專題11生物技術(shù)實(shí)踐(解析版)

1、專題 11 生物技術(shù)實(shí)踐基礎(chǔ)測(cè)試1. (2019鄭州模擬)研究表明，很多除草劑會(huì)對(duì)人體健康造成危害，某研究小組為篩選能夠高效降解某除草劑(有機(jī)物 )的菌株，進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)高效降解該除草劑的菌株應(yīng)從中獲取。(2)選擇培養(yǎng)基中應(yīng)以作為唯一碳源，除碳源外，該培養(yǎng)基中還應(yīng)含有 、 、 和瓊脂等。(3)某同學(xué)將樣品進(jìn)行梯度稀釋后，取某個(gè)稀釋度的樣品涂布到選擇培養(yǎng)基上，在適宜條件下培養(yǎng)后沒(méi)有菌落出現(xiàn)，產(chǎn)生上述現(xiàn)象的原因可能是，也可能是 。(4)找到實(shí)驗(yàn)失敗的原因后，該同學(xué)重新在同種選擇培養(yǎng)基上接種樣液，結(jié)果有兩種菌落(菌落1 和菌落2)出現(xiàn)(實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不存在污染)，挑取上述兩種菌落

2、單獨(dú)接種到同種選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，結(jié)果只有菌落1 形成而沒(méi)有菌落2 的形成，由此可得出能夠降解該除草劑的菌落是。前一次接種有兩種菌落出現(xiàn)，最可能的原因是。 _答案(1)被該除草劑嚴(yán)重污染的土壤(2)該除草劑水 氮源 無(wú)機(jī)鹽(3)稀釋度過(guò)高涂布器灼燒后沒(méi)冷卻(4)菌落1 菌落 2 可從菌落1 的代謝產(chǎn)物中獲得碳源(合理即可)解析(3)采用稀釋涂布平板法接種的微生物在適宜條件下培養(yǎng)后沒(méi)有菌落出現(xiàn)，其原因可能是稀釋度過(guò)高，導(dǎo)致涂布的樣品中不含分解該除草劑的菌；也可能是涂布器灼燒后沒(méi)冷卻，導(dǎo)致涂布的樣品中該除草劑分解菌被殺死。(4)選擇培養(yǎng)基中出現(xiàn)兩種菌落，而單獨(dú)在選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)后只出現(xiàn)了菌落1，

3、 說(shuō)明菌落1 能夠降解該除草劑，而菌落 2 不能； 混合培養(yǎng)時(shí)兩種菌落均能形成，最可能的原因是菌落2 能夠利用菌落1 的代謝產(chǎn)物，該代謝產(chǎn)物為菌落2 提供碳源。2. (2019開(kāi)封期末)生物技術(shù)實(shí)踐與我們的生活息息相關(guān)，結(jié)合所學(xué)的知識(shí)回答下列問(wèn)題：(1)胡蘿卜素可以用來(lái)治療由缺乏維生素A 引起的各種疾病，在提取胡蘿卜素時(shí)，不能用乙醇和丙酮萃取胡蘿卜素的原因是，_萃取的過(guò)程需采用加熱， 將提取的胡蘿卜素粗品通過(guò)進(jìn)行鑒定，如果要想獲得B-胡蘿卜素，還必須對(duì)提取的產(chǎn)物進(jìn)一步 。(2)若從土壤中純化酵母菌，需用 (填“固體培養(yǎng)基”或“液體培養(yǎng)基”)培養(yǎng)，最常用的接種方法是。 若用木糖來(lái)進(jìn)行酒精發(fā)酵，需

4、要將培養(yǎng)基上的酵母菌菌株轉(zhuǎn)接到的培養(yǎng)基中，在條件下培養(yǎng)一周后，收集存活的酵母菌，即所需菌種。(3)某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)土壤中纖維素分解菌總數(shù)，他選用稀釋104、 105、 106 倍的稀釋液進(jìn)行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3 個(gè)培養(yǎng)皿。從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看，還 應(yīng) 設(shè) 置 的 一 組 對(duì) 照 實(shí) 驗(yàn) 為 ， 此 對(duì) 照 實(shí) 驗(yàn) 的 目 的 是，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際數(shù)目 (填“多”或“少”)。答案(1)用于萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑，要能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶，而乙醇和丙酮都是水溶性有機(jī)溶劑水浴 紙層析法分離(2)固體培養(yǎng)基平板劃線法和稀釋涂布平板法只含有木糖，不含有葡萄糖等其他碳源無(wú)氧(3)

5、不接種的空白培養(yǎng)基驗(yàn)證培養(yǎng)基是否被雜菌污染少解析 (1)因?yàn)橐掖己捅际撬苄杂袡C(jī)溶劑，所以不能用于提取胡蘿卜素；萃取過(guò)程需要水浴加熱，避免使用明火引起燃燒、爆炸；提取的胡蘿卜素通過(guò)紙層析法鑒定；另外還需要提純等。(2)純化酵母菌時(shí)需要固體培養(yǎng)基，最常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；若用木糖來(lái)進(jìn)行酒精發(fā)酵，需要將酵母菌轉(zhuǎn)接到只有木糖做碳源的培養(yǎng)基上，并在無(wú)氧氣的環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵。(3)統(tǒng)計(jì)纖維素分解菌的數(shù)量時(shí)，需要設(shè)置不接種的空白對(duì)照，以檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被污染過(guò)；統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目要少，因?yàn)?，?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。3. (2019陜西延安二模

6、)中央電視臺(tái)舌尖上的中國(guó)欄目介紹了我國(guó)各地的美食，其中利用發(fā)酵技術(shù)制作的各類特色食品，如果醋、腐乳、泡菜等，很好地展現(xiàn)了廣大人民群眾的智慧。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)“天地一號(hào)”蘋(píng)果醋是我國(guó)著名的果醋。工業(yè)上釀制蘋(píng)果醋通常有兩條途徑，一條途徑是向搗碎的蘋(píng)果汁中直接接種(填微生物名稱)，經(jīng)過(guò)一次發(fā)酵制成。在發(fā)酵過(guò)程中需要經(jīng)常向發(fā)酵液中通入；另一條途徑需經(jīng)過(guò)先后兩次發(fā)酵獲得，即。 _(2)“王致和”腐乳是我國(guó)的著名品牌，通過(guò)發(fā)酵，豆腐中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類(填“增多”或“減少”)。制作腐乳時(shí)加鹽腌制后需要加入鹵湯，若鹵湯中的酒精含量過(guò)高，則會(huì)導(dǎo)致腐乳。(3)泡菜具有獨(dú)特的風(fēng)味，在我國(guó)的泡菜品種中，東北酸菜和

7、四川泡菜都非常有名，它們的制作過(guò)程基本類似，都是利用(微生物名稱)發(fā)酵。向壇中注入鹽水前，煮沸所用鹽水的目的是。在泡菜制作過(guò)程中，亞硝酸鹽含量的變化情況是。答案(1)醋酸菌無(wú)菌空氣先接種酵母菌獲得果酒，再在果酒中接種醋酸菌進(jìn)一步獲得果醋(2)增多成熟時(shí)間延長(zhǎng)(3)乳酸菌殺滅細(xì)菌(或滅菌) 先增加后減少解析(1)參與醋酸發(fā)酵的微生物是醋酸菌；醋酸菌是嗜氧菌，因此進(jìn)行醋酸發(fā)酵時(shí)需要經(jīng)常通入無(wú)菌空氣；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌可將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?，因此可先接種酵母菌通過(guò)酒精發(fā)酵獲得果酒，再在果酒中接種醋酸菌進(jìn)一步通過(guò)醋酸發(fā)酵獲得果醋。(2)腐乳制作過(guò)程中，蛋白質(zhì)和脂肪被分解成相應(yīng)的小分子物質(zhì)

8、，因此豆腐中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類增多。制作腐乳時(shí)加鹽腌制后需要加入鹵湯，若鹵湯中的酒精含量過(guò)高，則會(huì)導(dǎo)致腐乳成熟時(shí)間延長(zhǎng)。(3)參與泡菜制作的微生物主要是乳酸菌。向壇中注入鹽水前，煮沸所用鹽水的目的是殺滅細(xì)菌。在泡菜制作過(guò)程中，亞硝酸鹽含量先增加后減少。4. (2019湖南長(zhǎng)沙期末)三抱布拉霉菌能夠用來(lái)生產(chǎn)胡蘿卜素。 如圖是提取胡 蘿卜素的兩種方法。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：(1)純化三孢布拉霉菌常用的方法為， 在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)三孢布拉霉菌的過(guò)程中若要對(duì)三孢布拉霉菌及時(shí)進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)采用的計(jì)數(shù)方法是。(2)除了圖中兩種方法外，還可以從大面積養(yǎng)殖的中獲取胡蘿卜素。(3) 用 胡 蘿 卜 提 取 胡 蘿 卜

9、素 時(shí) 需 要 對(duì) 胡 蘿 卜 進(jìn) 行 粉 碎 ， 是 因 為。萃取過(guò)程中應(yīng)避免明火加熱的原因是_。 萃 取 的 最 佳 溫 度 和 時(shí) 間 可 以 通 過(guò)來(lái)摸索。(4)對(duì)萃取得到的胡蘿卜素粗品通常采用法進(jìn)行鑒定， 該方法的原理答案 (1)稀釋涂布平板法和平板劃線法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(2)巖藻(3)原料顆粒小，有助于胡蘿卜素的充分溶解，萃取效果好(合理即可) 有機(jī)溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)(4)紙層析各種色素在層析液中的溶解度不同，造成不同色素在濾紙上的擴(kuò)散速度不同(合理即可 )解析 (1)純化微生物常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法

10、，能及時(shí)統(tǒng)計(jì)微生物的數(shù)量。(2)除了題圖所示兩種方法外，還可以從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲取胡蘿卜素。(3)一般來(lái)說(shuō)，原料顆粒小，萃取溫度高，時(shí)間長(zhǎng)，需要提取的物質(zhì)就能夠充分溶解，萃取效果就好。因此對(duì)胡蘿卜進(jìn)行粉碎，有助于胡蘿卜素的充分溶解，萃取效果好。萃取過(guò)程要避免明火加熱，應(yīng)采用水浴加熱，因?yàn)橛袡C(jī)溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸。萃取的最佳溫度和時(shí)間可以通過(guò)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)摸索。(4)通常采用紙層析法鑒定胡蘿卜素粗品，該方法的原理是各種色素在層析液中的溶解度不同，造成不同色素在濾紙上的擴(kuò)散速度不同。5 在生產(chǎn)實(shí)踐中，若向果汁中加入人工培養(yǎng)的純凈酵母菌，能更好地抑制微生物生長(zhǎng)，提高

11、果酒的產(chǎn)量，但酵母菌混在果酒中會(huì)影響果酒的品質(zhì)。固定化酵母細(xì)胞技術(shù)能避免酵母菌混在果酒中，提高果酒品質(zhì)?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1) 固 定 化 酵 母 細(xì) 胞 技 術(shù) 的 應(yīng) 用 ， 最 主 要 目 的 是 解 決。為使所用到的固定化酵母細(xì)胞可以反復(fù)運(yùn)用，生產(chǎn)過(guò)程中一定要在條件下進(jìn)行。(2)在用海藻酸鈉包埋酵母菌形成凝膠珠的過(guò)程中，加熱溶解海藻酸鈉時(shí)要特別注意用 加熱，然后將溶化好的海藻酸鈉溶液 后，加入酵母菌充分?jǐn)嚢杌旌暇鶆颉?3)海藻酸鈉是一種多孔性載體，當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時(shí)，酵母菌催化活力較低，原因可能是。用過(guò) _高濃度的海藻酸鈉進(jìn)行酵母細(xì)胞固定化，會(huì)使產(chǎn)生果酒的速率降低，原因是(4)在生產(chǎn)過(guò)

12、程中，在盛有固定化酵母細(xì)胞的反應(yīng)器中加入的果汁濃度不能過(guò)高，原因是。答案(1)酵母菌的回收和再利用的困難無(wú)菌(2)小火(或間斷) 冷卻至室溫(3)海藻酸鈉濃度較低時(shí)包埋不緊密，酵母菌容易漏出，數(shù)量不足使凝膠珠的相對(duì)滲透性降低，不利于底物的進(jìn)入和產(chǎn)物的排出(4)濃度過(guò)高，酵母細(xì)胞會(huì)因失水過(guò)多而死亡解析(1)固定化酵母技術(shù)最主要是解決酵母菌的回收和再利用的困難；生產(chǎn)過(guò)程需要無(wú)菌環(huán)境保證固定化酵母菌沒(méi)有被雜菌污染，可以重復(fù)使用。(2)加熱溶解海藻酸鈉時(shí)要特別注意用小火加熱；冷卻到室溫再與酵母菌混合。(3)海藻酸鈉濃度較低時(shí)包埋不緊密，酵母菌易漏出，酵母菌數(shù)量減少，產(chǎn)酒減少。海藻酸鈉濃度過(guò)高底物不易接

13、觸到酶，產(chǎn)物也不容易排出，使反應(yīng)速率過(guò)低。(4)在固定化酵母細(xì)胞反應(yīng)器中不能加入濃度過(guò)高的果汁，否則酵母菌會(huì)因失水過(guò)多而死亡。6. (2019石家莊高三模擬)環(huán)境污染物多聚聯(lián)苯難以降解，受其污染的土壤中 常有重金屬污染同時(shí)存在。研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)苯降解菌內(nèi)的聯(lián)苯水解酶是催化多聚聯(lián)苯降解的關(guān)鍵酶?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，培養(yǎng)基中加入多聚聯(lián)苯作為 ，該培養(yǎng)基屬于 (填“選擇”或“鑒定”)培養(yǎng)基。用平板劃線法純化該細(xì)菌時(shí)，第2 次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開(kāi)始是為了(2)為了能夠反復(fù)利用聯(lián)苯水解酶，可以采用技術(shù)，該技術(shù)的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是 。 _(3)若從聯(lián)苯降解菌

14、中分離并得到純度較高的聯(lián)苯水解酶，純化該酶常用的方法是 ，采用該方法先分離出分子質(zhì)量 的蛋白質(zhì)。(4)下圖實(shí)線表示聯(lián)苯水解酶催化的反應(yīng)速度與酶濃度關(guān)系，虛線表示在其他條件不變情況下，底物濃度增加一倍，反應(yīng)速度與酶濃度的關(guān)系，能正確表示兩者關(guān)系的是()答案(1)(唯一)碳源選擇 將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個(gè)菌落(2)固定化酶提高產(chǎn)物的純度(3)凝膠色譜法較大(4)B解析(1)培養(yǎng)基中多聚聯(lián)苯作為唯一碳源時(shí)，就會(huì)選擇出聯(lián)苯降解菌；用平板劃線法純化該細(xì)菌時(shí)，再次劃線總是從上次劃線的末端開(kāi)始是為了將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(2)為了能反復(fù)利用聯(lián)苯水解酶，可以采用固定化酶技術(shù)，該技術(shù)還可

15、以提高產(chǎn)物純度。(3)純化酶常用的方法是凝膠色譜法，采用該方法先分離出質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)。(4)開(kāi)始時(shí)，酶不夠， 底物加不加倍都不能增加反應(yīng)的速率；隨著酶濃度增大，反應(yīng)速率才有區(qū)分，故選B。7. (2019山西大同期末)生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類對(duì)化石燃料的消耗。科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M 產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油(如下圖)(1)用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā)，宜選用、 從油料作物中提取。(2)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M 時(shí)，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供 ，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是 法。(3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用

16、法直接計(jì)數(shù)； 從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測(cè)，以確定其應(yīng)用價(jià)值；為降低生物柴油生產(chǎn)成本，可利用技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。答案(1)壓榨萃取(注：兩空順序無(wú)先后)(2)碳源高壓蒸汽滅菌(3)顯微鏡直接計(jì)數(shù)酶活性 (或：酶活力) 固定化酶(或：固定化細(xì)胞)解析(1)植物油不易揮發(fā)，不能選用蒸餾法，可以采取壓榨、萃取等方法從油料作物中提取。(2)微生物的生長(zhǎng)需要水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等，植物油由C、 H、 O 三種元素構(gòu)成，微生物以植物油作為碳源；培養(yǎng)基常規(guī)的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。8回答下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取和分離的問(wèn)題：(1)常利用蛋白質(zhì)各種特性的差異分離不同種類的蛋白質(zhì)，這些特性的差異包

17、括分子的形態(tài)和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、 和對(duì)其他分子的親和力等。(2)根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷的性質(zhì)和多少分離蛋白質(zhì)時(shí)，不能使用凝膠色譜法的理由是 。 _(3)蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步，即樣品處理、。(4)若要從豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液中分離血紅蛋白，則先要進(jìn)行紅細(xì)胞洗滌，該步驟的目的是。 _(5)常采用 由泳法測(cè)定分離出的血紅蛋白的分子量。該方法中，加入SDS的目的是答案(1)溶解度吸附性質(zhì)(兩空可以顛倒)(2)凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法(3)粗分離、純化和純度鑒定(4)去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離和純化(5)SDS-聚丙烯酰胺凝膠消除凈電荷對(duì)遷移率

18、的影響(其他答案合理也可)能力提升1. (2019黑龍江哈爾濱六中三模)利用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精的大致流程為:玉米秸稈預(yù)處理、水解糖液發(fā)酵酒精(1)玉米秸稈預(yù)處理后，選用纖維素酶進(jìn)行水解，使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄 糖。從以下哪些微生物中可以提取上述酶()A.釀制果醋的醋酸菌B.生長(zhǎng)在腐木上的霉菌C.制作酸奶的乳酸菌D.生產(chǎn)味精的谷氨酸棒狀桿菌(2)若從土壤中分離生產(chǎn)這種酶的微生物，所需要的培養(yǎng)基為(按功能 分),培養(yǎng)基中的碳源為,此外培養(yǎng)基 中還要有 答出主要三種)。對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是 (3)在生產(chǎn)糖液的過(guò)程中，為了使酶能夠反復(fù)利用，可采用 技術(shù)。(4)發(fā)酵階段需要的菌種是 ,

19、生產(chǎn)酒精時(shí)要控制的必要條件是答案(1)B (2)選擇培養(yǎng)基 纖維素 水、無(wú)機(jī)鹽、氮源 高壓蒸汽滅菌法 固定化(4)酵母菌隔絕空氣解析(1)腐木上有大量的纖維素，故應(yīng)從生長(zhǎng)在腐木上的霉菌中提取纖維素 酶。(2)可用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基從土壤中分離產(chǎn)生纖維素酶的微 生物。另外，培養(yǎng)基中還要注意添加適量的水、無(wú)機(jī)鹽和氮源等。培養(yǎng)基通常采 用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。(3)采用固定化技術(shù)制備固定化酶(細(xì)胞)，可以實(shí)現(xiàn)酶(細(xì)胞)的重復(fù)利用，降低 生產(chǎn)成本。(4)酵母菌無(wú)氧發(fā)酵可產(chǎn)生酒精，故該發(fā)酵是利用酵母菌在無(wú)氧條件下進(jìn)行的 酒精發(fā)酵來(lái)實(shí)現(xiàn)的2. (2019黑龍江省統(tǒng)考)“神農(nóng)嘗百草，日遇七十二

20、毒，得茶而解之一”。茶 飲料極少添加人工合成的色素、香精等添加劑，更多利用從植物中提取的天然成分。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)紅茶菌液是一種傳統(tǒng)的活菌飲料，由酵母菌、醋酸菌和乳酸菌共同發(fā)酵產(chǎn)生。純化菌種時(shí)，在固體培養(yǎng)基上常用的接種方法有。(2)提 取 茶 飲 料 所 用 的 胡 蘿 卜 素 時(shí) ， 通 常 在 萃 取 前 要 將 胡 蘿 卜 粉 碎 和 ，以提高萃取效果。(3)水蒸氣蒸餾法(填“適合”或“不適合”)胡蘿卜素的提取，原因(4)茶飲料所用的植物芳香油的提取流程如下：茉莉花+水-水蒸氣蒸儲(chǔ)-油水混合物-油層分離與粗提取加無(wú)水硫酸鈉過(guò)濾-茉莉油。加入 可促使油水混合物分層。(5)用壓榨法提取

21、橘皮精油時(shí)，要將橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，其目的答案(1)稀釋涂布平板法、平板劃線法(2)干燥(3)不適合水蒸氣蒸餾法適合用于分離揮發(fā)性物質(zhì)，而胡蘿卜素為非揮發(fā)性物質(zhì)，不能隨水蒸氣蒸餾出(4)NaCl(5)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率解析(1)微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作，主要用于微生物的分離純化。接種方法有多種，其中在固體培養(yǎng)基上常用稀釋涂布平板法、平板 劃線法接種菌種。(2)由于新鮮的胡蘿卜含有大量的水分，故萃取前要將胡蘿卜粉碎與干燥以提高萃取效率。(3)由于水蒸氣蒸餾法適合用于分離揮發(fā)性物質(zhì)，而胡蘿卜素為非揮發(fā)性物質(zhì)，不能隨水蒸氣蒸餾出，因此水

22、蒸氣蒸餾法不適合胡蘿卜素的提取。(4)在芳香油的提取過(guò)程中，需要加入NaCl,其目的是增大水層密度，促進(jìn)油水混合物分層，使油水分離。(5)提取橘皮精油時(shí)，需要將橘皮在石灰水中浸泡10 小時(shí)以上，其目的是破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率。3. (2019河南信陽(yáng)高中高三期末)常見(jiàn)的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來(lái)進(jìn)行酒精發(fā)酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A 分解木糖產(chǎn)生酒精。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：(1)在制備含瓊脂的培養(yǎng)基和倒平板的過(guò)程中，下列選項(xiàng)需要的是(填序號(hào))。酒精燈接種環(huán)高壓蒸汽滅菌鍋培養(yǎng)皿(2)若要“探究從自然界收集的酵母菌菌株能否利用木糖進(jìn)行酒精發(fā)酵”，請(qǐng)寫(xiě)

23、出實(shí)驗(yàn)思路：。(3)將搜集到的酵母菌放入培養(yǎng)液中擴(kuò)大培養(yǎng)后，用稀釋涂布平板法計(jì)算每克樣品中的菌株數(shù)的公式為(C W) X M ,其中C代表(4)純化后的酶A 可以用電泳法檢測(cè)其分子量大小。在相同條件下，帶電荷相同的蛋白質(zhì)電泳速度越快，說(shuō)明。(5)生產(chǎn)上常將酶A 固定化，部分操作如下：將酶A 固定在 (填“溶于水”或“不溶于水”)的載體上，將其裝入反應(yīng)柱內(nèi)后，需用蒸餾水充分洗滌固定化酶柱，以除去未吸附的酶 Ao 一般來(lái)說(shuō)，酶不適合采用 法固定化。固定化酶的優(yōu)點(diǎn)是。 _答案(1)(2)將自然界收集的酵母菌轉(zhuǎn)接到僅以木糖為碳源的培養(yǎng)基中，在無(wú)氧條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測(cè)有無(wú)酒精的產(chǎn)生(3)某一稀釋度下

24、平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)(4)其分子量越小(5)不溶于水包埋 酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，還可以反復(fù)利用解析(1)倒平板時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行， 正確；制備培養(yǎng)基時(shí)不需要接種環(huán)， 錯(cuò)誤；制備培養(yǎng)基需要用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌， 正確；倒平板時(shí)需要培養(yǎng)皿， 正確。(2)常見(jiàn)的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來(lái)進(jìn)行酒精發(fā)酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A 分解木糖產(chǎn)生酒精，故可將自然界收集的酵母菌菌株轉(zhuǎn)接到僅以木糖為碳源的培養(yǎng)基中，在無(wú)氧條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，檢測(cè)有無(wú)酒精產(chǎn)生。(3)用稀釋涂布平板法計(jì)算每克樣品中的菌株數(shù)公式為(CV)XM,其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)。

25、V 代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積 (mL)， M 代表稀釋倍數(shù)。(4)電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。在相同條件下，帶電荷相同的蛋白質(zhì)電泳速度越快，說(shuō)明其分子量越小。(5)因?yàn)槊阜肿虞^小，一般來(lái)說(shuō)，不適合采用包埋法固定化。4.某同學(xué)設(shè)計(jì)了下表所示的配方配制培養(yǎng)基，嘗試從土壤中篩選高效尿素分 解菌，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO4 7H2O0.2 g葡錮糖10.0 g尿素1.0 g瓊脂15.0 g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸儲(chǔ)水定咨到 1000 mL(1)

26、 “目的菌”生長(zhǎng)所需的碳源和氮源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的 ;從物理狀態(tài)上分析，該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基，判斷的依據(jù)是該培養(yǎng)基能篩選出尿素分解菌的原因是(2)若要證明該培養(yǎng)基具有選擇作用，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)？(3)若要進(jìn)一步純化尿素分解菌，常用稀釋涂布平板法，該方法是如何實(shí)現(xiàn)分 離純化的? 二在該培養(yǎng)基中可加入指示劑，根據(jù)指示劑的顏色變化可鑒定該種細(xì)菌是否能夠分解尿素。(4)為檢驗(yàn)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿滅菌是否合格，可采取的措施是 答案(1)葡萄糖和尿素(順序不能顛倒)固體培養(yǎng)基中含有凝固劑(瓊脂) 該培養(yǎng)基以尿素作為唯一氮源，只有能分解尿素的細(xì)菌才能生長(zhǎng)(2)用普通培養(yǎng)基(或牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基)代替上述培養(yǎng)基，

27、其他條件相同， 然后觀察并統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量(答案合理即可)(3)菌液梯度稀釋后涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞(答案合理即可)酚紅(4)將滅菌后不接種菌液的培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)解析(1)從化學(xué)成分上分析，培養(yǎng)基中含有葡萄糖和尿素，分別是尿素分解 菌的碳源和氮源；由于該培養(yǎng)基中有瓊脂，故該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；該培養(yǎng) 基中尿素為唯一氮源，說(shuō)明能夠生存的微生物能分泌月尿酶，為尿素分解菌。(2)若要證明該培養(yǎng)基具有選擇作用，應(yīng)用普通培養(yǎng)基(或牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基) 作為對(duì)照，普通培養(yǎng)基沒(méi)有選擇作用，大多數(shù)的微生物都能生長(zhǎng)，其上的菌落種 類和數(shù)量應(yīng)明顯多于該培養(yǎng)

28、基中的菌落種類和數(shù)量。(3)稀釋涂布平板法通過(guò)將菌液梯度稀釋后涂布平板，進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)稀釋度足 夠高時(shí)，就可以使單個(gè)細(xì)菌形成一個(gè)菌落；鑒定該種細(xì)菌能否分解尿素，可向該培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，分解尿素產(chǎn)生的氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH 上升，指示劑變 紅。(4)為檢驗(yàn)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿滅菌是否合格，可采取的措施是將滅菌后不接種菌液的培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)，看有無(wú)微生物生長(zhǎng)。5. (2019平頂山高三期末)多氯聯(lián)苯(PCBs)是一類持久性有機(jī)污染物，對(duì)生物危害性極大。科研人員通過(guò)人工篩選獲得高效的PCBs 降解菌，將其擴(kuò)大培養(yǎng)后投入污染土壤中，可將土壤中的 PCBs降解。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)欲選擇性獲得能降解P

29、CBs的降解菌，應(yīng)該在培養(yǎng)基中加入 PCBs作為唯一碳源，除此之外，還需要加入等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在降解菌數(shù)量足 夠 多 時(shí) ， 適 當(dāng) 提 高 PCBs 的 濃 度 能 使 PCBs 降 解 速 率 增 加 ， 其 原 因 是從酶與底物的相互_(關(guān)系角度分析)。擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，PCBs 降解菌所用的培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上劃分，屬于 培養(yǎng)基。(2)將篩選的PCBs 降解菌固定在一定的空間內(nèi)定殖于土壤中能提高降解效率，固定PCBs 降解菌的一般方法為包埋法，不使用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法的原因是 。用于包埋_PCBs 降解菌的載體應(yīng)該具有的特點(diǎn)是試舉兩個(gè)特點(diǎn) ()。(3)研究人員從PCBs降解菌中分離出PCBs降

30、解酶，分離該降解酶的常用方法有凝膠色譜法和。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù) 分離，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來(lái)，原因是答案(1)氮源、水和無(wú)機(jī)鹽酶量充足時(shí)，酶促反應(yīng)速率隨底物濃度增加而加快 液體(2)體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合不溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、物理性狀優(yōu)良、壽命長(zhǎng)、無(wú)毒、價(jià)格低廉及易制備等(任答兩點(diǎn)即可)(3)電泳法相對(duì)分子質(zhì)量大小相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，路程較短解析(1)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物所用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)一般有碳源、氮源、 水和無(wú)機(jī)鹽。適當(dāng)提高PCBs的濃度能使底物降解速率增加，其原因是 PCBs是待降解的底物, 酶量充足時(shí)底物濃度適當(dāng)升高，酶促反應(yīng)

31、速率隨底物濃度增加而加快。實(shí)驗(yàn)室大規(guī)模培養(yǎng)微生物所用的培養(yǎng)基一般為液體培養(yǎng)基。(2)固定化酶和固定化細(xì)胞所用的方法有化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法和包埋法，固定化細(xì)胞一般用包埋法，其原因是體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合。用于包埋PCBs 降解菌的載體要長(zhǎng)期存在于土壤中，因此應(yīng)該具有不溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)用凝膠色譜法分離定、物理性狀優(yōu)良、壽命長(zhǎng)、無(wú)毒、價(jià)格低廉及易制備等特點(diǎn) (3)實(shí)驗(yàn)室分離蛋白質(zhì)的常用方法有電泳法和凝膠色譜法,蛋白質(zhì)的原理是依據(jù)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小。相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)無(wú)法 進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，只能在凝膠外運(yùn)動(dòng)，路程較短，因此先從層析柱中洗脫出來(lái)。6. (2019石河子模擬)有機(jī)磷農(nóng)藥

32、樂(lè)果在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用廣泛， 其長(zhǎng)期使用會(huì) 導(dǎo)致土壤中有不同程度的殘留?？蒲腥藛T從土壤中分離出降解樂(lè)果的菌株(過(guò)程見(jiàn) 圖甲)，用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)后離心，取上精液探究分離出來(lái)的菌株是否能分泌降解 樂(lè)果的蛋白質(zhì)(見(jiàn)圖乙)。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：(1)制備選擇培養(yǎng)基時(shí)需要加樂(lè)果為唯一碳源，其目的是 對(duì) 培養(yǎng)基滅菌常用的方法是(2)圖甲所示劃線接種純化的操作過(guò)程中，對(duì)接種環(huán)至少需進(jìn)行 次灼燒滅菌。接種后蓋上皿蓋并將平板 放入恒溫箱中培養(yǎng)，這樣放置的目的(3)圖乙中的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？ ,原因是(4)使用樂(lè)果顯色劑采用比色法檢測(cè)降解后的樂(lè)果殘留量，應(yīng)先制作系列濃度梯度的溶液進(jìn)行顯色反應(yīng)，下表中 3號(hào)比色管的樂(lè)果濃度應(yīng)為 。管號(hào)123456樂(lè)果濃度(mg/L)01答案(1)篩選出只能利用樂(lè)果的微生物高壓蒸汽滅菌(2)6倒置避免培養(yǎng)基被落下的水滴污染不