蛋白質(zhì)溶解度 (2)

1、蛋白質(zhì)溶解度 1在一定的氫氧化鉀溶液中溶解的蛋白質(zhì)質(zhì)量占試樣中總蛋白質(zhì)量的百分?jǐn)?shù)。通常采用氮溶解指數(shù)（NSI）和蛋白質(zhì)分散指數(shù)（(PDI)來(lái)表示。 2原理 用一定濃度的氫氧化鉀溶液提取試樣中的可溶性蛋白質(zhì)，在催化劑作用下用濃硫酸將提取液中可溶性蛋白質(zhì)的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用鹽酸滴定測(cè)出試樣中可溶性蛋白質(zhì)含量；同時(shí)，測(cè)定原始試樣中粗蛋白質(zhì)含量，計(jì)算出試樣的蛋白溶解度。 3試劑 a)氫氧化鉀（分析純），無(wú)水硫酸鉀、五水硫酸銅、氫氧化鈉、硼酸、甲基紅、溴甲酚綠、硫酸銨； b)濃硫酸、鹽酸（分析純）、95%乙醇、蒸餾水。4儀器和設(shè)備a)感量為0.0001 g分析天

2、平；b)磁力攪拌器；c)離心機(jī)；d)樣品粉碎機(jī)；e)60目分析篩；f)電爐；g)100 mL或250 mL凱氏燒瓶；h)凱氏蒸餾裝置；i)250 mL錐形瓶；j)1000 mL容量瓶；k)微量滴定管。 5分析步驟 10.042 M氫氧化鉀溶液稱取2.360 g氫氧化鉀，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。2混合催化劑稱取6 g硫酸鉀和0.4 g硫酸銅，磨碎混勻。3氫氧化鈉溶液稱取400 g氫氧化鈉，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。4硼酸溶液稱取20 g硼酸，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。50.1M鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液量取8.3

3、 mL濃鹽酸，注入1000 mL水中混勻，按GB 601-88要求進(jìn)行標(biāo)定即可。6混合指示劑稱取1 g甲基紅和5 g溴甲酚綠，加入乙醇溶解后，轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度。6試樣處理 稱取試樣1.5 g（準(zhǔn)確至0.0002 g）置于250 mL燒杯中，準(zhǔn)確移入 0.042 M氫氧化鉀溶液75 mL，磁力攪拌20 min，然后將試樣轉(zhuǎn)移至離心管中，以2700 r/min的速度離心10 min。 7測(cè)定 吸取上清液 15 mL, 放入消化管中, 按照GB/T 6432-1994凱氏定氮法測(cè)定試樣中可溶性蛋白質(zhì)的含量。同時(shí)，按照GB/T 6432-1994凱氏定氮法測(cè)定試樣中粗蛋白質(zhì)的含量。 8分析結(jié)果計(jì)算 15/75=x/1.