中藥分析特點(diǎn)和一般程序及方法

1、中藥分析特點(diǎn)和一般程序及方法第一節(jié) 中藥分析的特點(diǎn)第二節(jié) 中藥分析一般程序及方法第一節(jié) 中藥分析的特點(diǎn)一、中藥及類型中藥是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下應(yīng)用的藥物。包括中藥材、中藥飲片和中成藥等。 中成藥又叫中藥成方制劑，包括單方或復(fù)方制劑，是以中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論和用藥原則為指導(dǎo)制成的。二、中藥分析特點(diǎn)1.中藥市場混亂。同物異名 同名異物現(xiàn)象普遍。2.中藥材質(zhì)量的不穩(wěn)定：易受產(chǎn)地、采收季節(jié)、用藥部位、炮制方法等影響。3.各種有效成分在中藥中含量相差懸殊，含量較低。4.成分復(fù)雜，而且大多數(shù)中藥的有效成分尚不十分清楚。5.同一成分在不同藥材中的藥理作用不同。6.制劑工藝不同，有效成分的量也不同。7.制劑工藝不同，有

2、效成分的量也不同。第二節(jié) 中藥分析的一般程序和方法取樣鑒別含量測定檢查樣品處理純化一、取樣 1.取樣均勻、合理、代表性 2.按規(guī)定方法取樣 （中藥材、中藥制劑）二、樣品處理（一）提取1.冷浸 樣品置溶劑里，室溫下浸泡一段時(shí)間的提取方法。適用范圍適宜植物性粉末不宜動(dòng)物性粉末親脂性 親水性石油醚 苯 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水3.回流提取法 樣品置有機(jī)溶劑中加熱回流的提取方法加快溶出速度，省時(shí)適宜受熱穩(wěn)定的藥物適宜較難溶出的組分特點(diǎn)儀器普通回流裝置通過更換溶劑，使提取更完全4、連續(xù)回流提取法 樣品置有機(jī)溶劑中加熱，蒸發(fā)的溶劑經(jīng)冷凝流回樣品管的提取方法節(jié)省溶劑，提高提取效率適宜受熱穩(wěn)

3、定的藥物費(fèi)時(shí)特點(diǎn)儀器索氏提取器5、水蒸氣蒸餾法 適用于具揮發(fā)性的可隨水蒸氣蒸出的組分的測定6、超聲提取法 超聲波振蕩器（超聲波清洗器） 簡便 省時(shí) 提取率高 利用超聲波的助溶作用進(jìn)行提取原理 超聲波在液體中以疏密相間的形式向物體輻射，出現(xiàn)“空化”現(xiàn)象（氣泡的形成、產(chǎn)生及破裂現(xiàn)象），形成超過1000個(gè)大氣壓的沖擊力（二）純化方法 利用藥物與雜質(zhì)溶解性能的不同進(jìn)行分離（二）純化方法1.萃?。?）保留測定組分在柱上，洗去雜質(zhì)，再用適當(dāng)溶劑洗下組分（2）保留雜質(zhì)于柱上常用固定相硅膠氧化鋁大孔吸附樹脂2.柱色譜法三、中藥鑒別(一）化學(xué)鑒別 抗干擾能力差顯色、熒光例 二妙丸中蒼術(shù)的鑒別蒼術(shù)酮蒼術(shù)炔（二）顯

4、微鑒別 在下列情況中應(yīng)用：藥材及炮制品的外形鑒別特征不明顯或外形相似難于鑒別而組織構(gòu)造不同時(shí)；藥材破碎或呈粉末不易用肉眼辨認(rèn)或區(qū)分時(shí)；含原藥材粉末的中藥制劑。安宮牛黃丸1、水牛角濃縮粉2、麝香3、珍珠4、朱砂5、雄黃6、黃連7、梔子8、郁金9、黃芩 (三)顯微化學(xué)反應(yīng)鑒別法： 一般可取藥材切片或粉末，中成藥取粉末，置載玻片上，滴加各種試劑，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察產(chǎn)生的結(jié)晶、沉淀物，以及特殊的顏色變化，作為鑒別特征。（四）色譜鑒別TLC法應(yīng)用最多（Rf、顏色、熒光）GC法 適用于含揮發(fā)性成分的藥物HPLC法常與含量測定同時(shí)進(jìn)行薄層色譜的陰、陽對照法陽性對照：將要鑒別的藥材按制劑工藝處理，再按鑒

5、別方法提取的溶液.陰性對照：把制劑中要鑒別的藥材除去，用剩下的各味藥按制劑工藝處理，再按鑒別方法提取的溶液 OO O O O O O O O O O 陰 樣 陽 對 品 對例（五）指紋圖譜鑒別定義： 中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)定該中藥材或中藥制劑特性的共有峰的圖譜。目前廣泛使用的是色譜指紋圖譜。2. 色譜指紋圖譜的特點(diǎn) 整體性 將指紋圖譜作為一個(gè)整體來分析和比較它的綜合特征以達(dá)到鑒別的目的。 模糊性 強(qiáng)調(diào)分析、比較指紋圖譜的相似性，而不是完全相同。 是一種綜合的、量化的色譜鑒別手段。四、雜質(zhì)檢查水分總灰分和酸不溶性灰分重金屬砷鹽殘留農(nóng)藥 中藥材主要項(xiàng)目雜質(zhì)來

6、源及各項(xiàng)目的意義水分 結(jié)塊、霉變或有效成分水解灰分 控制藥物本身及泥土、沙石等無機(jī)雜質(zhì)重金屬 環(huán)境污染和使用農(nóng)藥引入砷鹽 劇毒，常由除草劑、殺蟲劑或化肥引入殘留農(nóng)藥 有毒（一）水分測定法 測定用的供試品，一般先破碎成直徑不超過3mm的顆?；蛩槠?。直徑和長度在3mm以下的花類，種子和果實(shí)類藥材，可不破碎。減壓干燥法需先經(jīng)二號篩。 方法烘干法（不含或少含揮發(fā)性成分）甲苯法 （含揮發(fā)性成分）減壓干燥法（含揮發(fā)性成分貴重藥）GC法烘干法適用于不含或少含揮發(fā)性成分的樣品測定法：取供試品25g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱瓶中，厚度不超過5mm，疏松供試品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100105干燥5

7、小時(shí)，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時(shí)，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含水量（%）。 甲苯法適用于含揮發(fā)性成分的樣品儀器裝置：如圖。A為500ml的短頸圓底燒瓶；B為水分測定管；C為直形冷凝管，外管長40cm。使用前，全部儀器應(yīng)清潔，并置烘箱中烘干。 測定法：取供試品適量（約相當(dāng)于含水量14ml），精密稱定，置A瓶中，加甲苯約200ml，必要時(shí)加入干燥、潔凈的沸石或玻璃珠數(shù)粒，將儀器各部分連接，自冷凝管頂端加入甲苯，至充滿B管的狹細(xì)部分。將A瓶置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱，待甲苯開始沸騰時(shí)，調(diào)節(jié)溫

8、度，使每秒鐘餾出2滴。待水分完全餾出，即測定管刻度部分的水量不再增加時(shí)，將冷凝管內(nèi)部先用甲苯?jīng)_洗， 再用飽蘸甲苯的長刷或其他適宜的方法，將管壁上附著的甲苯推下，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫，拆卸裝置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的銅絲推下，放置，使水分與甲苯完全分離（可加亞甲藍(lán)粉末少量，使水染成藍(lán)色，以便分離觀察）。檢讀水量，并計(jì)算供試品中的含水量（%）。 【附注】用化學(xué)純甲苯直接測定，必要時(shí)甲苯可先加水少量，充分振搖后放置，將水層分離棄去，經(jīng)蒸餾后使用。減壓干燥法適用于含揮發(fā)性成分貴重藥的樣品減壓干燥器：取直徑12cm左右的培養(yǎng)皿，加入五氧化二磷干燥劑適量，使鋪成1cm的厚度，放入直徑

9、30cm的減壓干燥器中。 測定法：取供試品24g，混合均勻，分取約0.5 1g，置已在供試品同樣條件下干燥并稱重的稱量瓶中，精密稱定，打開瓶蓋，放入上述減壓干燥器中，減壓至（20mmHg）以下持續(xù)半小時(shí)， 室溫放置24小時(shí)。在減壓干燥器出口連接無水氯化鈣干燥管，打開活塞，待內(nèi)外壓一致，關(guān)閉活塞，打開干燥器，蓋上瓶蓋，取出稱量瓶迅速精密稱定重量，計(jì)算供試品中的含水量（%）。 GC法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用直徑為的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作為載體，柱溫為140150，熱導(dǎo)檢測器檢測。注入無水乙醇，照氣相色譜法（附錄- E）測定，應(yīng)符合下列要求： （1） 理論板數(shù)按水峰計(jì)算應(yīng)大于10

10、00；理論板數(shù)按乙醇峰計(jì)算的應(yīng)大于150。 （2） 水和乙醇兩峰的分離度應(yīng)大于2。 （3） 將無水乙醇注樣5次，水峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不得大于3.0%。標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：取純化水約，置25ml量瓶中，精密稱定，加無水乙醇至刻度，搖勻，即得。 供試品溶液的制備：取供試品適量（含水量約），粉碎或研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇50ml，密塞，混勻，超聲處理20分鐘，放置12小時(shí)，再超聲處理20分鐘，密塞放置，待澄清后傾取上清液，即得。 測定法：取無水乙醇、對照溶液及供試品溶液各5 l，注入氣相色譜儀，測定，即得。【附注】 （1） 對照溶液與供試品溶液的配制須用新開啟的同一瓶無水乙醇。

11、 （2）用外標(biāo)法計(jì)算供試品中的含水量。計(jì)算時(shí)應(yīng)扣除無水乙醇中的含水量， 方法如下： 對照溶液中實(shí)際加入的水的峰面積對照溶液中總水峰面積K對照溶液中乙醇峰面積 供試品溶液中水峰面積供試品溶液中總水峰面積K供試品溶液中乙醇峰面積 K無水乙醇中水峰面積/無水乙醇中乙醇峰面積（二）灰分的測定1.總灰分測定法：測定用的供試品須粉碎，使能通過二號篩，混合均勻后，取供試品23g（如須測定酸不溶性灰分，可取供試品35g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量（準(zhǔn)確至），緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時(shí)，逐漸升高溫度至500600，使完全灰化并至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓浚?jì)算供試品中總灰分的含量（%）。 如供試品不易灰

12、化，可將坩堝放冷，加熱水或10硝酸銨溶液2ml，使殘?jiān)鼭駶?，然后置水浴上蒸干，殘?jiān)涨胺胱?，至坩堝?nèi)容物完全灰化。2.酸不溶性灰分測定法：取上項(xiàng)所得的灰分，在坩鍋中小心加入稀鹽酸約10ml，用表面皿覆蓋坩鍋，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水5ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內(nèi)的殘?jiān)盟从跒V紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移置同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算供試品中酸不溶性灰分的含量（%）。干法破壞濕法破壞硫代乙酰胺法（三）重金屬的測定WHO規(guī)定植物藥鉛10ppm鎘0.3ppm堿融法破壞濕法破壞堿融法H+（四）砷鹽的測定（五）殘留農(nóng)藥的測定1

13、、總氯量的測定2、總磷量的測定3、GC法五、中成藥檢查按制劑通則各劑型規(guī)定的項(xiàng)目進(jìn)行。1.合劑和口服液pH 裝量相對密度微生物限度一般檢查項(xiàng)目 2.丸劑 指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的黏合劑或其他輔料制成球形或類球形制劑，分為蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、濃縮丸、蠟丸、微丸等檢查項(xiàng)目水分、重量差異裝量差異(按一次劑量分裝的)溶散時(shí)限、微生物限度 一種或多種藥材混合制成的粉末狀制劑，分內(nèi)服和外用散劑 檢查項(xiàng)目均勻度水分裝量差異微生物限度3.散劑 檢查項(xiàng)目粒度 水分 溶化性裝量差異 微生物限度4.顆粒劑檢查項(xiàng)目重量差異崩解時(shí)限微生物限度原粉片30浸膏片1h薄膜衣片1h5.片劑硬膠囊劑軟膠囊劑腸溶膠囊劑 檢查項(xiàng)目水分裝量差異崩解時(shí)限微生物限度6.膠囊劑 中國藥典中藥制劑含量測定所占比例 版本 % （HPLC 36% TLCS 24% GC 3%)六、含量測定測定成分的選定原則1.首選君藥及貴重藥、劇毒藥建立含量、限量測定方法2.其次考慮臣藥及其他味藥3.有效成分明確的，可選有效成分4.成分類別清楚的，可測某一類總成分的含量5.檢測成分