血涂片復檢規(guī)則及應(yīng)用

1、血涂片復檢規(guī)則血涂片復檢規(guī)則及應(yīng)用及應(yīng)用2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科2全血細胞分析檢測全血細胞分析檢測l標本接收及拒收標本接收及拒收l標本前處理標本前處理l血細胞分析儀檢測操作血細胞分析儀檢測操作l外周血涂片及染色外周血涂片及染色l顯微鏡鏡檢顯微鏡鏡檢2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科3血細胞發(fā)育成熟過程血細胞發(fā)育成熟過程細胞內(nèi)容物復雜度、細胞核密度增細胞內(nèi)容物復雜度、細胞核密度增加加細胞內(nèi)細胞內(nèi)DNA/RNADNA/RNA量減少量減少巨核細胞系巨核細胞系2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科4細胞形態(tài)學鏡檢是判斷血細胞形態(tài)細胞形態(tài)學鏡檢是判斷血細胞形態(tài)病理變化的金標準病理變化的金標準l質(zhì)量

2、高的“鏡檢”包括觀察炎癥引起的白細胞毒性變化；白血病細胞病理變化；貧血紅細胞形態(tài)變化；血小板形態(tài)特點，以及血液內(nèi)寄生蟲檢查。血細胞分析儀不可取代！l理想的血液檢查：儀器計數(shù)細胞；鏡檢觀察形態(tài)。l鏡檢費人費時，必須制定篩選標準。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科5分析儀白細胞分類結(jié)果可為鏡檢提供篩選手段,提高鏡檢效率,保證醫(yī)療質(zhì)量 鏡檢是細胞形態(tài)分析的最終手段具有特異診斷意義的形態(tài)變化必須鏡檢 2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科6三分類血球計數(shù)儀的血常規(guī)三分類血球計數(shù)儀的血常規(guī)復檢標準復檢標準l中華醫(yī)學會檢驗分會三分群血細胞分析儀應(yīng)用指南：儀器結(jié)果只有同時出現(xiàn)WBC、HGB、PLT及3個直方圖均

3、正常且儀器無報警才可向臨床報告“分群”結(jié)果而不需要鏡檢。l白細胞三分群的結(jié)果只適合在正常血象。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科7應(yīng)用五分類血細胞分析儀的復檢應(yīng)用五分類血細胞分析儀的復檢規(guī)則規(guī)則l2005年，“國際血液學復檢協(xié)作組”提出41條規(guī)則。15個實驗室，使用CD-4000、LH-750、XE-2100、ADVIA-120，對13298份樣品檢測并同時進行鏡檢。整理驗證得出41條規(guī)則l如此高檔儀器在常規(guī)檢查中需涂片復查的樣本仍有20-25%之多。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科8ISLH復檢專家組的復檢專家組的41條復檢規(guī)則條復檢規(guī)則關(guān)于血細胞計數(shù)15條規(guī)則關(guān)于白細胞分類參數(shù)7條規(guī)則關(guān)

4、于網(wǎng)織紅細胞1條規(guī)則關(guān)于可疑報警18條規(guī)則2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科9ISLH推薦的推薦的41條復檢規(guī)則（條復檢規(guī)則（1）l 新生兒：首次檢測標本；涂片鏡檢。lWBC、RBC、Hb、PLT、Reti：超出線性范圍；稀釋標本后重新測定。lWBC、PLT：低于實驗室確認的儀器線性范圍；按SOP文件進行。lWBC、RBC、Hb、PLT：無結(jié)果；檢查標本是否有凝塊，重測標本，如果維持不變，用替代方法計數(shù)。 2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科10ISLH推薦的推薦的41條復檢規(guī)則（條復檢規(guī)則（2）l WBC：首次結(jié)果30.0109/L；涂片鏡檢。 lWBC：3天內(nèi)Delta值超限，并30.010

5、9/L；涂片鏡檢。lPLT：首次結(jié)果1000109/L；涂片鏡檢(計數(shù))。lPLT：Delta值超限的任何結(jié)果；涂片鏡檢(計數(shù))。 2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科11ISLH推薦的推薦的41條復檢規(guī)則（條復檢規(guī)則（3）lHb：首次結(jié)果其年齡和性別參考范圍上限20g/L；涂片鏡檢，確認標本是否符合要求。 lMCV：24h內(nèi)標本的首次結(jié)果105fl（成人）；涂片鏡檢。 lMCV：24h以上的成人標本105fl；涂片鏡檢觀察大紅細胞相關(guān)變化，如無大紅細胞相關(guān)變化，要求重送新鮮血標本，如無新鮮血標本，報告中注明。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科12ISLH推薦的推薦的41條復檢規(guī)則（條復檢規(guī)則（

6、4）lMCV：24h內(nèi)標本的Delta值超限的任何結(jié)果；：確認標本是否符合要求。lMCHC：參考范圍上限20g/L；檢查標本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細胞。 lMCHC：22%；涂片鏡檢。 2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科13ISLH推薦的推薦的41條復檢規(guī)則（條復檢規(guī)則（5）l無DC結(jié)果或DC結(jié)果不全：無條件復檢；人工分類和涂片鏡檢。 lNeut：首次結(jié)果20.0109/L；涂片鏡檢。 lLym：首次結(jié)果5.0109/L（成人）或7.0109/L（1.5109/L（成人）或3.0109/L（2.0109/L；涂片鏡檢。 l(21)Baso：首次結(jié)果0.5109/L；涂片鏡檢。 l

7、(22)NRBC：首次出現(xiàn)任何結(jié)果；涂片鏡檢。l(23)Ret：首次結(jié)果0.10109/L；涂片鏡檢。 2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科15ISLH推薦的推薦的41條復檢規(guī)則（條復檢規(guī)則（7）l24.懷疑性報警不成熟粒細胞(IG)/桿狀核中性粒細胞（Band）報警提示除外：首次成人結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。l25.懷疑性報警：首次兒童結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。l26.WBC結(jié)果不可信報警：陽性報警；確認標本是否符合要求并重測標本，如出現(xiàn)同樣報警提示，檢查儀器，如需要，進行人工分類。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科16ISLH推薦的推薦的41條復檢規(guī)則（條復檢規(guī)則（8）l27.RBC碎片

8、：陽性報警；涂片鏡檢。l28.雙形RBC：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。l29.難溶性RBC：陽性報警；檢查WBC直方/散點圖，根據(jù)實驗室SOP證實Ret計數(shù)是否正確，涂片鏡檢是否有異常形態(tài)的紅細胞。l30.PLT聚集報警：任何計數(shù)結(jié)果；檢查標本是否有凝塊，涂片鏡檢估計PLT數(shù)，如PLT仍聚集，按實驗室SOP進行。l31.PLT報警：除PLT聚集外的PLT和MPV報警；涂片鏡檢。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科17ISLH推薦的推薦的41條復檢規(guī)則（條復檢規(guī)則（9）l32.IG報警：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。l33.IG報警：WBC的Detal值超上限，有以前確認的陽性報警結(jié)果；涂片

9、鏡檢。l34.左移報警：陽性報警；按實驗室SOP進行。l35.不典型和（或）變異Lym：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。l36.不典型和（或）變異Lym：WBC的Detal值超上限，有以前確認的陽性報警結(jié)果；涂片鏡檢。l37.原始細胞報警：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科18ISLH推薦的推薦的41條復檢規(guī)則（條復檢規(guī)則（10）l38.原始細胞報警：37天內(nèi)WBC的Detal值通過，有以前確認的陽性報警結(jié)果；按實驗室SOP進行。l39.原始細胞報警：WBC的Detal值超上限，有以前確認的陽性報警結(jié)果；涂片鏡檢。l40.NRBC報警：陽性報警；涂片鏡檢，如發(fā)現(xiàn)

10、NRBC，計數(shù)NRBC，重新計算WBC結(jié)果。l41.Ret：散點/直方圖異常；檢查儀器狀態(tài)是否正常，如吸樣有問題，重測標本，如結(jié)果維持不變，涂片鏡檢。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科19國內(nèi)的篩選標準國內(nèi)的篩選標準l2007年，中華醫(yī)學會檢驗分會成立“五分類血細胞分析儀復檢標準制定協(xié)作組”，擬制定復檢標準規(guī)則。l國內(nèi)朱忠勇等提出7條復檢規(guī)則l目前國內(nèi)五分類血細胞分析儀沒有統(tǒng)一的復檢規(guī)則標準，41條是較為公認的規(guī)則。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科20朱忠勇教授提出的朱忠勇教授提出的7條復檢規(guī)則條復檢規(guī)則l儀器出現(xiàn)血細胞計數(shù)、分類計數(shù)及相關(guān)指數(shù)的提示信號（flags）l直方圖或散點圖出現(xiàn)異常

11、l儀器檢測結(jié)果各參數(shù)之間出現(xiàn)矛盾l儀器檢測結(jié)果與臨床表現(xiàn)和初診、擬診明顯不符 l臨床初診或提示有白血病等血液病l臨床醫(yī)生指定要鏡檢，如重度感染病人，要求查中性粒細胞左移程度和毒性改變，不典型淋巴細胞，找寄生蟲等。l新生兒的血樣2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科21目前我科還未制定適合于本室的目前我科還未制定適合于本室的復檢規(guī)則復檢規(guī)則l過程復雜：復檢規(guī)則的制定應(yīng)用顯微鏡鏡檢對復檢規(guī)則進行評估復檢規(guī)則的驗證（重復）。l制定復檢規(guī)則的必要性。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科22血涂片復檢的必要性（血涂片復檢的必要性（1）實驗室認可的要求實驗室認可的要求ISO15189：血液學檢查部門應(yīng)制定如下標

12、準/程序并形成文件1 血細胞分析的顯微鏡復檢標準（檢測結(jié)果出現(xiàn)異常計數(shù)，警示標志，異常散點圖等情況時結(jié)果的確認方法和程序）2 血涂片制備和檢驗的書面程序/過程3 對患者血液檢查和凝固試驗的標本進行重復檢驗的標準及程序CAP認可：HEM34200 實驗室要建立標準以確保當分類計數(shù)儀標記出臨床異常結(jié)果時，必須對白細胞分類數(shù)據(jù)、直方圖、和/或血涂片進行檢查和復檢。HEM34350 所有的血涂片必須有唯一的標識號，如病人的序列號，姓名等。HEM34450 所有的血涂片至少保存一周，以便復查或參考。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科23血涂片復檢的必要性（血涂片復檢的必要性（2）l1 過分依賴儀器，弱化

13、人的能力及責任。l2 無或較少進行顯微鏡下形態(tài)學檢查。l3 無或較少進行手工白細胞分類檢查。l4 漏診：白血病、傳單、寄生蟲感染等。l5 誤診：貧血、血小板減少性紫癜、白血病l6 丟失部分重要病理改變的信息。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科24復檢規(guī)則制定的原則復檢規(guī)則制定的原則l1 根據(jù)儀器對細胞形態(tài)識別能力，決定篩選標準的寬嚴程度。識別越差，標準越嚴。l2 篩選范圍要涵蓋所有人工鏡檢范圍。l3 在保證篩選質(zhì)量基礎(chǔ)上，盡量使復檢率低。l4 假陰性率是關(guān)鍵參數(shù)，具有診斷意義的重要參數(shù)不能出現(xiàn)假陰性。其它參數(shù)假陰性率也要盡可能最低。l5 在低假陰性率前提下,調(diào)整標準降低假陽性率2022-5-3

14、0德陽市醫(yī)院檢驗科25復檢規(guī)則制定的原則復檢規(guī)則制定的原則l6 白血病患者(不管初診還是復診)不能篩選。l7 臨床醫(yī)生提出閱片者,必須鏡檢 。l8 篩選標準涉及的參數(shù),應(yīng)用的儀器能夠提供。l9 不同型號儀器篩選標準不同，同一型號儀器實驗室要求不同，標準也不同。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科26XE-2100復檢規(guī)則復檢規(guī)則2008（1）lWBC：30.0109/L；涂片鏡檢。 lPLT：1000109/L；涂片鏡檢。lHb：180g/L；涂片鏡檢。lMCV： 105fL；涂片鏡檢。lMCHC： 380g/L；涂片鏡檢有無球形紅細胞。lRDW：首次結(jié)果22%；涂片鏡檢。lDC：無結(jié)果或結(jié)果不

15、全；涂片鏡檢和人工分類。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科27XE-2100復檢規(guī)則復檢規(guī)則2008（2）lNeut：20.0109/L；涂片鏡檢。 lLym：5.0109/L；涂片鏡檢。 lMono：1.5109/L；涂片鏡檢。 lEos：2.0109/L；涂片鏡檢。 lBaso：0.5109/L；涂片鏡檢。 2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科28XE-2100復檢規(guī)則復檢規(guī)則2008（3）lWBC IP Message：白細胞異常散點圖；涂片鏡檢。lWBC IP Message：未成熟粒細胞；涂片鏡檢。lWBC IP Message：核左移；涂片鏡檢。l WBC IP Message：異形

16、淋巴細胞或原始細胞；涂片鏡檢。l WBC IP Message：原始細胞；涂片鏡檢。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科29XE-2100復檢規(guī)則復檢規(guī)則2008（4）lWBC IP Message：有核紅細胞；涂片鏡檢。lCBC+DC：新生兒標本；涂片鏡檢。l CBC+DC：血液病標本；涂片鏡檢。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科30復檢內(nèi)容，內(nèi)涵豐富復檢內(nèi)容，內(nèi)涵豐富l標本的復查l人工對儀器報告的審核l涂片鏡檢l人工分類l標本的確認和鑒定l儀器運行狀態(tài)的檢查l復檢人工分類2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科31復檢內(nèi)容細胞數(shù)量的驗證細胞數(shù)量的驗證l白細胞數(shù)量l血小板數(shù)量 在細胞分布適中部位瀏覽

17、血片，根據(jù)其與紅細胞的比例估計白細胞數(shù)、血小板數(shù)。Ex:正常情況下，每10-40個紅細胞會見到1個血小板。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科32復檢內(nèi)容白細胞分類計數(shù)和形態(tài)觀察白細胞分類計數(shù)和形態(tài)觀察l白細胞分類計數(shù)l粒細胞核象：核左移，核右移l中毒性改變：中毒性顆粒、空泡變性、核固縮、核溶解。l原幼細胞l異形淋巴細胞l其他2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科33異形淋巴細胞？異形淋巴細胞？2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科34異形淋巴細胞異形淋巴細胞2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科35嗜酸性粒細胞（成熟）嗜酸性粒細胞（成熟）2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科36嗜堿性粒細胞（成熟）嗜堿性粒細

18、胞（成熟）2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科37單核細胞單核細胞2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科38中毒顆粒中毒顆粒2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科39Monocytosis Immature Gran? Left Shift?DIFF:DIFF:單核散點較多。單核散點較多。中性上方幼稚細胞區(qū)域中性上方幼稚細胞區(qū)域出現(xiàn)少量散點出現(xiàn)少量散點IMI:IMI:幼稚細胞區(qū)域出現(xiàn)幼稚細胞區(qū)域出現(xiàn)相應(yīng)的散點相應(yīng)的散點IG%IG%：儀器：儀器：3.5%3.5%鏡檢：中幼粒鏡檢：中幼粒0.5%0.5%晚幼粒晚幼粒3.5%3.5%單核：儀器：單核：儀器：18.7%18.7%鏡檢：鏡檢：17.5%17.5%4

19、0Abn Lympho/L-Blasts?鏡下見到分葉的異鏡下見到分葉的異常淋巴細胞達常淋巴細胞達15%15%DIFFDIFF散點圖上，散點圖上，正常淋巴和單核正常淋巴和單核的區(qū)域有較多的的區(qū)域有較多的散點散點2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科41Acute myeloid leukemia (AML) - M1 DIFF:DIFF:白細胞分白細胞分化不良化不良IMI:IMI:顯示大量原顯示大量原始細胞始細胞鏡檢鏡檢:77 .5%:77 .5%的的原始細胞原始細胞2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科42Acute lymphocytic leukemia (ALL) - L1DIFF:DIFF:

20、淋巴至淋巴至OTHEROTHER區(qū)域區(qū)域出現(xiàn)大量灰白色散點，出現(xiàn)大量灰白色散點，中性粒細胞上方有少量中性粒細胞上方有少量散點散點IMI:IMI:幼稚細胞和原始細幼稚細胞和原始細胞區(qū)域也出現(xiàn)少量紅色胞區(qū)域也出現(xiàn)少量紅色散點，因此儀器提示原散點，因此儀器提示原始細胞和幼稚粒細胞。始細胞和幼稚粒細胞。鏡檢鏡檢:93%:93%原始細胞。原始細胞。2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科43復檢內(nèi)容紅細胞形態(tài)觀察紅細胞形態(tài)觀察l大小l形狀l血紅蛋白含量l細胞內(nèi)包涵體l紅細胞異形性2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科44正常紅細胞正常紅細胞2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科45靶形紅細胞靶形紅細胞2022-5-3

21、0德陽市醫(yī)院檢驗科46橢圓形紅細胞橢圓形紅細胞2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科47緡錢狀紅細胞緡錢狀紅細胞2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科48豪豪-周氏小體周氏小體（Howell-Jolly body）2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科49嗜堿性點彩紅細胞嗜堿性點彩紅細胞2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科50Hypochromia /Anemia /Iron Deficiency? /Fragments? /PLT Abn DistributionRETRET：大量紅細胞碎片血?。捍罅考t細胞碎片血小板直方圖異常，阻抗法將板直方圖異常，阻抗法將部分紅細胞碎片當成血小部分紅細胞碎片當成血小板計

22、數(shù)，而核酸熒光染色板計數(shù)，而核酸熒光染色法排除了紅細胞碎片：法排除了紅細胞碎片：PLT-IPLT-OPLT-IPLT-O，PLT-OPLT-O與鏡與鏡檢結(jié)果接近，儀器以檢結(jié)果接近，儀器以PLT-OPLT-O作為最終報告作為最終報告2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科51復檢內(nèi)容血小板形態(tài)觀察血小板形態(tài)觀察l大小l血小板聚集l血小板數(shù)量評估2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科52大血小板大血小板2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科53復檢內(nèi)容其他病理成分其他病理成分l寄生蟲l真菌2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科54真菌真菌2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科55瘧原蟲瘧原蟲(左：環(huán)狀體左：環(huán)狀體 右：

23、裂殖體右：裂殖體)2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科56錐蟲錐蟲2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科57血涂片復檢的報告方式血涂片復檢的報告方式l描述性報告l異常病理成分的分級報告l定量報告 確認儀器分類結(jié)果 報告手工分類結(jié)果2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科58血細胞分析儀新功能介紹血細胞分析儀新功能介紹l網(wǎng)織紅細胞計數(shù)和分析：XE-2100/SE-9500、LH750/STKS、CD3200/4000、ADVIA-120、Pentral120l幼稚細胞和有核紅細胞分析：XE-2100、LH750、CD3700/4000、ADVIA-120l紅細胞體積和細胞內(nèi)血紅蛋白的分析：ADVIA-120l淋巴細胞亞群測定：CD4000、GENSl動物血細胞分析：CD3700、ADVIA-2120l同時分析血漿成分（CRP）：Micros CRP2022-5-30德陽市醫(yī)院檢驗科59血細胞分析新參數(shù)介紹血細胞分析新參數(shù)介紹lIPF或RP（網(wǎng)織血小板）lIG（幼稚粒細胞）lNRBC（有核紅細胞）2022-5-30