單克隆抗體的制備和應(yīng)用

1、獲獎(jiǎng)年代獲獎(jiǎng)年代學(xué)學(xué) 者者獲獎(jiǎng)成就獲獎(jiǎng)成就1901E. A. Behring發(fā)現(xiàn)抗毒素，開創(chuàng)免疫血清療法發(fā)現(xiàn)抗毒素，開創(chuàng)免疫血清療法1908P. Ehrlich抗體生成的側(cè)鏈學(xué)說抗體生成的側(cè)鏈學(xué)說E. Metchnikoff細(xì)胞吞噬作用細(xì)胞吞噬作用1913C. Richet發(fā)現(xiàn)過敏現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)過敏現(xiàn)象1960F. M. Burnet抗體生成的克隆選擇學(xué)說抗體生成的克隆選擇學(xué)說P. B. Medawar1972G. M. Edelman抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)R. M. Porter1977R. S. Yalow創(chuàng)立放射免疫測(cè)定法創(chuàng)立放射免疫測(cè)定法1984G. KhlerB細(xì)胞雜交瘤和單克隆抗體

2、細(xì)胞雜交瘤和單克隆抗體C. MilsteinN. Jerne免疫網(wǎng)絡(luò)學(xué)說免疫網(wǎng)絡(luò)學(xué)說1987Tonegawa抗體多樣性的遺傳學(xué)基礎(chǔ)抗體多樣性的遺傳學(xué)基礎(chǔ)Niels K. JerneGeorges J.F. KhlerCsar Milstein應(yīng)用應(yīng)用SRBC為免疫原免疫小鼠為模型為免疫原免疫小鼠為模型, 觀察抗體觀察抗體產(chǎn)生細(xì)胞的體細(xì)胞突變產(chǎn)生細(xì)胞的體細(xì)胞突變(Somatic mutation)Hybridomas: The making of a revolution. Science 1982 Vol 205 pp1073-1075Continuous cultures of fused

3、cells secreting antibodies of predefined specificity. Nature 1975,256:495導(dǎo)致了在生命科學(xué)領(lǐng)域中的一場革命導(dǎo)致了在生命科學(xué)領(lǐng)域中的一場革命 克隆克?。–lone）又名無性繁殖系，指由一個(gè)祖）又名無性繁殖系，指由一個(gè)祖先細(xì)胞經(jīng)分化、增殖所產(chǎn)生的遺傳性狀完全相先細(xì)胞經(jīng)分化、增殖所產(chǎn)生的遺傳性狀完全相同的細(xì)胞群同的細(xì)胞群多克隆抗體（多克隆抗體（Polyclonal antibody, pAb） 用包含多種抗原決定基的抗原物質(zhì)免疫動(dòng)用包含多種抗原決定基的抗原物質(zhì)免疫動(dòng)物，從而刺激多個(gè)物，從而刺激多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對(duì)多種抗細(xì)胞克隆

4、產(chǎn)生針對(duì)多種抗原表位的不同抗體的總和，稱為多克隆抗體原表位的不同抗體的總和，稱為多克隆抗體單克隆抗體（單克隆抗體（Monoclonal Antibody, mAb）由一個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的，針對(duì)單一抗原由一個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的，針對(duì)單一抗原 決定簇的抗體，稱為單克隆抗體決定簇的抗體，稱為單克隆抗體單特異性和均一性單特異性和均一性無限供應(yīng)無限供應(yīng)用混合的抗原制備出識(shí)別一個(gè)抗原決定簇的抗體用混合的抗原制備出識(shí)別一個(gè)抗原決定簇的抗體McAbPcAb雜交細(xì)胞（雜交細(xì)胞（hybrid cell） 在外界某些條件干預(yù)下（如在外界某些條件干預(yù)下（如PEG、電穿、電穿孔），當(dāng)兩個(gè)細(xì)胞緊密地接觸的時(shí)候孔

5、），當(dāng)兩個(gè)細(xì)胞緊密地接觸的時(shí)候,其細(xì)胞膜其細(xì)胞膜可能發(fā)生融合，產(chǎn)生具有原來兩個(gè)細(xì)胞染色體可能發(fā)生融合，產(chǎn)生具有原來兩個(gè)細(xì)胞染色體/基因的單個(gè)細(xì)胞，稱為基因的單個(gè)細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞（雜交瘤細(xì)胞（Hybridomas） 若用一種腫瘤細(xì)胞與另一種體細(xì)胞（如淋若用一種腫瘤細(xì)胞與另一種體細(xì)胞（如淋巴細(xì)胞）融合，所形成的雜交細(xì)胞稱為雜交瘤巴細(xì)胞）融合，所形成的雜交細(xì)胞稱為雜交瘤細(xì)胞，簡稱細(xì)胞，簡稱雜交瘤雜交瘤。其既具有腫瘤細(xì)胞無限增。其既具有腫瘤細(xì)胞無限增殖的能力，也具有淋巴細(xì)胞的一些特性殖的能力，也具有淋巴細(xì)胞的一些特性 B淋巴細(xì)胞雜交瘤淋巴細(xì)胞雜交瘤 骨髓瘤細(xì)胞與免疫骨髓瘤細(xì)胞與免

6、疫B細(xì)胞融合所產(chǎn)生的雜細(xì)胞融合所產(chǎn)生的雜 交瘤細(xì)胞交瘤細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞抗原制備抗原制備免疫動(dòng)物免疫動(dòng)物骨髓瘤細(xì)胞及飼養(yǎng)細(xì)胞的制備骨髓瘤細(xì)胞及飼養(yǎng)細(xì)胞的制備細(xì)胞融合細(xì)胞融合 雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng) 雜交瘤細(xì)胞的篩選及克隆化雜交瘤細(xì)胞的篩選及克隆化單克隆抗體的鑒定單克隆抗體的鑒定 單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備 細(xì)胞、細(xì)菌和病毒等，一般具有較強(qiáng)的免疫細(xì)胞、細(xì)菌和病毒等，一般具有較強(qiáng)的免疫原性，可不加佐劑。例如，直接腹腔注射原性，可不加佐劑。例如，直接腹腔注射12107個(gè)細(xì)胞。個(gè)細(xì)胞。 顆粒性抗原：顆粒性抗原： 可溶性抗原的來源主要是天然純化

7、，或者用目可溶性抗原的來源主要是天然純化，或者用目的基因在原核或真核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)?？扇苄钥乖璧幕蛟谠嘶蛘婧思?xì)胞內(nèi)表達(dá)?？扇苄钥乖枧c弗氏完全或不完全佐劑混勻，進(jìn)行免疫。與弗氏完全或不完全佐劑混勻，進(jìn)行免疫。 可溶性抗原：可溶性抗原： 免疫目的：免疫目的： 采用與骨髓瘤供體同一品系的動(dòng)物采用與骨髓瘤供體同一品系的動(dòng)物 免疫動(dòng)物品系（脾細(xì)胞供體）和骨髓瘤細(xì)胞免疫動(dòng)物品系（脾細(xì)胞供體）和骨髓瘤細(xì)胞在種系發(fā)生上距離越遠(yuǎn)則產(chǎn)生的雜交瘤越不穩(wěn)定，在種系發(fā)生上距離越遠(yuǎn)則產(chǎn)生的雜交瘤越不穩(wěn)定，獲得的雜交瘤不能在該品系小鼠體內(nèi)誘生腹水。獲得的雜交瘤不能在該品系小鼠體內(nèi)誘生腹水。 動(dòng)物的選擇：動(dòng)物的選擇： 動(dòng)

8、物對(duì)抗原刺激易產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)動(dòng)物對(duì)抗原刺激易產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng) 8 12周齡雌性小鼠（最常用周齡雌性小鼠（最常用BALB/c）第一次免疫：可溶性抗原加弗氏完全佐劑第一次免疫：可溶性抗原加弗氏完全佐劑第二次免疫：可溶性抗原加弗氏不完全佐劑第二次免疫：可溶性抗原加弗氏不完全佐劑第三次免疫：可溶性抗原加生理鹽水第三次免疫：可溶性抗原加生理鹽水小鼠背部皮下注射小鼠背部皮下注射小鼠背部皮下注射小鼠背部皮下注射4周后周后3周后周后小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射10天后天后檢測(cè)血清效價(jià)檢測(cè)血清效價(jià)加強(qiáng)免疫：可溶性抗原加生理鹽水加強(qiáng)免疫：可溶性抗原加生理鹽水小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射細(xì)胞融合細(xì)胞融合3天后天后 免疫程

9、序：免疫程序： 脾（脾（spleen）抗原抗原脾（脾（spleen） 所選擇的骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)與提供免疫脾細(xì)胞的動(dòng)物所選擇的骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)與提供免疫脾細(xì)胞的動(dòng)物 品系相同品系相同骨髓瘤細(xì)胞系的選擇要點(diǎn)：骨髓瘤細(xì)胞系的選擇要點(diǎn)：自身不產(chǎn)生免疫球蛋白的重鏈與輕鏈自身不產(chǎn)生免疫球蛋白的重鏈與輕鏈 對(duì)氨基碟呤敏感對(duì)氨基碟呤敏感 與免疫脾細(xì)胞融合后產(chǎn)生穩(wěn)定分泌與免疫脾細(xì)胞融合后產(chǎn)生穩(wěn)定分泌Ig雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞 飼養(yǎng)細(xì)胞（飼養(yǎng)細(xì)胞（feeder cell）：）：融合前的準(zhǔn)備工作融合前的準(zhǔn)備工作拉頸處死小鼠拉頸處死小鼠無菌操作取出脾臟無菌操作取出脾臟清洗、研磨清洗、研磨收集細(xì)胞收集細(xì)胞離心洗滌離心洗滌細(xì)胞計(jì)數(shù)

10、細(xì)胞計(jì)數(shù)脾細(xì)胞的準(zhǔn)備脾細(xì)胞的準(zhǔn)備收集細(xì)胞收集細(xì)胞離心洗滌離心洗滌活細(xì)胞計(jì)數(shù)活細(xì)胞計(jì)數(shù)調(diào)整細(xì)胞濃度調(diào)整細(xì)胞濃度骨髓瘤細(xì)胞的準(zhǔn)備骨髓瘤細(xì)胞的準(zhǔn)備細(xì)胞融合細(xì)胞融合 骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞 按一定比例混合按一定比例混合1: 10或或1: 5 加入促融劑加入促融劑PEGPEG在聚乙二醇作用下在聚乙二醇作用下B淋巴細(xì)胞可與淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合，形成雜交瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合，形成雜交瘤細(xì)胞 用于雜交瘤融合的骨髓細(xì)胞缺乏用于雜交瘤融合的骨髓細(xì)胞缺乏HGPRT和和TK，在在HAT培養(yǎng)液中，未融合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏培養(yǎng)液中，未融合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏HGPRT和和TK ，不能利用補(bǔ)救途徑

11、合成不能利用補(bǔ)救途徑合成DNA而死而死亡。亡。 未融合的未融合的B淋巴細(xì)胞雖具有淋巴細(xì)胞雖具有HGPRT和和TK ，但但其本身不能在體外長期存活也逐漸死亡。其本身不能在體外長期存活也逐漸死亡。 只有骨髓瘤細(xì)胞與免疫只有骨髓瘤細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的雜交瘤既細(xì)胞融合的雜交瘤既有骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的能力，又從免疫有骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的能力，又從免疫B細(xì)胞得細(xì)胞得到到HGPRT和和TK 的基因產(chǎn)物，因此，能夠克服氨基的基因產(chǎn)物，因此，能夠克服氨基碟呤的阻斷作用，通過次黃嘌呤的補(bǔ)償途徑合成碟呤的阻斷作用，通過次黃嘌呤的補(bǔ)償途徑合成DNA，而在，而在HAT選擇培養(yǎng)液中生長繁殖。選擇培養(yǎng)液中生長繁殖。 融合

12、后融合后34天后，可天后，可見外形似骨髓瘤細(xì)胞，渾見外形似骨髓瘤細(xì)胞，渾圓透亮的克隆。圓透亮的克隆。 融合后第融合后第79天取培養(yǎng)上天取培養(yǎng)上清，檢測(cè)特異性抗體。清，檢測(cè)特異性抗體。細(xì)胞生長情況細(xì)胞生長情況雜交瘤分泌單克隆抗體的檢測(cè)方法雜交瘤分泌單克隆抗體的檢測(cè)方法 免疫酶技術(shù)免疫酶技術(shù)間接間接ELISA 包被抗原、培養(yǎng)上清、酶標(biāo)抗體、加底物顯色包被抗原、培養(yǎng)上清、酶標(biāo)抗體、加底物顯色 陰性對(duì)照：陰性對(duì)照：骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清 陽性對(duì)照：陽性對(duì)照：免疫鼠血清免疫鼠血清 免疫熒光技術(shù)免疫熒光技術(shù)間接免疫熒光（或酶）測(cè)定法：靶細(xì)胞鋪片、間接免疫熒光（或酶）測(cè)定法：靶細(xì)胞鋪片、 固定

13、細(xì)胞、加待測(cè)樣品、加熒光標(biāo)記抗體（或固定細(xì)胞、加待測(cè)樣品、加熒光標(biāo)記抗體（或 加酶標(biāo)抗體和顯色底物）、鏡檢加酶標(biāo)抗體和顯色底物）、鏡檢 活細(xì)胞免疫熒光技術(shù)：流式細(xì)胞術(shù)分析活細(xì)胞免疫熒光技術(shù)：流式細(xì)胞術(shù)分析 雜交瘤細(xì)胞的克隆化雜交瘤細(xì)胞的克隆化 在在HAT培養(yǎng)基中生長的雜交瘤細(xì)胞，只有培養(yǎng)基中生長的雜交瘤細(xì)胞，只有少數(shù)是分泌預(yù)定特異性單克隆抗體的細(xì)胞，因少數(shù)是分泌預(yù)定特異性單克隆抗體的細(xì)胞，因此，必須進(jìn)行篩選和克隆化。此，必須進(jìn)行篩選和克隆化。 克隆化克隆化即把培養(yǎng)孔中的細(xì)胞從單個(gè)細(xì)胞即把培養(yǎng)孔中的細(xì)胞從單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)繁殖，使之成為單克隆，其分泌的抗進(jìn)行培養(yǎng)繁殖，使之成為單克隆，其分泌的抗體達(dá)

14、到均一性。體達(dá)到均一性。有限稀釋法有限稀釋法 免疫球蛋白類別及亞類的鑒定免疫球蛋白類別及亞類的鑒定 小鼠免疫脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合形小鼠免疫脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞，其分泌的特異性成的雜交瘤細(xì)胞，其分泌的特異性McAb的本的本質(zhì)仍是小鼠的不同類型及其亞類的免疫球蛋白質(zhì)仍是小鼠的不同類型及其亞類的免疫球蛋白（Ig），其中以），其中以IgG（IgG1、 IgG2a、IgG2b和和IgG3等亞類）最常等亞類）最常見見，其次為，其次為IgM。 抗體親和力是指抗體與抗原或半抗原結(jié)抗體親和力是指抗體與抗原或半抗原結(jié)合的強(qiáng)度，其高低主要是由抗體分子結(jié)合表合的強(qiáng)度，其高低主要是由抗體分子

15、結(jié)合表位部位和抗原決定簇之間的互補(bǔ)程度決定。位部位和抗原決定簇之間的互補(bǔ)程度決定。特異性特異性 是否與其他抗原有交叉反應(yīng)是否與其他抗原有交叉反應(yīng)敏感性敏感性 對(duì)腹水和培養(yǎng)上清進(jìn)行效價(jià)測(cè)定對(duì)腹水和培養(yǎng)上清進(jìn)行效價(jià)測(cè)定 親和力測(cè)定親和力測(cè)定 動(dòng)物體內(nèi)誘生法動(dòng)物體內(nèi)誘生法 取取Balb/c小鼠小鼠, 首先腹首先腹腔注射腔注射0.5ml液體石臘或液體石臘或降植烷進(jìn)行預(yù)處理。降植烷進(jìn)行預(yù)處理。 12周后周后, 腹腔內(nèi)接種雜交腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在小鼠瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖，并產(chǎn)生和分泌腹腔內(nèi)增殖，并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體單克隆抗體約約12周周, 可見小鼠可見小鼠腹部膨大。用注射器腹

16、部膨大。用注射器抽取腹水，即可獲得抽取腹水，即可獲得大量單克隆抗體。大量單克隆抗體。 將雜交瘤細(xì)胞置于培將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶（或灌）中進(jìn)行培養(yǎng)。養(yǎng)瓶（或灌）中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體。收產(chǎn)生并分泌單克隆抗體。收集培養(yǎng)上清液，離心去除細(xì)集培養(yǎng)上清液，離心去除細(xì)胞及其碎片，即可獲得所需胞及其碎片，即可獲得所需要的單克隆抗體，不含無關(guān)要的單克隆抗體，不含無關(guān)Ig，但成本，但成本髙髙。體外培養(yǎng)法體外培養(yǎng)法 早期研究階段早期研究階段全軍單克隆抗體研究協(xié)作組（單克隆抗體通迅）全軍單克隆抗體研究協(xié)作組（單克隆抗體通迅）應(yīng)用和市場化應(yīng)用和市場化HLDA

17、HCDM功能基因組研究中的重要地位功能基因組研究中的重要地位國家重大科技項(xiàng)目（國家重大科技項(xiàng)目（973、863等）主要研究等）主要研究 內(nèi)容之一內(nèi)容之一基礎(chǔ)理論研究（生命科學(xué)）基礎(chǔ)理論研究（生命科學(xué)）發(fā)病機(jī)理的研究發(fā)病機(jī)理的研究疾病的預(yù)防（緊急預(yù)防）疾病的預(yù)防（緊急預(yù)防）疾病的診斷（傳染性疾病、腫瘤、自身免疫疾病的診斷（傳染性疾病、腫瘤、自身免疫 性疾病、過敏性疾病、免疫缺陷?。┬约膊　⑦^敏性疾病、免疫缺陷?。┘膊〉闹委煟ㄖ委熜钥贵w）疾病的治療（治療性抗體） 一項(xiàng)重要的生物技術(shù)和一項(xiàng)重要的生物技術(shù)和 一類生物高科技產(chǎn)品一類生物高科技產(chǎn)品 傳染性疾病傳染性疾病 HIV: 急性感染期和晚期急性感染

18、期和晚期: 核心抗原核心抗原p24升高升高; 檢測(cè)抗檢測(cè)抗HIV抗體初篩抗體初篩; 免疫印跡進(jìn)一步確認(rèn)免疫印跡進(jìn)一步確認(rèn); CD4+T 細(xì)胞細(xì)胞200/ l病情嚴(yán)重病情嚴(yán)重 HAV、HBV、HCV: 抗體抗體 HFRS: 免疫熒光，免疫熒光，ELISA（特異性（特異性IgM） 腫瘤腫瘤 多種腫瘤的標(biāo)志物多種腫瘤的標(biāo)志物 直腸結(jié)腸癌直腸結(jié)腸癌:CEA 前列腺癌前列腺癌:PSA 原發(fā)性肝癌原發(fā)性肝癌:AFP 淋巴瘤和白血病淋巴瘤和白血病:CD分子分子 自身免疫性和過敏性疾病自身免疫性和過敏性疾病 自身抗體（抗核抗體、類風(fēng)濕因子）自身抗體（抗核抗體、類風(fēng)濕因子） 放射免疫測(cè)定法（放射免疫測(cè)定法（RI

19、A）檢測(cè)特異性）檢測(cè)特異性IgE 甲狀腺素、胰島素、生長激素甲狀腺素、胰島素、生長激素 其他其他 血型檢測(cè)：凝集反應(yīng)（直接和間接）血型檢測(cè)：凝集反應(yīng)（直接和間接） 早孕早孕: 人絨毛膜促性腺激素（人絨毛膜促性腺激素（hCG） 男性不育男性不育: 抗精子抗體抗精子抗體Fabmurine antibodychimeric mouse antibody FvdAbengineeredbispecific AbScFvHumanizedF(ab )2HumanizedantibodyScFv-toxinintrabodyNumber of therapeutic mAbs entering clini

20、cal study per yearTherapeutic categories for mAbs in clinical study通用名通用名批準(zhǔn)時(shí)間批準(zhǔn)時(shí)間類型類型識(shí)別抗原識(shí)別抗原適應(yīng)癥適應(yīng)癥Muromonab-CD31986mouseCD3急性腎移植移植排斥急性腎移植移植排斥Daclizumab; Basiliximab1997;1998humanized/ chimericIL-2R(CD25) 急性腎移植移植排斥急性腎移植移植排斥Rituximab; Tositumomab; Ibritumomab1997;2002; 2003mouse/chimericCD20B細(xì)胞細(xì)胞-非何杰

21、金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎Alemtuzumab2001humanizedCD52慢性慢性B淋巴細(xì)胞性白血病淋巴細(xì)胞性白血病Gemtuzumab ozogamicin2000chimericCD33急性粒細(xì)胞性白血病急性粒細(xì)胞性白血病Edrecolomab*1995mouseEP-CAM結(jié)、直腸癌結(jié)、直腸癌Trastuzumab1998humanizedHER-2HER-2過表達(dá)的轉(zhuǎn)移性乳腺癌過表達(dá)的轉(zhuǎn)移性乳腺癌Cetuximab2004humanizedEGFR轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌、頭頸部癌癥轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌、頭頸部癌癥Bevacizumab2004;2006humani

22、zedVEGF轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌,年齡相關(guān)性黃斑病變年齡相關(guān)性黃斑病變Infliximab1998; 2002chimeric/ humanTNF-節(jié)段性回腸炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎節(jié)段性回腸炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,銀屑病性關(guān)節(jié)炎銀屑病性關(guān)節(jié)炎;強(qiáng)直性脊柱炎強(qiáng)直性脊柱炎Efalizumab2003humanizedCD11a銀屑病銀屑病Natalizumab2004human4整合素整合素多發(fā)性硬化癥多發(fā)性硬化癥Omalizumab2003humanizedIgE過敏性哮喘過敏性哮喘Abciximab 1994 chimeric GPb/a 冠心病血小板冠心病血小板Palivizumab 1998 h

23、umanized RSV 呼吸道合胞病毒感染呼吸道合胞病毒感染 Characteriztion of mAbs against EpCAM by IHC and IF腫瘤腫瘤 器官移植排斥器官移植排斥自身免疫性疾病自身免疫性疾病其他其他CD20, CD52, CD33, HER-2EGFR, VEGF, EP-CAMCD3, IL-2R（CD25）TNF-, CD11a, 4整合素整合素, CD20 GPb/a, IgE, RSVgpFMechanisms of mAb-mediated killing CD20 表達(dá)于表達(dá)于B 淋巴細(xì)胞，其抗體可促進(jìn)細(xì)胞對(duì)化療淋巴細(xì)胞，其抗體可促進(jìn)細(xì)胞對(duì)化療

24、 的敏感性，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、的敏感性，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、ADCC、CDC CD33 表達(dá)于表達(dá)于90% 以上的急性髓樣白血病以上的急性髓樣白血病 (AML)細(xì)胞，細(xì)胞， 但不表達(dá)于骨髓但不表達(dá)于骨髓CD34+造血干細(xì)胞，其抗體可造血干細(xì)胞，其抗體可 誘導(dǎo)雙鏈誘導(dǎo)雙鏈DNA斷裂和細(xì)胞死亡斷裂和細(xì)胞死亡 CD52 可誘導(dǎo)可誘導(dǎo)ADCC和和CDC，治療慢性，治療慢性B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 白血病、白血病、T細(xì)胞白血病和細(xì)胞白血病和T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 抗抗HER2/CD340 ADCC，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，抑制腫瘤細(xì)胞增殖 和血管形成和血管形成 抗抗EGFR 阻斷阻斷EGFR與與EGF結(jié)合，誘導(dǎo)結(jié)合，誘導(dǎo)AD

25、CC， 抑制細(xì)胞增殖，抑制腫瘤血管形成，抑制細(xì)胞增殖，抑制腫瘤血管形成， 誘導(dǎo)凋亡誘導(dǎo)凋亡 抗抗VEGF 阻斷阻斷VEGF與與VEGF受體結(jié)合，抑制受體結(jié)合，抑制 腫瘤的血管生長和轉(zhuǎn)移部位的發(fā)展腫瘤的血管生長和轉(zhuǎn)移部位的發(fā)展 抗抗CD3 補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用（補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用（CDC），）， 清除清除T細(xì)胞，阻斷細(xì)胞，阻斷T細(xì)胞功能細(xì)胞功能 抗抗CD25 補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用（補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用（CDC），）， 阻斷阻斷IL-2受體受體 抗抗TNF 阻斷阻斷TNF- 與受體結(jié)合與受體結(jié)合, 降低或消除降低或消除 由由TNF- 刺激細(xì)胞所發(fā)生的炎癥反應(yīng)刺激細(xì)胞所發(fā)生的炎癥反應(yīng) 抗抗CD11

26、a 抑制抑制LFA-1與配體結(jié)合與配體結(jié)合, 抑制白細(xì)胞抑制白細(xì)胞 黏附黏附, 治療斑狀牛皮癬治療斑狀牛皮癬 抗抗 4整合素整合素 抑制抑制VLA-4與配體結(jié)合與配體結(jié)合, 抑制白細(xì)胞黏附抑制白細(xì)胞黏附 CD20 治療治療RA 抗抗IgE 阻斷阻斷IgE與與IgE受體結(jié)合受體結(jié)合, 抑制肥大細(xì)胞和抑制肥大細(xì)胞和嗜堿性嗜堿性 粒細(xì)胞脫顆粒和釋放介質(zhì)，治療持續(xù)性哮喘粒細(xì)胞脫顆粒和釋放介質(zhì)，治療持續(xù)性哮喘 抗抗gpb/a 抑制血小板凝血，止血，預(yù)防冠狀動(dòng)脈抑制血小板凝血，止血，預(yù)防冠狀動(dòng)脈 血管形成術(shù)中血栓血管形成術(shù)中血栓 抗抗RSVgpF 中和病毒，抑制病毒融合和復(fù)制，中和病毒，抑制病毒融合和復(fù)制

27、， 預(yù)防兒童在高危期預(yù)防兒童在高危期RSV感染感染 抗抗IgE mAb 治療過敏性疾病的信號(hào)傳導(dǎo)途徑治療過敏性疾病的信號(hào)傳導(dǎo)途徑通用名通用名類型類型識(shí)別抗原識(shí)別抗原治療疾病治療疾病CatumaxomabRomovab 雙特異性雙特異性anti-CD3/Epcam結(jié)腸癌結(jié)腸癌Zanolimumab Humax-CD4人抗體人抗體, IgGCD4皮膚性皮膚性T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤EpratuzumabLymphocide人源人源, IgG1CD22非何杰金淋巴瘤和某些自身免非何杰金淋巴瘤和某些自身免疫性疾病疫性疾病(如如SLE), 與與CD20mAb聯(lián)用可能會(huì)提高臨床效果聯(lián)用可能會(huì)提高臨床效果MD

28、X-010ipilimumab人抗體人抗體, IgGCTLA-4黑素瘤黑素瘤WX-G250Rencarex嵌合嵌合, IgG1抗碳酸酐酶抗碳酸酐酶晚期腎癌晚期腎癌AMG-162 denosumab人抗體人抗體, IgG2RANKL絕期后骨質(zhì)疏松癥和防止治療絕期后骨質(zhì)疏松癥和防止治療腫瘤過程中激素部分切除治療腫瘤過程中激素部分切除治療引起的骨丟失引起的骨丟失Anti-MRSAmAbAurograb人抗體人抗體, scFv抗甲氧芐青鏈素的金抗甲氧芐青鏈素的金黃色葡萄球菌黃色葡萄球菌(MRSA)金黃色葡萄球菌感染金黃色葡萄球菌感染PexelizumabAlexion;Eculizumab人源人源,單

29、鏈可變區(qū)單鏈可變區(qū), scFv補(bǔ)體補(bǔ)體C5治療心血管術(shù)后合并癥治療心血管術(shù)后合并癥,膜性腎炎膜性腎炎,急性心肌梗塞急性心肌梗塞,RAMepolizumab人源人源, IgG1IL-5特應(yīng)性皮炎特應(yīng)性皮炎,嗜酸細(xì)胞過多綜合征嗜酸細(xì)胞過多綜合征靶分子靶分子抗體種類抗體種類治療疾病治療疾病商品名商品名公司公司批準(zhǔn)時(shí)間批準(zhǔn)時(shí)間CD分子分子 IL-6R人源化抗體人源化抗體（IgG1）阻斷阻斷IL-6與與IL-6R結(jié)合，結(jié)合，治療治療RA, Castelman病病RoActemra/TocilizumabChugai/Roche2009(US2009(EU)日本日本CD80/CD86CTLA4-Fc阻斷阻斷T細(xì)胞活化，細(xì)胞活化，治療治療RAOrencia/