臨床微生物樣本采集規(guī)范201312-上傳SIFIC

1、臨床微生物樣本采集規(guī)范臨床微生物樣本采集規(guī)范 2014-1-15成功治療感染癥的決定因素成功治療感染癥的決定因素o準(zhǔn)確、快速病原學(xué)診斷準(zhǔn)確、快速病原學(xué)診斷o醫(yī)師判讀病原菌培養(yǎng)結(jié)果醫(yī)師判讀病原菌培養(yǎng)結(jié)果o選擇適當(dāng)治療方法選擇適當(dāng)治療方法準(zhǔn)確、快速病原學(xué)診斷的決定因素準(zhǔn)確、快速病原學(xué)診斷的決定因素二大因素二大因素臨床醫(yī)務(wù)人員臨床醫(yī)務(wù)人員提高送檢意識提高送檢意識標(biāo)本采集標(biāo)本采集運(yùn)送運(yùn)送儲存儲存微生物室人員微生物室人員標(biāo)本接收標(biāo)本接收篩選篩選處理處理分離鑒定分離鑒定臨床醫(yī)生最不能接受的問題臨床醫(yī)生最不能接受的問題:陽性率低陽性率低“正確的微生物學(xué)檢驗始自正確的標(biāo)正確的微生物學(xué)檢驗始自正確的標(biāo)本采取。臨

2、床醫(yī)師、護(hù)師及檢驗技師本采取。臨床醫(yī)師、護(hù)師及檢驗技師都必須通曉其要領(lǐng)。都必須通曉其要領(lǐng)?！?著名的臨床微生物檢驗專著Manual of Clinical Microbiology 的主編Patrick Murray合格標(biāo)本的結(jié)果才能引導(dǎo)（而非誤導(dǎo)）做出正確的臨床決定 o我們應(yīng)該追求：我們應(yīng)該追求：“準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷”“針對性病原學(xué)治療針對性病原學(xué)治療” 正確的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送，是準(zhǔn)確的正確的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送，是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！病原學(xué)診斷的前提！ 病原學(xué)診斷的關(guān)鍵問題病原學(xué)診斷的關(guān)鍵問題o減少污染減少污染o鑒別污染和定植鑒別污染和定植 o提高陽性率提高陽性率o臨

3、床及時有效治療臨床及時有效治療o治療感染而非污染治療感染而非污染o治療感染而非定植治療感染而非定植o降低患者死亡率降低患者死亡率標(biāo)準(zhǔn)化的流程標(biāo)準(zhǔn)化的流程 病原學(xué)治療病原學(xué)治療微生物樣本采樣基本原則微生物樣本采樣基本原則1.1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.3.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.4.采樣后立即送檢，采樣后立即送檢，甚至床旁接種尤其是厭氧培養(yǎng)5.5.棉拭子標(biāo)本宜用運(yùn)送培養(yǎng)基棉拭子標(biāo)本宜用運(yùn)送培養(yǎng)基6.6.混有正常菌群污染標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)混有正常菌群污染標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)7.

4、7.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。8.8.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康乃蜋z標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康呐R床微生物標(biāo)本的分類臨床微生物標(biāo)本的分類帶菌體液帶菌體液 無菌體液無菌體液 痰 血液 咽拭子 腦脊液 尿液 關(guān)節(jié)腔積液 糞便 胸腹水 其他類別 其他類別 一、血培養(yǎng)操作規(guī)范血培養(yǎng)操作規(guī)范 血培養(yǎng)血培養(yǎng)主要病原菌：沙門菌、布氏桿菌、其他革蘭陰性桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌主要病原菌：沙門菌、布氏桿菌、其他革蘭陰性桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌以下菌應(yīng)視為非病原菌以下菌應(yīng)視為非病原菌(除非除非1次血培養(yǎng)分離出次血培養(yǎng)分離出

5、)：芽孢桿菌屬、凝固酶陰性葡萄球菌、草綠色鏈球菌、棒狀革蘭陽性桿菌：芽孢桿菌屬、凝固酶陰性葡萄球菌、草綠色鏈球菌、棒狀革蘭陽性桿菌從兩個獨立的皮膚位點采血，每瓶從兩個獨立的皮膚位點采血，每瓶采集采集10ml#135C 空氣中孵育空氣中孵育5天天每天檢查濁度并翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶每天檢查濁度并翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶#2#318小時后傳進(jìn)行次代培養(yǎng)小時后傳進(jìn)行次代培養(yǎng)當(dāng)培養(yǎng)瓶顯示細(xì)菌生長時進(jìn)當(dāng)培養(yǎng)瓶顯示細(xì)菌生長時進(jìn)行革蘭染色和傳代培養(yǎng)行革蘭染色和傳代培養(yǎng)革蘭陽性球菌革蘭陽性球菌接種血接種血平皿奧普托欣試驗平皿奧普托欣試驗革蘭陰性桿菌革蘭陰性桿菌接種血平皿和接種血平皿和麥康凱平皿麥康凱平皿革蘭陰性雙球菌或球桿革蘭陰性雙球

6、菌或球桿菌菌接種巧克力平皿和接種巧克力平皿和血平皿血平皿CO2中孵育中孵育72h#5#4將重要的革將重要的革蘭染色結(jié)果蘭染色結(jié)果盡快通知臨盡快通知臨床醫(yī)生床醫(yī)生對重要病原菌對重要病原菌進(jìn)行鑒定進(jìn)行鑒定和藥敏試驗和藥敏試驗#6例如：肺炎克雷伯菌例如：肺炎克雷伯菌例如：肺炎鏈球菌例如：肺炎鏈球菌 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution血培養(yǎng)的臨床意義血培養(yǎng)的臨床意義o血培養(yǎng)查病原菌對診斷以下疾病很重要血培養(yǎng)查病原菌對診斷以下疾病很重要 -菌血癥，真菌血癥菌血癥，真菌血癥 -感染性心內(nèi)膜炎感染性心內(nèi)膜炎 -臨床不明原因感染臨床不明原因感染 -

7、假體植入后感染（人工關(guān)節(jié)，人工瓣膜）假體植入后感染（人工關(guān)節(jié)，人工瓣膜） -導(dǎo)管相關(guān)性菌血癥導(dǎo)管相關(guān)性菌血癥 -化膿性關(guān)節(jié)炎化膿性關(guān)節(jié)炎 -肺炎肺炎o(hù)血培養(yǎng)是診斷敗血癥最有價值的手段血培養(yǎng)是診斷敗血癥最有價值的手段臨床常見的采血指征臨床常見的采血指征o發(fā)熱（發(fā)熱（ 3838 C C）或低溫（）或低溫（ 3636 C C） o寒戰(zhàn)寒戰(zhàn) o白細(xì)胞增多（計數(shù)大于白細(xì)胞增多（計數(shù)大于1010，000000 10109 9/L/L，特別有，特別有“核左移核左移” ” 未成熟的或桿狀核的白細(xì)胞）未成熟的或桿狀核的白細(xì)胞） o粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞1000 2 2 種種 視

8、視 為為 污污 染染 有有 癥癥 狀狀 ， 性性 生生活活 活活 躍躍 的的 女女 性性 清清 潔潔 留留 取取 1 1 0 0 0 0 純純 培培 養(yǎng)養(yǎng) 的的 腸腸 桿桿 菌菌 科科 菌菌 男男 性性 清清 潔潔 留留 取取 1 1 0 0 0 0 0 0 潛潛 在在 病病 原原 菌菌 所所 有有 從從 導(dǎo)導(dǎo) 尿尿 管管 中中 直直 接接 留留 取取 1 1 0 0 0 0 個個 所所 有有 種種 類類 的的 潛潛 在在 病病 原原 菌菌 所所 有有 外外 科科 或或 膀膀 胱胱 吸吸 取取 任任 何何 數(shù)數(shù) 量量 （ 肉肉 湯湯 增增 菌菌 ， 厭厭 氧氧 菌菌 ） 所所 有有 有有 爭爭

9、 議議 任任 何何 酵酵 母母 菌菌 若若 2 種菌生長，對種菌生長，對每種菌進(jìn)行鑒定和藥每種菌進(jìn)行鑒定和藥敏試驗；敏試驗；若若2種菌生長，報種菌生長，報告告“混合菌群混合菌群”#5注意注意: 革蘭陰性桿菌在血平革蘭陰性桿菌在血平皿和麥皿和麥 康凱平皿上均康凱平皿上均生長良好生長良好革蘭陽性球菌僅在血革蘭陽性球菌僅在血平皿上生長良好平皿上生長良好GNR#675,000 cfu/ml50,000 cfu/ml100,000 cfu/ml Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attributionGPC尿道感染尿道感染每年每年850萬例尿路感染萬例尿路感染,

10、90%為女性為女性1/2.5個婦女在一生中會得個婦女在一生中會得UTI下行性感染：血流下行性感染：血流腎臟腎臟膀胱（金黃色葡萄球菌，酵膀胱（金黃色葡萄球菌，酵母菌，結(jié)核分枝桿菌）母菌，結(jié)核分枝桿菌）上行性感染：尿道上行性感染：尿道膀胱膀胱腎盂腎盂 血流血流尿液培養(yǎng)標(biāo)本送檢指征尿液培養(yǎng)標(biāo)本送檢指征o1 1 有典型的尿路感染癥狀；尿頻，尿急，尿痛有典型的尿路感染癥狀；尿頻，尿急，尿痛o2 2 肉眼膿尿或血尿；肉眼膿尿或血尿；o3 3 尿道口有膿性分泌物；尿道口有膿性分泌物；o4 4 不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；o5 5 留置導(dǎo)尿管的病人出現(xiàn)發(fā)熱；留置導(dǎo)尿管的病人

11、出現(xiàn)發(fā)熱；o6 6 尿常規(guī)異常：白細(xì)胞，細(xì)菌計數(shù)，亞硝酸鹽。尿常規(guī)異常：白細(xì)胞，細(xì)菌計數(shù)，亞硝酸鹽。 您知道嗎？您知道嗎？ p正常人尿液是無菌的，而尿液細(xì)菌培養(yǎng)最大正常人尿液是無菌的，而尿液細(xì)菌培養(yǎng)最大的問題是雜菌污染。的問題是雜菌污染。p正常人外尿道有大腸桿菌、葡萄球菌等存在。正常人外尿道有大腸桿菌、葡萄球菌等存在。而這些細(xì)菌又是尿路感染中常見的病原菌。而這些細(xì)菌又是尿路感染中常見的病原菌。p要作好尿液細(xì)菌學(xué)檢查，首先應(yīng)注意標(biāo)本收要作好尿液細(xì)菌學(xué)檢查，首先應(yīng)注意標(biāo)本收集問題。集問題。您知道嗎？您知道嗎？o尿液經(jīng)尿道排出時會受到尿道內(nèi)正常菌群尿液經(jīng)尿道排出時會受到尿道內(nèi)正常菌群的污染的污染,

12、,但定量培養(yǎng)時計數(shù)不會超過但定量培養(yǎng)時計數(shù)不會超過10103 3 CFU CFU /m l, /m l, 泌尿系感染時定量培養(yǎng)在泌尿系感染時定量培養(yǎng)在10104 4 10105 5 CFU /m l CFU /m l 。o由于絕大多數(shù)的泌尿系感染是由腸桿菌科由于絕大多數(shù)的泌尿系感染是由腸桿菌科細(xì)菌引起細(xì)菌引起, ,而此類細(xì)菌的硝酸鹽還原實驗為而此類細(xì)菌的硝酸鹽還原實驗為陽性陽性, ,故可參考尿常規(guī)檢查中的硝酸鹽還原故可參考尿常規(guī)檢查中的硝酸鹽還原實驗來推斷是否有細(xì)菌感染。實驗來推斷是否有細(xì)菌感染。尿培養(yǎng)樣本采集方法（尿培養(yǎng)樣本采集方法（1 1） 標(biāo)本采集應(yīng)力爭在未使用抗生素之標(biāo)本采集應(yīng)力爭在未

13、使用抗生素之前注意避免消毒劑污染標(biāo)本前注意避免消毒劑污染標(biāo)本 o1 1 清潔中段尿中段尿（晨尿最佳）約清潔中段尿中段尿（晨尿最佳）約10 10 20ml20ml直接排入專用的無菌容器中，立即送檢，直接排入專用的無菌容器中，立即送檢，2h2h內(nèi)接種。內(nèi)接種。o2 2 恥骨上膀胱穿刺：評估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的恥骨上膀胱穿刺：評估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)”方法。方法。o3 3 直接導(dǎo)尿：可減少污染，準(zhǔn)確反映膀胱感染直接導(dǎo)尿：可減少污染，準(zhǔn)確反映膀胱感染情況。情況。尿培養(yǎng)樣本采集方法（尿培養(yǎng)樣本采集方法（2 2）o4 4 留置導(dǎo)尿管收集尿液：留置導(dǎo)尿管收集尿液：穿刺導(dǎo)尿管吸取尿穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液液，

14、不能從收集袋中采集尿液。長期留置導(dǎo)，不能從收集袋中采集尿液。長期留置導(dǎo)尿患者，應(yīng)在更換新尿管時留取尿標(biāo)本。尿患者，應(yīng)在更換新尿管時留取尿標(biāo)本。o5 5 集尿法：尿查抗酸桿菌時，留集尿法：尿查抗酸桿菌時，留2424小時尿液小時尿液盛于潔凈容器內(nèi)，取其沉渣盛于潔凈容器內(nèi)，取其沉渣10mL10mL送檢。送檢。泌尿標(biāo)本采集的規(guī)范泌尿標(biāo)本采集的規(guī)范 （1）o1 1、標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，否則可暫存于、標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，否則可暫存于44冰箱。冰箱。 o2 2、采集時間：使用抗菌藥物前采集。應(yīng)采、采集時間：使用抗菌藥物前采集。應(yīng)采集早晨第一次的尿。集早晨第一次的尿。o3 3、標(biāo)本管不應(yīng)含防腐劑和消毒劑。

15、、標(biāo)本管不應(yīng)含防腐劑和消毒劑。泌尿標(biāo)本采集的規(guī)范（泌尿標(biāo)本采集的規(guī)范（2）o4、采集中段尿時要先用肥皂清洗女性的外、采集中段尿時要先用肥皂清洗女性的外陰和男性的外生殖器，然后用清水沖洗。陰和男性的外生殖器，然后用清水沖洗。o5、長期留置導(dǎo)尿管的患者應(yīng)在更換新管時、長期留置導(dǎo)尿管的患者應(yīng)在更換新管時留取尿標(biāo)本。留取尿標(biāo)本。o6、 做厭氧培養(yǎng)時應(yīng)膀胱穿刺采集尿。做厭氧培養(yǎng)時應(yīng)膀胱穿刺采集尿。特別注意（特別注意（1 1）o尿液通常是無菌的或一過性有少量微生物，但是尿道內(nèi)或尿液通常是無菌的或一過性有少量微生物，但是尿道內(nèi)或尿道周圍皮膚的菌群會污染尿液標(biāo)本，從而可能導(dǎo)致錯誤尿道周圍皮膚的菌群會污染尿液標(biāo)

16、本，從而可能導(dǎo)致錯誤的培養(yǎng)結(jié)果。的培養(yǎng)結(jié)果。o診斷癥狀明顯的病人（如尿急、尿頻、尿痛），一份標(biāo)本診斷癥狀明顯的病人（如尿急、尿頻、尿痛），一份標(biāo)本就已足夠，治療就已足夠，治療48 48 7272小時后再采集第二份標(biāo)本。對于癥小時后再采集第二份標(biāo)本。對于癥狀不明顯的病人，需采集狀不明顯的病人，需采集2 2 3 3份標(biāo)本。懷疑腎結(jié)核時，份標(biāo)本。懷疑腎結(jié)核時，應(yīng)連續(xù)應(yīng)連續(xù)3 3天采集晨尿。天采集晨尿。 特別注意（特別注意（2 2）o多次收集或多次收集或2424小時尿不能用作培養(yǎng)。小時尿不能用作培養(yǎng)。o申請單上必須注明病人癥狀是否明顯，這對于定量申請單上必須注明病人癥狀是否明顯，這對于定量培養(yǎng)分析非常

17、重要，尤其只有少量尿液標(biāo)本。培養(yǎng)分析非常重要，尤其只有少量尿液標(biāo)本。o室溫都有利于病原菌和污染菌生長繁殖，因此若室溫都有利于病原菌和污染菌生長繁殖，因此若30min30min內(nèi)不能及時培養(yǎng)尿液則必須冷藏，但也不能內(nèi)不能及時培養(yǎng)尿液則必須冷藏，但也不能超過超過2424小時。小時。特別注意（特別注意（3 3） 多數(shù)藥物從尿道排泄多數(shù)藥物從尿道排泄, ,所以標(biāo)本采集應(yīng)力爭所以標(biāo)本采集應(yīng)力爭在未使用抗生素之前或停用抗菌藥在未使用抗生素之前或停用抗菌藥5d5d之后之后留取尿液標(biāo)本留取尿液標(biāo)本; ;尿液在膀胱內(nèi)應(yīng)停留尿液在膀胱內(nèi)應(yīng)停留6 6 8h8h以上，使細(xì)菌有足夠的時間繁殖以上，使細(xì)菌有足夠的時間繁殖

18、, ,故應(yīng)盡故應(yīng)盡量采集早晨第一次的尿量采集早晨第一次的尿, ,同時注意避免消毒同時注意避免消毒劑污染標(biāo)本。劑污染標(biāo)本。三、下呼吸道分泌物（痰培養(yǎng)）三、下呼吸道分泌物（痰培養(yǎng)）標(biāo)本采取規(guī)范標(biāo)本采取規(guī)范肺部感染病原學(xué)診斷有哪些項目？肺部感染病原學(xué)診斷有哪些項目？o顯微鏡檢查顯微鏡檢查 -革蘭染色革蘭染色 -濕片檢查濕片檢查 -分枝桿菌檢查分枝桿菌檢查 -肺孢子菌檢查肺孢子菌檢查o培養(yǎng)培養(yǎng) -細(xì)菌與真菌，普通菌，細(xì)菌與真菌，普通菌，厭氧菌，結(jié)核菌，真菌厭氧菌，結(jié)核菌，真菌 -定量定量/半定量培養(yǎng)半定量培養(yǎng)o免疫學(xué)方法免疫學(xué)方法 -抗原，尿可溶性抗原，抗原，尿可溶性抗原，GM，隱球菌，隱球菌 -抗體

19、：肺吸蟲抗體：肺吸蟲o組織病理學(xué)組織病理學(xué) -結(jié)核與其它分枝桿菌結(jié)核與其它分枝桿菌 -真菌（曲霉，隱球菌）真菌（曲霉，隱球菌）o分子生物學(xué)：核酸檢分子生物學(xué)：核酸檢測測痰標(biāo)本痰標(biāo)本主要病原菌：肺炎鏈球菌，克雷伯菌屬，流感嗜血桿菌，金黃色葡萄球菌，銅綠假單胞菌。主要病原菌：肺炎鏈球菌，克雷伯菌屬，流感嗜血桿菌，金黃色葡萄球菌，銅綠假單胞菌。非病原菌：酵母菌，草綠色鏈球菌，凝固酶陰性葡萄球菌非病原菌：酵母菌，草綠色鏈球菌，凝固酶陰性葡萄球菌病人需用水清潔口腔，病人需用水清潔口腔，深咳肺部痰，深咳肺部痰，不要唾液不要唾液#1 進(jìn)行革蘭染色以評價標(biāo)本是否適于接進(jìn)行革蘭染色以評價標(biāo)本是否適于接種。種。

20、向臨床醫(yī)生盡快報告重要的革蘭染色向臨床醫(yī)生盡快報告重要的革蘭染色結(jié)果結(jié)果#2#3好：很少扁平好：很少扁平上皮細(xì)胞上皮細(xì)胞奧普托欣紙片奧普托欣紙片CO2中孵育中孵育48小時小時#4接種巧克力平皿，血接種巧克力平皿，血平皿和麥康凱平皿平皿和麥康凱平皿#5拒絕：大量拒絕：大量 扁平扁平上皮細(xì)胞上皮細(xì)胞肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌對重要病原菌進(jìn)行對重要病原菌進(jìn)行鑒定鑒定&藥敏試驗藥敏試驗金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌肺炎鏈球菌膽汁溶菌膽汁溶菌 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution奧普托欣奧普托欣流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌下呼吸道標(biāo)本

21、標(biāo)本送檢指征下呼吸道標(biāo)本標(biāo)本送檢指征o1 1 咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。棕色膠胨樣痰。o2 2 咯血：肺結(jié)核病人常痰中帶血?？┭悍谓Y(jié)核病人常痰中帶血。o3 3 呼吸困難呼吸困難o4 4 發(fā)熱發(fā)熱o5 5 胸痛：當(dāng)炎癥病變累及壁層胸膜時，會發(fā)生胸痛。胸痛：當(dāng)炎癥病變累及壁層胸膜時，會發(fā)生胸痛。o肺部感染的患者有肺部感染的患者有25 25 5050可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時作血培養(yǎng)。同時作血培養(yǎng)。 社區(qū)獲得性肺炎臨床路徑社區(qū)獲得性肺炎臨床路徑（2009年版） 1.必需檢查項目：必需檢查項目：（1）血常規(guī)、尿常規(guī)

22、、大便常規(guī)；）血常規(guī)、尿常規(guī)、大便常規(guī)；（2）肝腎功能、血糖、電解質(zhì)、血沉、）肝腎功能、血糖、電解質(zhì)、血沉、C反反應(yīng)蛋白（應(yīng)蛋白（CRP）、感染性疾病篩查；）、感染性疾病篩查；（3）病原學(xué)檢查及藥敏；病原學(xué)檢查及藥敏；（4）胸部正側(cè)位片、心電圖。）胸部正側(cè)位片、心電圖。2.根據(jù)患者情況進(jìn)行：根據(jù)患者情況進(jìn)行：血培養(yǎng)血培養(yǎng)、血氣分析、胸、血氣分析、胸部部CT、D-二聚體、血氧飽和度、二聚體、血氧飽和度、B超、有超、有創(chuàng)性檢查等。創(chuàng)性檢查等。 病原體種類繁多而復(fù)雜病原體種類繁多而復(fù)雜使下呼吸道感染病原診斷成為難題使下呼吸道感染病原診斷成為難題細(xì)菌（包括軍團(tuán)菌、厭氧菌與分枝桿菌）細(xì)菌（包括軍團(tuán)菌、厭

23、氧菌與分枝桿菌）真菌（包括曲霉，隱球菌、肺孢子菌）真菌（包括曲霉，隱球菌、肺孢子菌）病毒病毒支原體、衣原體與立克次體支原體、衣原體與立克次體原蟲原蟲寄生蟲寄生蟲咳痰途經(jīng)口咽部咳痰途經(jīng)口咽部o唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)10108 8 10109 9/ml/ml。o研究顯示，國內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)研究顯示，國內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。不可避免地受到污染不可避免地受到污染我國痰細(xì)菌培養(yǎng)現(xiàn)狀我國痰細(xì)菌培養(yǎng)現(xiàn)狀o厭養(yǎng)菌檢出率極低厭養(yǎng)菌檢出率極低o結(jié)果重復(fù)性差結(jié)果重復(fù)性差o報告速度慢報告速度慢o感染菌與污染菌不易區(qū)分感染菌與污染菌不易區(qū)分

24、o藥敏結(jié)果與治療反應(yīng)存在差距藥敏結(jié)果與治療反應(yīng)存在差距咳痰標(biāo)本的采集咳痰標(biāo)本的采集o標(biāo)本采集方法標(biāo)本采集方法n醫(yī)師或護(hù)士直視下采集標(biāo)本醫(yī)師或護(hù)士直視下采集標(biāo)本n病人先漱口，去除表面的菌群病人先漱口，去除表面的菌群n教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液o臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格！臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格！關(guān)于咳痰標(biāo)本關(guān)于咳痰標(biāo)本o在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本; ;o標(biāo)本采集后標(biāo)本采集后1 1 2h2h內(nèi)必須立即進(jìn)行實驗室處理；內(nèi)必須立即進(jìn)行實驗室處理；o咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛，但也是最受爭議的標(biāo)本咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛，但也是最受爭

25、議的標(biāo)本o取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口; ;o深咳，采集標(biāo)本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo)深咳，采集標(biāo)本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo); ;o無痰可用無痰可用3 3 5 5NaCl 5mlNaCl 5ml霧吸約霧吸約5min5min導(dǎo)痰；導(dǎo)痰；o也可用物理療法、體位引流、鼻導(dǎo)管抽吸等法取痰；也可用物理療法、體位引流、鼻導(dǎo)管抽吸等法取痰；咳痰標(biāo)本不合格，退檢嗎？咳痰標(biāo)本不合格，退檢嗎？o如果低倍視野下鱗狀上皮細(xì)胞大于如果低倍視野下鱗狀上皮細(xì)胞大于2525個，白個，白細(xì)胞小于細(xì)胞小于1010個，應(yīng)不做或僅在特殊要求時做個，應(yīng)不做或僅在特殊要求時做培養(yǎng)

26、。培養(yǎng)。o如做培養(yǎng)，報告中注明如做培養(yǎng)，報告中注明“鏡檢結(jié)果表明標(biāo)本鏡檢結(jié)果表明標(biāo)本口咽分泌物污染明顯口咽分泌物污染明顯”。下呼吸道標(biāo)本采集方法（下呼吸道標(biāo)本采集方法（1 1）o1 自然咳痰法：晨痰、漱口，深咳呼吸道深自然咳痰法：晨痰、漱口，深咳呼吸道深部痰（非后鼻部分泌物、非唾液）留于無菌部痰（非后鼻部分泌物、非唾液）留于無菌容器內(nèi)。對于痰量少或無痰的患者可采用霧容器內(nèi)。對于痰量少或無痰的患者可采用霧化吸入化吸入45 345 3 5 5鹽水溶液，使痰液易鹽水溶液，使痰液易于排出。于排出。o2 2 支氣管鏡采集法：支氣管鏡采集法：n經(jīng)支氣管鏡直接吸引經(jīng)支氣管鏡直接吸引n支氣管肺泡灌洗支氣管肺泡

27、灌洗n防污染樣本毛刷防污染樣本毛刷下呼吸道標(biāo)本采集方法（下呼吸道標(biāo)本采集方法（2 2）o3 3 胃內(nèi)采痰法：無自覺癥狀的肺結(jié)核病人尤其胃內(nèi)采痰法：無自覺癥狀的肺結(jié)核病人尤其嬰幼兒不會咳嗽，有時將痰誤咽入胃中，可采嬰幼兒不會咳嗽，有時將痰誤咽入胃中，可采集胃內(nèi)容物做結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)。集胃內(nèi)容物做結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)。o4 4 氣管穿刺法：主要用于厭氧菌培養(yǎng)氣管穿刺法：主要用于厭氧菌培養(yǎng)o5 5 小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，將拭子小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，將拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽，可噴出肺部伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上送檢。幼兒還可用手或氣管分泌物

28、粘在拭子上送檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。痰培養(yǎng)的送檢次數(shù)痰培養(yǎng)的送檢次數(shù)o對于普通細(xì)菌性肺炎，對于普通細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天痰標(biāo)本送檢每天1 1次，連次，連續(xù)續(xù)2 2 3 3天。天。不建議不建議24h24h內(nèi)多次采集，除非痰液內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變；外觀性狀出現(xiàn)改變；o懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3 3天清晨痰液天清晨痰液送檢；送檢；o懷疑軍團(tuán)菌或深部真菌感染，痰標(biāo)本理想的送檢懷疑軍團(tuán)菌或深部真菌感染，痰標(biāo)本理想的送檢次數(shù)尚無定論。次數(shù)尚無定論。痰培養(yǎng)的運(yùn)送和保存痰培養(yǎng)的運(yùn)送和保存o所有病人的下呼

29、吸道標(biāo)本應(yīng)在采集后立即送至微所有病人的下呼吸道標(biāo)本應(yīng)在采集后立即送至微生物室，并于生物室，并于1 1小時內(nèi)接種小時內(nèi)接種o如不能及時送達(dá)，應(yīng)將標(biāo)本暫存于如不能及時送達(dá)，應(yīng)將標(biāo)本暫存于44，但放置，但放置時間不可超過時間不可超過24h24h。運(yùn)輸時勿置于冰塊中。運(yùn)輸時勿置于冰塊中o被口咽部菌群污染的標(biāo)本如咳痰等不可用于厭氧被口咽部菌群污染的標(biāo)本如咳痰等不可用于厭氧菌培養(yǎng)。菌培養(yǎng)。o室溫下放置室溫下放置1h1h會降低肺炎鏈球菌、流感嗜血桿會降低肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌的分離率而定植于上呼吸道的非致病菌則會過菌的分離率而定植于上呼吸道的非致病菌則會過度生長度生長四、大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范四、大便培養(yǎng)標(biāo)

30、本采集規(guī)范#1#2接種血平皿，麥康凱平皿，接種血平皿，麥康凱平皿，Hektoen或或DCA，若懷疑弧菌則還接種，若懷疑弧菌則還接種TCBS平皿。平皿。37 C 空氣孵育空氣孵育48h#3糞便標(biāo)本采集后糞便標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)進(jìn)行接種或分鐘內(nèi)進(jìn)行接種或置于置于cary-blair運(yùn)輸運(yùn)輸培養(yǎng)基中培養(yǎng)基中#4糞便培養(yǎng)糞便培養(yǎng)重要的病原菌：沙門菌、志賀菌、彎曲桿菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、重要的病原菌：沙門菌、志賀菌、彎曲桿菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、產(chǎn)毒性大腸桿菌產(chǎn)毒性大腸桿菌&難辨梭菌（在難辨梭菌（在常規(guī)的實驗室可能檢測不出）常規(guī)的實驗室可能檢測不出）選擇血性或膿性的部選擇血性或膿性的部分進(jìn)

31、行接種分進(jìn)行接種血平皿上氧化酶陽性的革蘭陰性血平皿上氧化酶陽性的革蘭陰性桿菌需進(jìn)一步鑒定桿菌需進(jìn)一步鑒定將菌落接種將菌落接種TCBS或含或含0-6鹽濃鹽濃度的肉湯中。度的肉湯中。麥康凱、麥康凱、HEK或或DCA平皿上不利用平皿上不利用乳糖的革蘭陰性桿菌需進(jìn)一步鑒定。乳糖的革蘭陰性桿菌需進(jìn)一步鑒定。氧化酶陽性、濕潤氧化酶陽性、濕潤的米色菌落的米色菌落革蘭染色顯示彎曲或螺旋形革蘭染色顯示彎曲或螺旋形的桿菌的桿菌彎曲桿菌屬彎曲桿菌屬Campy瓊脂瓊脂#6 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution#5將菌落接種至將菌落接種至Campy瓊脂瓊脂或使

32、用濾紙法。微需氧環(huán)或使用濾紙法。微需氧環(huán)境下境下37-42 C 孵育孵育 72 h大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范（大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范（1）o1.采集時間：腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采集；采集時間：腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采集；沙門菌感染、腸熱癥應(yīng)在沙門菌感染、腸熱癥應(yīng)在2周內(nèi)采；厭氧菌出現(xiàn)癥周內(nèi)采；厭氧菌出現(xiàn)癥狀即采集。狀即采集。o2.采集方法：采集方法：直腸拭子法：用無菌拭子蘸生理鹽水濕潤，由肛門直腸拭子法：用無菌拭子蘸生理鹽水濕潤，由肛門插入約插入約 67cm，輕輕在直腸內(nèi)旋動取出大便少，輕輕在直腸內(nèi)旋動取出大便少許，放入無菌便盒中，加蓋封口送檢。許，放入無菌便盒中，加蓋封口送檢。自然排便者可用

33、小木棒挑取有膿血和黏液的部位的自然排便者可用小木棒挑取有膿血和黏液的部位的糞便糞便2-3克，如液狀糞便取絮狀物盛于無菌的、密克，如液狀糞便取絮狀物盛于無菌的、密封的、不吸水的、容器內(nèi)或直接盛于增菌液或保存封的、不吸水的、容器內(nèi)或直接盛于增菌液或保存液中。液中。大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范（大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范（2）o3. 注意事項：注意事項：o雖然糞便標(biāo)本本身含很多細(xì)菌但也要用無雖然糞便標(biāo)本本身含很多細(xì)菌但也要用無菌容器。菌容器。o在患者病情許可的條件下應(yīng)在用藥前采集在患者病情許可的條件下應(yīng)在用藥前采集標(biāo)本。標(biāo)本。o應(yīng)床邊接種或置輸送培養(yǎng)基送檢。應(yīng)床邊接種或置輸送培養(yǎng)基送檢。o厭氧細(xì)菌（難辯梭菌）培養(yǎng)

34、的標(biāo)本應(yīng)盡量厭氧細(xì)菌（難辯梭菌）培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)盡量減少與空氣接觸。減少與空氣接觸。五、腦脊液標(biāo)本采集五、腦脊液標(biāo)本采集腦脊液（腦脊液（CSF)培養(yǎng)培養(yǎng)主要病原菌：主要病原菌：B群群溶血鏈球菌（新生兒），流感嗜血桿菌（溶血鏈球菌（新生兒），流感嗜血桿菌（2 2月月-2-2歲兒童），肺炎鏈球菌，腦膜炎奈瑟氏菌歲兒童），肺炎鏈球菌，腦膜炎奈瑟氏菌最少最少1ml，最佳，最佳5ml醫(yī)生通過無菌皮膚醫(yī)生通過無菌皮膚穿刺采集腦脊液穿刺采集腦脊液（腰椎穿刺）于無（腰椎穿刺）于無菌管中。第二管和菌管中。第二管和第三管用于微生物第三管用于微生物學(xué)檢測。學(xué)檢測。# 11500g離心離心15分鐘分鐘（可能的話）（可能的

35、話）# 2# 3用吸管吸去用吸管吸去上清，留下上清，留下1cc的腦脊液沉淀的腦脊液沉淀注意：不要傾倒注意：不要傾倒# 4滴一滴沉淀滴一滴沉淀于巧克力平皿和于巧克力平皿和血平皿血平皿上下吸取上下吸取10次以上次以上混勻沉淀混勻沉淀# 5CO2中孵中孵育育72小時小時# 6將一大滴沉淀將一大滴沉淀滴在玻片上。滴在玻片上。不要涂開。不要涂開。自然干燥并進(jìn)行革蘭染色。自然干燥并進(jìn)行革蘭染色。如見到大量多形核白細(xì)胞如見到大量多形核白細(xì)胞則則強(qiáng)烈支持感染強(qiáng)烈支持感染# 7 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采

36、集 o采集時間：懷疑腦膜炎時應(yīng)立即采集腦脊液，最是在采集時間：懷疑腦膜炎時應(yīng)立即采集腦脊液，最是在應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。o采集方法：腰穿采集腦脊液采集方法：腰穿采集腦脊液3 35ml5ml（最少最少1ml，最，最佳佳5ml），分裝到，分裝到3 3個無菌小瓶中（各個無菌小瓶中（各1 1 2ml2ml）。）。 第一管用于細(xì)菌培養(yǎng)第一管用于細(xì)菌培養(yǎng)! ! 用于細(xì)菌和病毒檢測時腦脊液量不少于用于細(xì)菌和病毒檢測時腦脊液量不少于1ml1ml；用于真；用于真菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于2ml2ml。腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集 o標(biāo)本

37、采集后注入無菌管標(biāo)本采集后注入無菌管/ /小瓶中送檢也小瓶中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶, ,用血培用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。養(yǎng)儀培養(yǎng)。o腦膜炎奈瑟菌離體后會迅速自溶腦膜炎奈瑟菌離體后會迅速自溶, ,肺炎肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌也很容易死亡鏈球菌和流感嗜血桿菌也很容易死亡, ,因此因此, ,標(biāo)本應(yīng)立即送檢標(biāo)本應(yīng)立即送檢, ,并注意保溫、并注意保溫、防干燥。切不可置冰箱保存防干燥。切不可置冰箱保存, ,否則會影否則會影響檢出率。響檢出率。腦脊液標(biāo)本的運(yùn)送腦脊液標(biāo)本的運(yùn)送o常溫立即送檢，實驗室收到標(biāo)本后應(yīng)立即接種。常溫立即送檢，實驗室收到標(biāo)本后應(yīng)立即接種。o腦脊液標(biāo)本送檢的理想

38、時間為腦脊液標(biāo)本送檢的理想時間為1515分鐘內(nèi)，半小時送檢分鐘內(nèi)，半小時送檢是可接受的，如果送檢時間超過是可接受的，如果送檢時間超過1 1小時，則會影響結(jié)小時，則會影響結(jié)果，在結(jié)果報告時，在備注處注明此情況。果，在結(jié)果報告時，在備注處注明此情況。o如不能及時送檢，可使用血培養(yǎng)瓶（懷疑腦膜炎奈瑟如不能及時送檢，可使用血培養(yǎng)瓶（懷疑腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染時，請勿使用血培養(yǎng)瓶）。菌和淋病奈瑟菌感染時，請勿使用血培養(yǎng)瓶）。六、穿刺液標(biāo)本的采集六、穿刺液標(biāo)本的采集穿刺液類標(biāo)本的采集穿刺液類標(biāo)本的采集 o穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括胸水、腹水、心穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等穿刺液培養(yǎng)

39、包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本。標(biāo)本。o采集時間：一般在用抗生素等抗菌藥采集時間：一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前，或在停止使用抗菌藥物物治療之前，或在停止使用抗菌藥物之后之后2 2 3d3d采集標(biāo)本采集標(biāo)本。穿刺液類標(biāo)本的采集穿刺液類標(biāo)本的采集 采集方法：采集方法： 無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本；無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本； 標(biāo)本采集量應(yīng)標(biāo)本采集量應(yīng)1ml1ml。 胸腔積液、腹水可抽取胸腔積液、腹水可抽取10 ml, 10 ml, 心包液、關(guān)節(jié)液等可心包液、關(guān)節(jié)液等可抽取抽取2 2 5 ml 5 ml 。 標(biāo)本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢，也標(biāo)本采集后注入無

40、菌小瓶或無菌試管中送檢，也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶, ,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。七、分泌物采集規(guī)范七、分泌物采集規(guī)范感染傷口的采樣方法感染傷口的采樣方法o組織活檢：金標(biāo)準(zhǔn)，可定量培養(yǎng)，用手術(shù)刀組織活檢：金標(biāo)準(zhǔn)，可定量培養(yǎng)，用手術(shù)刀或穿刺取深部組織活檢或穿刺取深部組織活檢o穿刺抽吸：膿腫，穿刺抽吸：膿腫，1mlo試子試子膿，吸取物或組織標(biāo)本膿，吸取物或組織標(biāo)本主要病原菌：金黃色葡萄球菌，化膿鏈球菌，其他主要病原菌：金黃色葡萄球菌，化膿鏈球菌，其他溶血鏈球菌，銅綠假單胞菌，其他革蘭陰性桿溶血鏈球菌，銅綠假單胞菌，其他革蘭陰性桿菌。菌。非病原菌：凝固酶陰性葡萄球菌

41、，少量的棒狀革蘭陽性桿菌非病原菌：凝固酶陰性葡萄球菌，少量的棒狀革蘭陽性桿菌用酒精消毒傷口用酒精消毒傷口 周圍皮膚周圍皮膚組織活檢是金標(biāo)準(zhǔn)，穿刺抽吸次之組織活檢是金標(biāo)準(zhǔn)，穿刺抽吸次之最差的標(biāo)本是拭子最差的標(biāo)本是拭子#1接種血平皿和麥康凱平皿接種血平皿和麥康凱平皿如果是吸取物或組織，進(jìn)行如果是吸取物或組織，進(jìn)行革蘭染色，將重要結(jié)果通知革蘭染色，將重要結(jié)果通知臨床醫(yī)生臨床醫(yī)生#2#3銅綠假單銅綠假單胞菌胞菌中孵育中孵育48小小時時#4對對1或或2種種重要病原菌進(jìn)行鑒定重要病原菌進(jìn)行鑒定&藥藥敏試驗敏試驗金黃色葡萄球金黃色葡萄球菌為主菌為主溶血鏈球菌溶血鏈球菌肺炎克肺炎克雷伯菌雷伯菌混合的混

42、合的2種腸道革蘭陰性種腸道革蘭陰性桿菌：桿菌：2種均報告；種均報告；當(dāng)檢出當(dāng)檢出3種或更多病原菌時，報告種或更多病原菌時，報告“混合菌叢混合菌叢”并描述性列出假單胞菌，金葡菌，變形桿菌，腸并描述性列出假單胞菌，金葡菌，變形桿菌，腸道革蘭陰性桿菌等。道革蘭陰性桿菌等。 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution#5分泌物樣本分泌物樣本o標(biāo)本的選擇更大程度上依賴于感染的程度和性質(zhì)而不標(biāo)本的選擇更大程度上依賴于感染的程度和性質(zhì)而不是可疑的病原體。是可疑的病原體。o對大多數(shù)開放傷口，采集前應(yīng)先去除表面菌群。對大多數(shù)開放傷口，采集前應(yīng)先去除表面菌群。

43、o除非有滲出物，干燥、結(jié)痂傷口一般不做培養(yǎng)。除非有滲出物，干燥、結(jié)痂傷口一般不做培養(yǎng)。o閉合膿腫應(yīng)取滲出物和膿腫壁標(biāo)本。閉合膿腫應(yīng)取滲出物和膿腫壁標(biāo)本。o開放膿腫處理同開放傷口。開放膿腫處理同開放傷口。o燒傷傷口應(yīng)在廣泛清洗和清創(chuàng)術(shù)后采集培養(yǎng)。建議取燒傷傷口應(yīng)在廣泛清洗和清創(chuàng)術(shù)后采集培養(yǎng)。建議取活檢標(biāo)本，傷口表面定量培養(yǎng)不一定有意義。活檢標(biāo)本，傷口表面定量培養(yǎng)不一定有意義。o代表性的標(biāo)本應(yīng)采自病灶活動區(qū)域或基底部而不僅僅代表性的標(biāo)本應(yīng)采自病灶活動區(qū)域或基底部而不僅僅是膿液。是膿液。分泌物采集規(guī)范分泌物采集規(guī)范o1 1、對開放性病灶的采集：如眼結(jié)膜膿性分泌物、對開放性病灶的采集：如眼結(jié)膜膿性分泌

44、物、扁桃體、外耳道、手術(shù)后切口、導(dǎo)管治療感染、扁桃體、外耳道、手術(shù)后切口、導(dǎo)管治療感染、瘺管內(nèi)膿液、生殖道分泌物等均屬于開放性病瘺管內(nèi)膿液、生殖道分泌物等均屬于開放性病灶。應(yīng)先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌，去灶。應(yīng)先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌，去除舊的分泌物，除舊的分泌物，用滅菌拭子采集病灶深部或邊用滅菌拭子采集病灶深部或邊緣的標(biāo)本分泌物，也可取感染部位下的組織送緣的標(biāo)本分泌物，也可取感染部位下的組織送檢。檢。也可對滲出液作厭氧培養(yǎng)。開放病灶不能也可對滲出液作厭氧培養(yǎng)。開放病灶不能做厭氧培養(yǎng)。做厭氧培養(yǎng)。分泌物采集規(guī)范分泌物采集規(guī)范o2 2、閉鎖性膿腫：如淋巴膿腫、肺膿腫、閉鎖性膿腫：如淋巴

45、膿腫、肺膿腫、肝膿腫、腹腔膿腫、盆腔膿腫等，對肝膿腫、腹腔膿腫、盆腔膿腫等，對封閉的膿腫常采用封閉的膿腫常采用穿刺或引流穿刺或引流的的方的的方法采樣，應(yīng)在用藥前采集，應(yīng)注意膿法采樣，應(yīng)在用藥前采集，應(yīng)注意膿液的氣味、性狀、顏色注意厭氧菌存液的氣味、性狀、顏色注意厭氧菌存在的可能。不能及時送檢應(yīng)應(yīng)用輸送在的可能。不能及時送檢應(yīng)應(yīng)用輸送培養(yǎng)基培養(yǎng)基。分泌物采集規(guī)范分泌物采集規(guī)范o3 3、燒傷傷口：清創(chuàng)，出現(xiàn)滲出液后以拭子、燒傷傷口：清創(chuàng)，出現(xiàn)滲出液后以拭子用力采集，僅作需氧培養(yǎng)。也可送檢活檢用力采集，僅作需氧培養(yǎng)。也可送檢活檢組織標(biāo)本。組織標(biāo)本。o4 4、膿皰或水皰：酒精消毒使之干燥，對于、膿皰或

46、水皰：酒精消毒使之干燥，對于患兒用患兒用2323號針頭挑破膿皰，拭子采集膿皰號針頭挑破膿皰，拭子采集膿皰液和基底部標(biāo)本。液和基底部標(biāo)本。o5 5、標(biāo)記：不要只寫標(biāo)記：不要只寫“分泌物分泌物”標(biāo)記標(biāo)本，標(biāo)記標(biāo)本，應(yīng)有專門的描述和解剖來源。注明滲出液應(yīng)有專門的描述和解剖來源。注明滲出液來自開放傷口還是閉合傷口。來自開放傷口還是閉合傷口。八、生殖道標(biāo)本采集規(guī)范八、生殖道標(biāo)本采集規(guī)范CO2孵育孵育72h TM培養(yǎng)基上尋找淋球菌，血培養(yǎng)基上尋找淋球菌，血平皿上尋找酵母菌平皿上尋找酵母菌# 2血平皿血平皿& Thayer-Martin平皿平皿# 1# 1接種接種Thayer-Martin培養(yǎng)基培養(yǎng)

47、基&革蘭染色革蘭染色將拭子在玻片上滾將拭子在玻片上滾動制成一個細(xì)胞厚動制成一個細(xì)胞厚度的涂片；尋找度的涂片；尋找“線索細(xì)胞線索細(xì)胞”C. 懷孕懷孕35-37周的孕婦陰道周的孕婦陰道或肛拭子或肛拭子營養(yǎng)肉湯中營養(yǎng)肉湯中孵育過夜孵育過夜血平皿上次代培養(yǎng)檢測血平皿上次代培養(yǎng)檢測B群鏈球菌群鏈球菌# 1# 2CO2中孵育中孵育48小時小時D. 女性的陰道拭子女性的陰道拭子# 1血平皿上尋找血平皿上尋找酵母菌，酵母菌，T-M培養(yǎng)基上尋培養(yǎng)基上尋找淋球菌找淋球菌革蘭染色輔助診斷細(xì)菌革蘭染色輔助診斷細(xì)菌性陰道病性陰道病# 1# 230 min內(nèi)將拭子置于內(nèi)將拭子置于0.5ml生生理鹽水中檢測滴蟲理鹽

48、水中檢測滴蟲T-M培養(yǎng)基上的淋球菌培養(yǎng)基上的淋球菌血平皿上的酵母菌血平皿上的酵母菌A. 女性的子宮頸或肛拭子女性的子宮頸或肛拭子B. 男性的尿道拭子男性的尿道拭子非病原菌非病原菌金黃色葡萄球菌任何革蘭陰性桿菌，包括大腸桿菌和變形桿菌B群群溶血鏈球菌（溶血鏈球菌（GBS)，僅為孕婦報告僅為孕婦報告生殖道標(biāo)本培養(yǎng)生殖道標(biāo)本培養(yǎng)主要病原菌：淋病奈瑟菌，滴蟲，酵母菌主要病原菌：淋病奈瑟菌，滴蟲，酵母菌&女性的細(xì)菌性陰道病綜合征，孕婦攜帶的女性的細(xì)菌性陰道病綜合征，孕婦攜帶的B群群溶血鏈球菌溶血鏈球菌 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution生殖道標(biāo)本的采集方法生殖道標(biāo)本的采集方法o推薦使用男性或女性專用拭子。推薦使用男性或女性專用拭子。o男性前列腺：用肥皂和水清洗陰莖頭，通過男性前列腺：用肥皂和水清洗陰莖頭，通過直腸按摩前列腺，用無菌拭子收集液體或使直腸按摩前列腺，用無菌拭子收集液體或使液體進(jìn)入無菌管內(nèi)。液體進(jìn)入無菌管內(nèi)。o男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2 2 4cm4cm，旋轉(zhuǎn)拭子，至少停留，旋轉(zhuǎn)拭子，至少停留20s20s。生殖道標(biāo)本的采集方法生殖道標(biāo)本的采集方法o女性陰道：擦除過多的分泌物和排出液，用女性陰道：擦除過多的分泌物和