氨基酸（aminoacid)蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子ppt課件

1、蛋白質(zhì)總結(jié)氨基酸蛋白質(zhì)的共價構(gòu)造和三維構(gòu)造蛋白質(zhì)構(gòu)造與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)的分別、純化和表征重要實驗生工081班.蛋白質(zhì)的構(gòu)造與相關(guān)功能1.肌紅蛋白2.紅蛋白3.免疫球蛋白4.輔基血紅素可與氧、一氧化碳、氫離子結(jié)合5.蛋白質(zhì)構(gòu)造與功能的關(guān)系：取決于以一級構(gòu)造為根底的蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象 a.一級構(gòu)造與功能的關(guān)系 一級構(gòu)造的變異與分子病鐮刀狀細胞貧血病 一級構(gòu)造與生物進化細胞色素 b.空間構(gòu)造與生物功能 蛋白質(zhì)的變構(gòu)景象血紅蛋白6.血紅蛋白與肌紅蛋白的比較.膠原蛋白膠原膠原蛋白類型：、。屬構(gòu)造糖蛋白。每股肽鏈為左手螺旋，多由Gly-Pro-Y序列反復而成，含三種不常見的氨基酸5羥賴氨酸、4羥脯氨酸和3羥

2、脯氨酸肌球蛋白掌握構(gòu)造由兩條一樣的重鏈和兩對不同的輕鏈組成。頭部有ATP結(jié)合位點具ATP酶活性和肌動蛋白結(jié)合位點。裝配成骨骼肌的粗絲。肌動蛋白：球狀單體，組成骨骼肌的細絲.三維結(jié)構(gòu)輔基血紅素（與氧結(jié)合部位）氨基酸殘基數(shù)與氧結(jié)合構(gòu)象改變與氧親和力與 氧結(jié)合曲線肌紅蛋白一條多肽鏈1個153Fe( II )原子以第六個配價鍵與氧進行可逆氧合作用鐵卟啉位移呈圓頂狀平面狀大血紅蛋白4個多肽亞基4個2(141)2(146)Fe( II )原子以第六個配價鍵與氧進行可逆氧合作用去氧血紅蛋白（T態(tài)）和氧合血紅蛋白（R態(tài)）小K.蛋白質(zhì)的性質(zhì)和分別、純化1、蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)等電點 與它所含的酸堿氨基酸數(shù)目比例有關(guān)

3、等離子點 蛋白質(zhì)的一個特征常數(shù)2蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)維持蛋白質(zhì)膠體性質(zhì)穩(wěn)定的要素3點3蛋白質(zhì)沉淀的方法等電點沉淀法可逆、不變性)鹽析法可逆、不變性有機溶劑沉淀法 可逆或不可逆重金屬鹽沉淀法 變性生物堿試劑變性 加熱沉淀法 變性強酸堿沉淀不可逆4蛋白質(zhì)的變性與復性溫暖條件、變性要素、常用變性劑.5蛋白質(zhì)的顏色反響.6、蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的測定a.根據(jù)化學組成測定最低相對分子質(zhì)量b.浸透壓法測定相對分子質(zhì)量c.沉降分析法超速離心法d.凝膠過濾法測定相對分子質(zhì)量分子篩層析此法比較簡單，不要求復雜的儀器，就能準確地測出Mre.SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定相對分子質(zhì)量.根據(jù)分子大小不同的方法透析和超越濾利

4、用溶解度差別的純化方法實際最常用的方法a鹽析b有機溶劑分級分別根據(jù)電荷不同的純化方法 PAGE、醋酸纖維素薄膜電泳、離子交換層析 利用選擇性吸附的純化方法利用對配體的特異生物學親和層析: 一步處置即 親和力的純化方法可分別所需蛋白質(zhì)，純度很高7蛋分別純化白質(zhì)的.一蛋白質(zhì)的含量測定凱氏定氮法雙縮尿法 Folin-酚試劑法紫外吸收法考馬斯亮藍結(jié)合法 靈敏度高，反復好膠體金測定法靈敏度最高二蛋白質(zhì)的純度測定電泳、沉降、HPLC和溶解度分析等。8蛋白質(zhì)的含量測定和純度鑒定.蛋白質(zhì)實驗部分氨基酸紙層析考馬斯亮藍結(jié)合法測定蛋白質(zhì)濃度SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量.氨基酸紙層析重 點：氨

5、基酸紙上層析法的操作技術(shù)難 點：紙層析法的根本原理溶劑前層析點原點溶劑前沿亮苯丙纈脯賴.相對遷移率 Rf = X/Y.考馬斯亮藍結(jié)合法測定蛋白質(zhì)濃度重 點：考馬斯亮藍法定量測定蛋白質(zhì)含量的原理和方法.實驗原理考馬斯亮藍能與蛋白質(zhì)的疏水微區(qū)相結(jié)合，這種結(jié)合具有高敏感性。考馬斯亮藍G250的磷酸溶液呈棕紅色，最大吸收峰在465nm。當它與蛋白質(zhì)結(jié)合構(gòu)成復合物時呈藍色，其最大吸收峰改動為595nm，考馬斯亮藍G250蛋白質(zhì)復合物的高消光效應(yīng)導致了蛋白質(zhì)定量測定的高敏度。在一定范圍內(nèi)，考馬斯亮藍G250蛋白質(zhì)復合物呈色后，在595nm下，吸光度與蛋白質(zhì)含量呈線性關(guān)系，其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比，而與蛋白質(zhì)的分子量及氨基酸成分無關(guān)，因此被廣泛地運用。Coomassie brilliant blue G-250在一定的實驗條件下，未知樣品的溶液與規(guī)范蛋白質(zhì)溶液同時反響，并于595nm下比色，可以經(jīng)過規(guī)范蛋白質(zhì)的規(guī)范曲線求出未知樣品的蛋白質(zhì)濃度。.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量重點掌握：實驗原理、整個實驗過程的設(shè)計與操作，如規(guī)范蛋白質(zhì)的選擇、分別膠與濃縮膠濃度確實定與制備、灌膠、樣品的處置、上樣量及方法的選擇。.電泳過程中有3種物理效應(yīng)：樣品的濃度效應(yīng)；對被分別分子的挑選效應(yīng)；電荷效