血型鑒定基本知識(shí)2013.8.27doc資料

1、血型鑒定基本知識(shí)2013.8.27ABO血型鑒定定義 ABO血型鑒定，即指ABH血型抗原的檢測(cè)。紅細(xì)胞含A抗原的叫A型，含B抗原的叫B型，含A和B抗原的叫AB型；不含A、B抗原，而含H抗原的稱(chēng)O型。正常范圍 ABO血型分為A型、B型、O型、AB型。臨床意義 ABO血型鑒定主要用于： 1、臨床輸血：當(dāng)循環(huán)血量不足或大失血或貧血需進(jìn)行輸血治療，在輸血前必須先選擇血型相同的供血者，再進(jìn)行交叉配血，完全相同后才能輸血。 2、在皮膚、腎移植等器官移植的時(shí)候選擇ABO血型相符的供體。 3、不孕癥和新生兒溶血癥病因的分析。 4、親子鑒定等。鑒定原理 常用鹽水凝集法檢測(cè)紅細(xì)胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的

2、血型抗體，依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有：正向定型：用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。反向定型：用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。結(jié)果判定：凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性，呈散在游離狀態(tài)為陰性。ABO血型定型原則血漿血細(xì)胞白細(xì)胞白細(xì)胞血小板血小板紅細(xì)胞紅細(xì)胞紅細(xì)胞紅細(xì)胞A凝集原凝集原B凝集原凝集原凝集原凝集原凝集原凝集原（紅細(xì)胞）（紅細(xì)胞）ABA和和B無(wú)無(wú)血型血型ABABOA凝集原B凝集原血清血清抗抗A凝集素凝集素抗抗B凝集素凝集素（抗（抗A）（抗（抗B）凝集素凝集素凝集原凝集原凝集原凝集原（紅細(xì)胞）（紅細(xì)胞）ABA和和B無(wú)無(wú)血型血型ABABO凝集素凝集素（血清）（

3、血清）抗抗B抗抗A無(wú)無(wú)抗抗A和抗和抗B血型血型可接受可接受血型血型不可接受不可接受血型血型ABOABB、OA、ABAB、A、B、OA、O無(wú)無(wú)A、AB、BB、AB輸血原則：輸血原則：同型血液可以互相輸，同型血液可以互相輸，O型血可以少型血可以少量輸給其他三種血型的人，量輸給其他三種血型的人，AB型血原型血原則上可以接受其他三種血型的血。則上可以接受其他三種血型的血。O（萬(wàn)能輸血者）（萬(wàn)能輸血者）（萬(wàn)能受血者）（萬(wàn)能受血者）方法學(xué)原理 根據(jù)紅細(xì)胞膜表面有無(wú)A抗原和（或）B抗原，將血型分為A，B，AB，O型4種。可利用紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，通過(guò)正反定型準(zhǔn)確鑒定ABO血型。所謂的正定型是指用標(biāo)準(zhǔn)抗A抗B分型

4、血清來(lái)測(cè)定紅細(xì)胞上有無(wú)相應(yīng)的A抗原或（和）B抗原；所謂的反定型，是指用標(biāo)準(zhǔn)的A型、B型細(xì)胞來(lái)測(cè)定血清中有無(wú)抗A和（或）抗B。試劑及配套品 抗抗A，抗，抗B和抗和抗0的標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)血清血清。準(zhǔn)血清均采自健康人，并應(yīng)符合下述條件：準(zhǔn)血清均采自健康人，并應(yīng)符合下述條件：特異性：只能與相應(yīng)的特異性：只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集，無(wú)非特發(fā)生凝集，無(wú)非特異性凝集。異性凝集。效價(jià)：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)抗效價(jià)：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗和抗B血清效價(jià)均在血清效價(jià)均在1：128以上。以上。親和力：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)要求抗親和力：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對(duì)對(duì)A1、A2及及A2B發(fā)生反應(yīng)發(fā)生反應(yīng)開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間分別是開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間分別是1

5、5s、30s和和45s；抗；抗B對(duì)對(duì)B型型紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為15s。凝集強(qiáng)度為。凝集強(qiáng)度為3min時(shí)，時(shí)，凝塊不小于凝塊不小于1-2mm。冷凝集素效價(jià)：在冷凝集素效價(jià)：在1：4以下。以下。無(wú)菌。無(wú)菌。滅活補(bǔ)體。滅活補(bǔ)體。 操作步驟 玻片法正定型 1、 取清潔玻片1張，用蠟筆劃成方法，標(biāo)明抗A，抗B，分別滴家抗A，抗B血清在相應(yīng)的方格內(nèi)，再加受檢者紅細(xì)胞1滴，混勻。 2、 將玻片輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)，使血清與細(xì)胞充分混勻，連續(xù)約1-5MIN，肉眼觀察有無(wú)凝集反映，也可以用低倍鏡觀察結(jié)果。注意事項(xiàng) 1、所用器材必須干燥清潔、防止溶血，凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染，建議

6、使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從冰箱取出后，應(yīng)待其平衡至室溫后再用，用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。 2、加試劑順序：一般先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便核實(shí)是否漏加血清。 3、雖然IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4最強(qiáng)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)收集整理但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般在室溫2024內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，而37條件，可使反應(yīng)減弱。 4、幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱，最好采用試管法鑒定血型。注意事項(xiàng) 5、玻片法反應(yīng)時(shí)間不能少于10min，否則較弱凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。 6、正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報(bào)告。 7、反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制，血型抗體可減弱或消失；血

7、清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價(jià)增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難；新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體，且自身血型抗體效價(jià)又低，因而出生6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗體，可引起假陰性或血型鑒定錯(cuò)誤。 婚配式子女可能有的血型子女不可能有的血型婚配式子女可能有的血型子女不可能有的血型鑒定方法 1）生理鹽水凝集法：玻片法：操作簡(jiǎn)單，適于大量標(biāo)本檢查，但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)；被檢查者如血清抗體效價(jià)低，則不易引起紅細(xì)胞凝集，因此，不適于反向定型。試管法：由于離心作用可加速凝集反應(yīng)，故反應(yīng)時(shí)間短，而且，借助于離心力可以使紅細(xì)胞接

8、觸緊密，促進(jìn)凝集作用，適于急診檢查。 紅細(xì)胞亞型抗原性弱，如抗A抗B標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低時(shí)，易造成漏檢或誤定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此類(lèi)錯(cuò)誤。鑒定方法 玻片法凝集結(jié)果判斷：紅細(xì)胞呈均勻分布，無(wú)凝集顆粒，鏡下紅細(xì)胞分散。在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn)： 呈一片或幾片凝塊，僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（+）。 呈數(shù)個(gè)大顆粒狀凝塊，有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（+）。 數(shù)個(gè)小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒，游離紅細(xì)胞約占1/2為（+）。 肉眼可見(jiàn)無(wú)數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察，每凝集團(tuán)中有58個(gè)以上紅細(xì)胞凝集為（+）。 可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周?chē)泻芏嗟挠坞x紅細(xì)胞（）。 可見(jiàn)極少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。 鏡下未見(jiàn)細(xì)胞凝集，紅細(xì)胞均勻分布為（-）。鑒定方法 （2）凝膠微柱法：是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體，加入試劑、標(biāo)本，用專(zhuān)用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀