全自動(dòng)生化分析儀基本知識(shí)與應(yīng)用

1、第一頁(yè)，共87頁(yè)。w根據(jù)反應(yīng)裝置： 連續(xù)流動(dòng)式、離心式和分立式w根據(jù)反應(yīng)介質(zhì)： 液相化學(xué)、干式化學(xué)w根據(jù)反應(yīng)通道： 單通道、多通道w根據(jù)自動(dòng)化程度： 全自動(dòng)、半自動(dòng) w根據(jù)儀器的復(fù)雜程度： 小型、中型和大型w根據(jù)分析系統(tǒng)試劑開放程度： 封閉系統(tǒng)、開放系統(tǒng)第二頁(yè)，共87頁(yè)。w比例泵w空氣分段w透析器w管道式，攜帶污染第三頁(yè)，共87頁(yè)。第四頁(yè)，共87頁(yè)。w幾乎幾乎“同步分析”w隨機(jī)任選式（早期的早期的必須按項(xiàng)目順序）w比色杯人工清洗？（一次性一次性）第五頁(yè)，共87頁(yè)。w目前使用生化分析儀主要此種類型。w比色杯 袋式儀器可以自動(dòng)制作比色杯 比色杯可以兼作反應(yīng)杯 比色杯不能作流動(dòng)比色池（半自動(dòng)半自動(dòng)）

2、第六頁(yè)，共87頁(yè)。4.干式生化分析儀 w干片分：擴(kuò)散層、試劑層、指示劑和支持層。w利用“反射光度法”和“差式電位法”檢測(cè)。w以液體樣品中的“水”為溶劑。w理論基礎(chǔ)：KubelkaMunk理論。第七頁(yè)，共87頁(yè)。w光源（石英鹵素?zé)簦﹚常用“干涉濾光片”分光w微量流動(dòng)比色池。w終點(diǎn)法項(xiàng)目通常在“儀器”外孵育，時(shí)間和溫度的準(zhǔn)確性常影響測(cè)定結(jié)果。第八頁(yè)，共87頁(yè)。w例例1w臨床上所指的封閉式全自動(dòng)生化分析儀主要是wA 質(zhì)控物封閉wB 試劑封閉wC 環(huán)境封閉wD 儀器封閉wE 技術(shù)人員封閉第九頁(yè)，共87頁(yè)。w例例2w全自動(dòng)生化分析儀可分為小型、中型、大型，其依據(jù)是：wA 單通道和多通道數(shù)量wB 儀器可測(cè)

3、定項(xiàng)目的多少wC 測(cè)定程序可否改變wD 儀器的復(fù)雜程度、功能和單位時(shí)間測(cè)試數(shù)量wE 是否可以同步分析第十頁(yè)，共87頁(yè)。w例例3w全自動(dòng)與半自動(dòng)生化分析儀共同之處為wA 取樣wB 加試劑混合wC 檢測(cè)波長(zhǎng)wD 孵育反應(yīng)wE 清洗系統(tǒng)第十一頁(yè)，共87頁(yè)。w例例4w干化學(xué)式自動(dòng)生化分析儀所用的光學(xué)系統(tǒng)為wA 分光光度計(jì)wB 原子吸光儀wC 反射比色計(jì)wD 固定閃爍計(jì)數(shù)器wE 免疫比濁計(jì)第十二頁(yè)，共87頁(yè)。w例例5w關(guān)于分立式全自動(dòng)生化分析儀的比色杯的闡述，錯(cuò)誤的錯(cuò)誤的是：wA 比色杯可以是反應(yīng)杯wB 比色杯可以自動(dòng)制作wC 比色杯可以是流動(dòng)比色池wD 比色杯可以是石英玻璃wE 比色杯可以是硬質(zhì)塑料第

4、十三頁(yè)，共87頁(yè)。w1.工作環(huán)境 空間、電源（UPS)、避免直射陽(yáng)光、環(huán)境溫度和濕度、電磁輻射、化學(xué)品。w2.水 蒸餾水、去離子水、反滲透水。w3.純水等級(jí)：一般二級(jí) 二級(jí)純水微生物含量： 最大每毫升菌落數(shù)103。第十四頁(yè)，共87頁(yè)。w例例6w臨床生化實(shí)驗(yàn)室一般采用NCCLS所規(guī)定的二級(jí)純水，其微生物菌落（CFU/ml)應(yīng)低于wA 1wB 10wC 100wD 1000wE 100000第十五頁(yè)，共87頁(yè)。w例例7w臨床生化實(shí)驗(yàn)室用水一般采用：wA 一級(jí)水wB 二級(jí)水wC 三級(jí)水wD 次級(jí)水wE 自來水第十六頁(yè)，共87頁(yè)。w1.樣品系統(tǒng) w專用樣品杯和直接用采血試管w凝塊和氣泡檢出功能w自動(dòng)沖

5、洗功能w樣品預(yù)稀釋、后稀釋、加倍、標(biāo)準(zhǔn)原液系列稀釋等不同的稀釋方式。第十七頁(yè)，共87頁(yè)。w2.試劑系統(tǒng)w冷藏功能w液面感應(yīng)及氣泡檢出w雙試劑與多試劑w試劑瓶的防蒸發(fā)與死體積w試劑條碼第十八頁(yè)，共87頁(yè)。w3.條形碼系統(tǒng)w三組成部分：掃描系統(tǒng)、信號(hào)整形、譯碼器w黑條白空相間的條碼符號(hào)w光電轉(zhuǎn)換元件w常用條碼類型：Code39, Code128等第十九頁(yè)，共87頁(yè)。w4.反應(yīng)系統(tǒng)w4.1 反應(yīng)盤w4.2 混合裝置 多用特氟隆不沾涂層的攪拌棒w4.3 溫控裝置 w理想的溫度波動(dòng)應(yīng)小于0.1w3種方式：空氣浴、水浴、恒溫液間接加熱w強(qiáng)生干化學(xué)儀用空氣浴恒溫第二十頁(yè)，共87頁(yè)。w5.清洗系統(tǒng) 一般先用堿

6、性液沖洗、再用酸性液沖洗、最后用去離子水沖洗。w6.管路系統(tǒng) 管路系統(tǒng)的老化或長(zhǎng)期使用后反應(yīng)廢物的沉積阻塞常造成反應(yīng)結(jié)果的重復(fù)性差。第二十一頁(yè)，共87頁(yè)。w7.比色系統(tǒng)w7.1 光源 鹵素?zé)舨ㄩL(zhǎng)300800nmw 氙燈 波長(zhǎng)285750nmw使用壽命1000h左右，光源能量對(duì)340nm影響最大。w7.2 比色杯 常用石英、硬質(zhì)玻璃、優(yōu)質(zhì)塑料w 光徑0.50.7cm。第二十二頁(yè)，共87頁(yè)。w7.3 單色器 朗伯比爾定律w 濾光片、棱鏡、光柵分光w 多采用光柵分光w 多采用后分光測(cè)量技術(shù)w光源 比色杯 單色光器 檢測(cè)器w7.4 檢測(cè)器 發(fā)光二極管w8 程序控制系統(tǒng)第二十三頁(yè)，共87頁(yè)。w9. 攜帶

7、污染w常規(guī)清洗不能完全消除攜帶污染w9.1 常見原因 共用系統(tǒng)w 保養(yǎng)不當(dāng)（污垢、老化）w 清洗液使用不當(dāng)w 排列順序不合理w9.2 計(jì)算 小于0.3%為正常w9.3 常見組合第二十四頁(yè)，共87頁(yè)。w例例8w自動(dòng)生化分析儀比色分析常用的檢測(cè)器是wA 固定閃爍計(jì)數(shù)器wB 硒電池wC 鎳氫電池wD 二極管wE 光電倍增管第二十五頁(yè)，共87頁(yè)。w例例9w自動(dòng)生化分析儀的光源能量降低對(duì)單色光影響最大的波長(zhǎng)是wA 340nmwB 405nmwC 450nmwD 500nmwE 630nm第二十六頁(yè)，共87頁(yè)。w例10w自動(dòng)生化分析儀清洗加樣針主要為了wA 提高分析精密度wB 提高分析準(zhǔn)確度wC 防止交叉

8、污染wD 提高反應(yīng)速度wE 提高分析的靈敏度第二十七頁(yè)，共87頁(yè)。w例例11w大多數(shù)全自動(dòng)生化分析儀比色杯的光徑是wA 0.50.7cmwB 0.81.0cmwC 1.11.9cmwD 2.03.9cmwE 4.0cm第二十八頁(yè)，共87頁(yè)。w例例12第二十九頁(yè)，共87頁(yè)。w例例13第三十頁(yè)，共87頁(yè)。w例14w全自動(dòng)生化分析儀比色杯的材料常采用wA 光學(xué)玻璃或一般塑料wB 普通玻璃或硬質(zhì)塑料wC 隔熱玻璃或普通塑料wD 石英玻璃或優(yōu)質(zhì)塑料wE 優(yōu)質(zhì)塑料或普通玻璃第三十一頁(yè)，共87頁(yè)。w例例15w目前全自動(dòng)生化分析儀最常用的光柵分光方式為wA 前分光wB 中分光wC 后分光wD 前中后分光wE

9、前后分光第三十二頁(yè)，共87頁(yè)。w例例16w干式生化分析儀保持恒溫的方式是wA 空氣式恒溫器加熱wB 水浴式循環(huán)直接加熱wC 恒溫液循環(huán)間接加熱wD 金屬直接加熱wE 反應(yīng)液直接加熱第三十三頁(yè)，共87頁(yè)。w例例17w全自動(dòng)生化分析儀的試劑與樣品的混合裝置類型為wA 攪拌棒wB 加溫wC 機(jī)械振蕩wD 加樣針wE 加混合液第三十四頁(yè)，共87頁(yè)。w例例18 某實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化分析儀近兩天發(fā)現(xiàn)部分結(jié)果明顯不穩(wěn)定，儀器自檢正常，測(cè)定過程沒有錯(cuò)誤報(bào)警，如果是交叉污染因素，首先應(yīng)考慮為wA 清洗劑的類型是否正確wB 清洗用水是否符合要求wC 管路沖洗是否徹底wD 反應(yīng)杯是否需更新wE 用校準(zhǔn)品對(duì)儀器進(jìn)行重新

10、校正。第三十五頁(yè)，共87頁(yè)。w例例19 340nm波長(zhǎng)屬于wA 可見光 wB 紫外光wC 紅外光wD 近紅外光wE 遠(yuǎn)紅外光第三十六頁(yè)，共87頁(yè)。w例例20第三十七頁(yè)，共87頁(yè)。w例例21第三十八頁(yè)，共87頁(yè)。w1.光譜分析技術(shù)w單波長(zhǎng)、雙波長(zhǎng)甚至多波長(zhǎng)w主波長(zhǎng)，特有波長(zhǎng)；副波長(zhǎng)，為消除干擾而設(shè)w單波長(zhǎng)易受溶血、黃疸、脂濁的干擾；雙波長(zhǎng)可消除上述干擾，減少雜散光、噪音干擾w常用雙波長(zhǎng) 比濁 340/700nm； Hb 340/380；NADH 340/380、340/405； ALP 405/476；Trinder 520/600。第三十九頁(yè)，共87頁(yè)。w1.1 波長(zhǎng)選擇的三個(gè)條件w待測(cè)物質(zhì)的

11、光吸收最大w吸收峰寬而鈍w常見干擾物在該波長(zhǎng)下光吸收最小w1.2 吸收光譜分析w Lambert-Beer定律第四十頁(yè)，共87頁(yè)。w1.3 散射光譜分析w散射光譜分析法 光線通過溶液混懸顆粒后的光吸收或光散射程度的定律方法。w透射比濁法w散射比濁法 目前，全自動(dòng)生化分析儀主要采用透射比濁法。第四十一頁(yè)，共87頁(yè)。w2.電化學(xué)分析技術(shù)w是利用物質(zhì)的電化學(xué)性質(zhì)，測(cè)定化學(xué)電池的電位、電流或電量的變化的分析方法。w基本公式：能斯特（Nernst)方程。w測(cè)量電極與參比電極wK+電極 頡氨霉素；Na+ 玻璃電極；Cl- 銀氯化銀電極；CO2 氣敏電極第四十二頁(yè)，共87頁(yè)。w例例22第四十三頁(yè)，共87頁(yè)。

12、w例例23第四十四頁(yè)，共87頁(yè)。w例例24第四十五頁(yè)，共87頁(yè)。w例例25第四十六頁(yè)，共87頁(yè)。w例例26第四十七頁(yè)，共87頁(yè)。w例例27第四十八頁(yè)，共87頁(yè)。w例例28w鈉電極屬于wA 晶體電極wB 氣敏電極wC 玻璃電極wD 酶電極wE 膜電極第四十九頁(yè)，共87頁(yè)。w例例29w很多分析儀都采用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)的光路技術(shù)，是為了減少wA 試劑的干擾wB 樣品中黃疸、溶血、脂血的干擾wC 儀器光源的波動(dòng)wD 批間差異wE 批內(nèi)差異第五十頁(yè)，共87頁(yè)。w例例30第五十一頁(yè)，共87頁(yè)。w例例31第五十二頁(yè)，共87頁(yè)。w例例32第五十三頁(yè)，共87頁(yè)。w終點(diǎn)分析法w連續(xù)監(jiān)測(cè)法w干化學(xué)分析法w電化學(xué)分析法

13、第五十四頁(yè)，共87頁(yè)。w1. 常用分析方法w 連續(xù)監(jiān)測(cè)法的定義w 終點(diǎn)法定義w 零級(jí)反應(yīng)期w 一級(jí)反應(yīng)期第五十五頁(yè)，共87頁(yè)。w2. NAD(P)H系統(tǒng)指示的反應(yīng)w還原型NAD(P)H在340nm有吸收峰；氧化型NAD(P)則沒有。第五十六頁(yè)，共87頁(yè)。w2.1 利用NAD(P)HNAD，吸光度下降的：w ALTw ASTw LD-Pw UNw K+酶法w TCO2酶法第五十七頁(yè)，共87頁(yè)。w2.2 利用NADNAD(P)H，吸光度升高的：wCKwCK-MBwTBAwLD-LwGlu-HKwTBA第五十八頁(yè)，共87頁(yè)。w3. Trinder反應(yīng)wGlu-GODw肌苷肌氨酸氧化酶法w尿酸wGPO

14、-PAPwT-Ch,HDL/LDL-Ch第五十九頁(yè)，共87頁(yè)。w4.苯衍生物指示反應(yīng)wALPwGGTwNAG第六十頁(yè)，共87頁(yè)。w5.免疫透射比濁法w型膠原wTnIwHs-CRP，LP(a)w尿微量白蛋白，前白蛋白w胱抑素Cw載脂蛋白第六十一頁(yè)，共87頁(yè)。w6. 離子選擇電極法wK+wNa+wCl-wTCO2第六十二頁(yè)，共87頁(yè)。w7. 常見受溶血影響較大的項(xiàng)目wK+wLDHwCKwASTwALTwMg第六十三頁(yè)，共87頁(yè)。w8.終點(diǎn)法反應(yīng)的項(xiàng)目wGlu-GOD，肌苷肌氨酸氧化酶法，尿酸，TG-GPO-PAP，T-Ch，w9.速率法反應(yīng)的項(xiàng)目wALT，AST，ALP，GGT，TBA，CK,LD

15、，wGlu-HK，UN，NAG，第六十四頁(yè)，共87頁(yè)。w9.其他w9.1 反應(yīng)底物 ALT L丙氨酸-酮戊二酸w ALP 磷酸苯二鈉w9.2 用全血標(biāo)本：糖化血紅蛋白第六十五頁(yè)，共87頁(yè)。w例例33第六十六頁(yè)，共87頁(yè)。w例例34第六十七頁(yè)，共87頁(yè)。w例例35第六十八頁(yè)，共87頁(yè)。w例例36第六十九頁(yè)，共87頁(yè)。w例例37第七十頁(yè)，共87頁(yè)。w例例38第七十一頁(yè)，共87頁(yè)。w例例39第七十二頁(yè)，共87頁(yè)。w例例40第七十三頁(yè)，共87頁(yè)。w例例41第七十四頁(yè)，共87頁(yè)。w例例42第七十五頁(yè)，共87頁(yè)。w例例43第七十六頁(yè)，共87頁(yè)。w例例44第七十七頁(yè)，共87頁(yè)。w例例45第七十八頁(yè)，共87頁(yè)

16、。w例例46第七十九頁(yè)，共87頁(yè)。w例例47w關(guān)于ALT測(cè)定中，敘述正確的是wA L-丙氨酸與-酮戊二酸為反應(yīng)底物wB NADH在氧化還原反應(yīng)中起作用wC 第一步反應(yīng)中的L-丙氨酸將進(jìn)入下一步反應(yīng)wD 在偶聯(lián)反應(yīng)中，生化儀將在455nm處檢測(cè)吸光度下降速率wE LD主要作用于第一步反應(yīng)第八十頁(yè)，共87頁(yè)。w例例48w若遇到溶血標(biāo)本時(shí)，受影響較小的項(xiàng)目是wA LDL-CwB LDHwC CKwD ASTwE ALT第八十一頁(yè)，共87頁(yè)。w例例49w在下列反應(yīng)中，需要谷氨酸脫氫酶的是：wA 酶速率法測(cè)定尿素wB 葡萄糖氧化酶法測(cè)定wC 肌苷酶法測(cè)定wD 尿酸酶法測(cè)定wE 膽固醇酶法測(cè)定第八十二頁(yè)，共87頁(yè)。w例例50w血清前白蛋白測(cè)定，臨床上常用的方法是wA 溴甲酚綠法wB 凱氏定氮法wC 雙縮脲法wD 免疫比濁法wE 磺柳酸法第八十三頁(yè)，共87頁(yè)。w例例51w酶法測(cè)定甘油三酯常用的方法是wA 終點(diǎn)法wB 速率法wC 免疫比濁法wD 化學(xué)修飾法wE 固定時(shí)間法第八十四頁(yè)，共87頁(yè)。w例例52w自動(dòng)生化分析儀中連續(xù)監(jiān)測(cè)法的讀數(shù)方式wA 在一定的時(shí)間范圍