3、1菊花的組織培養(yǎng)(給力的)ppt課件

1、課題一 菊花的組織培育 安岳中學(xué)： 蔣小麗有絲分裂受精卵細(xì)胞分化 在個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形狀、構(gòu)造和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差別的過(guò)程。1、細(xì)胞分化的概念一、知識(shí)回想 黑色素細(xì)胞在體外培育30多代后仍能合成黑色素；離體培育的上皮細(xì)胞，一直堅(jiān)持為上皮細(xì)胞，而不會(huì)變成其他類型的細(xì)胞。 2、穩(wěn)定性3、不可逆性細(xì)胞分化發(fā)生在整個(gè)生命進(jìn)程中。1、耐久性2、細(xì)胞分化的特點(diǎn) 造血干細(xì)胞 原紅細(xì)胞 早幼紅細(xì)胞 中幼紅細(xì)胞 晚幼紅細(xì)胞 成熟紅細(xì)胞 死亡4、普遍性 細(xì)胞分化能否意味著細(xì)胞中遺傳物質(zhì)的改動(dòng)？ 遺傳物質(zhì)沒(méi)有改動(dòng)，不同組織的細(xì)胞共同來(lái)源于受精卵，經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生。3、細(xì)胞分化的本質(zhì)A

2、BDCEEDCABEDCABEDCABEDCAB基因在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，不同細(xì)胞中遺傳信息的執(zhí)行情況不同即基因的選擇性表達(dá)的過(guò)程 紅細(xì)胞合成血紅蛋白 (不合成肌動(dòng)蛋白)肌細(xì)胞肌動(dòng)蛋白基因開(kāi)啟合成肌動(dòng)蛋白 (不合成血紅蛋白)肌動(dòng)蛋白基因封鎖血紅蛋白基因封鎖血紅蛋白基因開(kāi)啟試一試:如今他能解釋這些景象了嗎?4、細(xì)胞分化的結(jié)果 細(xì)胞產(chǎn)生了不同種類的蛋白質(zhì)即出現(xiàn)了不同的構(gòu)造和功能的細(xì)胞和組織。愈傷組織胚狀體1958，美國(guó)，斯圖爾德 植物組織培育離體二、根底知識(shí)一植物組織培育概念關(guān)鍵詞： 外植體、脫分化、再分化、愈傷組織 在無(wú)菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培育在人工配置的培育基上，給予

3、適宜的培育條件，誘導(dǎo)其脫分化產(chǎn)生愈傷組織再分化構(gòu)成叢芽，最終構(gòu)成完好的植株。又稱：植物離體培育脫分化或去分化：由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程。再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)展培育，又可以重新分化成根或芽等器官的過(guò)程。外植體：用于離體培育的植物器官或組織片段。愈傷組織：細(xì)胞陳列疏松、無(wú)規(guī)那么、高度液泡化的無(wú)定形的薄壁細(xì)胞。切取構(gòu)成層無(wú)菌接種誘導(dǎo)愈傷組織的構(gòu)成試管苗的構(gòu)成培育室移栽脫分化再分化二植物組織培育的根本過(guò)程植物組織培育過(guò)程離體組織或細(xì)胞植物體脫分化細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素愈傷組織芽根細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素有利于根的分化有利于芽的分化，抑制根的

4、分化促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)激素的運(yùn)用順序、運(yùn)用量及比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向：思索：以下培育基出現(xiàn)的景象反響了什么問(wèn)題？生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素高 利于根的構(gòu)成適中 利于愈傷組織的構(gòu)成供參考的配方1、誘導(dǎo)菊花愈傷組織：在MS培育基中參與BA和NAA，質(zhì)量濃度均為0.5mg、誘導(dǎo)菊花從芽：在MS培育基中參與BA和NAA，質(zhì)量濃度分別為2-3mg和0.020.03mg3、誘導(dǎo)菊花生根：在MS培育基各成分用量減半，并添參與NAA或IAA，質(zhì)量濃度均為0.1mg4溫度、光照、pH的影響光照：菊花每日用日光燈照射12h。溫度：大多數(shù)植物組織培育控制在2327 , 低于15時(shí)植物組織會(huì)表現(xiàn)生長(zhǎng)停頓, 高于35時(shí)對(duì)植物

5、生長(zhǎng)不利。 菊花的組織培育控制在1822。pH： 不同植物對(duì)培育基最適pH的要求不 同，大多數(shù)控制在56.5。 菊花的組織培育控制在5.8左右。制備MS固體培育基外植體消毒 接種 培 養(yǎng)栽 培四、實(shí)驗(yàn)操作 移 栽沖洗酒精無(wú)菌水沖洗氯化汞無(wú)菌水沖洗至少三次之上配制各種母液配制培育基滅菌一制備MS固體培育基MS培育基包括20多種營(yíng)養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)室普通運(yùn)用4保管配制好的培育基母液來(lái)制備1、配制各種母液無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100倍，常溫保管激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物普通可按1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液用母液配制培育基時(shí)，需求根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量2、配制培

6、育基分裝到錐形瓶中，每瓶分裝50ml或100ml 配制培育液 調(diào)PH 培育基的分裝 由于菊花的莖段的組織培育比較容易，因此不用添加植物激素3、滅菌分裝好的培育基連同其他器械一同進(jìn)展高壓蒸汽滅菌1、選材：菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝二外植體消毒2、消毒流水沖洗菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷悄然刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右 酒精處置用無(wú)菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70的酒精中搖動(dòng)23次，繼續(xù)67s，立刻將外植體取出，在無(wú)菌水中清洗 消毒液處置取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1的氯化汞溶液中12min，取出后在無(wú)菌水中至少清洗3次，漂凈消毒

7、液三接種污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。用70的酒精噴霧使空氣消毒， 酒精或新潔爾滅搽洗任務(wù)臺(tái)并用紫外線照射20分鐘。1、接種室消毒2、無(wú)菌操作要求操作要在酒精燈火焰旁完成，每次運(yùn)用器械后，都需求用火焰灼燒滅菌，接種后立刻蓋好瓶蓋。3、資料的切取和接種 將消過(guò)毒的菊花莖段在無(wú)菌培育皿中切成0.51cm的小段，用鑷子夾取菊花莖段接種。4、接種本卷須知每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為70的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種外植體在培育基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，普通胡蘿卜34塊，菊的莖或葉68塊，也不要太少，以充分

8、利用培育基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條件插入時(shí)應(yīng)留意方向，形狀學(xué)上端朝上，形狀學(xué)下端朝下，不要倒插。莖段、莖尖基部插入培育基利于吸收水分和營(yíng)養(yǎng)正常苗污染苗1、外植體帶菌2、培育基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時(shí)帶入4、環(huán)境不清潔污染途徑思索：他計(jì)劃做幾組反復(fù)？他計(jì)劃設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎？答：每種資料或配方至少要做一組以上的反復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培育基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培育，用以闡明培育基制造合格，沒(méi)有被雜菌污染。四培育接種后的錐形瓶最好放在無(wú)菌箱中培育，培育期間應(yīng)定期消毒培育溫度控制在18-22每日用日光燈光照12h五移栽 移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先翻開(kāi)培育瓶的封

9、口膜，讓試管苗在培育間生長(zhǎng)幾日。普通放置在2025的遮蔭環(huán)境中，順應(yīng)57d。試管苗不萎蔫，有新生長(zhǎng)的趨勢(shì)，便可移栽。1、翻開(kāi)封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移 用流水清洗根部的培育基，將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間3、移栽幼苗長(zhǎng)壯后，移栽到土壤中固體基質(zhì)型，含水量高、蓄水性強(qiáng)、透性好，適宜栽培珍珠巖 ,珍珠巖是一種火山噴發(fā)的酸性熔巖，經(jīng)急劇冷卻而成的玻璃質(zhì)巖石，有弧形或圓形裂隙，如珍珠的構(gòu)造，所以被命名為珍珠巖 。蛭石是一種天然、無(wú)毒的礦物質(zhì)，在高溫作用下會(huì)膨脹的礦物。它是一種比較少見(jiàn)的礦物，屬于硅酸鹽。 六栽培 幼苗移栽后，每天察看并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況，適時(shí)澆水、施肥，直至開(kāi)花1、培育

10、基的滅菌高壓蒸汽滅菌2、外植體的消毒酒精、氯化汞3、接種的無(wú)菌操作酒精、酒精燈灼燒4、無(wú)菌箱中的培育；5、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。在整個(gè)操作過(guò)程中，是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)無(wú)菌環(huán)境的？結(jié)果分析與評(píng)價(jià)一對(duì)接種操作中污染情況的分析二能否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化三能否進(jìn)展了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄四生根苗的移栽能否合格五、課題延伸1、普通來(lái)說(shuō)，容易進(jìn)展無(wú)性繁衍的植物，也容易進(jìn)展組織培育2、實(shí)例：蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季營(yíng)養(yǎng)繁衍扦插嫁接壓條 扦插嫁接壓條 練習(xí)1.答：植物組織培育所利用的植物資料體積小、抗性差，對(duì)培育條件的要求較高。用于植物組織培育的培育基同樣適宜于某些微生物的生長(zhǎng)，如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培育物一旦遭到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致