微生物實驗課試題庫及標準答案

1、 微生物實驗課試題庫及標準答案試題類型 試題數(shù)量 備 注 名詞解釋 29 試題涵蓋了微生物學各章節(jié)有關實驗技術的內容，以及沈萍、范秀容等編微生物學實驗第三版實驗指導書的內容。 選擇題 40判斷題 59填空題 70思考題 13總數(shù) 211 微生物實驗技術 名詞解釋01.電子顯微鏡：電子顯微鏡是利用電子波波長短,分辨力高的特點以電子流代替光學顯微鏡的光束使物體放大成象的超顯微鏡檢裝置。02.普通光學顯微鏡：用自然光或者燈光作光源鏡檢物體的顯微鏡。03.合成培養(yǎng)基：由化學成分已知的營養(yǎng)物質配制而成的培養(yǎng)基。04.人工培養(yǎng)基：人工配制的供微生物生長繁殖并積累代謝產物的一種營養(yǎng)基質。05.天然培養(yǎng)基：由

2、化學成分不完全清楚的天然物質如馬鈴薯,麩皮等配制而成的培養(yǎng)基。06.半合成培養(yǎng)基：由化學成分已知的化學物質和化學成分不完全清楚的天然物質配制而成的培養(yǎng)基。07.革蘭氏染色法。：革蘭氏染色是細菌的一種鑒別染色法,細菌首先用結晶紫染色,再用碘液固定,然后用95%的酒精脫色,最后用蕃紅復染。凡是菌體初染的結晶紫被酒精脫去了紫色后,又被蕃紅復染成紅色的細菌稱為革蘭氏負反應細菌；凡是菌體初染的紫色不能被酒精脫色,也不能被蕃紅復染成紅色的細菌稱為革蘭氏正反應細菌。08.簡單染色：用單一染料使微生物細胞染上所用染料顏色的染色方法。09.稀釋平板計數(shù)法：將一定量的樣品經十倍稀釋后,用平板培養(yǎng)最后三個稀釋度的樣

3、品稀釋液。待菌落長出后,計數(shù)出某一稀釋度的菌落數(shù)后再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品中的含菌數(shù)。10.顯微直接計：利用血球計數(shù)板或細菌計數(shù)板在顯微鏡下測計出每小格的微生物細胞數(shù)量后,再換算出單位體積中微生物細胞總數(shù)的測數(shù)方法。11.巴氏消毒：巴氏消毒是法國微生物學家巴斯德發(fā)明的一種消毒方法。是在62-63的條件下,保溫半小時殺死微生物的營養(yǎng)體(主要是病原菌)的方法。12.間歇滅菌：利用100的溫度殺死微生物的營養(yǎng)體.每次1小時連續(xù)三天,中間的空隙時間讓未殺死的芽胞萌發(fā)成營養(yǎng)體,在下一次100的溫度下被殺死。如此反復兩次可將培養(yǎng)基的微生物(包括芽胞)全部殺死。該方法適用于沒有高壓滅菌器的地方進行滅菌處理。

4、113.消毒:只殺死微生物的營養(yǎng)體(主要是病原菌),而不能殺死微生物的芽胞的除菌方法。14.滅菌:利用物理或化學方法殺死所有微生物包括細菌的芽胞的除菌方法稱為滅菌。15.過濾除菌:利用一定孔徑的濾膜阻止微生物的通過而除去溶液中或者空氣中微生物的除菌方法。16.濕熱滅菌:利用熱的蒸汽殺死微生物的滅菌方法。濕熱滅菌又分常壓蒸汽滅菌和加壓蒸汽滅菌17.干熱滅菌:利用干熱空氣殺死微生物的方法。其滅菌工藝條件通常為160-170/2h。18.選擇培養(yǎng)基:根據(jù)使用的目的,控制培養(yǎng)基的組成成分,使之有利于某種微生物的生長而限制其它微生物的生長,從而能從自然界混雜的群體中分離出某一種單一的微生物。如無氮培養(yǎng)基

5、用來分離土壤中的自生固氮菌。19.加富培養(yǎng)基:在基本培養(yǎng)基中加入血清,動植物組織液或者其它生長因子而配制出來的營養(yǎng)特別豐富的培養(yǎng)基。20.鑒別培養(yǎng)基:根據(jù)微生物的代謝特點,通過指示劑的顯色反應,用以鑒別不同微生物的培養(yǎng)21.數(shù)值孔徑:數(shù)值孔徑是判斷物鏡和聚光鏡性能的重要指標,通常用N.A表示:N.A=n.sin (n為介質折光率,a為鏡口角)。22.分辨力:分辨力是指顯微鏡能夠分辨出的物體兩點間最小距離的能力。它與波長及物鏡的數(shù)值孔徑有關。23.超凈工作臺:利用過濾除菌的原理而設計出來的一種無菌操作工作臺,鼓風機鼓出的空氣通過孔徑很小的薄膜將空氣中的微生物過濾后變成無菌空氣吹向操作臺,可防止周

6、圍有菌空氣流入,能保證操作臺始終保持無菌狀態(tài),便于無菌操作。24.純培養(yǎng)技術:純培養(yǎng)技術是培養(yǎng)某個單一微生物的方法。包括培養(yǎng)基的制作與滅菌。單一微生物的分離與純化,和無菌操作接種技術。25.焦深；焦深是指清晰的目的象的上面和下面所看見的物象之間的距離。它與放大倍數(shù)成反比,即放大倍數(shù)越大,焦深越小。26.暗視野顯微術:利用暗視野聚光器能阻止光線直接照射標本,而使光線斜射在標本上。在顯微鏡中見到黑暗視野中明亮物象的鏡檢技術。27.熒光顯微術:紫外光作光源的顯微鏡檢技術。28.負相差:在黑暗視野中看到明亮物體的相差鏡檢技術。29.正相差:在明亮視野中看到黑暗物體的相差鏡檢技術。實驗技術 選擇題01.

7、革蘭氏染色的關鍵操作步驟是:A.結晶紫染色。B.碘液固定。C.酒精脫色。D.復染。 答:(C)02.放線菌印片染色的關鍵操作是:A.印片時不能移動。B.染色。C.染色后不能吸干。D.A-C。 答:(A)。03.高氏培養(yǎng)基用來培養(yǎng):A.細菌。B.真菌。C.放線菌。 答:(C)。04.肉湯培養(yǎng)基用來培養(yǎng):A.酵母菌。B.霉菌。C.細菌。 答:(C)。05.無氮培養(yǎng)基用來培養(yǎng):A.自生固氮菌。B.硅酸鹽細菌。C.根瘤菌。D.A,B均可培養(yǎng)。E.A,B,C均可培養(yǎng)。答:(D)。06.在使用顯微鏡油鏡時,為了提高分辨力,通常在鏡頭和蓋玻片之間滴加:A.二甲苯。B.水。C.香柏油。 答:(C)。07.常用

8、的消毒酒精濃度為:A.75%。B.50%。C.90%。 答:(A)。08.用甲醛進行空氣熏蒸消毒的用量是:A.20ml/M3。B.6ml/M3。C.1ml/M3。 答:(B)。09高壓蒸汽滅菌的工藝條件是:A.121/30min。B.115/30min。C.130/30min。 答:(A)。10巴氏消毒的工藝條件是:A.62-63/30min。B.71-72/15min。C.A.B.均可。 答:(C)。11半固體培養(yǎng)基的主要用途是:A.檢查細菌的運動性。B.檢查細菌的好氧性。C.A.B.兩項。 答:(C)。12半固體培養(yǎng)基的瓊脂加入量通常是:A.1%。B.0.5%。C.0.1%。 答:(B)。

9、13.使用手提式滅菌鍋滅菌的關鍵操作是:A.排冷氣徹底。B.保溫時間適當。C.滅菌完后排氣不能太快。D.A-C。 答:(A)。14目鏡頭上的"K"字母表示:A.廣視野目鏡。B.惠更斯目鏡。C.補償目鏡。 答:(C)。15.目鏡頭上的"P"字母表示:A.平場目鏡。B.廣視野目鏡。C.平場補償目鏡。 答:(A)。16.物鏡頭上的"PL"字母表示:A.正低相差物鏡。B.正高相差物鏡。C.負高相差物鏡。 答:(A)。17.物鏡頭上的"UVL"字母表示。A.無熒光物鏡。B.照相物鏡。C.相差物鏡。 答:(C)。18鏡頭上標有

10、"對C"字母的鏡頭是:A.相差調整望遠鏡。B.攝影目鏡。C.相差目鏡。 答:(A)。19"PA"表示:A.馬鈴薯培養(yǎng)基。B.高氏培養(yǎng)基。C.肉湯培養(yǎng)基。 答:(A)。20.無菌室空氣滅菌常用方法是:A.甲醛熏蒸。B.紫外燈照射。C.噴石炭酸。D.A.B.并用。 答:(D)。21.干熱滅菌的關鍵操作是:A.滅菌物不能有水。B.保溫過程中不能開箱門。C.降溫不能太快。 答:(A)。22霉菌水浸制片的關鍵操作是:A.菌絲要分散。B.菌絲首先要用50%的乙醇浸潤。C.蓋蓋玻片不能有氣泡。D.A-C。答:(A)23.用來染芽胞的染料通常是:A.孔雀綠。B.結晶紫。

11、C.復紅。D.番紅。 答:(A)。24復紅法染鞭毛的關鍵操作是:A.玻片干凈。B.染料新鮮。C.菌體活化適當。D.A.B.C。 答:(B)。25.鍍銀法染鞭毛的關鍵操作是:A.玻片干凈。B.染料無沉淀。C.加熱適當。D.菌體活化適當。E.A-D。 答:(A)。26進行簡單染色使用的染色液通常是:A.復紅。B.蕃紅。C.結晶紫。D.孔雀綠。E.A-D均可。 答:(A)。27.物鏡頭上的"APO"字母代表:A.消色差物鏡。B.復消色差物鏡。C.半消色差物鏡。 答:(B)。28物鏡頭上的"Ach"字母表示:A.平場物鏡。B.超平場物鏡。C.消色差物鏡。 答:(

12、A)。29物鏡頭上的“NH”字母表示:A.正相差物鏡。B.負相差物鏡。C.負高相差物鏡。 答:(C)。30物鏡頭上的“0.17”表示:A.要求的蓋玻片厚度。B.要求的載玻片厚度。C.鏡頭浸油的深度。答:(A)。31鏡頭上標有“NK"字母的鏡頭是:A.照相目鏡。B.熒光目鏡。C.相差目鏡。答:(A)。32目鏡頭上的“PK”字母表示:A.平場目鏡。B.補償目鏡。C.平場補償目鏡。答:(C)。33物鏡頭上的"Splan"字母表示:A.超平場物鏡。B.平場物鏡。C.消色差物鏡。答:(A)34物鏡頭上的"SplanApo"表示:A.超平場復消色差物鏡。B

13、.超平場半消色差物鏡。C.超平場物鏡。答:(A)。35.物鏡頭上的"Planapo"表示:A.超平場物鏡。B.平場物鏡。C.平場復消色差物鏡。答:(C)。36物鏡頭上的"Plan"字母表示:A.平場物鏡。B.消色差物鏡。C.超平場物鏡。答:(A)。37目鏡頭上的"W"字母表示:A.廣視野高眼點補償目鏡。B.高眼點目鏡。C.廣視野目鏡。答:(C)。38目鏡頭上的"SWK"字母表示:A.超廣視野目鏡。B.高眼點補償目鏡。C.平場補償目鏡。答:(A)。39.目鏡頭上的"WHK"字母表示:A.超廣視野目

14、鏡。B.廣視野高眼點目鏡。C.平場補償目鏡。答:(B)。40.物鏡頭上的"錯.L"字母表示:A.消色差物鏡。B.半消色差物鏡。C.復消色差物鏡。答:(B)。實驗技術 判斷題01.無菌吸管上端塞入棉花是為了過濾口中的有菌空氣。答:(對)。02.無菌吸管上端塞入棉花的目的是為了防止菌液吸入口中。答:(錯)。03.稀釋平板測數(shù)時,放線菌計數(shù)的標準是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個之間的稀釋度進行計數(shù)。答:(對)。04稀釋平板測數(shù)時,細菌計數(shù)的標準是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個之間的稀釋度進行計數(shù)。答:(對)。05.稀釋平板測數(shù)時,細菌,放線菌,真菌的計數(shù)標準是選擇每皿中菌落數(shù)

15、在30-300個的稀釋度進行計數(shù)。答:(錯)。06稀釋平板測數(shù)時,真菌的計數(shù)標準是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個的稀釋度進行計數(shù)。答:(對)。07.稀釋平板測數(shù)時,細菌、放線菌、真菌的計數(shù)標準是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個的稀釋度進行計數(shù)。答:(錯)。08.用混菌法測微生物活菌數(shù)時,每個平皿中的菌液加入量是1ml。答:(對)。09.用涂抹法測微生物活菌數(shù)時,每個平皿中的菌液加入量是0.1ml。答:(對)。10用油鏡鏡檢時應將聚光器升至最高。答:(對)。11使用高倍鏡時,可將聚光器升至最高。答:(錯)。12.為了滿足微生物對微量元素的需要,配制培養(yǎng)基所用的水最好使用自來水。答:(對)。13

16、.稀釋測數(shù)用的無菌水通常是由自來水滅菌而成。答:(對)。14.觀察根霉,青霉只需用低倍鏡觀察即可。答:(錯)。15.實驗室通常使用血球計數(shù)板測微生物的總菌數(shù)。答:(錯)。16浸油的油鏡頭可用軟的衛(wèi)生紙擦凈。答:(錯)。17.為了節(jié)省時間,可直接在染色涂片上滴加香柏油后,直接用油鏡觀察。答:(錯)。18.使用油鏡的正確操作步驟是:1.低倍鏡觀察。2.高倍鏡觀察。3.轉出高倍鏡頭,滴加香柏油后用油鏡觀察。答:(對)。19.在擦拭顯微鏡鏡頭時,應向一個方向擦拭。答:(對)。20.顯微鏡鏡頭的放大倍數(shù)越大,它的數(shù)值孔徑值越大,其鏡口角也越大。答:(對)。21.稀釋平板測數(shù)通常是采用十倍稀釋法。答:(對

17、)。22.稀釋平板測數(shù)通常采用的是二倍稀釋法。答:(錯)。23.做稀釋平板測數(shù)時,只需一支吸管從頭稀釋到尾即可。答:(錯)。24.做稀釋平板測數(shù)時,每做一個稀釋度都必須更換一支無菌吸管。答:(對)。25.稀釋平板測數(shù)時,無論是用混菌法,還是用涂抹法,每個平皿中的菌液加入量都是1ml。答:(錯)。26.稀釋平板測數(shù)時,無論是用混菌法,還是用涂抹法,每個平皿中的菌液加入量都是0.1ml。答:(錯)。27.實驗室做固體培養(yǎng)基時,常加1.8%的瓊脂作凝固劑,做半固體培養(yǎng)基時,瓊脂加入量通常是0.5%。答:(對)。28.實驗室做固體培養(yǎng)基,常加2%的瓊脂作凝固劑,做半固體培養(yǎng)基時,瓊脂加入量通常是1%。

18、答:(錯)。29.E.coli經革蘭氏染色后,菌體呈紅色,它是革蘭氏正反應細菌。答:(錯)。30.在光學顯微鏡下,根霉的孢子囊是透明的。答:(錯)。31.使用手提滅菌鍋滅菌后,為了盡快排除鍋內蒸汽,可直接打開排氣閥排氣。答:(錯)。32.蘇云金桿菌的芽胞在菌體的中央。答:(錯)。33.所有真菌菌落的表面干燥,呈絨毛狀。答:(錯)。34.所有放線菌菌落表面干燥,呈粉粒狀。答:(錯)。35.所有細菌菌落的表面都是光滑濕潤狀。答:(錯)。(芽胞菌菌落表面粗糙。)。36鏡臺測微尺每小格的實際長度是10微米。答:(對)。37.目鏡測微尺每小格的實際長度是10m。答:(錯)。38.鏡臺測微尺每小格的實際長

19、度是10nm(納米)。答:(錯)。39.血球計數(shù)板兩邊的平臺比計數(shù)區(qū)高0.1cm。答:(錯)。40.血球計數(shù)板兩邊的平臺比計數(shù)區(qū)高0.1mm。答:(對)。41.棉花塞塞入試管的長度應為棉塞全長的2/3。答:(對)。42.棉花塞塞入試管的長度應為棉塞全長的2/3。答:(錯)。43.擺斜面的長度應不超過試管長度的2/3。答:(錯)。44.擺斜面的長度應不超過試管長度的1/2。答:(對)。45.血球計數(shù)板計數(shù)區(qū)的面積是1mm2。答:(對)。46.用血球計數(shù)板計數(shù)時,任數(shù)5個大方格(80個小格)的菌數(shù)即可。答:(錯)。47.在使用細菌計數(shù)板計數(shù)時,為了防止計數(shù)偏大,計數(shù)區(qū)四周壓線的菌只能數(shù)兩邊。答:(

20、對)。48.目鏡測微尺每格的實際長度是未知的,需用長度已知的鏡臺測微尺校正。答:(對)。49.測微生物的細胞大小時,需要校正的是鏡臺測微尺每格的實際長度。答:(錯)。50.測微生物細胞大小時,需要校正的是目鏡測微尺每格的實際長度。答:(對)。51.血球計數(shù)板計數(shù)區(qū)每小格的體積是1/4000mm3。答:(對)。52.血球計數(shù)板計數(shù)區(qū)共有400個小格,每小格的面積是1/400cm2。答:(錯)。53.用分裝器將培養(yǎng)基分裝試管時,應謹防培養(yǎng)基沾染試管口。答:(對)。54.瓊脂的熔化溫度是90以上,凝固溫度是45以下。答:(錯)。55.瓊脂的熔化溫度是95以上,凝固溫度是45以下。答:(對)。56.玻

21、璃器材洗凈后在急需時可采用高壓蒸汽滅菌,而不能用干熱滅菌。答:(對)。57.細菌計數(shù)板每小格的體積是1/20000mm3。答:(對)。58.血球計數(shù)板計數(shù)區(qū)每小格的體積是1/4000cm3。答:(錯)。59.無菌室用甲醛熏蒸消毒后可噴氨水以減少甲醛的刺激。答:(對)。 實驗技術 填空題01.霉菌水浸片的制片程序是加一滴水于載玻片中央,用解剖針挑取菌絲少許,將菌絲用50%的酒精浸潤,將菌絲用蒸餾水水洗,將菌絲放入載玻片水滴中并小心分散,蓋上蓋玻片。02.放線菌印片染色的操作程序是印片,干燥,固定,復紅染色2-3分鐘,水洗,晾干。03.固體培養(yǎng)基常用洋菜(瓊脂)作凝固劑,普通固體培養(yǎng)基的用量一般為

22、1.5-2.0%_,半固體培養(yǎng)基的用量一般為0.5%_。04.簡單染色的操作程序是涂片,干燥,固定,復紅染色1-2分鐘,水洗,晾干。05.使用手提式滅菌鍋進行滅菌的操作程序是_鍋內加水,滅菌物體裝鍋,對稱上緊密封螺帽將鍋密封上,加熱升溫,排盡鍋內冷空氣,升溫至滅菌工藝條件(一般為98kpa),在工藝條件下保壓計時(一般為30分鐘),到時間后切斷熱源,降溫,出鍋。06實驗室配制固體培養(yǎng)基的操作程序是照配方稱取藥品,將藥品溶解在一定量的水中后加熱煮沸,將瓊脂按量稱取后用水浸濕,將浸濕的瓊脂加入煮沸的營養(yǎng)液中,待瓊脂全部融化后調節(jié)pH值,補充損失的水分,分裝培養(yǎng)基入不同的容器中。07.有莢膜的細菌用

23、負染色法染色后,莢膜為無色,菌體為_紅色.08.細菌經革蘭氏染色后,革蘭氏正反應菌呈_紫色,革蘭氏負反應菌呈_紅色。09.細菌經簡單染色后呈_所染染料的顏色_。10.顯微鏡的光學系統(tǒng)由_反光鏡,聚光鏡,物鏡,_和目鏡組成。11顯微鏡的機械部分包括_鏡座,鏡臂,載物臺,轉換器,鏡筒,推動器,粗動螺旋,微動螺旋聚光鏡升降螺旋。等九部分組成。12.高氏培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)_放線菌,其pH值為_7.5-8.0_。13.PA培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)真菌_菌,其pH值為5-6_。14.牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)_細菌,其pH值為_、7.0-7.2_。15.無氮培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)自生固氮菌。其氮源來自_空氣中

24、的N2_。16.干熱滅菌的工藝條件是160-170/2h_。17.使用顯微鏡低倍鏡觀察時,聚光器應該降低,使用顯微鏡高倍鏡觀察時,聚光器應該適當升高。18.革蘭氏染色的關鍵操作是酒精脫色_。19.顯微鏡的倍數(shù)越大,焦深越小,調焦應該越小心_。20.按培養(yǎng)基的形態(tài),可將培養(yǎng)基分為液體_,固體_,半固體_三種類型。21.配制常規(guī)培養(yǎng)基時通常用_自來_水。22.熱滅菌通常用來滅菌玻璃器材,培養(yǎng)基的滅菌通常用_高壓蒸汽滅菌。23.細菌稀釋測數(shù)通常采用10倍_稀釋法,稀釋用試管無菌水為9_毫升。24.配制培養(yǎng)基時常用_1molNaOH、和1molHCL調節(jié)pH值。25.按培養(yǎng)基的特殊用途,可將培養(yǎng)基分成

25、_選擇培養(yǎng)基,加富培養(yǎng)基,鑒別培養(yǎng)基等。26.選擇培養(yǎng)基可用來分離培養(yǎng)我們所需的特殊微生物類群,例如我們要從土壤中分離纖維分解菌,可以利用_纖維素_作唯一碳源來篩選纖維分_解菌_；要分離產蛋白酶的微生物,可以利用酪蛋白,作唯一氮源分離_蛋白分解菌_。27革蘭氏染色的操作程序是涂片,干燥,固定,結晶紫染色1分鐘,水洗,碘液媒染1分鐘,水洗,95%的乙醇脫色25秒,水洗,蕃紅復染3-5分鐘,水洗,晾干_。28.培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長繁殖或積累代謝產物的營養(yǎng)基質。按營養(yǎng)物質的不同來源可分為_天然培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基,半合成培養(yǎng)基_三大類。29.高倍鏡頭的數(shù)值孔徑通常為_0.65,放大倍數(shù)

26、為_40x_。30.油鏡頭的數(shù)值孔徑通常為_1.25,放大倍數(shù)為_100x或90x_。31.低倍鏡頭的數(shù)值孔徑通常是0.25_,放大倍數(shù)為_10x或8x_。32.穿刺接種使用的接種工具為_接種針,斜面接種使用的接種工具為接種環(huán)_。33.進行稀釋測數(shù)使用的主要器材有_酒精燈,1ml無菌吸管,9ml試管裝無菌水,9cm的無菌平板34.用孔雀綠和復紅作細菌芽胞染色時,可使菌體呈紅色,使芽胞呈_綠色。35.用日光燈作光源時,通常用_平面反光鏡,用自然光作光源時,通常用凹面_反光鏡36.無菌室殺菌通常采用紫外燈照射,和噴灑化學藥劑(如酚)相結合的方法。37.半固體培養(yǎng)基通常用來檢查_細菌的運動性。38.

27、擺試管斜面的基本操作方法是將擺斜面用特制木條放在桌面上,將裝有固體培養(yǎng)基的試管趁熱放在特制木條上擺成斜面,斜面長度不得超過試管長度的1/2,將試管棉塞部分用滅菌報紙蓋上,以防空氣中微生物落到棉塞上引起污染。39不能加熱滅菌的液體培養(yǎng)基應采用濾法除菌,通常用的器皿有蔡氏細菌過濾濾和膜濾_。40.藍細菌的培養(yǎng)可用膜濾_培養(yǎng)基。41.分離酵母菌時為了抑制細菌的生長,通常用_膜培養(yǎng)基。42.從土壤中分離真菌時,通常在培養(yǎng)基中加入_孟加拉紅和_鏈霉素顯_抑制細菌的生長。43.測微生物的大小使用的主要工具是微鏡,鏡臺測微尺和_目鏡測微尺。44.測微生物的數(shù)量使用的主要工具是_顯微鏡和血球計數(shù)板_。45.進

28、行細菌的顯微計數(shù)時使用的主要工具是顯微鏡和細菌計數(shù)板_。46.普通光學顯微鏡測酵母菌的大小的操作程序是將鏡臺測微尺置載物臺上,調焦找到臺尺,在低倍鏡下校正目鏡測微尺每格的長,在高倍鏡下校正目鏡測微尺每格的長,去掉臺尺換上待測樣本片,在高倍鏡下測出十個酵母菌寬和長的格數(shù),將校正值乘入,算出十個酵母菌的平均寬和平均長,以平均寬x *平均長Y(m)表示酵母菌的大小。47.顯微計數(shù)的操作程序是_將待測菌進行適當?shù)南♂?將計數(shù)板置于載物臺上,在低倍鏡下找到計數(shù)區(qū),將菌液加到計數(shù)區(qū)上,調焦看到菌體,按五點取樣法計數(shù)五個大方格的菌數(shù),計算每小格的含菌數(shù),計算出單位體積(如每ml)中的含菌數(shù)。48.莢膜染色法

29、的操作程序是_涂片,風干,加復紅染色3-5分鐘,水洗,晾干,加墨素涂抹,風干。49.芽胞染色的操作程序是片,干燥,固定,孔雀綠加熱染色15分鐘,水洗,復紅染色2-3分鐘,水洗,晾干。50.芽胞染色的關鍵操作是孔雀綠加熱染色_。51.放線菌印片染色的關鍵操作是_印片時不能移動_。52.用負染色法染莢膜的關鍵操作是_涂抹墨素要薄。53.搖床振蕩培養(yǎng)通常用來培養(yǎng)_好氣微生物,享格特的厭氧操作方法通常用來培養(yǎng)專性厭氧菌54.革蘭氏染色反應與細菌細胞壁的_結構_和_組成_有關。在革蘭氏染色過程中,當用95%酒精處理后,就放在顯微鏡下觀察,革蘭氏陽性菌呈_紫_色,而革蘭氏陰性菌呈_無色。55.血球計數(shù)板與

30、細菌計數(shù)板的主要差別是前者計數(shù)區(qū)的深度是后者的五倍56.制霉菌水浸片時加棉蘭染色液可使菌體呈_淺蘭色。57.Anabaenaazo對ica的異型胞通常是_間生在光學顯微鏡下它是_透明的,細胞兩端有極節(jié)_。它能控制氧氣的進入,保持異型胞內_低氧分壓,以利于固定分子氮_。58.配制培養(yǎng)基時,應注意各種營養(yǎng)物質的配比,特別是C:N比(碳氮比)。一般而言,當C:N³5:1時,有利于_菌體生長；當C:NÐ5:1時,有利于_積累代謝產物。59.由于各種微生物對某種化合物如抗生素、染料的敏感性不同,可以利用這一特征來從土壤中分離出不同類群的微生物。如在培養(yǎng)基中加入青霉素(鏈霉素),會殺死

31、或抑制細菌和放線菌的生長而分離出真菌_；在培養(yǎng)基中加入_結晶紫_,有利于分離到革蘭氏陰性菌。60細菌在革蘭氏染色過程中,最后用蕃紅復染的原因是G-細菌經結晶紫染色、碘液媒染、酒精脫色后菌體紫色脫去,故需用蕃紅復染,這樣在光鏡下才能見到紅色的菌體。61.高倍鏡下能看到的物象在油鏡下看不到往往是由于_片置反和_菌體著色太淺引起。62.微生物在培養(yǎng)基中生長時,由于其_新陳代謝而使培養(yǎng)基_pH值發(fā)生改變；所以在配制培養(yǎng)基時,為維持該條件的相對恒定,常在培養(yǎng)基中加入緩沖物質如_碳酸鹽(CaCO3)_或_磷酸鹽63.一般而言,微生物在含糖基質上生長,會產_酸_,而使_pH下降_；微生物分解蛋白質或氨基酸會

32、產_堿_,而使_pH上升.64.在微生物培養(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)皿首先是被_Petri采用的,因此又稱培養(yǎng)皿為_Petri_dish。Hesse在其妻子的啟發(fā)下,將固體培養(yǎng)基使用的凝固劑由明膠改為_瓊脂65.顯微鏡的微動螺旋每轉一圈升降距離為_0.1毫米66.兩個典型的革蘭氏正反應細菌和革蘭氏負反應細菌經革蘭氏染色后都呈陰性反應往往是由于_酒精脫色時間過長和_菌體培養(yǎng)時間太長引起。67.檢查乳品和飲料是否含有_大腸桿菌(E.Coli)_等腸道細菌,可采用_伊紅-美蘭_培養(yǎng)基,在這種培養(yǎng)基平板上_大腸桿菌(E.Coli)_會形成具有_金屬_光澤的紫黑色小菌落。68.細菌鞭毛經鍍銀法染色后呈_褐_色。

33、69.細菌鞭毛經李夫森法染色后呈_紅色。70.由于升汞(HgCL2)有腐蝕作用,所以不能用于金屬器皿消毒,特別是_鋁制品。 實驗技術 思考題01.試述在普通光學顯微鏡下測定微生物細胞大小的基本方法。測定微生物細胞的大小主要使用目鏡測微尺。其方法如下:1.先用長度已知的鏡臺測微尺校正目鏡測微尺。校正的方法是讓臺尺與目尺重疊,看臺尺的X格正好與目尺的Y格重疊,然后用 計算目尺每格的長.分別校正目鏡測微尺在低倍鏡,高倍鏡及油鏡下每格所代表的實際長度。2.將待測微生物制成水浸片或染色涂片置載物臺上,調焦找到微生物后用目鏡測微尺測量其寬幾格,長幾格,然后乘上相應放大倍數(shù)下的校正值。3.一般測10個微生物

34、,然后以平均值表示。4.若是酵母、細菌等單細胞微生物,通常測其寬和長,然后以平均寬´平均長表示,單位為m。02以測蘇云金桿菌工業(yè)菌粉中的活菌數(shù)為例,試述稀釋平板計數(shù)的基本方法。1.測數(shù)前先準備好測數(shù)用的1ml無菌吸管,9cm無菌平板,9ml試管無菌水和牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。2.稱取10克工業(yè)菌粉加入90ml無菌水中置搖床上或用手振蕩20-30分鐘,讓菌體分散。3.將上述振蕩過的菌液按無菌操作法進行十倍稀釋直到10-8。4.取9cm無菌平板9套用記號筆在平板底編號,10-8編3套,10-7編3套,10-6編3套。 5.用1支1ml的無菌吸管,取1ml10-8的稀釋菌液放入編號10-8

35、的平板中,如此將三個重復做完.同法取10-7稀釋菌液放入三個編號為10-7平板中.同法取10-6稀釋菌液放入三個編號為10-6平板中.(均要按無菌操作法做)。6.將牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基熔化冷至45-50后,在酒精燈火焰邊按無菌操作法倒入上述9套平板中,每個加入量大約15-20ml,邊加邊搖動平板,使培養(yǎng)基與菌液充分混勻。7.待培養(yǎng)基凝固后,將平板倒過來,置28-30下培養(yǎng)48小時后計數(shù)。03.試述劃線分離的操作方法。1.取9ml無菌平板一套在火焰旁按無菌操作法倒人15-20ml營養(yǎng)瓊脂,讓其冷凝成平板。2.左手拿上述平板,右手拿接種環(huán)在火焰上滅菌后沾取原始分離物在平板上平行劃線三條3.將接種

36、環(huán)在火焰上滅菌,左手平板轉動大約70度,用滅菌接種環(huán)通過第一次劃線的地方作二次劃線,亦劃三條。4.同上法再作第三次,第四次劃線。 5.蓋上平板蓋,將平板倒過來置28-30下培養(yǎng)2-4天后觀察結果.劃的好應在第四次劃線處出現(xiàn)單個菌落。注:本答案也可畫圖說明。04.試述檢查細菌的運動性的操作方法。檢查細菌的運動性有兩種方法:1.鏡檢法將待檢樣品制成菌懸液,滴一點菌液于一蓋玻片上,取一凹窩載玻片,將凹窩對準菌懸液蓋在蓋玻片上,然后將蓋玻片和載玻片一起翻轉,讓菌懸液在凹窩上的蓋玻片下.然后在顯微鏡下觀察,觀察應找懸液的邊緣.因細菌為了更多地接觸空氣,總向水滴的邊緣運動,觀察時要注意將細菌的運動與分子的

37、布朗運動區(qū)別開。2.半固體穿刺法將待檢細菌穿刺接種在半固體試管培養(yǎng)基中,若細菌僅沿穿刺線生長,說明細菌不運動。若細菌沿穿刺線向周圍擴散生長,說明細菌有運動性。05簡述配制培養(yǎng)基的基本原則:培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長繁殖,或用于積累代謝產物的營養(yǎng)基質。所以配制培養(yǎng)基時應注意以下原則:1.根據(jù)微生物的不同選用不同的培養(yǎng)基,以滿足微生物對營養(yǎng)物的需要。如自養(yǎng)型微生物所要求營養(yǎng)較簡單,而異養(yǎng)型微生物營養(yǎng)要求較復雜。培養(yǎng)細菌,放線菌,真菌等各有不同的培養(yǎng)基。2。注意各種營養(yǎng)物質的濃度與配比。微生物生長所需要的營養(yǎng)物質往往在適當時才生長良好。濃度大往往會抑制微生物的生長。如糖類,各種重金屬鹽類如

38、果濃度太高,也會影響微生物的生長。同時各種營養(yǎng)物質的濃度比也應注意,特別是C/N比。3.注意將培養(yǎng)基的pH值控制在一定范圍內。為了防止因微生物生長繁殖或積累代謝產物后影響培養(yǎng)基pH值,常在其中加入磷酸鹽,碳酸鹽,以維持培養(yǎng)基pH值的相對恒定。4.同時還應考慮培養(yǎng)基的氧化還原電位及原材料的經濟、易購和來源廣泛的原則。06試述配制培養(yǎng)基的基本過程及應該注意的問題。配制培養(yǎng)基的基本過程是:1.按培養(yǎng)基的配方稱取各種藥品,用量太少的藥品應配制成溶液后再取一定量加入。2.將各種藥品加水溶解,通常是加所需水量的一半。3.若配固體培養(yǎng)基,按2%的用量稱取瓊脂,用水將瓊脂浸濕一下,用手擠去瓊脂中過多的水分,加

39、入2的溶液中。4.加熱至瓊脂全部溶解,并補足所需的全部水量。5.用1molNaOH和1molHCL調節(jié)pH至要求值。6.用分裝器將培養(yǎng)基分裝入試管或三角瓶中,塞上棉塞并包扎,滅菌后備用。注意事項:1.配制過程中,在加熱熔化瓊脂時,要不斷攪拌,以防糊底。2.分裝時不要讓培養(yǎng)基沾染試管口或瓶口,以防培養(yǎng)過程中容易污染雜菌。 07.試述顯微計數(shù)的基本方法。顯微計數(shù)通常用來測微生物單細胞的數(shù)量,大一點的細胞如酵母菌用血球計數(shù)板,小一點的細胞如細菌用細菌計數(shù)板。該測數(shù)方法不能區(qū)別死活細胞,測出的是微生物總的細胞數(shù)量。血球計數(shù)板和細菌計數(shù)板構造相似,計數(shù)區(qū)的面積都是1mm2,兩者的差別在于血球計數(shù)板的深度

40、為0.1mm。細菌計數(shù)板的深度為0.02mm。無論是血球計數(shù)板還是細菌計數(shù)板計數(shù)區(qū)都劃為25個大方格,每個大方格又劃為16個小格。所以每小格的體積為1/4000mm3或1/20000mm3。計數(shù)時,先在顯微鏡下找到計數(shù)區(qū),然后將菌液稀釋到適當濃度,取少量菌液滴在計數(shù)區(qū)上蓋上特制蓋玻片,亦可先蓋蓋玻片。然后用吸管將菌液從計數(shù)板上的溝里加入?？烤旱谋砻鎻埩Τ錆M計數(shù)區(qū)。計數(shù)時采取五點取樣法數(shù)數(shù),即四角各取一個大方格,再在中央取一個大方格。計數(shù)時大方格四周壓線的細胞只數(shù)兩邊,以防增加數(shù)量。將5個大方格的菌數(shù)加起來除以80得出每個小格的菌數(shù),再乘以4000即為1mm3的菌數(shù),再乘上1000即為1ml的

41、菌數(shù),乘上稀釋倍數(shù)即為樣品含菌數(shù)。 08標本片上的某一物象,第一次看到后如何再次找到它?要做到這一點,首先取決于顯微鏡的好壞,若顯微鏡上的推動器帶有縱橫標尺,很容易做到這一點。首先記住標本片放到推動器上的方向,然后記下觀察某一物體時推動器上的縱橫標尺的數(shù)字。如縱3,橫4。當標本片拿下來后,若要重復觀察原來的物象,只要按原方向將標本片莢在推動器上,將推動器推動到第一次觀察該物體的縱,橫標尺數(shù)字縱3,橫4,即可看到第一次觀察過的物體。 09.試述在光學顯微鏡下所看到的Anabaenaazo對ica的主要特征。Anabaenaazo對ica的主要特征是:1.菌體為絲狀體,營養(yǎng)細胞為綠色,藻絲不扭曲。2.該菌有異型胞,異型胞間生,無色透明,兩端有極點。 3