瓦窯溝中學食用菌栽培實驗教案

1、第一章 食用菌概述(第 1-2 學時)第一節(jié) 食用菌概念 第二節(jié) 發(fā)展食用菌生產(chǎn)的意義 教學目標 使學生了解食用菌的概念和資源狀況，人工栽培食用菌種類，栽培歷史和目前產(chǎn)業(yè)狀況；了解食用菌的食用價值、藥用價值和經(jīng)濟價值；掌握食用菌生物學效率的基本概念和計算方法；發(fā)展食用菌產(chǎn)業(yè)的意義。 教學方法與手段 啟發(fā)式、講授式課堂教學方法 利用多媒體教學 教學重點:發(fā)展食用菌生產(chǎn)的意義 食用菌生物學轉(zhuǎn)化率的概念 教學難點:食、藥用價值 課程設(shè)計 組織教學： 第一次課要了解班級基本情況，點名，要求做好本課學習準備 導入新課： 介紹本課與本專業(yè)的關(guān)系，培養(yǎng)目標，學習要求 講課內(nèi)容： 第一節(jié) 食用菌概念 一、食用

2、菌概念 食用菌是指人們可以食用的大型真菌的總稱。 具體指大型真菌中能形成具有 膠質(zhì) 或 肉質(zhì) 的子實體或菌核組織并能食用或藥用的菌類。菇、菌、蕈、蘑、耳 二、食用菌栽培歷史和現(xiàn)狀 1 栽培歷史 介紹我國國食用菌栽培歷史 目前進行較大面積栽培的約 20 多種。如平菇、香菇、雙孢蘑菇、木耳、銀耳、草菇、金針菇等為普遍栽培的種類。 2 現(xiàn)狀 生產(chǎn)現(xiàn)狀 菌種優(yōu)化、專業(yè)化生產(chǎn)，生產(chǎn)過程機械化、自動化，反季節(jié)栽培、周年生產(chǎn)，人工控制光、溫、濕等因子，代用料栽培為主要形式 經(jīng)營現(xiàn)狀 龍頭企業(yè)帶動型，主導產(chǎn)業(yè)帶動型，市場帶動型 第二節(jié) 發(fā)展食用菌生產(chǎn)的意義 一、發(fā)展食用菌生產(chǎn)的意義 （一）為人類提供理想的健康

3、食品 1 食用價值 食用菌都具有高蛋白、低脂肪、低膽固醇的特點 2 藥用價值 食用菌中具有的多糖類和蛋白多糖及抗生素，能抑制腫瘤生長，增強機體免疫功能。 3 經(jīng)濟價值 栽培原料來源廣泛，生產(chǎn)設(shè)備簡單，投資少。 生物學效率高 80%-120% ，生物學轉(zhuǎn)化率 = 子實體鮮重 / 栽培基質(zhì)干重 *100% 食用菌生長周期短，見效快。 （二）充分利用自然資源變廢為寶 二、食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展前景 介紹我國和世界食用菌產(chǎn)業(yè)狀況和市場需求情況 概括總結(jié)： 學習的內(nèi)容可以概括為兩大方面：一是基本知識部分，如食用菌栽培歷史、生產(chǎn)經(jīng)營狀況、栽培意義和發(fā)展前景等；二是基本理論部分，即食用菌的概念，生物學轉(zhuǎn)化率等。 知

4、識拓展： 查閱香菇、靈芝的藥用價值 利用利用網(wǎng)絡(luò)資源了解食用菌發(fā)展?jié)摿?思考練習 1 什么是食用菌？ 2 為什么說食用食用菌有利于人身健康？ 3 目前人工栽培的食用菌有哪些種？ 4 你了解目前食用菌產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)狀嗎？ 5 我省生產(chǎn)食用菌有哪些優(yōu)勢？ 第二章食用菌生物學基礎(chǔ)(第 3-4 學時) 第一節(jié) 食用菌的形態(tài)與分類 教學目標 使學生了解食用菌形態(tài)結(jié)構(gòu)，菌絲體和子實體的功能和發(fā)育部位；掌握菌絲生長發(fā)育規(guī)律，菌絲結(jié)構(gòu)，熟練掌握初生菌絲和次生菌絲的主要區(qū)別；了解食用菌在生物界中的分類地位。 教學方法與手段 啟發(fā)式、講授式課堂教學方法 利用多媒體教學 教學重點:菌絲體和子實體的功能，菌絲結(jié)構(gòu)，初生菌絲

5、和次生菌絲的主要特征。 教學難點:孢子萌發(fā)生長，菌絲增殖過程。 課程設(shè)計 組織教學：抽查學生出勤情況，組織課堂紀律，點擊本次課主題 復習提問：什么是食用菌？有什么食用價值和藥用價值？ 導入新課：以啟發(fā)式方法，設(shè)問，導入關(guān)于食用菌形態(tài)、功能的內(nèi)容 講課內(nèi)容： 一、食用菌形態(tài) 1. 菌絲體的形態(tài)、功能介紹初生菌絲、次生菌絲及鎖狀聯(lián)合結(jié)構(gòu) 具有分解、貯存、運輸功能。分布基質(zhì)內(nèi) 2. 子實體形態(tài)、功能 介紹菌蓋、菌褶、菌柄、菌環(huán)、菌托 具有食用、貯存、繁殖功能。分布基質(zhì)外，子實體的形態(tài)、大小、質(zhì)地等，因種類不同而異 3. 菌絲的組織體 介紹菌索、菌核、菌絲束、菌膜和子座的形態(tài)、特點 二、食用菌的分類

6、介紹食用菌在生物中的分類地位，強調(diào)食用菌是屬于子囊菌亞門和擔子菌亞門的菌類 簡單介紹食用菌的種類 絕大多數(shù)食用菌和廣泛栽培的食用菌都是擔子菌，在我國的 40 個科，大致可分為四大類群，即耳類、非褶菌類、傘菌類和腹菌類。少數(shù)食用菌屬于子囊菌，分別屬于 6 個科。 概括總結(jié)： 食用菌菌絲體（基質(zhì)內(nèi)，有分解、貯存、運輸功能） 單核菌絲、雙核菌絲 鎖狀聯(lián)合 子實體（基質(zhì)外，有食用、貯存、繁殖功能） 菌蓋、菌褶、菌柄、菌環(huán)、菌托 知識拓展：利用課余時間到實驗室利用高倍顯微鏡觀察食用菌菌絲體 思考練習 1. 菌絲體、菌絲組織體、子實體有什么功能？ 2. 什么是初生菌絲和次生菌絲？兩者有什么區(qū)別？ 3. 了

7、解食用菌在生物界中的分類地位。 實踐活動 課余時間到食用菌生產(chǎn)基地觀察子實體的主要特征 第二章食用菌生物學基礎(chǔ) 基本技能訓練(第 5-6 學時實踐課)實訓一 食用菌菌絲形態(tài)觀察 常用儀器設(shè)備使用 教學目標 通過本次實訓，使學生掌握簡易菌絲徒手切片的制片方法，認識菌絲形態(tài)，掌握食用菌菌絲的基本特征，能夠區(qū)別于其它真菌。 教學方法與 手段 實驗 實訓 教學重點: 菌絲宏觀形態(tài)和特征的觀察 教學難點: 菌絲微觀形態(tài)觀察 課程設(shè)計 組織教學：點名掌握學生出勤情況，規(guī)范實驗室紀律，操作前準備 復習提問：食用菌菌絲體主要特征？ 講述內(nèi)容： 一、講解目的要求 菌絲形態(tài)觀察的重要性，實驗要求 二、材料用品準備

8、 三、顯微鏡調(diào)節(jié)方法 演示調(diào)節(jié)方法 四、講解本次實驗的操作規(guī)程 五、開始操作（按照實訓指導進行操作） 操作內(nèi)容： （一）食用菌菌絲形態(tài)觀察 1. 制片 2. 顯微鏡觀察 3. 繪制草圖 （二）常用儀器設(shè)備使用：學習高壓滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫箱的使用 參觀實驗室并介紹各種實驗設(shè)備和設(shè)施的結(jié)構(gòu)及功能， 概括總結(jié)：要求在顯微鏡下能清楚地看到次生菌絲的鎖狀聯(lián)合結(jié)構(gòu)，對于菌絲過密而看不清的，要求重做。草圖畫在實訓手冊上。 掌握高壓滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫箱的使用 操作練習：超凈工作臺使用，恒溫箱溫度調(diào)節(jié)，熟悉高壓滅菌鍋各部件 課前準備 實驗中的菌絲需要提前 7 天培養(yǎng)好。事先做平板培養(yǎng)基，在無菌條件下

9、，以無菌操作規(guī)程插入蓋玻片，接入平菇母種， 24 下培養(yǎng) 課后作業(yè) 完成實訓報告，內(nèi)容要求：實驗題目、目的、方法原理、操作程序、結(jié)果或結(jié)論、改進意見 思考練習 1 在顯微鏡下看到的菌絲是什么樣的？是擴大多少倍的？ 2 為什么見空氣后菌絲就會萎縮？ 3 應(yīng)用高壓滅菌鍋應(yīng)掌握哪幾個步驟？ 第二章食用菌生物學基礎(chǔ)(第 7-8 學時)授課題目 第二節(jié) 食用菌的營養(yǎng)生理 第三節(jié) 食用菌理化環(huán)境 教學目標 使學生掌握食用菌的營養(yǎng)及其生長過程中與生態(tài)因子間的關(guān)系；食用菌生長發(fā)育中對生態(tài)環(huán)境的要求，控制適宜環(huán)境的方法措施。 教學方法與手段 啟發(fā)式、講授式課堂教學方法 利用多媒體教學 教學重點:食用菌營養(yǎng)要求和

10、生態(tài)環(huán)境要求 教學難點:營養(yǎng)生理，食用菌的 C/N 課程設(shè)計 組織教學：調(diào)查學生出勤情況，組織課堂紀律，點擊本次課主題 復習提問：初生菌絲和次生菌絲有什么區(qū)別？ 導入新課：啟發(fā)菌絲生長的生活要求？導入食用菌營養(yǎng)生理和環(huán)境要求 講課內(nèi)容：主要介紹食用菌的營養(yǎng)及其生長過程中與生態(tài)因子間的關(guān)系 第二節(jié)食用菌的營養(yǎng)生理 食用菌的營養(yǎng) 1 碳源：凡用于構(gòu)成細胞質(zhì)或代謝產(chǎn)物中碳素來源的營養(yǎng)物質(zhì)，統(tǒng)稱為碳源。介紹生產(chǎn)中常用的碳源 2 氮源：凡用于構(gòu)成細胞物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中氮素來源的營養(yǎng)物質(zhì)，統(tǒng)稱為氮源。介紹生產(chǎn)中常用的氮源 3 無機鹽 磷、硫、鈣、鎂、鉀、鐵、銅、鋅、錳、鈷、鉬等 介紹生產(chǎn)中常用的無機鹽種類

11、4 生長因子 主要指維生素、氨基酸、核酸類等物質(zhì) 二、食用菌的生理類型 介紹腐生、寄生、共生菌及特點，強調(diào)人工栽培的食用菌多是腐生 第三節(jié)食用菌的理化環(huán)境 主要講授食用菌生長發(fā)育中對生態(tài)環(huán)境的要求和控制適宜環(huán)境的方法措施 溫度 講授食用菌對溫度的要求，強調(diào)耐低溫特點，各生育期對溫度的不同要求，分化期的變溫結(jié)實和恒溫結(jié)實性，調(diào)控措施 二、水分和濕度 培養(yǎng)費料適宜的水分含量，菌絲生長和子實體生長對空氣濕度要求，調(diào)控措施 三、光照 菌絲體生長和子實體生長要求不同光線強度，調(diào)控措施 四、氧氣與二氧化碳 菌絲體生長和子實體生長對空氣中氧氣與二氧化碳的要求，通風的必要性，調(diào)控措施 五、酸堿度 食用菌對栽培

12、料中酸堿度要求，調(diào)控措施 概括總結(jié)：食用菌營養(yǎng)：碳源、氮源、食用菌的 C/N 、無機鹽 生長環(huán)境：溫度、濕度、光照、空氣、酸堿度 知識拓展：利用網(wǎng)絡(luò)資源 “菌海萍蹤” 了解一位菌物學家 思考練習 了解食用菌生產(chǎn)中，都用哪些碳源、氮源、無機鹽類物質(zhì)？ 調(diào)查菌絲生長階段，要營造什么樣的環(huán)境條件？采用哪些措施？ 實踐活動 到實習基地看一看食用菌栽培的設(shè)施和遮陽方法 第三章 消毒與滅菌(第 9-10 學時)授課題目 第一節(jié) 培養(yǎng)基質(zhì)的消毒與滅菌 第二節(jié) 接種與培養(yǎng)環(huán)境的消毒與滅菌 教學目標 使學生了解食用菌與其它微生物種類和害蟲的關(guān)系，掌握消毒、滅菌的各種方法，避免造成環(huán)境污染的注意事項。 教學方法與

13、手段 啟發(fā)式、講授式課堂教學方法 利用多媒體教學手段 教學重點: 高壓滅菌和常壓滅菌原理與技術(shù)；無菌室、無菌箱消毒技術(shù)規(guī)則 教學難點: 藥品的使用 課程設(shè)計 組織教學：調(diào)查學生出勤情況，組織課堂紀律，點擊本次課主題 復習提問：食用菌要求最高和最低溫度是哪一生長期？食用菌 C/N 、 pH 導入新課：以設(shè)問提出有機物發(fā)霉腐爛的原因？導入消毒和滅菌的概念 講課內(nèi)容：第一節(jié) 培養(yǎng)基質(zhì)的消毒與滅菌 首先介紹消毒、滅菌、防腐、除菌的概念 一、熱力滅菌 1 高壓蒸氣滅菌 講授滅菌原理和方法步驟，強調(diào)滅菌條件 壓力指標：液體培養(yǎng)基 1.1Kg/cm2 或 0.11*106pa 30 分鐘 固體培養(yǎng)基： 1.

14、5Kg/cm2 或 0.15*106pa 2 小時 2 常壓蒸氣滅菌方法 描述常壓蒸氣滅菌設(shè)施與設(shè)備 滅菌時間：熟料 100 6-24 小時半熟料 2 小時。 3 其它滅菌方法介紹 二、拌藥消毒常用藥品使用方法和注意事項 第二節(jié) 接種與培養(yǎng)環(huán)境的消毒與滅菌 介紹消毒藥品和使用 一、消毒殺菌劑 二、表面消毒殺滅 三、室內(nèi)空間殺菌 四、接種環(huán)境除菌 五、室外環(huán)境消毒 概括總結(jié)：消毒：應(yīng)用于培養(yǎng)環(huán)境、接種環(huán)境的空間除菌 . 用化學藥劑噴灑或熏蒸，紫外燈照射等方法。 滅菌：應(yīng)用于培養(yǎng)料、培養(yǎng)基和接種工具的徹底除菌。有常壓滅菌和高壓滅菌兩種。 知識拓展：利用網(wǎng)絡(luò)資源了解其它的消毒、滅菌方法 思考練習 什

15、么是滅菌、消毒和防腐？ 說說生產(chǎn)上采用哪些物理和化學方法進行消毒和滅菌？ 高壓滅菌和常壓滅菌的溫度、壓力和持續(xù)時間各為多少？ 實踐活動 用高錳酸鉀和甲醛對無菌接種箱進行消毒 第四章 食用菌菌種生產(chǎn)(第 11-12 學時)第一節(jié)食用菌菌種的概念和類型 第二節(jié)食用菌制種條件 教學目標 使學生掌握食用菌菌種的概念和類型，掌握制作母種、原種、栽培種的目的和應(yīng)用。熟練掌握常用制種設(shè)備的應(yīng)用技術(shù)。 教學方法與手段 啟發(fā)式、講授式課堂教學方法 利用多媒體教學手段 教學重點:食用菌制種條件及應(yīng)用技術(shù)，菌種的類型（母種、原種、栽培種） 教學難點: 高壓滅菌 課程設(shè)計 組織教學：調(diào)查學生出勤情況，組織課堂紀律，組

16、織觀看菌種樣品，點擊本次課主題 復習提問：怎樣對無菌接種室和接種箱進行消毒？為什么高壓滅菌能滅菌徹底？ 導入新課：用啟發(fā)式教學方法，引導種子概念，導入菌種知識 講課內(nèi)容：第一節(jié)食用菌菌種的概念和類型 一、菌種的概念 解釋：原意是指孢子（相當于植物的種子） ，但在實際生產(chǎn)中，常將經(jīng)過人工培養(yǎng)的純菌絲體連同培養(yǎng)基質(zhì)一同叫做菌種。 二、菌種的類型 講授母種、原種、栽培種（又分別稱為一、二、三級的菌種）的制種作用、使用容器和應(yīng)用 第二節(jié)食用菌制種條件 一、食用菌制種程序 圖解制種程序 二、制種的基本設(shè)備和條件 用照片展示各種設(shè)備，并講授其功能和應(yīng)用技術(shù) 概括總結(jié)：食用菌菌種的概念和類型 母種：將純菌絲

17、體或孢子在試管培養(yǎng)基中繁殖而成。可以繁殖原種，也適宜菌種保藏。 原種：母種菌絲在固體培養(yǎng)基上繁殖而成。這一過程增強菌絲對培養(yǎng)環(huán)境的適應(yīng)性，又起到擴繁的作用。原種可以直接出菇。 栽培種：由原種擴繁而成。主要是為了擴繁，為生產(chǎn)提供足夠的菌種。 知識拓展：查找參考書了解微生物的致死溫度 思考練習 什么叫食用菌菌種？它有哪些類型？ 為什么要繁殖一、二、三級的菌種？ 食用菌制種需要哪些條件？ 高壓滅菌鍋和常壓滅菌鍋各有哪些優(yōu)缺點？ 實踐活動 到實習基地查看一、二、三級的菌種的表面狀態(tài) 調(diào)查了解生產(chǎn)單位的制種基本設(shè)備和條件 第四章 食用菌菌種生產(chǎn)(第 13-14 學時)第三節(jié)培養(yǎng)基制備 第四節(jié)食用菌菌種分

18、離 教學目標 使學生了解培養(yǎng)基的概念和種類，掌握母種、原種和栽培種培養(yǎng)基的制作技術(shù)；熟練掌握食用菌組織分離技術(shù)。 教學方法與手段 啟發(fā)式、講授式課堂教學方法 利用多媒體教學手段和電化教學 教學重點: 培養(yǎng)基種類及配方，菌種分離方法，無菌接種技術(shù) 教學難點:孢子分離 課程設(shè)計 組織教學：點名了解學生出勤情況，組織課堂紀律，互動提問 復習提問：為什么要制原種、栽培種？你看到它們長在什么物質(zhì)上？ 導入新課：引導學生思考食用菌和營養(yǎng)，怎樣創(chuàng)造這個營養(yǎng)環(huán)境。 講課內(nèi)容：第三節(jié)培養(yǎng)基制備 一、培養(yǎng)基的概念和種類 1 概念：培養(yǎng)基是采用人工的方法，按照一定比例配制各種營養(yǎng)物質(zhì)，以供給食用菌生長繁殖的基質(zhì)。

19、2 種類：液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固化培養(yǎng)基講授它們個自優(yōu)缺點 二、母種培養(yǎng)基 這部分簡述制作原理和方法，制作技術(shù)通過實訓完成， 三、原種和栽培種培養(yǎng)基 四、液體菌種培養(yǎng)基 簡述制作原理和方法，制作技術(shù)通過實訓完成 第四節(jié)食用菌菌種分離 強調(diào)菌種分離是菌種純化的基本方法，是制種的重要環(huán)節(jié)。 菌種分離：組織分離孢子分離種木分離 一、接種箱和超凈工作臺的使用 二、無菌操作及轉(zhuǎn)管 三、菌種的分離 1 組織分離法 選擇頭潮菇，菌肉肥厚，形正，未散孢，八分成熟的種菇。 消毒接種培養(yǎng)純化試驗 2 孢子分離法 主要講授操作規(guī)程和注意事項，菌種分離技能在實踐課教學中學習 概括總結(jié)：課堂教學主要是了解一些培養(yǎng)基的種

20、類和制作方法，各級菌種繁殖有效代數(shù)及擴繁數(shù)量，主要技術(shù)要在實訓課中學習。 知識拓展：利用網(wǎng)絡(luò)資源了解食用菌育種方法 思考練習 培養(yǎng)基有哪些類型？ 菌種分離有哪些方法？生產(chǎn)中常用的是哪一種？ 怎樣進行無菌室、無菌箱消毒？ 實踐活動 課余時間參與生產(chǎn)基地的培養(yǎng)基制作 了解菌種分離時選擇的八分成熟的菇種是什么樣的 第四章 食用菌菌種生產(chǎn)(第 15-16 學時) 第五節(jié)食用菌菌種制作 ( 主要通過實訓完成 ) 第六節(jié) 菌種培養(yǎng) 第七節(jié)菌種質(zhì)量鑒定 第八節(jié)菌種保藏與復壯 教學目標 使學生了解食用菌菌種生產(chǎn)的工藝過程，掌握菌種制作和菌種復壯技術(shù)，菌種質(zhì)量鑒定標準，菌種保藏方法；熟練掌握食用菌制種生產(chǎn)中的滅

21、菌、接種和無菌操作等關(guān)鍵技術(shù)。 教學方法與手段 啟發(fā)式、講授式課堂教學方法 利用多媒體教學手段和電化教學 教學重點:一、二、三級菌種制作 教學難點: 菌種質(zhì)量鑒定，菌種復壯 課程設(shè)計 組織教學：調(diào)查學生出勤情況，檢查教材和筆記，互動提問 復習提問：培養(yǎng)基有哪些類型？母種培養(yǎng)基高壓滅菌的控制條件？ 導入新課：通過提問使學生思維進入菌種制作操作程序 講課內(nèi)容：第五節(jié)食用菌菌種制作 這節(jié)內(nèi)容主要是通過實踐課來完成，下面僅介紹制種的工作程序和需要注意的問題 展示菌種制作的一些圖片，讓學生有了感性認識，紹不同培養(yǎng)基的選擇 第六節(jié) 菌種培養(yǎng) 主要講授在菌種培養(yǎng)過程中對空氣、溫度、濕度、光線、培養(yǎng)時間和定期

22、檢查方面的要求 第七節(jié) 菌種質(zhì)量鑒定 菌種質(zhì)量的鑒定一般是從菌種的純度、長勢、顏色、菌齡、均勻度和出菇快慢等 6 方面進行鑒定的，最可靠的方法就是出菇試驗。 一、母種質(zhì)量鑒定 二、原種和栽培種質(zhì)量的鑒定 第八節(jié) 菌種保藏與復壯 一、菌種保藏 通常采用干燥、低溫、冷凍、缺氧和真空保藏，即使生命處于休眠狀態(tài)。 二、菌種復壯 菌種復壯是使生活力降低的菌種恢復或提高到原有健壯的程度。 概括總結(jié)： 菌種生產(chǎn)中的幾項技能：各級菌種的培養(yǎng)基制備，母種擴繁和無菌操作，高壓滅菌，無菌室、無菌箱消毒滅菌，原種、栽培種接種，組織分離和孢子分離。 知識拓展： 實踐活動 走訪食用菌企業(yè)或食用菌栽培戶，了解各級菌種的培養(yǎng)

23、基配方和制種條件及經(jīng)常出現(xiàn)的問題。 思考練習 優(yōu)良有母種、原種、栽培種一般符合哪些要求？ 如何進行母種接原種，原種接栽培種？ 第四章 食用菌菌種生產(chǎn)(第 17-20 學時實踐課）實訓二 母種培養(yǎng)基制備 教學目標 使學生掌握母種培養(yǎng)基常用配方和配制方法，掌握高壓滅菌鍋的正確使用方法，具備直接進行生產(chǎn)性制種的能力。 教學方法與手段 實驗 實訓 教學重點:煮汁分裝試管，高壓滅菌 教學難點:高壓滅菌 課程設(shè)計 組織教學：學生考勤，安排實驗分組及操作臺位置 復習提問：母種培養(yǎng)基配方？瓊脂起什么作用？ 講解內(nèi)容： 一、目的要求 實驗要求 分組及每組任務(wù) 二、材料用品準備 將已準備好的材料、用品及作用做以介

24、紹 三、講解本次實驗的操作規(guī)程 四、學生操作（按照實訓指導進行操作） 操作內(nèi)容： 1 配方 母種培養(yǎng)基配方（本次實驗選用 PDA 培養(yǎng)基） 2 每組做 1000mL 培養(yǎng)基，全班共做 4000mL ，要求每人分裝 5 支試管，扎好梱后一起滅菌。 3 操作步驟 稱量各種材料和藥品，煮汁，過濾，融瓊脂，分裝試管，包捆，滅菌。滅菌后趁熱擺斜面。 4 注意事項 煮馬鈴薯至熟而不爛 裝入試管中培養(yǎng)基的量為試管容積的 1/5-1/4 灌裝時盡量避免培養(yǎng)基粘附在管口及管壁上 試管豎直裝在鐵筐中，放入高壓鍋內(nèi)進行滅菌 當鍋內(nèi)產(chǎn)生一定蒸氣壓力達 0.05MPa 時進行排氣，排盡氣后關(guān)好排氣閥。當蒸氣再上升至 0

25、.110.12MPa 或 1.1 1.2kg /cm2 時，調(diào)節(jié)氣體排放，保持此壓力 30 分鐘。 概括總結(jié)：本次實訓操作規(guī)程按實訓指導要求進行，分組做好培養(yǎng)基后一起滅菌，滅菌過程要在老師指導下認真進行，要求全班同學都在現(xiàn)場，認真學習操作規(guī)程，滅菌后大家一起擺斜面。 技能訓練：利用課余時間每組再做一次 課前準備 1. 設(shè)備及器具：高壓滅菌鍋、電爐子、鋁鍋、天秤、試管、量筒、漏斗、漏斗架。 2. 材料和藥品：馬鈴薯、瓊脂、葡萄糖、棉塞、紗布等。 課后作業(yè) 完成實訓報告，內(nèi)容要求：實驗題目、主要內(nèi)容、實訓目的、方法原理、操作程序、結(jié)果或結(jié)論、存在問題及改進意見 思考練習 查閱資料，了解母種培養(yǎng)基的

26、其它配方。 高壓滅菌當壓力上至 0.110.12MPa 時里面的溫度是多少？ 3 試管裝培養(yǎng)基為什么不能超過 1/4 高度？ 4 為什么每 7 個試管扎成一捆后，要用牛皮紙將棉塞處包好？ 第四章 食用菌菌種生產(chǎn)(第 21-24 學時實踐課）實訓三 無菌操作訓練及母種擴繁和培養(yǎng) 教學目標 使學生了解無菌室和接種箱消毒滅菌方法和超凈工作臺、接種機等儀器設(shè)備的工作原理，掌握規(guī)范的無菌接種技術(shù)，能夠把握好菌種質(zhì)量關(guān)。 教學方法與手段: 實驗 實訓 教學重點: 無菌室消毒 無菌接種操作 教學難點: 無菌接種操作 課程設(shè)計 組織教學： 學生考勤，安排實驗分組、接種次序，強調(diào)操作規(guī)程復習提問： 用紫外線燈消

27、毒時間？接種帶口罩的目的？消毒準備： 課前將母種培養(yǎng)基和接種用具一并放入無菌室，開啟無菌室和超凈工作臺上的紫外燈，照射 30 分鐘。 講解內(nèi)容： 1. 要求學生帶口罩 2. 無菌室和超凈工作臺消毒（紫外線燈）方法及無菌箱消毒方法 3. 無菌操作示范（先在實驗室做，學生練習，然后再實際演練） 操作內(nèi)容： （按照實訓指導進行操作） 1. 母種擴繁 每人擴繁 5 支試管 指導學生對幾個關(guān)鍵技術(shù)要正確操作 進入無菌室后，用 75% 的酒精棉球擦手和接種工具 點燃酒精燈，將接種針頂端燒紅，并使整支接種棒在火焰上穿過 用右手小指夾住試管培養(yǎng)基棉塞拔出并不扔掉 挑取黃豆大小的菌絲瓊脂塊，迅速移入到試管培養(yǎng)基

28、的中央 動作要快 將棉塞在火焰附近烘烤一下，塞住試管口，要塞緊 左手拿的菌種試管一直保持不動，試管口對準火焰 火焰封口 接種后貼上標簽 2. 母種培養(yǎng) 恒溫箱調(diào)試，按菌種的種類設(shè)定溫度 概括總結(jié)： 本次實訓分兩部分進行，先是無菌操作訓練，不記成績，然后 每人轉(zhuǎn)接 5 支試管，放在恒溫箱中培養(yǎng)，檢驗操作效果，記成績。通過試管轉(zhuǎn)接訓練，學生能夠掌握無菌操作技術(shù)。母種擴繁的操作基本正確，能夠保證無污染。 技能訓練： 要求每人轉(zhuǎn)空管理體制 10 支 知識拓展： 詳細看一看超凈工作臺的說明書，了解其工作原理 課前準備 1 設(shè)備及器具 無菌室、超凈工作臺和接種器、酒精燈及接種器具。 2 材料和藥品 菌種（

29、母種）、試管培養(yǎng)基、無水酒精、 75% 酒精及棉球。 3 菌種準備 在實驗課前 15 天要將母種轉(zhuǎn)接好，培養(yǎng)好后做為學生實驗材料 課后作業(yè) 完成實訓報告，內(nèi)容要求：實驗題目、主要內(nèi)容、實訓目的、方法原理、操作程序、結(jié)果或結(jié)論、存在問題及改進意見 思考練習 一支母種能擴繁多少支試管？ 為什么打開的試管其管口一直對準火焰？ 第四章 食用菌菌種生產(chǎn)(第 25-26 學時實踐課）實訓四 組織分離與孢子分離 教學目標 使學生了解選種標準和種菇消毒的方法，掌握組織分離制取母種的方法和技術(shù)。 教學方法與手段:實驗 實訓 教學重點: 種菇選擇和消毒技術(shù)，分離技術(shù)，無菌操作技術(shù) 教學難點:消毒技術(shù) 課程設(shè)計 組

30、織教學：點名掌握學生出勤情況，規(guī)范實驗室紀律，操作前準備 復習提問：食用菌菌種分離有哪幾種方法？ 導入新課：講述組織分離與孢子分離的基本原理 消毒準備：課前將母種試管培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基及接種用具一并放入無菌室，開啟無菌室和超凈工作臺上的紫外燈，照射 30 分鐘。 講述內(nèi)容： （解釋本次實驗中學生只做組織分離，關(guān)于孢子分離只做演示教學） 1.要求學生帶口罩 2.如何選取種菇 在采摘的平菇中選取 3.組織分離示范（先在實驗室做，學生練習，然后再實際演練） 利用實驗室消毒的時間在其它實驗室進行示范性操作，讓學生練習 操作內(nèi)容：（按照實訓指導進行操作） 1選取種菇 每人選取 1 個 2分組進行操作 5

31、 人一組 4.分離轉(zhuǎn)接 每組轉(zhuǎn)接 10 個平皿、 10 支試管 5.設(shè)定適宜溫度進行培養(yǎng) 控制恒溫 23 6.10 天后檢驗成果 指導學生對幾個關(guān)鍵技術(shù)要正確操作 種菇消毒時間不要太長，無菌水沖洗 2-3 次 切取菌肉要在菌蓋與菌柄交接處，菌塊大小適宜 將菌肉緊貼在培養(yǎng)基上 保證無菌操作 接種后粘貼標簽 培養(yǎng)過程中要經(jīng)常檢查，發(fā)現(xiàn)有污染及時淘汰 概括總結(jié)：通過先在實驗室做練習操作，基本能夠掌握組織分離方法和無菌操作要領(lǐng)，實驗中分組進行，每組完成一套實驗，共同放在恒溫箱中培養(yǎng)，分別在 3 天、 5 天、 10 天后檢查效果 技能訓練：利用業(yè)余時間在實驗室練習，要求每人用組織分離方法制作 5 支試

32、管母種。 課前準備 1. 提前 1 天將試管培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基做好，滅菌。 2 種菇的選取 課前采摘種菇。種菇必須是生長健壯，無病蟲害，外形好，朵大肉厚，具有出菇早、高產(chǎn)等該品種典型特征的子實體。 課后作業(yè) 完成實訓報告，內(nèi)容要求：實驗題目、主要內(nèi)容、實訓目的、方法原理、操作程序、結(jié)果或結(jié)論、存在問題及改進意見 思考練習 1 進行組織分離和種菇要選擇什么成熟期的？ 2 為什么平板培養(yǎng)基的容易污染？ 3 組織分離后培養(yǎng)好的母種是否可以直接擴繁原種？ 第四章 食用菌菌種生產(chǎn)(第 27-30 學時實踐課）實訓五 原種、栽培種培養(yǎng)基制備 教學目標 使學生了解原種、栽培種在生產(chǎn)中的應(yīng)用，掌握原種、栽培種培養(yǎng)基的常用