第三章 中藥制劑的檢查1

1、第四章第四章 中藥制劑的檢查中藥制劑的檢查 江西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系江西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系中藥制劑的檢查內(nèi)容與要求n雜質(zhì)的概念、分類、來(lái)源雜質(zhì)的概念、分類、來(lái)源n雜質(zhì)的限量計(jì)算雜質(zhì)的限量計(jì)算n重金屬檢查原理及注意點(diǎn)重金屬檢查原理及注意點(diǎn)n砷鹽檢查原理及砷鹽檢查原理及KI、酸性酸性SnCl、HgBr試紙的作用試紙的作用n中藥制劑的檢查項(xiàng)目：干燥失重、水分中藥制劑的檢查項(xiàng)目：干燥失重、水分灰分、酸不溶灰分灰分、酸不溶灰分n中藥制劑的特殊雜質(zhì)檢查原則中藥制劑的特殊雜質(zhì)檢查原則掌握掌握熟悉熟悉 中藥制劑的檢查包括：中藥制劑的檢查包括： 制劑通則檢查制劑通則檢查 一般雜質(zhì)檢查一般雜質(zhì)檢查 特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查

2、 微生物限度檢查微生物限度檢查第一節(jié)第一節(jié) 中藥制劑中的雜質(zhì)檢查中藥制劑中的雜質(zhì)檢查 一、雜質(zhì)及其來(lái)源一、雜質(zhì)及其來(lái)源藥品的雜質(zhì)藥品的雜質(zhì) 是指藥物中存在的是指藥物中存在的危害人體健康危害人體健康或或影響藥物質(zhì)量影響藥物質(zhì)量的物質(zhì)的物質(zhì). . 雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查 是藥物純度評(píng)價(jià)的一項(xiàng)重要內(nèi)容是藥物純度評(píng)價(jià)的一項(xiàng)重要內(nèi)容. .一雜質(zhì)的概念一雜質(zhì)的概念 二二雜質(zhì)的分類雜質(zhì)的分類 一般雜質(zhì)一般雜質(zhì) 指在自然界中分布廣泛指在自然界中分布廣泛, ,在多在多種藥材的種藥材的采集采集、收購(gòu)收購(gòu)、加工加工以及以及制劑的生制劑的生產(chǎn)產(chǎn)或或貯存貯存過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)過(guò)程中容易引入的雜質(zhì). .特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì) 指某

3、一些中藥制劑中單獨(dú)存在指某一些中藥制劑中單獨(dú)存在的雜質(zhì)，是在的雜質(zhì)，是在制備過(guò)程制備過(guò)程或或儲(chǔ)存儲(chǔ)存中根據(jù)中根據(jù)其其來(lái)源來(lái)源、生產(chǎn)工藝生產(chǎn)工藝及及藥品性質(zhì)藥品性質(zhì)可能引入的可能引入的雜質(zhì)。雜質(zhì)。 生產(chǎn)制備過(guò)程引入生產(chǎn)制備過(guò)程引入貯存過(guò)程中引入貯存過(guò)程中引入三三雜質(zhì)的來(lái)源雜質(zhì)的來(lái)源中藥材原料中引入中藥材原料中引入雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量 在不影響藥物在不影響藥物療效療效、穩(wěn)定穩(wěn)定性性及及不發(fā)生毒副作用不發(fā)生毒副作用的前提下的前提下, ,藥物藥物中所含雜質(zhì)的中所含雜質(zhì)的最大允許量最大允許量. .百分表示百分表示( %)百萬(wàn)分表示百萬(wàn)分表示( ppm)限量表示方限量表示方 法法二、雜質(zhì)限量檢查二、雜質(zhì)限量檢

4、查%100=樣品量樣品量雜質(zhì)的最大允許量雜質(zhì)的最大允許量雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量%100=SCVL標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法 （用一定量的雜質(zhì)對(duì)照品溶液）（用一定量的雜質(zhì)對(duì)照品溶液）三、雜質(zhì)限量的計(jì)算三、雜質(zhì)限量的計(jì)算610SCV)ppm(L= 若用若用ppm表示雜質(zhì)限量表示雜質(zhì)限量則：則：注意注意: 單位是否統(tǒng)一單位是否統(tǒng)一 供試品是否有稀釋供試品是否有稀釋 表示方法表示方法%或或ppm舉例舉例：阿膠砷鹽檢查法：阿膠砷鹽檢查法：取本品取本品2.02.0g g，加氫氧化鈣加氫氧化鈣1 1g g，混合，加少量水，攪勻，干燥后先用混合，加少量水，攪勻，干燥后先用小火燒灼小火燒灼 使炭化，再在使炭化，再在500-

5、600500-600熾灼使熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸完全灰化，放冷，加鹽酸 3 3mlml與適量的水與適量的水使溶解成使溶解成3030mlml，分取溶液分取溶液1010mlml，加鹽酸加鹽酸4 4ml ml 與水與水1414mlml，依法檢查（附錄依法檢查（附錄 F F），），含砷含砷量不得過(guò)百萬(wàn)分之量不得過(guò)百萬(wàn)分之 三。三。 精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（每精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（每1 1mlml相當(dāng)于相當(dāng)于1 1gg的的AsAs）2 2mlml 610SCV)ppm(L=L = 2 L = 2 1 1 10 /(2.0 10 /(2.0 10/30)10/30) = 3 ppm = 3 ppm6 n靈

6、敏度法靈敏度法 在供試品溶液中加入試劑，在一定條在供試品溶液中加入試劑，在一定條件下，觀察有無(wú)正反應(yīng)出現(xiàn)。件下，觀察有無(wú)正反應(yīng)出現(xiàn)。例：肉桂油中重金屬檢查例：肉桂油中重金屬檢查 取本品取本品1010mlml，加水加水1010mlml與鹽酸與鹽酸1 1 滴，滴，振搖后，通硫化氫氣使飽和，水層與油振搖后，通硫化氫氣使飽和，水層與油層均不得變色。層均不得變色。 第二節(jié)第二節(jié) 一般雜質(zhì)檢查方法一般雜質(zhì)檢查方法1.重金屬的概念重金屬的概念重重金屬金屬 是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代硫代乙酰胺乙酰胺或或硫化鈉硫化鈉作用生成不溶性硫化作用生成不溶性硫化物而顯色的金屬雜質(zhì)物而顯色的金屬雜質(zhì). 如

7、：如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等等. 重金屬存在，影響藥物的穩(wěn)定性重金屬存在，影響藥物的穩(wěn)定性及安全性及安全性. 鉛易在體內(nèi)積蓄中毒鉛易在體內(nèi)積蓄中毒,以以Pb為代表為代表.重重金金屬屬檢檢查查法法 H2PbSHSHPb22 （一）基本原理：（一）基本原理： SHCONHCH5 . 3pHOHCSNHCH223223原理：原理： 在弱酸性在弱酸性 (pH3.5 醋酸鹽緩沖液醋酸鹽緩沖液)條件下，硫代乙酰胺水解條件下，硫代乙酰胺水解,產(chǎn)生產(chǎn)生H2S,與微量與微量重金屬離子重金屬離子(以以Pb2+為代表為代表)生成黃色到棕黑生成黃色到棕黑色的硫化物混懸

8、液色的硫化物混懸液（硫代乙酰胺法）硫代乙酰胺法） 在堿性介質(zhì)中在堿性介質(zhì)中,以以Na2S與微量重金屬離與微量重金屬離子生成不溶性的硫化物（子生成不溶性的硫化物（硫化鈉法硫化鈉法）重重金金屬屬檢檢查查法法2 操作方法操作方法比色放置硫代乙酰胺水22ml TS25ml2ml )buff(pH3.5水、醋酸鹽樣品樣品管乙管乙管同上標(biāo)準(zhǔn)液（一定量） 對(duì)照管甲管甲管第一法：適用于供試品不經(jīng)有機(jī)處理，適用于供試品不經(jīng)有機(jī)處理，在酸在酸性溶液中顯色的重金屬檢查性溶液中顯色的重金屬檢查（二）檢查方法：（二）檢查方法：重重金金屬屬檢檢查查法法丙管丙管供試品溶液供試品溶液標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液+同上同上顯色顯色結(jié)果

9、觀察結(jié)果觀察對(duì)照管樣品管樣品管樣品管不得深于不得深于對(duì)照管對(duì)照管重重金金屬屬檢檢查查法法 顏色比較顏色比較甲管甲管 乙管乙管 丙管丙管 合格合格否則，第二法否則，第二法重重金金屬屬檢檢查查法法 操作操作 緩緩熾灼緩緩熾灼 放冷放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供試品供試品 炭化炭化 加熱加熱 HNO3 500-600H2SO4 除盡除盡 放冷放冷 完全灰化完全灰化 蒸干蒸干HCl 2ml 水水15ml 中性中性 按硫代乙酰胺按硫代乙酰胺 蒸干蒸干 氨試液氨試液 法檢查法檢查注意：注意：做空白試驗(yàn)做空白試驗(yàn) 適用于供試品需熾灼破壞，取遺留殘?jiān)m用于供試品需熾灼破壞，取遺留殘?jiān)?jīng)處理在酸性溶液中

10、顯色的重金屬檢查經(jīng)處理在酸性溶液中顯色的重金屬檢查第二法第二法第三法第三法硫化鈉法硫化鈉法 適用于難溶于稀酸但能溶解于適用于難溶于稀酸但能溶解于堿性溶液的藥物中重金屬的檢查堿性溶液的藥物中重金屬的檢查. .原理原理在堿性介質(zhì)中在堿性介質(zhì)中,以以Na2S為顯色劑為顯色劑, 使使Pb2+與與S2-作用生成作用生成PbS 的混懸液的混懸液, 與一與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較較, 不得更深不得更深.重重金金屬屬檢檢查查法法 方法靈敏度方法靈敏度Pb2+標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液10 g/ml （使用不超過(guò)一使用不超過(guò)一周）周） 取用量為取用量為2ml時(shí)，時(shí)，加加硫代

11、乙酰硫代乙酰胺所顯顏色最適合于目視法觀察胺所顯顏色最適合于目視法觀察（三）注意事項(xiàng)（三）注意事項(xiàng)重重金金屬屬檢檢查查法法 pH在在3.03.5時(shí)時(shí), 呈色較完全呈色較完全.硫代乙酰胺加入量以硫代乙酰胺加入量以2ml 呈色最深呈色最深最佳顯色時(shí)間最佳顯色時(shí)間2分鐘分鐘 溶液的溶液的pH對(duì)于金屬離子與硫化對(duì)于金屬離子與硫化氫呈色影響較大氫呈色影響較大.(25ml供試液中有供試液中有2ml醋酸緩沖液醋酸緩沖液) 反應(yīng)條件反應(yīng)條件重重金金屬屬檢檢查查法法 供試品溶液有顏色時(shí)的處理供試品溶液有顏色時(shí)的處理 . 稀焦糖溶液調(diào)節(jié)稀焦糖溶液調(diào)節(jié) . 指示劑調(diào)節(jié)指示劑調(diào)節(jié)重重金金屬屬檢檢查查法法 其他離子的干擾

12、其他離子的干擾干擾：干擾：弱酸性溶液中弱酸性溶液中Fe3+氧化氧化H2S析出析出S,產(chǎn)生混濁影響檢查產(chǎn)生混濁影響檢查.a.供試品中微量高價(jià)供試品中微量高價(jià)Fe3+存在存在排除：排除：加入加入抗壞血酸抗壞血酸或或鹽酸羥胺鹽酸羥胺使使Fe3+還原為還原為Fe2+.重重金金屬屬檢檢查查法法 b. 空白處理：空白處理： 為消除鹽酸或其他試劑可能夾雜重金屬，為消除鹽酸或其他試劑可能夾雜重金屬，當(dāng)當(dāng) 鹽酸用量鹽酸用量 1.0 ml 氨試液氨試液 2.0 ml . 除另有規(guī)定外，對(duì)照溶液應(yīng)取同樣量試液除另有規(guī)定外，對(duì)照溶液應(yīng)取同樣量試液蒸干后，依法檢查。蒸干后，依法檢查。重重金金屬屬檢檢查查法法 c.供試品

13、為鐵鹽（大量的供試品為鐵鹽（大量的Fe3+） Fe3+在在HCl溶液中能形成配位化合物溶液中能形成配位化合物用乙醚提取用乙醚提取 Fe3+HCl HFeCl62-（黃色）黃色）水層加氨試液調(diào)至堿性水層加氨試液調(diào)至堿性,殘存的殘存的Fe3+可用可用KCN掩蔽掩蔽, 按硫化鈉法檢查按硫化鈉法檢查. 如：枸櫞酸鐵銨的重金屬檢查枸櫞酸鐵銨的重金屬檢查重重金金屬屬檢檢查查法法a. HNO3處理后處理后,必須蒸干除盡必須蒸干除盡NO.b. 熾灼溫度嚴(yán)格控制：熾灼溫度嚴(yán)格控制：500-600中藥制劑中重金屬檢查的前處理中藥制劑中重金屬檢查的前處理重重金金屬屬檢檢查查法法 c. 藥物本身能生成不溶性硫化物藥物

14、本身能生成不溶性硫化物加入掩蔽劑消除干擾加入掩蔽劑消除干擾其他：其他：a. 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的稀釋配制標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的稀釋配制b. 硫化鈉棕色瓶中保存可硫化鈉棕色瓶中保存可1-2個(gè)月個(gè)月重重金金屬屬檢檢查查法法砷砷鹽鹽檢檢查查法法 (一一) 古蔡氏法古蔡氏法 (二二) 二乙基二硫代甲酸銀法二乙基二硫代甲酸銀法 （Ag-DDC法）法） (一一) 古蔡氏法（古蔡氏法（Gutzeit）1. 原原 理理金屬金屬鋅鋅與與酸酸作用產(chǎn)生新作用產(chǎn)生新生態(tài)的生態(tài)的氫氫與藥物中與藥物中微量砷鹽反應(yīng)微量砷鹽反應(yīng)生生成具揮發(fā)性的成具揮發(fā)性的砷化氫砷化氫,遇遇溴化汞試紙溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑砷斑,與同條件

15、下與同條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較較,測(cè)得供試品得含砷限度測(cè)得供試品得含砷限度.砷砷鹽鹽檢檢查查法法反應(yīng)式如下：OH3Zn3AsHH9Zn3AsO22333棕色（量大）323As(HgBr)3HBr3HgBrAsH黃色（量少）223)HgBr(AsHHBr2HgBr2AsH棕色棕色黃色黃色2操作操作加鋅粒加鋅粒2g, 立即將裝妥的導(dǎo)氣管立即將裝妥的導(dǎo)氣管 B 密塞與密塞與 A 瓶瓶, 置置25-40 水浴中水浴中, 反應(yīng)反應(yīng)45分鐘分鐘, 取出溴化汞取出溴化汞試紙?jiān)嚰? 比較砷斑比較砷斑.供試品標(biāo)準(zhǔn)液KI T.S.酸性SnCl2T.S.As3+ZnHCl

16、AsH3過(guò)Pb(AC)2棉花遇HgBr2試紙砷斑 比較 導(dǎo)氣管導(dǎo)氣管B中裝入醋酸鉛棉球中裝入醋酸鉛棉球再于旋塞再于旋塞C的平面上放一片溴化汞試紙的平面上放一片溴化汞試紙樣品、對(duì)照品分別置于檢砷瓶中樣品、對(duì)照品分別置于檢砷瓶中, 加鹽酸加鹽酸5ml與水與水21ml, 再加再加2.5% %碘化鉀試液碘化鉀試液5ml 與與0.3%酸性氯化亞錫試液酸性氯化亞錫試液5滴滴, 在室溫放置在室溫放置10分鐘分鐘2.2.裝置裝置檢砷瓶檢砷瓶A導(dǎo)氣管導(dǎo)氣管B 具孔塞具孔塞CABC砷砷鹽鹽檢檢查查法法 3. 討討 論論1)試劑的作用試劑的作用a. KI的作用的作用還原劑：還原劑：As5+As3+ 五價(jià)砷生成五價(jià)砷

17、生成AsH3的反應(yīng)速度比三的反應(yīng)速度比三價(jià)砷速度慢價(jià)砷速度慢, 加入加入 KI 使五價(jià)砷還原為使五價(jià)砷還原為三價(jià)砷后再與活潑氫反應(yīng)三價(jià)砷后再與活潑氫反應(yīng), 以增大以增大AsH3的生成速度的生成速度.OHIAsOHIAsO22333422砷砷鹽鹽檢檢查查法法砷砷鹽鹽檢檢查查法法 還原劑還原劑(表現(xiàn)在表現(xiàn)在3方面方面). 將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷(As5+As3+)OHSnAsOH2SnAsO2433234b.酸性SnCl2的作用 SnIISn4222新生態(tài)氫H 2ZnH2Zn2233HH 2 AsHAs2424ZnIZnI進(jìn)而促進(jìn)進(jìn)而促進(jìn)AsH3不斷不斷生成生成穩(wěn)定的絡(luò)離子穩(wěn)定的

18、絡(luò)離子. 將將KI被氧化生成的被氧化生成的I2再還原為再還原為I-砷砷鹽鹽檢檢查查法法砷砷鹽鹽檢檢查查法法 （氣泡）233HH2AsHAsHHHZnH2阻礙酸與鋅粒反應(yīng)阻礙酸與鋅粒反應(yīng)Zn超電壓超電壓0.70Sn超電壓超電壓0.50SnCl2. SnCl2與與Zn粒表面形成粒表面形成Zn-Sn齊齊 起去極化作用起去極化作用,使氫氣均勻而使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生連續(xù)地發(fā)生.砷砷鹽鹽檢檢查查法法 c. .PbAcPbAc2 2棉花的作用棉花的作用 排除硫化物的干擾排除硫化物的干擾(1(1mgSmgS2- 2- ) ) （黑色，干擾）HgSHgBrSHH2S222果留在棉花上，不干擾結(jié) 2HAcPbS

19、H2SPbAc2砷砷鹽鹽檢檢查查法法 d.HgBrd.HgBr2 2試紙的作用試紙的作用 HgBrHgBr2 2試紙與試紙與AsHAsH3 3作用生成砷斑作用生成砷斑. . 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)a.標(biāo)準(zhǔn)砷溶液標(biāo)準(zhǔn)砷溶液規(guī)定取規(guī)定取2 ml (1 g /ml) b.Zn粒的大小及用量粒的大小及用量 大?。耗芡ㄟ^(guò)大小：能通過(guò)1號(hào)篩號(hào)篩（8502000 m） 用量：約用量：約2g.c.反應(yīng)溫度：反應(yīng)溫度： 2540 反應(yīng)時(shí)間：反應(yīng)時(shí)間：45分鐘分鐘 砷砷鹽鹽檢檢查查法法a. 供試品是硫化物供試品是硫化物,亞硫酸鹽亞硫酸鹽,硫代硫酸鹽硫代硫酸鹽（色斑，干擾試驗(yàn)） Hg,HgSHgBrSO,SHHOS,SO

20、,S222232232（不干擾）243232232SOOHNOOS,SO,S排除方法：加入濃硝酸處理排除方法：加入濃硝酸處理 干擾物的排除干擾物的排除砷砷鹽鹽檢檢查查法法Fe3+能消耗還原劑能消耗還原劑(KI、SnCl2), 并能氧并能氧化砷化氫化砷化氫.排除方法排除方法：先加酸性先加酸性SnCl2試液使試液使 Fe3+ Fe2+砷砷鹽鹽檢檢查查法法b. 供試品是鐵鹽供試品是鐵鹽(Fe3+)c. 共價(jià)鍵結(jié)合的砷化物共價(jià)鍵結(jié)合的砷化物排除方法排除方法：進(jìn)行有機(jī)破壞進(jìn)行有機(jī)破壞 酸破壞法或堿破壞法酸破壞法或堿破壞法砷砷鹽鹽檢檢查查法法 堿破壞法堿破壞法a 加入氫氧化鈣加入氫氧化鈣 500-600

21、C灼燒灼燒 例：酚磺酞例：酚磺酞b 加入無(wú)水碳酸鈉堿融（環(huán)狀有機(jī)加入無(wú)水碳酸鈉堿融（環(huán)狀有機(jī)酸堿金屬）酸堿金屬） 例：苯甲酸鈉例：苯甲酸鈉砷砷鹽鹽檢檢查查法法酸破壞法酸破壞法 加稀硫酸與溴化鉀加稀硫酸與溴化鉀 例：葡萄糖中砷鹽檢查例：葡萄糖中砷鹽檢查 (二二) 二乙基二硫代氨基甲酸銀法二乙基二硫代氨基甲酸銀法 (Ag-DDC法法) silver diethyldithiocarbamateAgSSCNC2H5C2H5 本法不僅用于砷鹽的限量檢查本法不僅用于砷鹽的限量檢查, 而而且可用作微量砷鹽的含量測(cè)定且可用作微量砷鹽的含量測(cè)定.1. 原原 理理 第一步第一步：同古蔡氏法生成同古蔡氏法生成砷化

22、氫砷化氫 第二步第二步：砷化氫還原砷化氫還原Ag-DDC溶液溶液,產(chǎn)生產(chǎn)生紅色紅色的的膠態(tài)膠態(tài)銀銀. 目視比色法目視比色法 儀器分析儀器分析 510nm三、鉛、鎘、砷、汞、銅的檢查三、鉛、鎘、砷、汞、銅的檢查n原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法n電感耦合等離子體質(zhì)譜法。電感耦合等離子體質(zhì)譜法。四、鐵鹽的檢查四、鐵鹽的檢查方法：硫氰酸鹽法方法：硫氰酸鹽法原理：原理： 鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配離子銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配離子, ,與與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后所呈的一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后所呈的顏色進(jìn)行比較。顏色進(jìn)行比較。Fe3+

23、 6SCN-HClFe(SCN)63-（硫氰酸鐵絡(luò)離子）操作：操作：4ml25mld.HCl 30%硫氰酸銨硫氰酸銨過(guò)硫酸銨過(guò)硫酸銨50mgH2O50mlH2O 樣樣品品標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液2) 最佳比色濃度最佳比色濃度a. 儀器分析線性范圍儀器分析線性范圍5 90 g Fe3+ /50mlb. 目視比色濃度范圍目視比色濃度范圍1050 g Fe3+ /50ml討論：討論：1) 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液硫酸鐵銨硫酸鐵銨(含硫酸含硫酸) 濃度濃度 10 gFe3+/ml五、干燥失重測(cè)定法：五、干燥失重測(cè)定法： （水分和揮發(fā)物質(zhì)水分和揮發(fā)物質(zhì)）1、常壓恒溫干燥法（、常壓恒溫干燥法（烘干法烘干法）2、干燥劑

24、干燥法、干燥劑干燥法(受熱易分解或揮發(fā)的樣品受熱易分解或揮發(fā)的樣品)3、減壓干燥法（、減壓干燥法（熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定及較難熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定及較難趕除水分的樣品趕除水分的樣品） 恒重恒重 六、水分測(cè)定法：六、水分測(cè)定法：1、烘干法（不含或少含揮發(fā)性成分）、烘干法（不含或少含揮發(fā)性成分）2、甲苯法（含揮發(fā)性成分）、甲苯法（含揮發(fā)性成分）3、減壓干燥法（含揮發(fā)性成分的貴重藥品）、減壓干燥法（含揮發(fā)性成分的貴重藥品）4、氣相色譜法（外標(biāo)法）、氣相色譜法（外標(biāo)法）供試品、甲苯、玻璃珠供試品、甲苯、玻璃珠水分水分甲苯甲苯甲苯法甲苯法水分測(cè)定管水分測(cè)定管直型冷凝管直型冷凝管短頸圓底燒瓶短頸圓底燒瓶2112

25、2112)(22)(WWttWWttRRRRR=n = 16（tR/W）2 水水 峰計(jì)大于峰計(jì)大于3000 乙醇峰計(jì)大于乙醇峰計(jì)大于200n = 5.54（tR/W1/2）2 氣相色譜法（外標(biāo)法）氣相色譜法（外標(biāo)法）大于大于2水峰水峰RSD不得大于不得大于2.0%七、熾灼殘?jiān)鼨z查法七、熾灼殘?jiān)鼨z查法 緩緩熾灼緩緩熾灼 放冷放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供試品供試品 炭化炭化 加熱加熱 700-800H2SO4 除盡除盡 完全灰化完全灰化殘?jiān)鼘⒂糜谥亟饘贉y(cè)定時(shí)熾灼溫度殘?jiān)鼘⒂糜谥亟饘贉y(cè)定時(shí)熾灼溫度應(yīng)控制在應(yīng)控制在500-600八、灰分、酸不溶性灰分檢查八、灰分、酸不溶性灰分檢查n總灰分：限

26、制中藥中的泥沙和其他總灰分：限制中藥中的泥沙和其他雜質(zhì)雜質(zhì)n酸不溶性灰分：限制中藥中的泥沙酸不溶性灰分：限制中藥中的泥沙等雜質(zhì)等雜質(zhì)例例：黃芪總灰分不得過(guò)黃芪總灰分不得過(guò)5.0%,酸不溶性酸不溶性灰分不得過(guò)灰分不得過(guò)1.0% 第三節(jié)第三節(jié) 中藥制劑的特殊雜質(zhì)檢查中藥制劑的特殊雜質(zhì)檢查n特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查：按照制劑的生產(chǎn)或儲(chǔ)按照制劑的生產(chǎn)或儲(chǔ)存過(guò)程中，根據(jù)其存過(guò)程中，根據(jù)其來(lái)源來(lái)源、生產(chǎn)工藝生產(chǎn)工藝及及藥品的性質(zhì)藥品的性質(zhì)有可能引入的雜質(zhì)進(jìn)有可能引入的雜質(zhì)進(jìn)行檢查行檢查 檢查原則檢查原則：利用藥品和雜質(zhì)的利用藥品和雜質(zhì)的理化性質(zhì)理化性質(zhì)及及生理作用生理作用的差異，采用的差異，采用物理的物理

27、的、化化學(xué)學(xué)的、的、藥理藥理的、的、微生物微生物的方法來(lái)檢查。的方法來(lái)檢查。舉例：舉例： 1 1、土大黃苷的檢查土大黃苷的檢查： 取本品（取本品（大黃大黃）粉末）粉末0.20.2g g，加甲醇加甲醇2 2ml,ml,溫浸溫浸1010分鐘，放冷，取上清液分鐘，放冷，取上清液 1010l,l,點(diǎn)于濾紙上，以點(diǎn)于濾紙上，以4545乙醇展開(kāi)，取出，乙醇展開(kāi)，取出，晾干，放置晾干，放置1010分鐘，置分鐘，置紫外光燈紫外光燈(365(365nm) nm) 下下檢視，不得顯持久的亮紫色熒光。檢視，不得顯持久的亮紫色熒光。 2. 西洋參中人參的檢查西洋參中人參的檢查 西洋參樣品西洋參樣品 人參對(duì)照藥材人參對(duì)

28、照藥材 薄層色譜法薄層色譜法 不得顯對(duì)照藥材同樣斑點(diǎn)不得顯對(duì)照藥材同樣斑點(diǎn)人參：人參： 取人參對(duì)照藥材取人參對(duì)照藥材 1 1g g，照照 鑒別鑒別 項(xiàng)下對(duì)照藥材溶液制備項(xiàng)下對(duì)照藥材溶液制備的方法制成對(duì)照藥材溶液。照的方法制成對(duì)照藥材溶液。照 薄層色譜法薄層色譜法( (附錄附錄 B)B)試驗(yàn)，試驗(yàn)，吸取吸取 鑒別鑒別 項(xiàng)下的供試品溶液和上述對(duì)照藥材溶液各項(xiàng)下的供試品溶液和上述對(duì)照藥材溶液各2 2l l，分分別點(diǎn)于同一硅別點(diǎn)于同一硅 膠膠 G G薄層板上，以氯仿薄層板上，以氯仿- -甲醇甲醇- -水水(13:7:2)5(13:7:2)51010放置放置1212小時(shí)的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾

29、干小時(shí)的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干, ,噴噴 以以1010硫酸乙醇溶液，在硫酸乙醇溶液，在105105加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光及紫外光燈別置日光及紫外光燈(365(365nm)nm)下檢視。供試品色譜下檢視。供試品色譜 中，不得中，不得顯與對(duì)照藥材完全相一致的斑點(diǎn)。顯與對(duì)照藥材完全相一致的斑點(diǎn)。 3. 雙酯型生物堿雙酯型生物堿：毒性大，是烏頭有大毒的：毒性大，是烏頭有大毒的主要有效成分。烏頭炮制過(guò)程中，雙酯型主要有效成分。烏頭炮制過(guò)程中，雙酯型生物堿發(fā)生水解除去酯基后無(wú)毒性。生物堿發(fā)生水解除去酯基后無(wú)毒性。 3+n 制川烏中酯型生物堿的檢查制川烏中酯型生物堿

30、的檢查 高效液相色譜法高效液相色譜法n 附子理中丸中烏頭堿的限量檢查附子理中丸中烏頭堿的限量檢查 薄層色譜法薄層色譜法 第四節(jié)第四節(jié) 農(nóng)藥殘留量的檢查農(nóng)藥殘留量的檢查n常用農(nóng)藥按化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為：常用農(nóng)藥按化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為： 有機(jī)氯類有機(jī)氯類：六六六、：六六六、DDT 有機(jī)磷類有機(jī)磷類: 三硫磷、氯硫磷三硫磷、氯硫磷 苯氧羧酸類苯氧羧酸類 氨基甲酸酯類氨基甲酸酯類 二硫代氨基甲酸酯類二硫代氨基甲酸酯類 無(wú)機(jī)農(nóng)藥無(wú)機(jī)農(nóng)藥 植物性農(nóng)藥植物性農(nóng)藥 其他其他一、供試品的制備n殘留農(nóng)藥的提取殘留農(nóng)藥的提取 根據(jù)農(nóng)藥的種類選取溶劑和提取方法根據(jù)農(nóng)藥的種類選取溶劑和提取方法常用溶劑常用溶劑：丙酮、乙腈、苯、氯仿

31、、二氯：丙酮、乙腈、苯、氯仿、二氯甲烷甲烷常用方法常用方法：索氏提取法、振蕩提取法：索氏提取法、振蕩提取法 n樣品的純化樣品的純化 常用步驟：常用步驟：LLP柱層析分離柱層析分離 二、檢測(cè)方法：色譜法二、檢測(cè)方法：色譜法 注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：1、盡快分析、保存好、盡快分析、保存好2、避光，注意容器和包裝材料、試劑、避光，注意容器和包裝材料、試劑干擾干擾3、防止損失、防止損失氣相色譜法n層析柱層析柱 常用玻璃柱或彈性石英毛細(xì)管柱；固常用玻璃柱或彈性石英毛細(xì)管柱；固定相常用非極性的或中等極性的溶液；單體一般定相常用非極性的或中等極性的溶液；單體一般為為8080100100目目n檢測(cè)器檢測(cè)器 有有機(jī)

32、氯農(nóng)藥常機(jī)氯農(nóng)藥常用電子捕獲檢測(cè)器用電子捕獲檢測(cè)器ECDECD；有機(jī)磷農(nóng)藥常用火焰光度檢測(cè)器有機(jī)磷農(nóng)藥常用火焰光度檢測(cè)器FPDFPD、氮磷檢測(cè)器、氮磷檢測(cè)器NPDNPD或質(zhì)譜檢測(cè)器或質(zhì)譜檢測(cè)器MSDMSDn固定液固定液 n擔(dān)體擔(dān)體n柱溫柱溫 程序升溫，溫度范圍一般為程序升溫，溫度范圍一般為100 100 300 300 n載氣載氣 高純氮（高純氮（99.9999.99），流量為），流量為5050150ml/min150ml/min高效液相色譜法：高效液相色譜法： 常用常用十八烷基硅烷鍵合硅膠十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，色譜柱，甲醇甲醇- -水水或或乙腈乙腈- -水水作為流動(dòng)相，檢測(cè)器選用作為流

33、動(dòng)相，檢測(cè)器選用紫外紫外或或熒光檢測(cè)熒光檢測(cè)器器。 有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量檢查有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量檢查 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 彈性石英毛細(xì)管柱彈性石英毛細(xì)管柱SE-54(SE-54(或或DB-1701) DB-1701) 、電子捕獲檢測(cè)器，進(jìn)樣口、電子捕獲檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度：溫度：230230，檢測(cè)器溫度：，檢測(cè)器溫度：300300，不分流進(jìn)樣，程序升溫，不分流進(jìn)樣，程序升溫 對(duì)照品儲(chǔ)備液對(duì)照品儲(chǔ)備液 六六六（六六六（BHCBHC）-，-，-，-BHC-BHC，滴滴涕（，滴滴涕（DDTDDT）PP-PP-DDEDDE，-DDD-DDD，-DDT-DDT，OP-DDTOP-DD

34、T及五氯硝基苯（及五氯硝基苯（PCNBPCNB）+ +石油醚（石油醚（60-9060-90）分別制成每分別制成每1ml1ml約含約含4-54-5g g的溶液的溶液 混合對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備混合對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備 對(duì)照品儲(chǔ)備液對(duì)照品儲(chǔ)備液0.5ml 10ml0.5ml 10ml 混合對(duì)照品溶液的制備混合對(duì)照品溶液的制備 取混合對(duì)照品儲(chǔ)備液制成每取混合對(duì)照品儲(chǔ)備液制成每1L1L含含0 0g g、1 1g g、5 5g g、1010g g、5050g g、100100g g、500500g g濃度系列。濃度系列。 有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量檢查有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量檢查 供試品溶液制備供試品溶液制備供試品研細(xì)，稱取適

35、量（相當(dāng)于藥材供試品研細(xì)，稱取適量（相當(dāng)于藥材2g2g），置），置100ml100ml具塞錐形瓶中，具塞錐形瓶中，+ +水水20ml20ml浸泡過(guò)夜，浸泡過(guò)夜，+ +丙酮丙酮40ml40ml，稱定，超聲處理，稱定，超聲處理30min30min，放冷，用，放冷，用丙酮補(bǔ)足減失的重量，丙酮補(bǔ)足減失的重量，+ +氯化鈉約氯化鈉約6g6g及及二氯甲烷二氯甲烷30ml30ml，稱定，超聲處，稱定，超聲處理理15min15min，用二氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，靜置使分層，將有機(jī)相迅速，用二氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，靜置使分層，將有機(jī)相迅速移入裝有適量移入裝有適量無(wú)水硫酸鈉無(wú)水硫酸鈉的的100ml100ml具塞錐形

36、瓶中，放置具塞錐形瓶中，放置4 4小時(shí)。精密小時(shí)。精密量取量取35ml35ml，于，于4040水浴減壓濃縮至近干，加少量石油醚（水浴減壓濃縮至近干，加少量石油醚（60609090）如前反復(fù)操作至）如前反復(fù)操作至二氯甲烷及丙酮除凈二氯甲烷及丙酮除凈，用石油醚（，用石油醚（60-9060-90）溶解并轉(zhuǎn)移至溶解并轉(zhuǎn)移至10ml10ml具塞刻度離心管中，加石油醚（具塞刻度離心管中，加石油醚（60609090）至）至5ml5ml。+ +硫酸硫酸1ml1ml，振搖，振搖1 1分鐘，離心（分鐘，離心（30003000轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/ /分）分）1010分鐘。精密量取分鐘。精密量取上清液上清液2ml2ml置具刻度的濃

37、縮瓶，連接旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，置具刻度的濃縮瓶，連接旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器， 4040（或用氮（或用氮?dú)猓⑷芤簹猓⑷芤簼饪s濃縮至適量，精密稀釋至至適量，精密稀釋至1ml 1ml ，即得。，即得。 測(cè)定測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量檢查有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量檢查色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：彈性石英毛細(xì)管柱：彈性石英毛細(xì)管柱DB-17MS(DB-17MS(或或HP-5)HP-5)、氮磷檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度：、氮磷檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度：230230，檢測(cè)器溫度：，檢測(cè)器溫度：300300，不分流進(jìn)樣，程序升溫，不分流進(jìn)樣，程序升溫對(duì)照品儲(chǔ)備液對(duì)照品儲(chǔ)備液 ：對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、樂(lè)果、氧化樂(lè)果、：對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷

38、、樂(lè)果、氧化樂(lè)果、甲胺磷、久效磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、敵甲胺磷、久效磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷、敵敵畏、乙酰甲胺磷，用乙酸乙酯，制成每敵畏、乙酰甲胺磷，用乙酸乙酯，制成每1ml1ml約含約含100100g g的溶的溶液液混合對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備混合對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備：對(duì)照品儲(chǔ)備液：對(duì)照品儲(chǔ)備液1ml 20ml1ml 20ml混合對(duì)照品溶液的制備混合對(duì)照品溶液的制備：取混合對(duì)照品儲(chǔ)備液制成每：取混合對(duì)照品儲(chǔ)備液制成每1ml1ml含含0.10.1g g、0.50.5g g、1 1g g、2 2g g、5 5g g濃度系列。濃度系列。 有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量檢查有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量檢查供

39、試品溶液制備供試品溶液制備 供試品研細(xì)，稱取適量（相當(dāng)于藥材供試品研細(xì)，稱取適量（相當(dāng)于藥材5g5g），），+ +無(wú)水硫酸鈉無(wú)水硫酸鈉5g5g，+ +乙酸乙酯乙酸乙酯50-100ml50-100ml，冰浴超聲處理，冰浴超聲處理3min3min，放置，取上層，放置，取上層液濾過(guò)，藥渣加液濾過(guò)，藥渣加乙酸乙酯乙酸乙酯30-50ml30-50ml，冰浴超聲處理，冰浴超聲處理3min3min，放，放置，濾過(guò)，合并濾液，置，濾過(guò)，合并濾液， 4040減壓濃縮至干，減壓濃縮至干，+ +乙酸乙酯乙酸乙酯5ml5ml，使溶解。精密量取使溶解。精密量取1ml1ml，加到，加到活性炭小柱活性炭小柱（120-400

40、120-400目，目，0.25g0.25g），置多功能真空樣品處理器上，用正己烷），置多功能真空樣品處理器上，用正己烷- -乙酸乙酯乙酸乙酯（1:11:1）5ml5ml洗脫洗脫。洗脫液置氮吹儀上濃縮至近干。洗脫液置氮吹儀上濃縮至近干。+ +乙酸乙酯乙酸乙酯1ml1ml，溶解。，溶解。 測(cè)定測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量檢查有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量檢查1-1-敵敵畏敵敵畏 2-2-速滅速滅磷磷3-3-久效磷久效磷 4-4-甲拌甲拌磷磷5-5-巴胺磷巴胺磷 6-6-二嗪二嗪農(nóng)農(nóng)7-7-乙嘧硫磷乙嘧硫磷8-8-甲基嘧啶硫磷甲基嘧啶硫磷9-9-甲基對(duì)硫磷甲基對(duì)硫磷10-10-稻瘟凈稻瘟凈 11-11-水胺水胺硫磷硫磷1

41、2-12-氧化喹硫磷氧化喹硫磷13-13-稻豐散稻豐散 14-14-甲甲喹硫磷喹硫磷15-15-克線磷克線磷 16-16-乙乙硫磷硫磷十六種有機(jī)磷農(nóng)藥的氣相色譜圖十六種有機(jī)磷農(nóng)藥的氣相色譜圖擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量檢查：擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量檢查：氣相色譜法氣相色譜法 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：彈性石英毛細(xì)管柱色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：彈性石英毛細(xì)管柱SE-54SE-54或或DB-5DB-5，電子捕獲檢測(cè)器。進(jìn)樣口溫度，電子捕獲檢測(cè)器。進(jìn)樣口溫度270270，檢測(cè)器溫度，檢測(cè)器溫度330330。選最佳的分流比。程序升溫：理論塔板數(shù)按溴氰菊酯。選最佳的分流比。程序升溫：理論塔板數(shù)按溴氰菊酯峰計(jì)算應(yīng)

42、不低于峰計(jì)算應(yīng)不低于1 110105 5，兩個(gè)相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于，兩個(gè)相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.51.5。 對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備：氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯適對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備：氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯適量，用石油醚量，用石油醚(60(6090)90)分別制成每分別制成每1mL1mL約含約含20202525g g。 混合對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備：對(duì)照品儲(chǔ)備液混合對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備：對(duì)照品儲(chǔ)備液1ml 10ml1ml 10ml。混合對(duì)照品溶液的制備混合對(duì)照品溶液的制備 量取混合對(duì)照品儲(chǔ)備液，制成每量取混合對(duì)照品儲(chǔ)備液，制成每1L1L分別含分別含0 0g g、4 4g g、8 8g g、40

43、40g g、200200g g的溶液。的溶液。供試品溶液的制備供試品溶液的制備 取樣約取樣約l l2g2g；精密稱定，置；精密稱定，置100mL100mL具塞錐形瓶，加石油具塞錐形瓶，加石油醚醚(60(6090)-90)-丙酮丙酮(4:1)(4:1)混合溶液混合溶液30mL30mL，超聲處理，超聲處理1515分鐘，分鐘，濾過(guò)，藥渣再重復(fù)上述操作濾過(guò)，藥渣再重復(fù)上述操作2 2次后，合并濾液。濾液加入適量次后，合并濾液。濾液加入適量無(wú)水硫酸鈉脫水后，于無(wú)水硫酸鈉脫水后，于40404545減壓濃縮至近干，用少量減壓濃縮至近干，用少量石油醚石油醚(60(6090)90)反復(fù)操作至丙酮除凈，殘?jiān)舆m量石

44、油反復(fù)操作至丙酮除凈，殘?jiān)舆m量石油醚醚(60(6090)90)溶解，置混合小柱上，用石油醚溶解，置混合小柱上，用石油醚(60(6090)-90)-乙醚乙醚(4:1)(4:1)混合溶液混合溶液90mL90mL洗脫，收集洗脫液。于洗脫，收集洗脫液。于40404545減壓濃縮至近干，再用石油醚減壓濃縮至近干，再用石油醚(60(6090)390)34mL4mL重復(fù)重復(fù)操作至乙醚除凈，用石油醚操作至乙醚除凈，用石油醚(60(6090)90)溶解轉(zhuǎn)移至溶解轉(zhuǎn)移至5mL5mL量瓶量瓶中，并稀釋至刻度。中，并稀釋至刻度。 測(cè)定法測(cè)定法 分別精密吸取供試品溶液和與之相對(duì)應(yīng)濃度的分別精密吸取供試品溶液和與之相對(duì)

45、應(yīng)濃度的混合對(duì)照品溶液各混合對(duì)照品溶液各1 1L L，分別連續(xù)進(jìn)樣，分別連續(xù)進(jìn)樣3 3次，取次，取3 3次平均值。次平均值。按外標(biāo)法計(jì)算。按外標(biāo)法計(jì)算。黃曲霉素的檢查黃曲霉素：黃曲霉素：極強(qiáng)的毒性和致癌性；極強(qiáng)的毒性和致癌性； 在紫外線照射下，能發(fā)出熒光；在紫外線照射下，能發(fā)出熒光； 耐熱，在耐熱，在280時(shí)發(fā)生裂解；時(shí)發(fā)生裂解； 低濃度時(shí)易受紫外線破壞，被氧化或遇堿被破低濃度時(shí)易受紫外線破壞，被氧化或遇堿被破壞；壞； 性質(zhì)：性質(zhì)：不溶于水，溶于油及氯仿、丙酮、甲醇不溶于水，溶于油及氯仿、丙酮、甲醇 測(cè)定方法：測(cè)定方法：HPLC、熒光分析法、免疫分析法熒光分析法、免疫分析法等等 高效液相色譜法

46、高效液相色譜法 原理：原理：黃曲霉毒素經(jīng)衍生后得到能產(chǎn)生強(qiáng)熒光的物質(zhì)，可黃曲霉毒素經(jīng)衍生后得到能產(chǎn)生強(qiáng)熒光的物質(zhì)，可 用熒光檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。用熒光檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。 衍生的方法：柱前三氟乙酸（衍生的方法：柱前三氟乙酸（TFATFA）衍生，柱后碘衍）衍生，柱后碘衍生和柱后過(guò)溴化溴化吡啶（生和柱后過(guò)溴化溴化吡啶（PBPBPBPB）衍生）衍生 本法靈敏度為本法靈敏度為0.2g0.2g/kg/kg 注意：注意：（1 1）應(yīng)有相應(yīng)的安全防護(hù)措施，并不要污染環(huán)境。）應(yīng)有相應(yīng)的安全防護(hù)措施，并不要污染環(huán)境。（2 2）殘留有黃曲霉毒素的廢液或殘?jiān)牟Ａ髅?，?yīng)置）殘留有黃曲霉毒素的廢液或殘?jiān)牟Ａ髅?，?yīng)置于專

47、用貯存容器（裝有于專用貯存容器（裝有10%10%次氯酸鈉溶液）內(nèi)，浸泡次氯酸鈉溶液）內(nèi)，浸泡2424小時(shí)小時(shí)以上，再用清水將玻璃器皿沖洗干凈。以上，再用清水將玻璃器皿沖洗干凈。熒光分析法熒光分析法 黃曲霉毒素黃曲霉毒素B B1 1 - -香豆素鈉鹽香豆素鈉鹽 （熒光）（熒光） （無(wú)熒光）（無(wú)熒光） 激發(fā)波長(zhǎng)激發(fā)波長(zhǎng)360nm360nm，發(fā)射波長(zhǎng)，發(fā)射波長(zhǎng)450nm450nm免疫化學(xué)分析法免疫化學(xué)分析法 酶連免疫法（酶連免疫法（ELISAELISA）NaOHNaOHHClHCl第六節(jié)第六節(jié) 二氧化硫殘留量測(cè)定法二氧化硫殘留量測(cè)定法一、蒸餾滴定法一、蒸餾滴定法 （中國(guó)藥典中國(guó)藥典方法）方法） A

48、A為為1000mL1000mL兩頸圓底燒瓶；兩頸圓底燒瓶；B B為豎式回流冷凝管；為豎式回流冷凝管；C C為為( (帶刻度帶刻度) )分液漏斗；分液漏斗；D D為連接氮?dú)饬魅肟冢粸檫B接氮?dú)饬魅肟?；E E為二氧化硫氣為二氧化硫氣體導(dǎo)出口。體導(dǎo)出口。 測(cè)定法測(cè)定法 取藥材細(xì)粉約取藥材細(xì)粉約10g10g，精密稱定，置兩頸圓底，精密稱定，置兩頸圓底燒瓶中，加水燒瓶中，加水300300400mL400mL和和6mol/L6mol/L鹽酸溶液鹽酸溶液lOmLlOmL，連接刻，連接刻度分液漏斗，并導(dǎo)入氮?dú)庵疗康祝B接回流冷凝管，在冷度分液漏斗，并導(dǎo)入氮?dú)庵疗康?，連接回流冷凝管，在冷凝管的上端凝管的上端E E

49、口處連接導(dǎo)氣管，將導(dǎo)氣管插入口處連接導(dǎo)氣管，將導(dǎo)氣管插入250mL250mL錐形瓶錐形瓶底部。錐形瓶?jī)?nèi)加水底部。錐形瓶?jī)?nèi)加水125mL125mL和淀粉指示液和淀粉指示液1mL1mL作為吸收液，作為吸收液，置于磁力攪拌器上不斷攪拌。加熱兩頸燒瓶?jī)?nèi)的溶液至沸，置于磁力攪拌器上不斷攪拌。加熱兩頸燒瓶?jī)?nèi)的溶液至沸，并保持微沸約并保持微沸約3 3分鐘后開(kāi)始用碘滴定液分鐘后開(kāi)始用碘滴定液(0.01 mol/L)(0.01 mol/L)滴定，滴定，至藍(lán)色或藍(lán)紫色持續(xù)至藍(lán)色或藍(lán)紫色持續(xù)2020秒鐘不褪，并將滴定的結(jié)果用空白秒鐘不褪，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。試驗(yàn)校正。 供試品中二氧化硫殘留量供試品中二氧化

50、硫殘留量(mg/g)= (mg/g)= WC1000032. 0)VV(0 V V為供試品消耗碘滴定液的體積，為供試品消耗碘滴定液的體積，mLmL； V V0 0為空白消耗碘滴定液的體積，為空白消耗碘滴定液的體積，mLmL； C C為碘滴定液濃度，為碘滴定液濃度，0.01mol/L0.01mol/L； W W為供試品的重量，為供試品的重量，g g； O.032O.032為每為每1mL1mL碘滴定液碘滴定液(1 moL/L)(1 moL/L)相當(dāng)?shù)亩趸虻南喈?dāng)?shù)亩趸虻馁|(zhì)量，質(zhì)量，g g。 Monier Williams Monier Williams改良法（韓國(guó)）：改良法（韓國(guó)）： 原理為

51、：中藥材蒸餾出的原理為：中藥材蒸餾出的S0S02 2被被3%3%過(guò)氧化氫溶液氧化成硫過(guò)氧化氫溶液氧化成硫酸后，在微量滴定管中用酸后，在微量滴定管中用0.0lmol/L0.0lmol/L氫氧化鈉溶液滴定。由氫氧化鈉溶液滴定。由氫氧化鈉溶液的消耗量可計(jì)算出氫氧化鈉溶液的消耗量可計(jì)算出S0S02 2的量。的量。二、四氯汞鈉二、四氯汞鈉- -副玫瑰苯胺比色法副玫瑰苯胺比色法 利用樣品中的亞硫酸鹽與四氯汞鈉反應(yīng)生成穩(wěn)定的絡(luò)合利用樣品中的亞硫酸鹽與四氯汞鈉反應(yīng)生成穩(wěn)定的絡(luò)合物，再與甲醛及鹽酸副玫瑰苯胺作用生成紫色絡(luò)合物，在物，再與甲醛及鹽酸副玫瑰苯胺作用生成紫色絡(luò)合物，在分光光度計(jì)上與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。分

52、光光度計(jì)上與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。三、離子色譜法三、離子色譜法四、示波極譜法四、示波極譜法 第七節(jié)第七節(jié) 樹(shù)脂殘留物檢查樹(shù)脂殘留物檢查殘留溶劑測(cè)定：氣相色譜法殘留溶劑測(cè)定：氣相色譜法一、色譜柱一、色譜柱1. 1. 毛細(xì)管柱毛細(xì)管柱（1 1）非極性色譜柱）非極性色譜柱 固定液為固定液為100%100%的二甲基聚硅氧烷的二甲基聚硅氧烷 （2 2）極性色譜柱）極性色譜柱 固定液為聚乙二醇（固定液為聚乙二醇（PEG-20MPEG-20M）（3 3）中極性色譜柱）中極性色譜柱 固定液為（固定液為（35%35%）二苯基）二苯基- -（65%65%）甲基聚硅氧）甲基聚硅氧烷、（烷、（50%50%）二苯基）二苯基

53、- -（50%50%）二甲基聚硅氧烷、）二甲基聚硅氧烷、（35%35%）二苯基）二苯基- -（65%65%）二甲基聚硅氧烷、（）二甲基聚硅氧烷、（14%14%）氰丙基苯基氰丙基苯基- -（85%85%）二甲基聚硅氧烷、（）二甲基聚硅氧烷、（6%6%）氰丙）氰丙基苯基基苯基- -（94%94%）二甲基聚硅氧烷等。）二甲基聚硅氧烷等。（4 4）弱極性色譜柱）弱極性色譜柱 固定液為（固定液為（5%5%）苯基）苯基- -（95%95%）甲基聚硅氧烷、）甲基聚硅氧烷、（5%5%）二苯基）二苯基- -（95%95%）二甲基硅氧烷共聚物的毛細(xì)）二甲基硅氧烷共聚物的毛細(xì)管柱等。管柱等。 以直徑為以直徑為0.1

54、80.180.25mm0.25mm的二乙烯苯的二乙烯苯- -乙基乙烯乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他適宜的填料為固定相。苯型高分子多孔小球或其他適宜的填料為固定相。2. 2. 填充柱填充柱二、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)二、系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 1. 1. 用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算，毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算，毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)一般不低于一般不低于50005000；填充柱的理論板數(shù)一般不低于；填充柱的理論板數(shù)一般不低于10001000。 2. 2. 色譜圖中，待測(cè)物色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度色譜圖中，待測(cè)物色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于應(yīng)大于1.51.5。 3. 3. 以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，對(duì)照品

55、溶液連續(xù)進(jìn)樣以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5 5次，所得待次，所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSDRSD）應(yīng)不大于）應(yīng)不大于5%5%；若以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)物峰面積的；若以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)物峰面積的RSDRSD應(yīng)不大于應(yīng)不大于10%10%。三、供試品溶液的制備三、供試品溶液的制備 1. 1. 頂空進(jìn)樣頂空進(jìn)樣 除另有規(guī)定外，精密稱取供試品除另有規(guī)定外，精密稱取供試品0.10.11g1g；常以水為溶；常以水為溶劑；非水溶性藥物，可采用劑；非水溶性藥物，可采用N,N-N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或其他適宜溶劑

56、；選擇適宜的溶劑且應(yīng)不干擾待測(cè)溶劑的測(cè)或其他適宜溶劑；選擇適宜的溶劑且應(yīng)不干擾待測(cè)溶劑的測(cè)定。根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，定。根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要。其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要。2. 2. 溶液直接進(jìn)樣溶液直接進(jìn)樣 精密稱取供試品適量，用水或合適的有機(jī)溶劑使溶解；精密稱取供試品適量，用水或合適的有機(jī)溶劑使溶解；根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要四、對(duì)照品溶液的制備四、對(duì)照品溶液的制備 精密稱取各

57、品種項(xiàng)下規(guī)定檢查的有機(jī)溶劑適量，采用精密稱取各品種項(xiàng)下規(guī)定檢查的有機(jī)溶劑適量，采用與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對(duì)照品溶液；與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對(duì)照品溶液； 以水作溶劑，先將待測(cè)有機(jī)溶劑溶解在以水作溶劑，先將待測(cè)有機(jī)溶劑溶解在50%50%二甲基亞砜二甲基亞砜或或N,N-N,N-二甲基甲酰胺溶液中，再用水逐步稀釋。二甲基甲酰胺溶液中，再用水逐步稀釋。 如為限度檢查，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定確定對(duì)照品溶如為限度檢查，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定確定對(duì)照品溶液的濃度；液的濃度； 如為定量測(cè)定，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的實(shí)際殘留量如為定量測(cè)定，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的實(shí)際殘留量確定對(duì)照品溶

58、液的濃度；通常對(duì)照品溶液色譜峰面積不宜超確定對(duì)照品溶液的濃度；通常對(duì)照品溶液色譜峰面積不宜超過(guò)供試品溶液中對(duì)應(yīng)的殘留溶劑色譜峰面積的過(guò)供試品溶液中對(duì)應(yīng)的殘留溶劑色譜峰面積的2 2倍。必要時(shí)，倍。必要時(shí)，應(yīng)重新調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡芤旱臐舛取?yīng)重新調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡芤旱臐舛?。五、測(cè)定法五、測(cè)定法1. 1. 第一法第一法 （毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法）（毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法） 色譜條件：色譜條件： 柱溫一般為柱溫一般為4040100100；常以氮?dú)鉃檩d氣，流速為每；常以氮?dú)鉃檩d氣，流速為每分鐘分鐘1.01.02.0mL2.0mL；以水為溶劑時(shí)頂空瓶平衡溫度為；以水為溶劑時(shí)頂空瓶平衡溫度為70708585，頂空瓶平衡時(shí)間為頂空瓶平衡時(shí)間為30306060分鐘；進(jìn)樣口溫度為分鐘；進(jìn)樣口溫度為200200；如采；如采用火焰離子化檢測(cè)器（用火焰離子化檢測(cè)器（FIDFID），溫度為），溫度為250250。 測(cè)定法：測(cè)定法： 取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2 2次，次，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。適用于需檢查有機(jī)溶劑的數(shù)量不多，且極性差異較小時(shí)。適用于需檢查有機(jī)溶劑的數(shù)量不多，且極性差異較小時(shí)。2. 2. 第二法（毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法）第二法（毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法）適用于需檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量較多，