地中海貧血篩查-血液學(xué)分析

1、地中海貧血檢測(cè)血液學(xué)分析血液學(xué)分析容敏逢容敏逢主要內(nèi)容 篩查方案 血液學(xué)分析 地貧基因型與臨床表現(xiàn)地中海貧血篩查及產(chǎn)前診斷流程地中海貧血篩查及產(chǎn)前診斷流程被檢對(duì)象被檢對(duì)象（婚前或孕中期）（婚前或孕中期）血液學(xué)分析血液學(xué)分析（MCV ，Hb A2變化）變化）排除地貧排除地貧地貧攜帶者地貧攜帶者遺傳咨詢，配偶檢查遺傳咨詢，配偶檢查血液學(xué)分析血液學(xué)分析（MCV Hb A2變化）變化）地貧攜帶者地貧攜帶者排除地貧排除地貧遺傳咨詢遺傳咨詢雙親基因分析雙親基因分析胎兒產(chǎn)前診斷胎兒產(chǎn)前診斷地中海貧血的臨床特征地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血小細(xì)胞低色素性溶血型貧血( (中、重度中、重度) )黃疸

2、黃疸肝脾腫大肝脾腫大 ( (脾大明顯脾大明顯) )骨髓擴(kuò)增骨髓擴(kuò)增發(fā)育遲緩發(fā)育遲緩合并感染合并感染Barts 水腫胎水腫胎(地貧地貧, ,宮內(nèi)或出生后數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡宮內(nèi)或出生后數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡) )地貧血液學(xué)分析 最常用的方法:紅細(xì)胞平均容積(MCV)、紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)、Hb電泳聯(lián)合檢測(cè)進(jìn)行篩查,發(fā)現(xiàn)異常者再進(jìn)行基因診斷。地中海貧血的血液學(xué)表型特征地中海貧血的血液學(xué)表型特征 RBC脆性脆性 RBC 參數(shù)參數(shù) MCV MCH 細(xì)胞形態(tài)變化細(xì)胞形態(tài)變化 Hb電泳分析電泳分析 Hb A2 ( ) 或或 ( ) Hb Barts ( ) Hb H ( ) Hb E ( ) 貧血實(shí)驗(yàn)室診斷程序貧血的形態(tài)學(xué)分類(lèi)貧

3、血的形態(tài)學(xué)分類(lèi)貧血類(lèi)型MCV（fl）MCH(pg)MCHC(g/L)特征小細(xì)胞低色素性貧血8024200300珠蛋白合成異常，缺鐵性貧血，慢性失血小紅細(xì)胞正色素性貧血 8032320360骨髓呈巨幼紅細(xì)胞特征正紅細(xì)胞正色素性貧血801002732320360急性失血，急性溶血，再生障礙性貧血人類(lèi)不同時(shí)期血紅蛋白的組成人血紅蛋白的組成人血紅蛋白的組成 胚胎期血紅蛋白： Hb Gower 1 （x2 e2 ） Hb Gower 2 (2 e2) Hb Portland (x2 g2) 即Hb Portland 1 另有少量Hb Portland 2 (x2 2)，Hb Portland 3 (x2

4、 d2) 胎兒期主要血紅蛋白： HbF （2 g2 ） 成人主要血紅蛋白： HbA （ 2 2）約占血紅蛋白總量96.597.5% HbA2 （2 d2 ） 約占血紅蛋白總量2.53.5% HbF （ 2 g2）約占血紅蛋白總量1%以下。 地中海貧血表型陽(yáng)性診斷參考標(biāo)準(zhǔn)地中海貧血MCV82fL、HbA2 2.5%、HbF 2%、紅細(xì)胞形態(tài)異常，其中一項(xiàng)陽(yáng)性者。地中海貧血MCV82fL、HbA2 3.5%、HbF 3.5%、紅細(xì)胞形態(tài)異常，其中一項(xiàng)陽(yáng)性者。血紅蛋白電泳圖譜血紅蛋白電泳圖譜1 2 3 4 51. 1. 正常人正常人HBHB2. 2. 輕型輕型 地貧地貧 3. 3. 異常異常HB E

5、 HB E 雜合子雜合子4. 4. 新生兒新生兒HB Barts HB Barts (4 )( ( 地貧地貧標(biāo)準(zhǔn)型標(biāo)準(zhǔn)型）5. HB H 5. HB H (4 )Normal AA2 AE Barts AF HA+ +- -500V, 25min全自動(dòng)血紅蛋白瓊脂糖凝膠電泳圖譜 1、正常成人HbA2,無(wú)HbF區(qū)帶; 2、成人HbA2升高,但HbF堿變性含量正常,圖譜中不能掃描出HbF區(qū)帶; 3、成人HbA2升高,HbF堿變性含量稍高于正常,圖譜中可見(jiàn)淺染HbF區(qū)帶; 4、成人HbA2升高,HbF堿變性含量高于正常,圖譜中可見(jiàn)一淺染HbF區(qū)帶;5、成人HbA2升高,HbF堿變性含量明顯高于正常,

6、圖譜中可見(jiàn)一清晰HbF區(qū)帶。a-珠蛋白基因突變及其遺傳學(xué)分型珠蛋白基因突變及其遺傳學(xué)分型 就遺傳單體型而言就遺傳單體型而言a-珠蛋白基因突變可分成三類(lèi)：珠蛋白基因突變可分成三類(lèi)： a-地貧2缺失突變 左缺失 （-a4.2） ，右缺失（-a3.7） 、-a2.7 a-地貧I缺失突變 基因型為（-）， 包括：-SEA、-THAI、-FIL及-HW a-地貧非缺失突變 基因型為（a aT） ，包括： a aCS， a a QS ， a a wsHbH病基因型可分成缺失型和非缺失型兩種： 缺失突變基因型：（-a3.7/-）、（-a4.2/-）及(-a2.7/-) 非缺失突變基因型： （aaT/-）和（

7、aaT/ aaT ） a-地中海貧血臨床類(lèi)型 根據(jù)臨床表現(xiàn)嚴(yán)重程度，可分成以下四種靜止型靜止型a-地貧地貧 （aaa-）或（aaa aT） 出生時(shí)臍血血紅蛋白含少量Hb Barts，-般少于5 患者無(wú)臨床癥狀輕型（標(biāo)準(zhǔn)型）輕型（標(biāo)準(zhǔn)型）a-地貧地貧 （a a /-）或（a-a-） 出生時(shí)臍血血紅蛋白Hb Barts占5-10%患者多無(wú)明顯臨床癥狀,實(shí)驗(yàn)室檢查可小細(xì)胞低色素性貧血，MCH和MCV均較低血紅蛋白血紅蛋白H病病 （-a /-），或（a -/-），或（a aT /-），或（a aTa aT） 出生時(shí)臍血Hb Barts約占20-30，此時(shí)HbH含量較低；但出生后Hb Barts含量迅速

8、降低，HbH含量逐漸增高。通常成年期患者HbH含量會(huì)持續(xù)在4%-20%范圍內(nèi)。 終生輕度至中度貧血和肝脾腫大等，但差異較大 .實(shí)驗(yàn)室檢查可見(jiàn)小細(xì)胞低色素性貧血，紅細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)包涵體HB Barts胎兒水腫綜胎兒水腫綜合征（合征（-/-） Barts為主, 少量Hb H 和HbPortland患胎多于妊娠晚期（3440周）或產(chǎn)后數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡 -珠蛋白基因的突變珠蛋白基因的突變 -珠蛋白基因點(diǎn)突變：珠蛋白基因點(diǎn)突變： -珠蛋白基因最常見(jiàn)的突變類(lèi)型。包括單堿基置換和數(shù)個(gè)堿基缺失或插人突變。在中國(guó)-地貧群體中 41/42（-TCTT）、IV S-654(CT), CD17(AT), -28（AG）和CD

9、71/72（+A）等5種突變最常見(jiàn)，約占總突變率90%以上 大片段缺失： 缺失突變涉及基因組上較大片段的缺失包括-地貧和遺傳性胎兒血紅蛋白持存癥(hereditary persistance of fetal hemoglobin,HPFH)。此外，G-和A -珠蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)的突變也可導(dǎo)致HPFH。突變類(lèi)型 編碼區(qū)的無(wú)義突變、移碼突變和起始密碼突變：如CD41-42，CD71-72 ，CD17突變后形成終止子，表現(xiàn)為0。 非編碼區(qū)IVS-1和IVS-2突變?nèi)鏘VS-II-654突變影響mRNA的拼接，表現(xiàn)為。 影響轉(zhuǎn)錄的突變：如-28，-29的突變影響基因的轉(zhuǎn)錄，表現(xiàn)為 。地貧的基因型與表

10、現(xiàn)型 重型重型 -地中海貧血地中海貧血/ 、0/ 0 、0/ （純合子或雙重雜合子）所有患者有組織缺氧癥狀，可出現(xiàn)所有患者有組織缺氧癥狀，可出現(xiàn)“地中海貧血面容地中海貧血面容”，生長(zhǎng)發(fā)育遲緩。紅，生長(zhǎng)發(fā)育遲緩。紅細(xì)胞體積小且低色素。過(guò)剩的游離細(xì)胞體積小且低色素。過(guò)剩的游離 鏈形成鏈形成 鏈包涵體，引起溶血性貧血，靠鏈包涵體，引起溶血性貧血，靠輸血維持生命。輸血維持生命。實(shí)驗(yàn)室檢查主要可見(jiàn)：血紅蛋白定量約為20-30g/L或更低；紅細(xì)胞體積細(xì)小，形態(tài)不一，靶形紅細(xì)胞較常見(jiàn)，網(wǎng)織紅細(xì)胞增高；血紅蛋白電泳時(shí)HbA缺乏或嚴(yán)重缺乏，HbF增高達(dá)30以上（偶可達(dá)90%以上）。 輕型輕型 -地中海貧血地中海

11、貧血A/ 、A/ 0 （雜合子）患者癥狀較輕，輕度貧血，輕度肝脾腫大。紅細(xì)胞脆性降低，小細(xì)胞，低色患者癥狀較輕，輕度貧血，輕度肝脾腫大。紅細(xì)胞脆性降低，小細(xì)胞，低色素，素，MCVMCV、MCHMCH較低。較低。實(shí)驗(yàn)室檢查可見(jiàn)：實(shí)驗(yàn)室檢查可見(jiàn)：血紅蛋白定量約為血紅蛋白定量約為90-120g/L或更低或更低;小細(xì)胞低色素性貧血，小細(xì)胞低色素性貧血，MCH和和MCV分別為分別為2022pg和和5070fl;紅細(xì)胞脆性降低；紅細(xì)胞脆性降低；約約50%患者患者HbF增高，增高，約為約為1-3%，甚少大于，甚少大于5%；HbA2量增高（達(dá)量增高（達(dá)4%-8%）。）。 地貧的基因型與表現(xiàn)型 中間型中間型 -

12、地中海貧血地中海貧血/ 、/ 0 （純合子或雙重雜合子）患者臨床癥狀介于重型和輕型之間，如中度偏重貧血，生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，黃疸患者臨床癥狀介于重型和輕型之間，如中度偏重貧血，生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，黃疸等。血液檢查呈小細(xì)胞低色素貧血癥。等。血液檢查呈小細(xì)胞低色素貧血癥。實(shí)驗(yàn)室檢查呈小細(xì)胞低色素性貧血癥改變，血紅蛋白定量部分患者可低至實(shí)驗(yàn)室檢查呈小細(xì)胞低色素性貧血癥改變，血紅蛋白定量部分患者可低至60g/L，但，但也有患者高達(dá)也有患者高達(dá)100-120g/L本型患者通常屬某些本型患者通常屬某些-地中海貧血變異型純合子，如日地中海貧血變異型純合子，如日+地貧（高地貧（高F）+(高高 F)地貧或兩種不同變異型地中海貧血的雙重雜合子，如地貧或兩種不同變異型地中海貧血的雙重雜合子，如+地貧地貧+地貧。地貧。血液學(xué)分析的敏感性和特異性 RBC脆性假陰性脆性假陰性 血常規(guī)檢測(cè)血常規(guī)檢測(cè)(MCV)對(duì)靜止型地貧有小概率的漏檢對(duì)靜止型地貧有小概率的漏檢靜止型a-地貧患者多無(wú)臨床癥狀E/N基因型患者的MCV十分接近篩查值這部分地貧患者極易漏診 通過(guò)通過(guò)Hb電泳可對(duì)電泳可對(duì)-地貧進(jìn)行明確診斷地貧進(jìn)行明確診斷HbA2輕度增高診斷-地貧的敏感性可達(dá)96.