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文檔簡介
1、四.糖尿病的生物化學(xué)檢測:一測定血液中的葡萄糖含量 測定血糖的方法很多,按其測定原理可分為三類:.1.無機(jī)化學(xué)法: 所用試劑均為無機(jī)化學(xué)試劑氧化亞銅法又稱Folin-Wu法原理 葡萄糖 + 復(fù)原堿性銅鹽Cu CuO + 磷鉬酸 鉬藍(lán) .鐵氰化鉀法 操作簡便試劑易得,費(fèi)用低 特異性差 谷胱甘肽 葡萄糖醛酸 尿酸 VitC 已淘汰。偏高.2.有機(jī)化學(xué)方法: 利用糖的羰基與有機(jī)試劑反響測糖。 Hultmen運(yùn)用鄰甲苯胺試劑Otoluidine,O-T測定血糖。原理 血清 + 冰醋酸 + 鄰甲苯胺 葡糖糖 5羥甲基2呋喃甲醛 + 鄰甲苯胺 藍(lán)色的醛亞胺Schiff堿 .3.生物化學(xué)法: 主要是酶法葡萄
2、糖氧化酶法Glucose Oxidase,GOD原理 葡萄糖氧化酶葡萄糖 葡萄糖酸 + 過氧化氫H2O2 + 4-氨基安替比林+ 酚 O2 +有色化合物 其顏色深淺同血糖濃度呈正比。 過氧化物酶.葡萄糖氧化酶法特點(diǎn): 操作簡便,特異性較高 引薦方法 溶血膽色素0.34mol/L VitC 5mg/L以上 左旋多巴0.5mol/L 谷胱苷肽 100mg/L本法第一步是特異反響,第二步特異性差,誤差往往發(fā)生在反響的第二步。負(fù)偏向.葡萄糖 + ATP G6P + ADP G6P + NADP 6-磷酸葡萄糖酸+ NADPH NADPH的生成速率與葡萄糖濃度成正比,在波長340nm監(jiān)測吸光度升高速率,
3、計算血清中葡萄糖濃度。 己糖激酶G6PD己糖激酶法原理. 己糖激酶法的特點(diǎn) 參考方法 試劑盒貴 輕度溶血 脂血、黃疸、 VitC NaF、肝素、EDTA、草酸鹽 但從紅細(xì)胞中釋放出來的有機(jī)磷酸酯和一些酶能耗費(fèi)NADP,有干擾。葡萄糖脫氫酶法無干擾.二 測定尿中葡萄糖 臨床初判別作為過篩 正常人24小時尿糖 0.5g 尿糖實(shí)驗 1.班氏試劑:CuSO4 Glu Cu磚紅色2.尿10A:干酶試劑、折光儀比色.三口服葡萄糖耐量實(shí)驗(Oral glucose tolerance test , OGTT 一種葡萄糖負(fù)荷實(shí)驗,了解機(jī)體對葡萄糖的調(diào)理作用。 空腹血糖濃度67mmol/L,+OGTT OGTT
4、 實(shí)驗前預(yù)備: a 實(shí)驗前三天,每日食物中糖150g b 影響實(shí)驗藥物停用3d c 實(shí)驗前病人1016h未進(jìn)食 d 坐位取血5min后飲250ml含75g無水葡 萄糖水,以后每隔30min取血一次,共 四次,歷時2h。 . 30 60 90 120 150 min510mmol/L正常人糖耐量受損糖尿病腎糖閾.1.正常糖耐量1空腹靜脈血漿葡萄糖7.8mmol/L 峰值超越10mmol/L并出現(xiàn)糖尿 延遲2小時后回復(fù)到空腹程度 判別目的是服葡萄糖后2小時的血漿葡萄糖值增高。.3.糖耐量受損 輕度耐量才干下降1空腹血漿葡萄糖7.8mmol/L2口服葡萄糖后30、60、90min的血漿 葡萄糖11mmol/L32h值在811mmol/L 稱為亞臨床或無病癥的糖尿病 1/3恢復(fù)正常 1/3仍為糖耐量受損 1/3明確糖尿病.4、
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