamydia pneumoniae肺炎衣原體第三類BSL-237.Mycoplasma pneumoniae肺炎支原體第三類BSL-238.Ure
22、aplasma urealyticum解脲脲原體第三類BSL-239.Candida albicans白假絲酵母菌第三類BSL-240.Cryptococcus neoformans新生隱球菌第三類BSL-2根據(jù)上述病原體檢測的表格,本中心的實(shí)驗(yàn)室僅僅允許在生物安全等級為1和2 的實(shí)驗(yàn)室里工作。2.3.3生物安全檢查生物安全辦公室應(yīng)定期組織人員對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行生物安全檢查,每年至少一次(可以和內(nèi)審一同進(jìn)行)。檢查結(jié)果應(yīng)與實(shí)驗(yàn)室人員和管理者一起討論,對于在檢查過程中發(fā)現(xiàn)的所有不足之處,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)采取改正措施。3 標(biāo)志3.1 墻面標(biāo)志3.1.1 實(shí)驗(yàn)室入口處的墻面上應(yīng)有實(shí)驗(yàn)室名稱。3.2 門
23、上標(biāo)志3.2.1 實(shí)驗(yàn)室入口處門上必須有生物危害警告標(biāo)志。標(biāo)志包括國際生物危害符號、生物危害等級(如BSL-1或2或3),有特殊要求的專用實(shí)驗(yàn)室應(yīng)標(biāo)明特殊進(jìn)入等要求。 國際生物危害警告標(biāo)志3.2.2 BSL-2實(shí)驗(yàn)室入口處門上必須有人員出入限制標(biāo)志和相關(guān)信息,如實(shí)驗(yàn)室責(zé)任人的姓名、聯(lián)系電話等。3.3 標(biāo)貼和顏色3.3.1 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),生物危害符號應(yīng)貼在醫(yī)用垃圾容器、冰箱、冷凍箱、培養(yǎng)皿和含BSL-2或BSL-3傳染因子的離心機(jī)、污水池、超聲腐蝕器及生物安全柜等上。3.3.2 當(dāng)設(shè)備用于處理人血液標(biāo)本、其它潛在感染物質(zhì)或感染因子時(shí),生物危害符號應(yīng)臨時(shí)貼在相關(guān)的設(shè)備上。3.3.3生物危害符號也應(yīng)貼
24、在其它用于儲存、運(yùn)送BSL-2或BSL-3傳染因子、血液標(biāo)本或“其它潛在感染物質(zhì)”(注意:未懷疑包含傳染因子或“其它潛在感染物質(zhì)”的運(yùn)送可以不貼生物危害符號,而貼診斷樣品標(biāo)志)的容器上。標(biāo)貼應(yīng)用帶子、線、粘膠或其它方式盡可能貼近容器以防止松動(dòng)或意外弄丟。3.3.4生物危害警告標(biāo)志底色應(yīng)該是桔紅色帶熒光,字母和符號用對比明顯的顏色。(可以購買)如果有下列情況,生物危害警告標(biāo)志可以免貼:(1) 廢棄物是放在黃色有生物危害符號的袋內(nèi);(2) 在儲存、轉(zhuǎn)移、運(yùn)送、處理過程中,單個(gè)盛血液或“其它潛在物質(zhì)”的容器被放置在貼有生物危害符號的第二個(gè)容器中。(3) 當(dāng)實(shí)驗(yàn)室門上貼有生物危害警告標(biāo)志時(shí),其室內(nèi)的儀
25、器等物品可免貼。3.4 外送維修或處理的設(shè)備3.4.1已污染或可能污染的設(shè)備外送維修或處理必須盡可能徹底消毒,在設(shè)備上貼上生物危害警示。3.4.2 對一些不能進(jìn)行徹底消毒的儀器設(shè)備,在外送之前,將這些儀器設(shè)備盡可能的消毒(沖洗或擦干凈外部),并貼上生物危害警示。3.4.3 生物危害警示還必須注明哪些部分仍存在污染,生物危害符號貼在污染區(qū)域附近。生物危害警示本設(shè)備的外部和內(nèi)部表面已消毒,已無任何生物危害。本設(shè)備將作為(在內(nèi)打勾) 服務(wù)/維修 重新安置 報(bào)廢 消毒操作人員 所使用的消毒劑 消毒日期 設(shè)備放置地點(diǎn) 實(shí)驗(yàn)室聯(lián)系電話 設(shè)備的以下區(qū)域 仍存在污染生物危害警示的推薦樣式4.生物安全要求和人員
26、管理以下的內(nèi)容描述了實(shí)驗(yàn)人員的要求。每個(gè)專業(yè)科室負(fù)責(zé)人的職責(zé)是確保實(shí)驗(yàn)室能遵循規(guī)章制度。4.1生物物質(zhì)的使用登記各專業(yè)科室實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任人要完成和遞交“生物物質(zhì)的使用登記表”。生物安全辦公室必須保存有關(guān)人員使用生物物質(zhì)的準(zhǔn)確的信息(例如:微生物、細(xì)胞系、人源物質(zhì)、動(dòng)物和毒物),并要求各專業(yè)科室負(fù)責(zé)人每年遞交準(zhǔn)確信息,以及一年里有關(guān)生物物質(zhì)的增加或刪除、房間位置的增加或刪除等變化。4.1.1人類病毒在開始研究人類致病因子前需要在生物安全辦公室登記。生物安全辦公室必須在實(shí)驗(yàn)開始前批準(zhǔn)全部包括有傳染性因子或潛在生物危害的生物物質(zhì)導(dǎo)入動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)人員必須在新的實(shí)驗(yàn)開始前接受生物安全培訓(xùn)。生物安全培訓(xùn)
27、由生物安全辦公室組織安排。生物安全負(fù)責(zé)人的職責(zé)是確保實(shí)驗(yàn)室全體人員得到適當(dāng)操作和技術(shù)的培訓(xùn)。生物安全負(fù)責(zé)人和/或?qū)嶒?yàn)室生物安全責(zé)任人在用風(fēng)險(xiǎn)組2(生物安全水平2)因子工作前必須到生物安全辦公室登記。風(fēng)險(xiǎn)組2和較高致病因子名單見附錄A。生物安全辦公室將定期監(jiān)控設(shè)備和操作,同時(shí)回答任何關(guān)于安全的問題。在下列情況發(fā)生之前必須聯(lián)系生物安全辦公室:u 開始用新的可感染因子工作u 改變現(xiàn)有工作的范圍或位置u 將可感染因子提供給科內(nèi)外其他工作人員u 在實(shí)驗(yàn)室安排非本實(shí)驗(yàn)室的工作人員工作4.1.2人類血液、體液、組織和其他潛在有傳染性的物質(zhì)血液耐受致病標(biāo)準(zhǔn)適用于“職業(yè)暴露”于人類血液或其他潛在有傳染性物質(zhì)下的
28、工作人員。其他潛在有傳染物質(zhì)包括:u 人類細(xì)胞或組織培養(yǎng)u 來自于人類(活的或死的)任何不固定的組織或器官,除了完整無缺的皮膚。u 人類體液,包括尿液、糞、唾液或眼淚等。u HIV或HBV包括培養(yǎng)液或其他溶液u 血液,器官或其他來自于感染了HIV或HBV或其他血液耐受致病原的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織。如果工作人員沒有直接接觸血液或其他潛在有傳染物質(zhì),但使用那些用于處理或貯存血液,其他潛在有傳染物質(zhì)或血液耐受致病原的儀器,那么此人也被認(rèn)為是職業(yè)暴露。員工暴露于由人類血液、組織和體液,可引起一個(gè)重要的健康風(fēng)險(xiǎn),它們含有血液耐受致病原諸如:¨ 人類免疫缺陷病毒(HIV)¨ 巴貝西蟲¨
29、; 科羅拉多壁虱熱¨ 乙型肝炎(HBV)¨ 疏螺旋體菌¨ 蟲媒病毒¨丁型肝炎(HDV)¨ 布氏桿菌¨ 減少螺菌¨ 丙型肝炎(HCV)¨ 鉤端螺旋體¨ Creutzfeldt-Jakob virus¨ 瘧原蟲¨ 弗朗西斯菌¨ Human T-lymphotropicVirus Type I I型人類T淋巴促激素病毒¨ 密螺旋體¨ Streptobacillus moniliformis念珠鏈桿菌¨ Hemorrhagic Fever viruses
30、出血熱病毒4.1.3動(dòng)物全部的研究實(shí)驗(yàn)包括動(dòng)物管理必須由生物安全負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。一經(jīng)批準(zhǔn),必須在實(shí)驗(yàn)開始前與生物安全辦公室聯(lián)系確保制定安全協(xié)議。實(shí)驗(yàn)人員必須與生物安全辦公室及有關(guān)安全人員溝通描述標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程概要。4.2生物安全柜空氣清潔設(shè)備能確??剖覇T工的健康和安全,同時(shí)可保護(hù)實(shí)驗(yàn)和預(yù)防臨床傳染性物質(zhì)釋放到環(huán)境中。生物安全柜的功效依賴于操作者的行為,如在設(shè)備中物品的定位和實(shí)驗(yàn)室人員的移動(dòng)。本中心的全部生物安全柜必須具有中心證明/服務(wù)合同以及至少每年鑒定。生物安全辦公室聯(lián)系確定需每年鑒定的日期。當(dāng)轉(zhuǎn)讓給新買主、報(bào)廢、從中心搬走或從其他單位或制造商獲得生物安全柜時(shí),須預(yù)先通知生物安全辦公室。如設(shè)備有服
31、務(wù)或維修需要(例如,更換熒光燈、開關(guān)等)應(yīng)聯(lián)系生物安全辦公室。在生物安全柜被重新貯存、維修(內(nèi)部)或報(bào)廢前,必須由有證的技師用甲醛等專業(yè)排污。購買生物安全柜應(yīng)與生物安全辦公室協(xié)調(diào)。生物安全辦公室評價(jià)全部生物安全柜的購買要求。科室不購買和使用超凈工作臺,因?yàn)槌瑑艄ぷ髋_的空氣吹向工作表面而進(jìn)入操作者的面部和(皮膚)破損處。超凈工作臺不能提供保護(hù)人員或環(huán)境防止可傳染性或潛在可傳染性因子、過敏原、化學(xué)品或物質(zhì)。4.3人員管理實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立工作人員上崗考核制度,所有與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相關(guān)的人員都應(yīng)經(jīng)過培訓(xùn)并取得上崗資質(zhì)。培訓(xùn)對象應(yīng)包括實(shí)驗(yàn)室管理人員、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員、樣本運(yùn)輸人員、廢棄物處置人員、儀器設(shè)備維修人員及
32、保潔工等。實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員應(yīng)每年接受生物安全培訓(xùn)。培訓(xùn)組織機(jī)構(gòu)應(yīng)采取有效方法對培訓(xùn)的效果進(jìn)行評估??剖覒?yīng)建立人員培訓(xùn)檔案。人為的失誤和不規(guī)范的操作會(huì)極大地影響所采取的安全措施對實(shí)驗(yàn)室人員的防護(hù)效果。因此,熟悉如何識別與控制實(shí)驗(yàn)室危害的有安全意識的工作人員,是預(yù)防實(shí)驗(yàn)室感染、差錯(cuò)和事故的關(guān)鍵?;谶@一原因,不斷地進(jìn)行安全措施方面的在職培訓(xùn)是非常必要的。一個(gè)有效的安全規(guī)程首先始于實(shí)驗(yàn)室管理者,管理者應(yīng)確保安全的實(shí)驗(yàn)室操作及程序融合到工作人員的基本培訓(xùn)中。安全措施方面的培訓(xùn)是新工作人員崗前培訓(xùn)的有機(jī)組成部分,應(yīng)向工作人員介紹生物安全操作規(guī)范和實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程,包括安全手冊或?qū)嶒?yàn)的操作手冊。應(yīng)采用諸如簽名
33、傳閱的方法,來確保工作人員閱讀并理解這些規(guī)程。專業(yè)科室主任在對屬下工作人員進(jìn)行規(guī)范性實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)培訓(xùn)時(shí)起著關(guān)鍵作用,生物安全委員會(huì)可以幫助進(jìn)行人員培訓(xùn)并研制教具和教案。4.3.1培訓(xùn)規(guī)劃不斷進(jìn)行崗位安全教育對于維持實(shí)驗(yàn)室工作人員和后勤保障人員的安全意識是很重要的。下列各項(xiàng)是保證生物安全培訓(xùn)規(guī)劃行之有效的必備要素:需求評估。這一過程包括確定相關(guān)的任務(wù)、重要性等級(以發(fā)生頻率、危害程度以及復(fù)雜性來表示)以及完成這些任務(wù)的必要步驟等細(xì)節(jié)。確立培訓(xùn)目的。最令人滿意的情況是,期望受培訓(xùn)者在進(jìn)行培訓(xùn)之后,能在工作中加以應(yīng)用。培訓(xùn)的目的是要了解開展實(shí)驗(yàn)的條件以及所需的熟練水平。
34、規(guī)定培訓(xùn)的內(nèi)容和方法。培訓(xùn)內(nèi)容是受培訓(xùn)者為了實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)操作目標(biāo)所必須掌握的知識或技術(shù)。通常由那些對工作和相關(guān)要求最為了解的人員來確定生物安全培訓(xùn)規(guī)劃的內(nèi)容。其他的內(nèi)容可能集中在練習(xí)如何解決工作中發(fā)生的問題,以及學(xué)習(xí)糾正人們在使用某一技術(shù)過程中所犯的錯(cuò)誤。還不能確定某種教學(xué)方法(專題講座、計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)、交互式影像方式等)是否會(huì)比另一種更好,教學(xué)方法的好壞很大程度上取決于特定的培訓(xùn)需要、培訓(xùn)對象的構(gòu)成等。人員培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)包括實(shí)驗(yàn)室生物安全的基本知識、基本技能、消防和應(yīng)急處置預(yù)案、化學(xué)、生物危險(xiǎn)和傳染預(yù)防、應(yīng)急救護(hù)等課程。還應(yīng)包括:A. 吸入危險(xiǎn)(氣溶膠產(chǎn)物),如何使用接種環(huán)、劃線接種
35、瓊脂平板、移液、制作涂片、打開培養(yǎng)物、采血/血清標(biāo)本、離心等。B. 食入危險(xiǎn),如處理標(biāo)本、涂片以及培養(yǎng)物。C. 在使用注射器和針頭時(shí)刺傷皮膚的危險(xiǎn)。D. 處理血液以及其它有潛在病理學(xué)危險(xiǎn)的材料E. 感染性材料的清除污染和處理??紤]不同培訓(xùn)對象的差異。有效的培訓(xùn)一定要考慮培訓(xùn)對象的特點(diǎn)。不同人員在資質(zhì)、讀寫、文化、口語以及培訓(xùn)前所掌握的技術(shù)水平等方面都可能不一致。關(guān)于培訓(xùn)規(guī)劃能否提高受培訓(xùn)者的操作技能和個(gè)人安全水平,這可能取決于培訓(xùn)所采用的方法。對某些人應(yīng)采用更直觀的或“手把手”的方式更好;而其他人則以學(xué)習(xí)文字材料更有效果。工作人員如有特別要求時(shí)也應(yīng)提出,例如對聽力缺陷人員的課程調(diào)
36、整。除了考慮這些因素外,建議制定安全培訓(xùn)規(guī)劃的人員要熟悉了解成人教育的基本原則。針對不同的學(xué)習(xí)要求。教學(xué)內(nèi)容(例如培訓(xùn)課程、錄像、文字材料等)不應(yīng)該同所教授的技術(shù)或主題相沖突、相抵制或沒有關(guān)聯(lián)。例如,如果培訓(xùn)的目的是要提高解決問題的能力,那么在教育中就應(yīng)該強(qiáng)調(diào)思維推理而并非死記硬背,應(yīng)該要求培養(yǎng)創(chuàng)造性的行為和或相應(yīng)的反饋(肯定正確可靠)能力。此外,提供與實(shí)際工作條件相似的實(shí)踐機(jī)會(huì)有助于將技能應(yīng)用到實(shí)際工作中。培訓(xùn)評估。培訓(xùn)評估有助于判斷培訓(xùn)是否達(dá)到了預(yù)定效果。培訓(xùn)評估通常包括下列四種方式:· 檢查培訓(xùn)對象對所進(jìn)行培訓(xùn)的反應(yīng)· 考核培訓(xùn)對象對所培訓(xùn)
37、內(nèi)容的記憶和/或操作執(zhí)行情況· 評估培訓(xùn)對象在工作中的行為變化· 按培訓(xùn)機(jī)構(gòu)的目的或目標(biāo)來考查是否已有明確的效果。對培訓(xùn)效果最完整的評估應(yīng)包括全部上述四個(gè)方面。僅考慮培訓(xùn)對象對所進(jìn)行培訓(xùn)的反應(yīng)是一種最不有效的評估方法,因?yàn)檫@種反應(yīng)與培訓(xùn)對象對培訓(xùn)內(nèi)容的實(shí)際掌握程度之間可能沒有關(guān)系,它也不應(yīng)作為評估培訓(xùn)效果的唯一指標(biāo)。培訓(xùn)調(diào)整。由于衡量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)多種多樣,因此對培訓(xùn)效果的評估很難表明培訓(xùn)規(guī)劃究竟是完全成功還是徹底失敗。通常的結(jié)果為,培訓(xùn)對象與其他人相比,對課程內(nèi)容的某些部分會(huì)有更好的理解、掌握和應(yīng)用。培訓(xùn)所造成的知識或能力上的不同或差異,可能提示是否需要更長的培
38、訓(xùn)時(shí)間、采用其他的培訓(xùn)方法或聘請更有能力的教師。5.醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序。醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序由生物安全辦公室管理。程序的目的是對員工作定期的健康評估,關(guān)注對特殊的生物因子員工可能的處理(方式)有關(guān)的因素或條件。對特殊的員工醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序可以做一些預(yù)防測定,包括免疫、定期身體檢查和采集血清樣本。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期對實(shí)驗(yàn)人員開展與其從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相關(guān)的健康體檢,建立人員健康檔案。實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)在身體狀況良好的情況下進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)工作,若出現(xiàn)疾病、過勞狀態(tài)或其他意外狀況,則不應(yīng)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)或立即退出實(shí)驗(yàn)區(qū)。醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序的目的是:u 推薦下列的合適的醫(yī)學(xué)預(yù)防(措施)u 做員工的定期評價(jià)以決定假如與工作相關(guān)的醫(yī)學(xué)條件是普遍的,這樣
39、的話,采取確定的測定以減輕他們的(影響)對一個(gè)特定的員工醫(yī)學(xué)監(jiān)督的范圍將是非常不同和依賴于:Ø 課題本身存在的潛在因素Ø 那些直接或潛在暴露生物因子的員工與現(xiàn)在或以前健康狀況有關(guān)的某些附加因素醫(yī)學(xué)監(jiān)督將可提供員工可能導(dǎo)致的潛在暴露。5.1暴露于結(jié)核桿菌員工的篩選面對職業(yè)暴露于結(jié)核桿菌的員工在科室生物安全辦公室登記。職業(yè)安全和健康管理從下列范圍鑒定潛在暴露:u 可能處理肺結(jié)核菌的實(shí)驗(yàn)室有風(fēng)險(xiǎn)新員工在雇用時(shí)必須用肺結(jié)核皮膚試驗(yàn)(PPD)測試TB暴露以建立其基礎(chǔ)值。有風(fēng)險(xiǎn)全體員工必須每年做PPD試驗(yàn)。暴露于活性TB案例中的員工必須報(bào)告在暴露時(shí)初始TB試驗(yàn)基線和以后暴露3個(gè)月測試的
40、事件和經(jīng)歷。5.2免疫在某些情況下,做特殊研究的人員要用合適的疫苗免疫,諸如狂犬病,風(fēng)疹和麻疹。疫苗建議B型肝炎疫苗推薦給使用人類血液,體液或組織工作的人員其他疫苗由員工健康醫(yī)生決定。在一些案例中定期收集適當(dāng)?shù)纳鲜鲅鍢颖緶y定疫苗引起的抗體。5.3醫(yī)學(xué)限制5.3.1懷孕一般認(rèn)為在懷孕期間暴露于某些傳染因子例如母親被因子感染可能會(huì)影響胎兒。懷孕的或?qū)言械膵D女要告知生物安全辦公室。員工要與生物安全委員會(huì)及生物安全辦公室討論關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作與懷孕的風(fēng)險(xiǎn)問題。生物安全辦公室是懷孕婦女詢問任何問題或涉及到有關(guān)她們工作環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)的機(jī)構(gòu),同時(shí)辦公室又扮演著懷孕員工和她們各自的部門負(fù)責(zé)人之間的聯(lián)絡(luò)員角色。5.3.
41、2生殖生物學(xué)危害生殖生物學(xué)危害包括但并不僅僅限于下列:u 巨細(xì)胞病毒(CMV)u B型肝炎病毒(HBV)u E型肝炎病毒u 人類免疫缺陷病毒(HIV)u 人類細(xì)小病毒B19u 風(fēng)疹(德國麻疹)u 淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒u 水痘帶狀皰疹病毒(雞疹)只要需要,生物安全辦公室與各專業(yè)科室一起去評價(jià)實(shí)驗(yàn)室工作程序以確保最小的暴露。5.3.3其它限制經(jīng)過與員工及醫(yī)生討論后,制定員工的限制和推薦的基線。以條件為例證明特殊預(yù)防感染、免疫抑制條件和抑制免疫系統(tǒng)的藥物治療。因此,假如你正處于上述任何條件,你必須將有關(guān)情況告知你的醫(yī)生和辦公室。5.4員工血清貯存許多傳染病并非明顯疾病條件引起??深A(yù)先收集新進(jìn)員工
42、、傳染病實(shí)驗(yàn)室員工的血清作為本底血清。6個(gè)人防護(hù)裝備(PPE)個(gè)人防護(hù)裝備是減少操作人員暴露于氣溶膠、飛濺物以及意外接觸等危險(xiǎn)的一個(gè)屏障。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備足夠的符合不同級別的個(gè)人防護(hù)裝備,供實(shí)驗(yàn)人員選擇和使用。6.1實(shí)驗(yàn)服、隔離衣進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)域必須穿實(shí)驗(yàn)服,反復(fù)使用的實(shí)驗(yàn)服必須是耐用的。在二級生物安全實(shí)驗(yàn)室里從事病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和HBV、HCV、HIV等血清學(xué)檢測工作時(shí),應(yīng)該在實(shí)驗(yàn)服外面穿上隔離衣。每隔適當(dāng)?shù)臅r(shí)間應(yīng)更換實(shí)驗(yàn)服以確保清潔,當(dāng)實(shí)驗(yàn)服或隔離衣已被危險(xiǎn)材料污染時(shí)應(yīng)立即更換,放在指定的位置,告知保潔人員先消毒再清洗。實(shí)驗(yàn)服、隔離衣不得穿離實(shí)驗(yàn)區(qū)域。6.2 手套手套應(yīng)符合舒服、合適、耐磨、耐撕的
43、要求。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室一般性工作,以及在處理感染性物質(zhì)、血液和體液標(biāo)本時(shí),應(yīng)戴手套,并保證:¨ 所戴手套無漏損;¨ 戴好手套后應(yīng)完全遮蓋手及腕部;¨ 在撕破、損壞或受污染時(shí)應(yīng)立即更換手套;¨ 在完成工作后應(yīng)摘除手套并徹底洗手。用過的一次性手套應(yīng)丟棄在生物垃圾袋內(nèi);¨ 手套不得戴離實(shí)驗(yàn)室區(qū)域。6.3 工作鞋實(shí)驗(yàn)區(qū)域必須穿不露腳趾的鞋,鞋應(yīng)舒適,鞋底防滑。推薦使用皮制的不滲液體的鞋類。從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目和在二級生物安全實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)應(yīng)穿一次性鞋套,在從事可能出現(xiàn)漏出的工作時(shí)也應(yīng)穿一次性鞋套。用過的鞋套應(yīng)丟棄在生物垃圾袋內(nèi),鞋套不得穿離實(shí)驗(yàn)室區(qū)域。6
44、.4 護(hù)目鏡在HIV初篩實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)備有護(hù)目鏡。在從事可能出現(xiàn)飛濺的工作時(shí)應(yīng)戴護(hù)目鏡,可避免實(shí)驗(yàn)物品飛濺對眼睛造成的傷害。護(hù)目鏡不得戴離實(shí)驗(yàn)室區(qū)域。6.5 口罩、帽子 在無菌室從事無菌實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)戴口罩、帽子。在從事可能出現(xiàn)飛濺的工作時(shí)應(yīng)戴口罩、帽子。用過的口罩、帽子應(yīng)丟棄在生物垃圾袋內(nèi),口罩、帽子不得戴離實(shí)驗(yàn)室區(qū)域。7實(shí)驗(yàn)室設(shè)備 實(shí)驗(yàn)室所用設(shè)施、設(shè)備和材料應(yīng)符合國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定要求。一級病原微生物實(shí)驗(yàn)室和二級病原微生物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施設(shè)備要求。7.1 生物安全柜有生物安全柜的科室要有一個(gè)生物安全柜的操作規(guī)程。合適地使用生物安全柜能提供一個(gè)清潔的工作環(huán)境。生物安全柜能提供給人員、物品和環(huán)境的保護(hù)。生物
45、安全柜隔離來自被限制的生物危害材料區(qū)域人員的生物危害。生物安全柜藉由經(jīng)過高效率微粒子空氣濾過器(HEPA)過濾空氣中煙霧狀生物危害性材料。吸入的空氣在進(jìn)入生物安全柜工作區(qū)域之前經(jīng)一個(gè) HEPA 濾過器過濾。排氣也通過 HEPA濾過器過濾。氣溶膠在生物安全柜的工作區(qū)域中產(chǎn)生被包含在生物安全柜里面。二級生物安全柜操作程序:l 如果使用,把紫外燈關(guān)掉;打開熒光燈和排風(fēng)機(jī)。l 用75%的乙醇或適當(dāng)?shù)南緞┫舅械膬?nèi)部表面。l 將物品按程序放入生物安全柜內(nèi)的位置;不要阻塞進(jìn)氣孔。等候 2-3 分鐘對工作區(qū)域清潔。l 在工作區(qū)域之內(nèi),物品之間保持適當(dāng)?shù)拈g距。l 工作應(yīng)該從干凈的到污染的地方進(jìn)行。l 工作
46、完畢后,讓柜內(nèi)的物品在移出之前運(yùn)行 2-3 分鐘。l 用75%乙醇或適當(dāng)?shù)南緞┎潦盟械墓ぷ鞅砻?。l 關(guān)閉熒光燈和排風(fēng)機(jī)。需要注意的是:A. 生物安全柜運(yùn)行正常時(shí)才能使用。B. 生物安全柜在使用中打開的玻璃觀察擋板不能超過規(guī)定高度。C. 安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放器材或標(biāo)本,不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)。D. 安全柜內(nèi)不能使用明火,否則燃燒產(chǎn)生的熱量會(huì)干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器,但最好使用一次性無菌接種環(huán)。E. 所有工作必須在工作臺面的中后部進(jìn)行,并能夠通過玻璃觀察擋板看到。F. 盡量減少操作者身后的人員活動(dòng)。G. 操作者不應(yīng)反復(fù)移出或伸進(jìn)手臂以免干擾氣流。H. 不要使實(shí)驗(yàn)
47、記錄本、移液器以及其它物品阻擋空氣格柵,因?yàn)檫@將干擾氣體流動(dòng),引起物品的潛在污染和操作者的暴露。I. 在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后,安全柜的風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行23分鐘。J. 在生物安全柜內(nèi)操作時(shí),不能進(jìn)行文字工作。許多生物安全柜裝備有殺菌的紫外線燈。照射時(shí)間、距離、灰塵或碎片的出現(xiàn)和紫外燈強(qiáng)度影響紫外燈的殺菌效果。紫外燈的可見蘭紫色光不指示有殺菌的效應(yīng)。紫外燈需要定期地清潔排除灰塵。紫外燈可能損害眼睛、皮膚和實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。紫外燈應(yīng)該在有人進(jìn)入前被關(guān)閉。禁止使用到期的紫外燈。7.2 離心沉淀程序所有的離心沉淀將使用放入密封的離心轉(zhuǎn)子中的離心機(jī)保護(hù)桶或密封的離心管。如果使用的是無效的小離心機(jī)安全杯,則
48、應(yīng)該在生物安全柜中操作離心機(jī)。操作離心機(jī)的每個(gè)人應(yīng)該熟悉相應(yīng)的操作程序。在操作記錄簿上詳細(xì)記錄離心機(jī)和轉(zhuǎn)子使用情況以決定技術(shù)維修的需要。下列是被推薦的離心沉淀法程序:l 在使用離心管和瓶之前檢查它們有否壓力標(biāo)記。l 在生物安全柜里面輕輕裝滿所有的離心機(jī)管和瓶。在放入安全杯或轉(zhuǎn)子前用消毒劑擦拭離心管。l 離心管決不要裝得太多,當(dāng)離心管裝得太滿可能發(fā)生泄漏。最大為離心管的3/4。l 離心前離心管的蓋子處于蓋著狀態(tài)。l 所有的管子放入保護(hù)桶或密封轉(zhuǎn)子中。檢驗(yàn)保護(hù)桶的“O”型密封圈和保護(hù)桶或轉(zhuǎn)子的內(nèi)部。l 在放入轉(zhuǎn)子或保護(hù)桶之前用消毒劑擦拭管子或瓶子的外面。l 不要超過安全的轉(zhuǎn)子速度。l 如果一個(gè)異常
49、的情況發(fā)生(噪音或振動(dòng)) 立即停止離心機(jī)。l 離心完畢后在打開離心機(jī)之前等候五分鐘。這將會(huì)使氣溶膠沉淀下來以防止事故的發(fā)生。l 在每次使用后清潔和防護(hù)輸送器或轉(zhuǎn)子和離心機(jī)內(nèi)部。l 在生物安全柜中打開保護(hù)桶或轉(zhuǎn)子。7.3 化學(xué)吸附真空管和過濾器化學(xué)吸附真空管和過濾器防止傳染性和非傳染性物質(zhì)吸入真空管線里?;瘜W(xué)吸附真空管和過濾器:l 將化學(xué)消毒劑放入化學(xué)吸附瓶中。讓被吸附液體完全稀釋。(例如: 100 毫升普通漂白氯開始,吸入 900 毫升的液體和廢棄物)。l 如果真空管堵塞或者液體接觸過濾器則檢查真空過濾器并替換。舊的過濾器將作醫(yī)學(xué)廢棄流處理。組織培養(yǎng)瓶過濾器消毒劑溶液溢出瓶收集瓶真空管7.4注
50、射器和針頭注射器和皮下注射器的針頭是一種危險(xiǎn)的器械。為了減少偶爾的意外注射、氣溶膠的產(chǎn)生或溢出,當(dāng)有替代的方法可以利用的時(shí)候,應(yīng)避免使用注射器。例如,在注射器上為口腔或鼻腔的注射使用鈍針或套管。當(dāng)使用腸外注射的時(shí)候,推薦下列使用皮下注射器針頭和注射器的注意點(diǎn):l 在生物安全柜里使用注射器和針頭時(shí),最好和避免拿注射器的手作快速和不必要的移動(dòng)。l 檢查玻璃注射器是否有裂紋和碎裂以及針頭是否有倒鉤和堵塞。這些檢查應(yīng)該在使用和消毒前完成。只使用針頭鎖閉為了確信針頭被安全鎖定放入桶內(nèi)。無論什么時(shí)候只要有可能就用塑料的可任意處理的注射器替換玻璃制的注射器。l 只要可能就使用更安全的針。l 使用操作針和注射
51、器的時(shí)候戴乳膠手套。l 裝滿注射器時(shí)盡量減少注射器內(nèi)泡沫和氣泡的產(chǎn)生。l 排除掉注射器內(nèi)多余的氣體、液體和泡沫,垂直打入濕的含合適的消毒劑的脫脂棉花內(nèi)或打入含有消毒棉花的小瓶內(nèi)。l 不要為了混勻而用注射器將有傳染性物質(zhì)的液體強(qiáng)力地注射進(jìn)開口的小瓶里。如果注射器的針頭在試管里液面下則用注射器混合僅僅是用來補(bǔ)液。l 注射器從試管中被裝滿時(shí),注意不要污染注射器的中部,這可能導(dǎo)致傳染性物質(zhì)轉(zhuǎn)移至手指頭。l 在從橡皮塞中拔除注射器和針頭時(shí),用含適當(dāng)?shù)南緞┑拿撝藁ò腿♂橆^。如果有涉及消毒劑污染到敏感的實(shí)驗(yàn)材料,可以使用消毒的脫脂棉,并立即丟棄至生物危害袋內(nèi)。l 將注射器丟入專用的容器內(nèi)。別折彎、
52、別剪、別重復(fù)或以別的方式處理針。如果重復(fù)使用不可避免,使用相同的手法。別將注射器扔進(jìn)非專用的容器內(nèi)。7.5移液管l 決不要用嘴吸移液管;在吸取傳染性材料的時(shí)候總是使用一些移液管輔助器具。所有危險(xiǎn)的東西更適宜在生物安全柜里操作。l 傳染性的或有毒的材料不應(yīng)該從移液管中強(qiáng)力地排出。l 傳染性的或有毒的液體要防止因用空氣吹打液體而導(dǎo)致泡沫的產(chǎn)生。l 決不應(yīng)該為了混合而用移液管反復(fù)地吹吸含有傳染性或者有毒物質(zhì)的液體。l 移液管的排出除應(yīng)該與液體或瓊脂水平盡可能地近,并且,只要可能內(nèi)容物應(yīng)該沿著管壁或瓶壁排出,不要從高處排出。l 用于吸取傳染性或者有毒材料移液管尾部應(yīng)該用棉花塞住,甚至在操作AIDS時(shí)用安全移液管。l 避免從移液管中偶然落下的傳染性或者有毒的材料到工作面。在拋棄或再次使用前放含濕的消毒劑的毛巾或其他的能吸收的材料到工作面和高壓鍋上。l 污染的移液管應(yīng)該放入類似次氯酸鹽消毒劑的容器內(nèi)。裝移液管的圓筒不要垂直地放置由于其高度,必須放在生物安全柜外的地面上。從生物安全柜中拿出污染的移液管,將它們垂直地放入容器中防止從移液管中的液體滴入到地面上或容器的邊緣而形成氣溶膠,并且,移液管頂部常常超出消毒劑的液面。l 為被使用的移液管在生物安全柜的范圍內(nèi)放置丟棄盤。經(jīng)適當(dāng)時(shí)間的浸泡后,多余的消毒劑小心的倒入水池。盤子和移液管一起高壓消毒,用清潔的盤子換上新鮮的消毒劑備用。
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