菊花的組織培養(yǎng)(1)ppt課件

1、 經過初中的學習，我們曾經了解到大多綠色開花植物都是靠種子來繁衍的。那么，有沒有不用種子來培育植物的方法呢？ 組織培育營養(yǎng)繁衍扦插嫁接壓條 扦插嫁接壓條 愈傷組織胚狀體1958，美國，斯圖爾德 植物組織培育離體回想知識二思索這個實驗闡明了動物曾經分化的細胞核具有什么特性？高度分化的動物體細胞的細胞核有發(fā)育成完好個體的潛能多利羊的誕生動物細胞有沒有這種才干？曾經分化的細胞，依然具有發(fā)育成完好個體的潛能。即細胞的全能性思索為什么曾經分化的細胞具有全能性呢？生物體的每一個細胞都是由同一個受精卵有絲分裂而來的，所以高度分化的細胞含有堅持物種發(fā)育所需求的全套遺傳信息植物組織培育技術動物的克隆技術一、植物

2、組織培育的實際根底課本P32當植物細胞脫離了原來所在植物體的器官或組織而處于離體形狀時，在一定的營養(yǎng)物質、激素和其他外界條件的作用下，就能夠表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完好的植株。植物組織培育原理：植物細胞的全能性1、培育無病毒植株2、 大規(guī)模培育愈傷組織提取紫草素，治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化裝品的原料4、基因工程中亦需用到植物組織培育的方法受體細胞為植物細胞植物組織培育的運用： 3、人工種子處理有些作物種類繁衍才干差，結子困難或發(fā)芽率低等問題菊花的組織培育什么叫細胞分化？愈傷組織的細胞有什么特點？什么叫脫去分化、再分化？如何控制細胞的脫分化與去分化？ 閱讀32-33頁第一段處理以下問題二、植物

3、組織培育的根本過程愈傷組織三、掌握幾個概念外植體:用于離體培育的植物器官或組織片段.細胞分化： 植物的個體發(fā)育過程中，細胞在形狀、構造和生 理功能上都會出現(xiàn)穩(wěn)定性的差別，構成這些差別 的過程叫做細胞分化。愈傷組織：離體的植物組織或細胞，培育一段時間后，會通 過細胞有絲分裂，構成愈傷組織。 愈傷組織的細胞陳列疏松而無規(guī)那么，是一種高度液泡化的呈無定外形狀的薄壁細胞。脫分化去分化：由高度分化的植物組織或細胞產生愈傷 組織的過程，稱為植物細胞的脫分化或 者叫做去分化。再分化：脫分化產生的愈傷組織繼續(xù)進展培育，又可以重新 分化成根或芽等器官，這個過程叫做再分化。二、植物組織培育的根本過程影響植物組織培

4、育的要素1、外植體的影響1不同的植物組織培育的難易程度差別很大，容易進展無性繁衍的植物也容易進展組織培育。2)同一種資料，資料的年齡，保管時間也有影響。幼齡、保管時間短的資料容易培育勝利。 菊花的組織培育普通選擇未開花植株的莖上部新萌生的側枝，由于這種嫩枝生理形狀良好，易誘導脫分化和再分化。2、營養(yǎng)要素的影響：MS培育基主要成分包括： 大量元素N、P、S、K、Ca、Mg等無機物 微量元素Fe、Mn、B、Zn、Mo、 Cu、Co、I等有機物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素：生長素、細胞分裂素、赤霉素等討論：他能說出各種營養(yǎng)物質的作用嗎？同專題2中微生物培育基的配方相比，MS培育基的配

5、方有哪些明顯的不同？P83、84答：微量元素和大量元素提供植物細胞生活所必需的無機鹽；蔗糖提供碳源，同時可以維持細胞的浸透壓；甘氨酸、維生素等物質主要是為了滿足離體植物細胞在正常代謝途徑遭到一定影響后所產生的特殊營養(yǎng)需求。 微生物培育基以有機營養(yǎng)為主。與微生物的培育不同，MS培育基那么需提供大量無機營養(yǎng)，無機鹽混合物包括植物生長必需的大量元素和微量元素兩大類。3、激素的影響 在配置好的MS培育基中，經常需求添加植物激素，最常用的是生長素和細胞分裂素。它們是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵要素。 生長素的作用：促進細胞伸長。 細胞分裂素的作用：促進細胞的分裂、生長和發(fā)育。1)按照不同的順序運用

6、這兩類激素，會得到不同的實驗結果。使用順序實驗結果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于細胞分裂，但不利分化先使用細胞分裂素后使用生長素細胞既分裂、也分化同時使用分化頻率高2)當同時運用這兩類激素時，兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向 課本P33使用比例實驗結果生長素細胞分裂素利于根的分化，抑制芽的分化生長素細胞分裂素利于芽的分化，抑制根的分化生長素=細胞分裂素促進愈傷組織的生長所以植物激素的濃度、運用的先后順序以及用量的比例等都會影響實驗結果。留意:不是一切外植體都需求植物激素，菊花嫩枝的組織培育比較容易，因此不用添加植物激素。4、消毒和滅菌對植物組織培育的影響 如外植體的消毒、器械的滅菌不

7、徹底會導致整個實驗前功盡棄。5、其它要素的影響 PH 5.8左右 溫度 1822 光照 普通前14d進展暗培育，構成愈傷組織后進展光照，由于葉片中的葉綠素只需在有光照的條件下才干構成，普通光照12h/d。植物組織培育過程:離體組織或細胞植物體脫分化細胞分裂素生長素愈傷組織芽根細胞分裂素生長素細胞分裂素生長素再分化植物細胞培育不需求光需求光影響植物組織培育的要素資料的種類、年齡及保管時間長短等營養(yǎng)植物激素消毒和滅菌PH、溫度、光照等條件五、實驗操作1、植物組織培育的操作流程 制備MS固體培育基 外植體的消毒 接種 培育 移栽 栽培2、各步詳細操作及本卷須知1MS固體培育基的配制1配制各種母液為什

8、么？無機物中大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100倍，常溫保管激素類、維生素類以及用量較小的有機物普通可按1mg/ml的質量濃度單獨配制成母液用母液配制培育基時，需求根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計算用量2配制培育基 配制培育液 調PH 培育基的分裝 分裝到錐形瓶中，每瓶分裝50ml或100ml，由于菊花的莖段的組織培育比較容易，因此不用添加植物激素3滅菌分裝好的培育基連同其他器械一同進展高壓蒸汽滅菌1、選材：菊花莖段，取生長旺盛的嫩枝2外植體消毒2、消毒流水沖洗菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷悄然刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右 酒精處置用無菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入體積分數(shù)

9、為70的酒精中搖動23次，繼續(xù)67s，立刻將外植體取出，在無菌水中清洗 消毒液處置取出后用無菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入質量分數(shù)為0.1的氯化汞溶液中12min，取出后在無菌水中至少清洗3次，漂凈消毒液本卷須知： 1.在消毒過程中，我們既要思索藥劑的消毒效果，又要思索外植體的耐受才干，不同藥劑不同植物資料甚至不同器官要區(qū)別對待。 2.外植體滅菌用過的有毒藥品要妥善處置氯化汞以免引起環(huán)境污染。普通搜集后一致交給有關專業(yè)部門處置。思索題： 為什么要對外植體進展一系列的消毒？對外植體的消毒需求留意什么？ 外植體資料的體積小抗性很差，剛取回來的外植體帶有很多微生物，假設不進展一系列的消毒，這些微

10、生物就會與外植體競爭營養(yǎng)物質，同時會產生一些有害物質，因此要對外植體進展一系列的消毒。對外植體的消毒既要思索藥劑的消毒效果，又要思索外植體的耐受才干。3接種污染的主要來源是空氣中的細菌和孢子，接種室消毒是至關重要的。接種前用70的酒精噴霧使空氣消毒， 用70酒精或新潔爾滅擦拭一遍任務臺并用紫外線照射20分鐘。任務臺消毒后，首先點燃酒精燈。1、接種室消毒2、無菌操作要求一切操作都要在酒精燈火焰旁完成，每次運用器械后，都需求用火焰灼燒滅菌，接種后立刻蓋好瓶蓋。3、資料的切取和接種課本P34頁4、接種本卷須知每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分數(shù)為70的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，

11、冷卻后再接種外植體在培育基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，普通胡蘿卜34塊，菊的莖或葉68塊，也不要太少，以充分利用培育基中的營養(yǎng)成分和光照條件插入時應留意方向，外植體的形狀學上端朝上，不要倒插。4.培育：1.將接種后的錐形瓶及對照組放在無菌培育箱中進展培育，并且定期消毒，溫度控制在1822，前14天進展暗培育，愈傷組織構成后每天光照12h，愈傷組織為乳白色或黃色的瘤狀2.愈傷組織構成后，改換培育基進展叢芽培育3.再改換培育基進展生根培育就能得到完好的植株。思索題：1.為什么愈傷組織構成后需求光照？答：愈傷組織構成后進展叢芽培育,培育中會構成 葉片，而葉片中葉綠素的構成需求光

12、照。 2.為什么植物組織培育過程中需求改換培育基？答：愈傷組織構成后培育基中的營養(yǎng)也幾乎耗 盡，生根培育和叢芽培育所需的激素的量或 比例也不一樣，因此需求改換培育基。5.移栽： 移栽生根的菊花試管苗之前，應先翻開培育瓶的封口膜，讓試管苗在培育間生長幾日1、翻開封口膜2、清洗轉移 用流水清洗根部的培育基，將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時間3、移栽幼苗長壯后，移栽到土壤中本卷須知：移栽過程中既要充分清洗根系外表的培育基，又不能傷及根系。6.栽培：將幼苗移栽后每天察看并記錄幼苗生長情況，適時澆水，施肥，直至開花。正常苗污染苗1、外植體帶菌2、培育基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔污染途徑思索： 植物組織培育的整個操作過程中如何實現(xiàn)無菌 環(huán)境？ 1器械及培育基的滅菌高壓蒸汽滅菌 2 外植體的消毒70%酒精、0.1%氯化汞 3接種的無菌操作酒精、酒精燈、灼燒 4無菌培育箱中培育 5移栽到消毒的環(huán)境中生存一段時間思索：他計劃做幾組反復？他計劃設置對照實驗嗎？答：每種資料或配方至少要做一組以上的反復。設置對照實驗可以取用一個經過滅菌的裝有培育基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培育，用以闡明培育基制造合格，沒有被雜菌污染。三、課題延伸1、普通來說，容易進展無性繁衍的植物，也