河南農業(yè)大學考研專業(yè)課《現(xiàn)代分子生物學》考試試卷(4086)

1、河南農業(yè)大學考研專業(yè)課現(xiàn)代分子生物學課程試卷（含答案）學_年第 _學期考試類型：（ 閉卷）考試考試時間 ： 90 分鐘年級專業(yè)學號姓名1、分析題（ 5 分，每題5 分）1. 寫出從組織中抽取RNA勺關鍵步驟，并解釋如何判斷 RNA質量。答案：1）從組織中提取 RNA 的步驟如下：將組織在混合氣體中磨碎，每 50 100mg組織加入1mlTRIzol 裂解液溶解樣品,充分吹打混勻。 每 1ml TRIzol 加入 2.0ml氯仿，劇烈震蕩 15s ，室溫放置5min 。 4 C, 10000g 離心 15min,此時 RNA 主要集中在水相中。 將水相轉移至新的離心管中，加入等重量異丙醇,室溫放

2、置10min 。 4C, 10000g 離心 10min,此時可在離心管底部觀察到白色沉淀,即為 RNA 。 用 75 冷勺乙醇洗滌沈淀,475C0,0g 以下,離心 5min ,棄上清。 超凈臺中吹干，加入無 RNase的水溶解。（2）檢測 RNA 質量的方法如下： 凝膠成像：取適量RNA溶液選擇退出電泳緩沖液后，跑瓊脂糖 凝膠電泳，如果 28S 和 18S 條帶明亮、清晰，并且 28S 的亮度在 18S 條帶的兩倍以上，則認為 RNA 的質量是好的。 吸光度檢測：使用紫外分光光度計檢測 RNA樣品在260nm、 280nm 處的吸光度，若兩者的比值在 1.82.0時，可認為RNA純 度良好

3、，蛋白質等其他物質的污染可以接受。解析：2、判斷題（ 55 分，每題 5 分）1. 癌細胞生長旺盛，因而內質網(wǎng)特別發(fā)達。（ ）答案：正確解析：內質網(wǎng)是細胞內除核酸的一系列重要的生物大分子，如蛋白質、 脂類（如甘油三酯） 和糖類合成的基地。癌細胞生長旺盛，可能需要 大量的蛋白質、脂質、糖類等，因而內質網(wǎng)特別更發(fā)達。2. 生物體的部分組織或器官因創(chuàng)傷而丟失時，剩余部分的肌肉、骨骼、皮膚等組織的細胞均能繼續(xù)生長，從而形成與丟失部分形態(tài)和功 能上大致相同的結構，這一過程稱為再生。（） 答案：錯誤 解析：再生是生物體的整體或器官受外力作用發(fā)生創(chuàng)傷而部分丟失， 在剩余功能的基礎上又生長出與丟失部分在形態(tài)與

4、部分上相同的結構， 這一修復過程稱為再生。受到創(chuàng)傷之后，剩余更進一步個別的細胞并 不一定均能繼續(xù)生長。3. SDSPAGE 時，不同大小蛋白質分子的電荷質量比值趨近于相同。 （）答案：正確解析：4. 在原核基因操縱子中都有 CRP位點。（）答案：錯誤解析：色氨酸操縱子無 CRP 位點。5. 真核生物的5S、18S和28S rRNA通常組成一個單位進行轉錄。（）答案：錯誤解析：真核生物 5S rRNA 基因也是成簇排列的，中間被不轉錄區(qū)域隔開，由RNA聚合酶皿轉錄。1618S、5.8S和2628SrRNA基因組 成一個轉錄單位，彼此被間隔區(qū)分開，由 RNA聚合酶I轉錄。利福霉素SV和利福平都是轉

5、錄起始抑制劑而不是 RNA鏈延長的 抑制劑。答案：正確 解析：在RNA聚合酶中，只有帶。因子的全酶才能專一地與 DNA 上的啟動子結合，合成均一的產(chǎn)物，c脂質的作用只是啟動RNA的轉 錄，一旦轉錄開始，就脫離起始復合物，而由核心酶負責 RNA 鏈的延 伸。利福霉素的作用機制是抑制菌體內 RNA聚合酶的活性，從而影 響核糖核酸的合成和蛋白質代謝，導致細菌束絲藻生長繁殖停止而達 到殺菌作用。利福平的作用是與依賴于 DNA的RNA多聚酶的B亞 單位牢固結合，抑制細菌 RNA 的合成，防止該酶與 DNA 連接，從而 阻斷 RNA 轉錄過程，使 DNA 和酵素的合成停止。因此，利福霉素 SV 和利福平的

6、作用都是抑制轉錄起始。6. 在能識別一個細胞的分化以前，有一個預先保證細胞怎樣變化的 時期，這一階段被稱為細胞決定。（ ）答案：正確解析：細胞決定是所稱細胞在發(fā)生可識別的形態(tài)變化之前，就已受到 約束特殊而向特定方向分化， 這時細胞內部已發(fā)生變化，弄清了未來 的發(fā)育命運。7. cDNA文庫是包含有細胞中所有 mRNA因此該文庫能包含細胞所 有的遺傳信息。（ ）答案：錯誤解析： cDNA 文庫不涵蓋有細胞中所有 mRNA ，因此該文庫也不能包 含細胞所有的遺傳信息。 cDNA 文庫只是包含有特定細胞類型和發(fā)育 時期細胞中的表達包涵信息。8. 由于遺傳密碼子的簡并性，一個氨基酸可以有幾種 tRNA但

7、通常只有一種氨酰tRNA合成酶。（）答案：正確解析：許多胺基酸的密碼子的第 1 和第 2 個堿基相同，只有第 3 個堿 基不同，即為核苷酸的簡并性。由于遺傳密碼子的簡并性，一個氨基 酸可以有幾種 tRNA ，但有時只有一種氨酰 tRNA 合成酶。9. 在雜交之前先用凝膠電泳把粗提取物中的 RNA或 DNA分子進行 分離，假定雜交后只有一種或少數(shù)幾種大小的片段被探針雜交上了， 就能肯定這種雜交是特異性的。（ ）答案：正確解析：在雜交之前先用凝膠電泳把粗提取物中中曾的 RNA 或 DNA 分子進行分離，分離為不同大小的片段。假定雜交后只有舉例來說一種 或少數(shù)幾種大小的片段被探針雜交上了，就能肯定這

8、種雜交是特異性 多態(tài)性的。10. DNA 是生物界中唯一的遺傳物質。（ ）答案：錯誤解析： RNA 也可以做遺傳物質。3 、名詞解釋（ 50 分，每題 5 分）1. SD 序列 揚州大學 2019 研答案：SD序列指存在于原核生物起始密碼子 AUG上游712個殘基 處的一種47個核苷酸的保守片段。它與16SrRNA3 '端反向互補，SD 序列幫助招募核糖體 RNA ，并將核糖體比對并結合到信使 RNA 的起始密碼子，從而開始蛋白合成。一旦被招募， tRNA 可以按照密 碼子的指令順序添加氨基酸，從翻譯起始位點向下游傳輸數(shù)據(jù)進行蛋 白質合成。解析：空2. 基因組 答案：基因組是指生物體內

9、遺傳信息的集合，是植物某個特定物種細 胞內全部 DNA 分子的總和。包括核中的染色體 DNA 和線粒體、葉綠 體等亞細胞器中曾的 DNA ?；蚪M大小與原核生物和低等真核生物的 形態(tài)復雜性呈正相關，在軟體動物和其他高等真核生物中所，由于重 復 DNA 的存在，基因組大小不再與生物的絕不形態(tài)復雜性呈正相關。解析：空3. 核酸原位雜交 答案：核酸原位雜交是指用標記了的已知序列的核苷酸片段作為探針， 通過雜交直接在組織肉片、細胞涂片、培養(yǎng)細胞爬片、或分裂中期染 色體上檢測和定位同一個特定的靶核苷酸存在的靶技術。核酸原位雜 交的生物化學基礎是核酸的變性、復性和堿基互補配對結合。核酸原 位雜交有 DNA

10、RNA 雜交、 DNADNA 雜交和 RNARNA 雜交等。解析：空整合感染答案：整合感染是指某些 DNA 在感染復制過程個別中可以將自身全 部或部分 DNA 片段整合到宿主蛋白質 DNA 中，并隨宿主細胞的復制 遺傳給下一代的感染方式。逆轉錄病毒的 RNA 反向轉錄產(chǎn)物 cDNA 即前病毒也可以整合到宿主的 DNA 中的感染，這種感染參與病毒致 腫瘤機制。解析：空4. G 蛋白答案：G蛋白又稱三聚體GTP結合調節(jié)蛋白，是指由a、B、迂個 亞基組成，能與 GDP 或 GTP 結合的外周蛋白。以三聚體存在并與 GDP結合者為即非活化型，位于細胞膜。當 a亞基與GTP結合并導 致By二聚體脫落時則

11、變成活化型，神經(jīng)遞質可作用于膜受體的不同性 激素，通過不同的 G 蛋白負面影響介導影響質膜上某些離子通道或酶 的活性，繼而影響細胞內第二信使?jié)舛群秃罄m(xù)的生物學效應。解析：空5. 癌基因答案：癌基因是朊病毒指體外能引起細胞轉化，在體內繼發(fā)性腫瘤的 基因，它是細胞內遺傳物質動物細胞的組成成分。在正常情況下，這 些基因處于靜止或低表達狀態(tài)，低毒性對高負荷細胞不僅無害而且不 可缺少。癌基因激活的方式包括表型點突變、基因擴增、染色體重排、 病毒感染等。癌基因激活的失活結果是其數(shù)目增多或功能增強，使細胞過度增殖及獲得其他惡性特征，從而形成惡性腫瘤。癌基因主要分 病毒癌基因和細胞轉化基因。解析：空6. 原位

12、雜交技術（ ISH）答案：原位雜交技術是指運用有分子單鏈之間核酸互補的堿基序列， 把有放射性或非放射性的外源核酸（即探針）和組織、蛋白或染色體 上待測 DNA 或 RNA 互補配對，大分子結合成專一的核酸雜交分子， 經(jīng)一定的檢測手段把待測核酸在組織、細胞或染色體上等位基因的位 置顯示出來的一種生物技術。原位雜交技術通常可分為 RNA 原位雜交 和染色體原位雜交兩大類。解析：空7. 外顯子 揚州大學 2019研答案：外顯子也表示表達序列，是指一個基因表達為多肽鏈的部分， 是指在 RNA 剪接后仍會被保存下來，并可在蛋白質生物合成過程中同 被表達為蛋白質蛋白質的基因序列。外顯子最初是既存在于最初的

13、轉 錄中間體中，也存在于成熟的 RNA 分子中的核苷酸序列。所有子代的 外顯子一同組成了遺傳信息，該信息會體現(xiàn)在酶上。解析：空8. 滾環(huán)復制（ rolling circle replication ） 答案：滾環(huán)復制是單向復制的一種特殊方式，是指 DNA 的合成由對 正鏈原點的專一性切割開始，所形成的自由 5 '端被從雙鏈環(huán)中置換出 來并為多肽DNA結合蛋白所覆蓋，使其3 ' 0端在DNA聚合酶的作 用下不斷延伸。在這個過程中，單鏈尾巴的延伸與雙鏈 DNA 的繞軸 旋轉同步。滾環(huán)復制是噬菌體中所常見的 DNA 復制方式。解析：空9. Probe 寧波大學 2019 研答案： P

14、robe 的中文名稱是超聲波，即核酸探針，是指一段帶有檢測 標記、且順序已知的、與目的基因互補的核酸序列。當將探針與樣品 雜交時，探針和與其互補的核酸（ DNA 或 RNA ）序列通過氫鍵緊密 相連，隨后未被雜交的多余探針被無用洗去。最后，根據(jù)質譜儀的標 記物種類，可成功進行放射自顯影、熒光發(fā)光、酶聯(lián)化學發(fā)光等方法 來氨基酸判斷樣品中是否或者何右邊含有被測序列。解析：空4、填空題（ 40 分，每題 5 分）1. RNA 是由核糖核苷酸通過鍵連接而成的一種多聚體。答案：磷酸二酯解析：RNA是由核糖核苷酸通過3 '羥基和5的磷酸基團形成3 ' 5 '磷酸 二酯鍵。2. 原核

15、生物細胞中DNA甲基化位點主要是在序列上，而真核生物細 胞核DNA的甲基化位點則主要是在序列上。答案： GATC|CG 解析： DNA 甲基化為 DNA 化學修飾的一種形式，能夠在不改變 DNA 序列的前提下，改變遺傳表現(xiàn)。通常指在 DNA 甲基化轉移酶的作用下， 在基因組 CpG 二核苷酸的胞嘧啶 5 碳位共價鍵結合一個甲基基團。原 核生物細胞中 DNA 甲基化位點主要是在 GATC 序列上，而真核生物 細胞核 DNA 的甲基化位點則主要是在 CG 序列上。3. DNA復制時的RNA引物是由的活性切除的。答案：DNA聚合酶I |53 '外切核酸酶解析：DNA聚合酶I具有5 7 3 &

16、#39;外切核酸酶活性，可以切除NA引 物。4. 大腸桿菌乳糖操縱子包括三個結構基因：、 lacY 和 lacA ，以及、 操縱基因和。答案： lacZ| 啟動子|阻遏子解析：大腸桿菌乳糖操縱子三個結構基因：Z （編碼B半乳糖苷酶）、Y （編碼B半乳糖苷酶透過酶）、A （編碼B半乳糖苷乙酰轉移酶），以及啟動子（P）、操縱基因（0）、阻遏子（I）。5. 大腸桿菌在含有乳糖和葡萄糖的培養(yǎng)基中，只利用為碳源，這是 因為位點的正調控開關被關閉。答案：葡萄糖 |乳糖操縱子啟動子區(qū) CRPcAMP 結合位點解析：在大腸桿菌中，在有葡萄糖存在的市場條件下，其他碳源相關 基因表達的操縱子如乳糖操縱子的基因表達

17、受葡萄糖中間代謝產(chǎn)物的 抑制，是代謝物阻抑。葡萄糖的代謝中間產(chǎn)物會間接降低細胞內腺苷 酸環(huán)化酶的活性，導致胞內 cAMP 的含量降低，與它相結合的正宏觀 調控蛋白（CRP）因找不到配體而不能形成復合物（CRPcAMP ），該 酵素是激活乳糖操縱子的重要組成部分，細菌對此復合物的資金需求 是獨立的，與阻遏體系無關，轉錄必須有此復合物結合在 DNA 的啟動 子區(qū)域上。6. 一個兩股鏈都帶放射性的 DNA分子，在無放射性標記物的體系中， 經(jīng)兩次復制，其產(chǎn)生的子代 DNA分子中，有個DNA分子不帶放射性。答案：2解析：DNA復制為半不保留復制。一次復制后，子代產(chǎn)物中幾條鏈中 兩條中間體帶有放射性，兩條

18、不帶。經(jīng)過兩次復制，產(chǎn)生的八條幾條 鏈中只有兩條帶有放射性元素。因此，由 2 個 DNA 分子不帶放射性。7. 在切口移位標記探針時，DNasel處理DNA的溫度應控制在，溫度 過高會使，不利于標記。答案：1416 C |DNase I的活性增強、導致切口過多、使DNA探 針的長度變短解析：薄片平移法是合成探針標記的方法之一，即利用微量的 DNasel 使待標記的雙鏈 DNA 氫原子產(chǎn)生若干切口，然后利用 DNasel 的 53 '外切酶活性從切口的端除去核苷酸；同時DNasel還有53 '的聚合酶活性可將反應體系中多中所的核苷酸底物連接到切口的3 '羥基末端。由于在切

19、去核苷酸的同時又在切口的 3 '端補上核苷酸，從而 使切口沿著 DNA 鏈移動，此時若反應體系中含有標記的核苷酸，它們 就會摻入到新合成的鏈中，獲得帶有標記的 DNA 探針。在此投資過程 中需要注意DNasel處理DNA的溫度應控制在1416 C,溫度過高 會使DNase I的活性增強、導致切口過多、使 DNA探針的長度變短, 不利于標記。8. DNA 通過分子折疊形成的三股螺旋叫，它存在于區(qū)，因而具有重 要的生物學意義。答案： HDNA| 基因的調控區(qū)解析：5、簡答題（ 35 分，每題 5 分）1. 簡述翻譯的主要過程及特點。 武漢科技大學 2019 研答案：（1 ）翻譯的主要處理過

20、程如下： 起始：起始核糖體與mRNA結合并與氨酰tRNA形成翻譯起 始復合物。 延長：每加一個氨基酸經(jīng)過位次、成肽和轉位，使肽鏈從N端向 C 端延長。 終止：當mRNA經(jīng)常出現(xiàn)分子中的終止密碼子出現(xiàn)后，多肽鏈 合成停止，肽鏈從肽酰 tRNA 中釋出， mRNA 、核蛋白體等分離。（2 ）翻譯的特點如下： 每生成一個肽鍵，要消耗2個高能磷酸鍵。 氨基酸活化要消耗 2 個高能磷酸鍵。 整個過程可能多于 4 個高能磷酸鍵。解析：空2. 簡述RNA的種類和各自的生理功能 答案： RNA 的種類及各自的性腺如下表所示。表 RNA 的種類及新陳代謝解析：空3. 什么是比較基因組學？簡述它們在遺傳學中的運用

21、。答案：（1）比較基因組學是指基于基因組圖譜和測序基礎上，對已知的基因和基因組結構進行比較，來了解抗原的功能、表達機理和 物種進化的學科。（2）比較基因組學在遺傳學中的應用：利用模擬生物基因組與人 類基因組之間編碼順序上和結構上的同源性，克隆人類細胞學說，無 腺揭示基因功能和疾病分子機制，闡明物種變異關系，及線粒體的內 在結構。解析：空4. 簡述蛋白質的生物合成過程。 暨南大學 2018研答案： 蛋白質生物合成是蛋白質最為復雜的活動之一。參與細胞 內蛋白質生物合成的物質除氨基酸外，還需要 mRNA 作為模板、 tRNA 作為特異的氨基酸“搬運工具”、核糖體作為蛋白質合成的裝 配場所、有關的酶與

22、蛋白質因子參與反應、 ATP 或 GTP 提供能量。翻 譯過程包括起始、延長和終止三個發(fā)展階段。生物合成整個過程如下：1）起始：該過程是指 mRNA 、起始氨基酰 tRNA 分別與核糖體結合而形成翻譯起始復合物(2) 延長：翻譯起始復合物已經(jīng)形成后，核糖體從 mRNA的5 ' 端向3 '端移動，依據(jù)密碼子順序，從N端開始向C端合成多肽鏈。這 是一個在核糖體上重復進行的進位、成肽和轉位的循環(huán)過程，每完成 1 次，肽鏈上即可增加 1 個氨基酸殘基。該過程也被稱為核糖體循環(huán)。 這一過程除了需要 mRNA 、tRNA 和核糖體外，還需要有數(shù)種延長因 子以及 GTP 等參與。( 3 )終

23、止：終止密碼子沒有被任何氨基酰 tRNA 識別，釋放因子 RF 能識別終止密碼子而進入 A 位，這一識別過程需要水解 GTP。 RF 的結合可觸發(fā)核糖體構象分子結構改變，將肽基轉移酶活性轉變?yōu)轷?酶活性，水解組氨酸與結合在 P 位的 tRNA 之間的酯鍵，釋出合成的 肽，促使 mRNA 、tRNA 及 RF 從核糖體脫離。 mRNA 模板和各種蛋 白質因子、其他組分都可被再次利用。解析：空5. 簡述染色質免疫沉淀技術( chromatin immunoprecipitation ) 的原理和應用。答案： 染色質利用計算機免疫沉淀技術是指研究體內蛋白質和 DNA 相互作用的一種技術。它運用抗原抗

24、體反應的特異性，可以真實 地體內蛋白因子和基因組 DNA 結合的狀況。( 1)染色質免疫沉淀技術的基本原理在節(jié)律狀態(tài)下把細胞內的 DNA 與蛋白質合成物在一起，通過超 聲或酶處理將染色質切為小片段后，利用抗原抗體的特異性識別反應， 將與目的蛋白相結合的 DNA 片段沉淀下來，固相通過對目的片段的 色譜法與檢測，從而取得蛋白質與 DNA 相互作用的信息。染色質免 疫沉淀技術一般包括細胞固定，染色質斷裂，染色質免疫沉淀，交聯(lián) 反應的逆轉， DNA 的純化，和 DNA 的鑒定。（2）染色質免疫沉淀技術的應用 檢測體內酯因子和 DNA 的動態(tài)作用。 CHIP 和體內足跡重寄生結合，用于尋找反式因子的體

25、細胞結合 位點。 組蛋白的各種共價修飾和基因表達的關系。 染色質免疫沉淀技術和其他方法的結合，擴大了其應用范圍，如 CHIP 和基因芯片相結合建立的 CHIPONCHIP 方法已廣泛用于特 定反式因子靶基因的高通量篩選。 RNACHIP 用于研究 RNA 在基因表達調控中會的作用。解析：空6. 在一定條件下，運用基因敲除技術敲除掉某個基因并不一定就能 獲知該基因的功能，試分析其原因。答案： 基因敲除技術又稱基因打靶，是指通過一定的途徑使機體 特定的基因失活或缺失的技術。敲除掉某個基因并不一定就能獲知該 基因的功能，可能的原因如下：（1）許多基因在功能上是高速緩存冗余的，敲除掉一個在功能上 緩存

26、的基因，并不能辨認造成容易識別的表型，因為基因家族的其他 成員可以提供同樣的功能。（2）現(xiàn)有的技術實驗技術和工具無法檢測其功能。（3）許多基因組在細胞分裂、生長和發(fā)育過程中均發(fā)揮重要作用， 如稀薟擬南芥有10002000個必需基因，敲除這些基因會配子體或 早期胚的致死性，因而無法獲得必需基因的純合突變體，也就沒有對 必需蛋白基因的純合突變體的表型進行評價。（4）該基因在功能上“無用”或作用很小，以至于難于獲知其具 體功能。解析：空7. 重組DNA（基因工程）的主要步驟。答案： 重組 DNA 又稱基因工程，是指在惡意軟件體外將核酸核 酸插入病毒、質?；蚱渌d體分子中所，行成遺傳物質的重新組合，

27、使之進入原先不能這類分子的寄主細胞內并核酸進行持續(xù)穩(wěn)定的繁殖 和表達的過程。重組 DNA 的主要包括步驟主要包括包括以下 4 個基本步驟： （1 ）提取目的基因：通過一定的方法得到需要進行的目的 DNA ， 常用的方法有人工合成法、基因組文庫法和 cDNA 文庫法。（2）目的基因與運載體融為一體：通過限制性內切酶對含目標片 段的 DNA 和載體進行切割后，通過 DNA 連接酶進行連接，完成基因 的重組計劃過程。（ 3 ）將目的基因導入應受體細胞：將人工重組的 DNA 分子導入 能成功進行正常復制的寄主細胞，從而隨著寄主細胞的分裂而瓦解需 要進行復制。（4）目的基因的檢測和表達：目的基因導入受體

28、細胞后，檢測與 鑒定其是否可以穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性。受體細胞必須表現(xiàn)出特 定的性狀，才能說明目的基因完成了傳達過程。解析：空6、論述題（ 20 分，每題 5 分）1. 如果想讓人的胰島素基因在細菌中表達生產(chǎn)人胰島素，你認為至 少應當滿足哪些條件？答案： 欲在細菌中喚起生產(chǎn)人的胰島素，需要將人的胰島素基因 克隆到一個細菌表達載體上，然后誘導表達，分離純化獲得蛋白質。 在克隆整個過程中上列需要滿足以下條件：（1）將胰島素基因的編碼序列置于含有核糖體結合位點和起始密 碼子 ATG 的細菌強啟動子的下游，因為細菌的 RNA 聚合酶不能識別 真核生物的啟動子；（2 ）使用胰島素基因的 cDNA 編碼

29、序列，因為大多數(shù)真核抗原 大多數(shù)有內含子，轉錄后被切除形成成熟 mRNA ，而細菌細胞動手術 不能切除真核基因的內含子；（3）選用合適的突變型宿主，如蛋白酶缺失的菌株，防范產(chǎn)生真 核的真核蛋白質產(chǎn)物被細菌的蛋白酶所識別和降解；（ 4 ）人的胰島素由 A 、B 兩個肽鏈組成，是由胰島素原（無活性） 切除連接 A 鏈和 B 鏈的 C 肽后形成有活性的胰島素?？梢苑謩e克隆 A 、 B 兩鏈的編碼序列，在體外加工已經(jīng)形成二硫鍵；或者克隆胰島素原 的編碼序列，在體外切除 C 肽，加工而成。解析：空2. 試述DNA的主要理化性質。答案： DNA 的主要理化性質如下：（1）核酸的人帶電荷性質 無論是 DNA

30、 還是 RNA ，核苷酸鏈內既有酸性的基又有堿性的 含氮雜環(huán)堿基，因此核酸是兩性酸堿。 由于磷酸舒爾酸性較強，核酸通常學業(yè)成績?yōu)樗嵝浴?在中性或堿性溶液中其，核酸帶負電荷，在外加電場作用下向 電極移動。 核酸的人帶電荷性質可用于分離分子質量大小不同的核酸。帶 負電荷的電荷核酸與帶正電荷的金屬離子成鹽，在有乙醇或異丙醇存 在時核酸即可從溶液中沉淀析出。 常用氯化鈉、乙酸鈉、乙酸鉀或乙酸銨等鹽溶液來制備核酸。（2）核酸的高分子性質 核酸是陰離子質量很大的高分子化合物，因此核酸溶液具有較 大的接觸面。 核酸溶液的黏性與分子的不對稱性有關，分子不對稱性愈大， 其黏度也就愈大，不規(guī)則原子比球形分子溶液的

31、黏度大，線性分子溶 液的粘度更大。 DNA 分子的長度與其直徑半徑之比可達 107 ，因此極稀的 DNA 溶液也有較大的表面張力。 RNA 溶液的黏度較 DNA 小。當核酸溶液在受熱或酸堿等因素 作用下發(fā)生變性時，分子不對稱性變小，溶液黏度下降。因此可用黏 度測定作為 DNA 變性的指標。（3）核酸的紫外吸收 核酸分子的堿基中含有的共軛雙鍵具有吸收紫外線的性質。 蛋白質的最大去除波長為 280nm ，而核酸的最大紫外吸收波長 為 260nm 。 利用核酸的紫外吸收特性可借助鑒別核酸樣品中的蛋白質雜質， 對核酸進行定性、定量分析。也可以利用核酸的分子紫外吸收受最大 中間結構影響極大的特性研究核酸

32、的變性。（4）核酸的變性和復性 核酸的變性是指在極端的 pH 和受熱條件下核酸分子中的氫鍵 斷裂、雙螺旋結構解開的不良現(xiàn)象。因為變性時堿基對之間的氫鍵斷 開，積存力也受到破壞，但不伴有共價鍵的斷裂，所以變性后的核酸 在 260nm 的光吸收增強，稱為增色效應。 變性核酸經(jīng)退火恢復原狀的過程稱為變性 DNA 的復性。一定 條件下才核酸的變性是可逆的。熱變性的 DNA 溶液慢慢冷卻，可使 解開的兩條互補單鏈重新直線型締合而形成雙螺旋結構，即退火。如 果將熱變性的 DNA 溶液驟然冷卻至低溫，則變性的 DNA 很難復性。 伴隨復性會出現(xiàn)核酸溶液紫外光吸收減弱的現(xiàn)象，稱為核酸的減色效 應。解析：空試述

33、真核生物轉錄水平的調控機制。 武漢科技大學 2019研答案： 真核生物在轉錄水平的調控主要核酸是通過反式作用因子、 順式作用元件和 RNA 聚合酶的相互作用來完成的，主要是反式作用因 子結合順式作用元件后影響核糖體起始復合物的形成過程。（1）核糖體起始復合物的形成真核生物 RNA 聚合酶識別的是由通用轉錄因子與 DNA 形成的蛋 白質 DNA 復合物，只有當一個或多個轉錄因子結合緊密結合到 DNA 上，形成有功能的啟動子，才能被 RNA 引物所識別并結合。核糖體起始復合物的形成過程為：結合FTATA區(qū)；RNA聚合酶識別并結合TF II DDNA復合物；促進或抑制核糖體 起始復合物的形成。（2）

34、反式作用因子 一般兼具三個功能域（DNA識別結合域、轉錄活性域和結合其 他蛋白結合域）。 能識別并結合上游調控區(qū)中的作用元件。 對基因的表達有正性或負性調控作用。（3）轉錄起始的調控反式積極作用因子的活性調節(jié)a .表達式調節(jié)：反式作用因子合成出來就具有活性。b 共價修飾：磷酸化和去磷酸化，糖基化。c.配體結合：許多激素受體是反式作用因子。d .蛋白質與蛋白質相互作用：蛋白質與蛋白質復合物的解離與形成。反式作用因子與順式作用元件的結合反式作用因子被激活后才，需先識別并結合上游啟動元件和增強 子實施中的保守性序列，對基因轉錄起調節(jié)作用。 反式作用因子的作用手法：成環(huán)、扭曲、滑動。 反式作用獨立式因

35、子的組合式調控作用 每一種反式作用結合順式作用元件后雖然可以發(fā)揮促進或抑制作用，但反式作用因子對基因調控不是由單一因子敲定的而是塵埃落定 幾種因子組合發(fā)揮特定的作用。解析：空3. DNA 分子標記有哪些種類？答案： DNA 分子標記有以下種類：（1）RFLP 標記： DNA 某一位點上的變異有可能引起該位點特 異性的限制性內切酶識別位點的改變，包括原有位點的消失或出現(xiàn)和 新的酶切位點，致使酶切片段長度隨之加之發(fā)生變化。這種變化引起 的多態(tài)現(xiàn)象即為限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）。對RFLP的檢測主 要是用 Southern 雜交的方法進行，即利用限制善用酶酶解及凝膠電 泳分離不同生物體的 DN

36、A 分子，然后用經(jīng)標記的特異 DNA 探針與之 雜交，通過發(fā)射自顯影或非同位素顯色技術來闡述 DNA 的多態(tài)性。（ 2） RAPD 標記：隨機擴增多態(tài)性 DNA ，用隨機短引物（人工 合成的六核苷酸）進行 DNA 的 PCR 擴增。所擴增的 DNA 區(qū)段是事 先未知的，具有舉例來說和任意性，因此隨機引物 PCR 標記技術可用 于對任何未知基因組的研究。3） ISSR 標記：簡單序列重復區(qū)間擴增多態(tài)性。利用基因組中常出現(xiàn)的 SSR 本身設計引物，無需預先克隆和測序（4 ）SSR 標記：簡單重復序列端粒酶。又稱微衛(wèi)星 DNA 多態(tài)性， 即由二核苷酸，三核苷酸或四核苷酸串聯(lián)重復的左右拷貝數(shù)目不等而

37、出現(xiàn)的多態(tài)現(xiàn)象。（5）STS 標記：序列標定位置。染色體上所位置已定的、核苷酸 序列已知的、且在基因組中只有一份拷貝的 DNA 短片段，一般長 200500bp 。STS標記是根據(jù)單拷貝的DNA片段兩端的序列，設 計一對特異引物，經(jīng) PCR 擴增基因組 DNA 而產(chǎn)生的一段長度為幾百 bp 的特異序列。（6）AFLP 標記：擴增片段長度特異性。通過對基因組 DNA 酵 素切片段的段選擇性擴增來檢測 DNA 酶切片段長度的多態(tài)性。 AFLP 揭示的 DNA 多態(tài)性是酶切位點和其后的選擇性的變異。（7 ）CAPS 標記：是特異引物 PCR 與限制性酶切相結合而產(chǎn)生 的一種DNA標記，當SCAR或S

38、TS的特異擴增產(chǎn)物的電泳譜帶不表 現(xiàn)多態(tài)性時，一種補救辦法就是第二種用限制性內切酶對擴增產(chǎn)物進 行酶切，然后通過瓊脂糖或聚丙烯胺凝膠電泳檢測其多態(tài)性，這種多 態(tài)性稱為 CAPS 標記。它揭示的是特異 PCR 產(chǎn)物 DNA 序列鼻花內則 限制性酶切位點變異的信息，也表現(xiàn)為限制性片段長度的多態(tài)性。（8）SNP 標記：單核苷酸多態(tài)性。不同個體基因組 DNA 序列 同一位置上的單個多肽的差別。其比較的不是 DNA 的片段長度，而 是相同堿基長度里的單個堿基的差別。解析：空7、選擇題（ 12 分，每題 1 分）1. 下列哪一種蛋白質或酶最不可能是癌基因的編碼產(chǎn)物？（ ）A 蛋白質磷酸酶B 蛋白質磷酸激酶

39、C 轉錄因子D. GTP 酶答案：A解析：蛋白磷酸酶是具有催化已經(jīng)磷酸化的蛋白質分子發(fā)生去磷酸化反應的一類酶分子，與蛋白激酶相對應存在，共同構成了磷酸化和磷酸化這一重要的蛋白質活性的開關系統(tǒng)。癌基因編碼的產(chǎn)物大多無需 去磷酸化，因此答案選。2. 細胞分化時不發(fā)生（ ）。A. DNA去甲基化B. 組蛋白乙?；疌. 重編程（ reprogramming ）D. 基因沉默答案： C解析：3. DNA 變性是指（ ）。 浙江海洋大學 2019研A 多核苷酸鏈解聚B 互補堿基之間氫鍵斷裂C 分子中磷酸二酯鍵斷裂D. DNA分子由超螺旋-雙螺旋答案：B解析：4. 根據(jù)構建方法的不同，基因文庫可分為基因組文庫、cDNA文庫等。下列文庫中，哪項屬于cDNA文庫？（）A. MAC文庫B. BAC文庫C. 扣除文庫D. YAC文庫答案： C解析： cN 文庫是指某生物某一發(fā)育時期所轉錄的 mRN 全部經(jīng)反轉錄 已經(jīng)形成的 cN 片段與某種載體連接而形成的催生州列的集合?？鄢?庫又稱為德圣茹文庫，是反映不同組織和細胞或同一細胞在不同功用 狀態(tài)下，基因表達差異的 cN 文庫。因此答案選。5. cAMP與CRP吉合形成復合物cAMPCR介導的正性調節(jié)發(fā)生在（ ）。A. 沒有葡