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文檔簡介
1、生菜中色素提取分離和含量測定實驗目的實驗目的實驗器材實驗器材實驗材料及儀器藥品1.層析液配方:石油醚20ml +丙酮2ml +苯1ml2.天平 研缽 燒杯 量筒 濾紙 表面皿 剪刀 95%乙醇 漏斗 滴管 尼龍布 毛細管 1.學會葉綠素的提取分離和含量的測定2.了解葉綠素的性質實驗原理實驗原理 綠葉中的葉綠體含有葉綠素,葉綠素可以溶于有機溶劑乙醇,丙酮等,所以可將色素提取出來,紙層析法是分離色素最簡單的方法,他的原理是利用混合色素各個物理,化學性質的差別,以不同的程度分布于固定相和流動相中。由于他們的移動速度不同,從而達到移動的目的。實驗步驟實驗步驟1.稱取2g的新鮮生菜綠葉,剪碎,放在研缽中
2、,加5ml乙醇,加入少許的石英砂一起研磨成漿,用尼龍布過濾后,該濾液即為葉綠素提取液。2.取一塊預先干燥處理過的定性濾紙,將它剪成長約10cm,寬約1cm的濾紙條。將濾紙條的一段剪去兩角,在此端距頂端1cm處用鉛筆畫一條細線,線要直,要勻,要細。3.畫濾液細線 用毛細管取少量濾液,沿鉛筆線均勻畫細線。濾液干后,重復劃線一兩次。4.分離光和色素,向燒杯中倒入3ml層析液,將濾紙條尖端朝下,斜靠內壁,插入層析液,蓋上表面皿5.僅過幾分鐘后,觀察色素帶的情況,最上層的是胡蘿卜素,其次是葉黃素,再次是葉綠素a,最后是葉綠素b 注意事項注意事項1.畫鉛筆線時,線要細 直 勻 2.分離光合色素時,濾液細線
3、不要浸入液面以下,接觸到層析液,這是因為色素極易溶解在層析液中,導致色帶不清晰,影響實驗效果。3.分離光合色素時,要加蓋,減少有機溶劑的揮發(fā)。4.丙酮有毒性,在使用時,要遠離。 1.取5g干凈的生菜葉,沸水2min,撈出來,冷卻。 2.將冷卻后的生菜葉放在研缽中搗碎,加入等體積的 95%的乙醇,攪拌浸取30min ,過濾,濾渣按照上法再用95%的乙醇浸取3 次,合并4次的浸提液,加入等體積 的石油醚,萃取10min,靜置,充分分層,分出醚相,下層醇相再用石油醚照上層萃取2次,合并3次石油醚萃取液,依次用60%,70%,80%的乙醇醇各洗滌一次最后用離子水洗滌三次。 3.水浴加熱石油醚,使石油醚揮發(fā),得到葉綠素固體 4.葉綠素質量=裝有葉綠素固體的燒杯的質量-空燒杯的質量 葉綠素含量的測定實驗步驟葉綠素含量的測定實驗步驟實驗分析及結果實驗分析及結果綠葉質量:5g 葉綠素干物質的質量:0.985g葉綠素的得率:0.985/5=0.197=19.7% 同比其他方法,這種葉綠素含量測定方法比較方便、準確、速度快、可以用來成為食用色素謝謝觀賞2013年6月3日此課件下載可自行編輯修改,僅供
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