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文檔簡介
1、關(guān)于HIV檢測及臨床意義第一張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第二張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第三張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第四張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第五張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第六張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第七張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第八張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月中國每年新發(fā)現(xiàn)的HIV/AIDS病例數(shù)(19852002)第九張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十一張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十二張,
2、PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十三張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十四張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十五張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十六張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十七張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十八張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第十九張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第二十張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第二十一張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第二十二張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第二十三張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第二十四張,PPT共六十一頁
3、,創(chuàng)作于2022年6月第二十五張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第二十六張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第二十七張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月HIV的檢測第二十八張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月HIV感染可通過兩種途徑檢測直接檢測病毒或其組成部分檢測人體HIV免疫反應(yīng)HIV特異性抗體從感染到血清抗體陽轉(zhuǎn)有一段窗口期,平均為1-3個月,有一小部分HIV感染者出現(xiàn)延遲反應(yīng)第二十九張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月HIV感染后抗原和抗體的變化及其與疾病關(guān)系HIV感染人體后出現(xiàn)一過性病毒血癥,6-8周后血清抗體陽轉(zhuǎn),病毒滴度降低,在隨后的5-8年無癥狀帶
4、毒期里HIV抗體一直存在,但病毒難查到。進入AIDS期后血漿中病毒再次出現(xiàn)。故診斷HIV感染多數(shù)時間用抗體檢測診斷,極早期(窗口期)用抗原檢測。第三十張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月HIV抗體診斷 目前臨床上實際應(yīng)用的是測定特異性HIV抗體,包括初篩和確認(rèn)實驗。第三十一張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月一、檢測試劑篩查試劑必須是HIV-1/2混合型、經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)、批批檢合格、臨床評估質(zhì)量優(yōu)良、在有效期內(nèi)的試劑。目前常用的篩查試劑有酶聯(lián)免疫、顆粒凝集和其它快速診斷試劑。采供血機構(gòu)進行血液篩查應(yīng)采用酶聯(lián)免疫試劑。自采自供血的單位必須進行HIV抗體檢測,在尚未建立艾
5、滋病篩查實驗室的偏遠地區(qū)可由經(jīng)過培訓(xùn)的技術(shù)人員在規(guī)定的場所用快速試劑進行血液篩查。第三十二張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2、確認(rèn)試劑必須經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)。確認(rèn)試劑包括免疫印跡試驗、條帶免疫試驗及免疫熒光試驗試劑。目前以免疫印跡試劑最為常用。 第三十三張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月ELISA方法:目前最常用的初篩實驗,自1985年首次檢測HIV-1抗體的試劑盒供市以來,已從第一代的全病毒抗原間接法發(fā)展到第四代的以重組的多肽抗原及抗P24抗體包被的雙夾心法,使窗口期縮短了2-3周。第三十四張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月四代艾滋病酶聯(lián)免疫試劑比較sol
6、idphasespecificdetection ofconjugate第一代病毒裂解液HIV-1IgG 抗體HIV-1 -IgG抗體第二代病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1 / -2IgG 抗體HIV-1 / -2 IgG抗體第三代病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1 / -2 / -OIgM / IgG 抗體HIV-1 / -2 / -O病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1 / -2 / -O第四代病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1 / -2 / -Oanti-p24 AbIgM / IgG 抗體HIV-1 / -2 / -Op24 抗原病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1 / -2 / -Oa
7、nti-p24 抗體第三十五張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月檢測結(jié)果的報告和處理陰性反應(yīng)出具HIV抗體陰性報告,如果近期有高危行為,如性亂、注射毒品等,或有急性流感樣癥狀等情況,為排除“窗口期”的可能,可以進行HIV-1 P24抗原或HIV核酸檢測,或23個月以后再做抗體檢測。篩查實驗呈陽性發(fā)現(xiàn)反應(yīng),可出具“HIV抗體待復(fù)查”的報告,不能出陽性報告。第三十六張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月樣本初篩檢測一陰一陽均陽性反應(yīng)陰性報告送確認(rèn)重復(fù)檢測陰性報告均陰性反應(yīng)陽性反應(yīng)原有試劑另一種原理初篩試劑選用初篩試劑陰性反應(yīng)HIV抗體初篩檢測流程圖第三十七張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于20
8、22年6月快速診斷試劑:采用乳膠凝集、免疫斑點和免疫層析三種原理快速、不需特殊儀器敏感度、特異度低于ELISA,且價格貴適用于血站覆蓋不到的邊遠地區(qū)/城市大醫(yī)院急診手術(shù)前檢查快速診斷陽性結(jié)果還需經(jīng)ELISA方法驗證第三十八張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月HIV抗體確認(rèn)常用的確認(rèn)實驗方法是免疫印跡法(WB)。免疫印跡試劑有HIV-1/2混合型和單一型。一般先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測第三十九張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月蛋白印跡實驗(WB)廣泛使用的確認(rèn)實驗用聚丙烯酰胺凝膠電泳將純化的HIV蛋白抗原分開后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上。標(biāo)本中存在的HIV抗體與條帶上的抗原結(jié)合,
9、再加入酶偶聯(lián)的抗人IgG抗體和底物,在抗原抗體結(jié)合的部位會出現(xiàn)有色條帶其可檢測標(biāo)本中針對HIV不同抗原的抗體,故被用做確認(rèn)試劑。不同的研究機構(gòu)有不同的判定標(biāo)準(zhǔn)第四十張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月HIV抗體確認(rèn)檢測流程圖免疫印跡法(HIV1/2混合型)HIV-1陽性反應(yīng)可疑反應(yīng)出現(xiàn)HIV-2指帶HIV-1陽性報告可疑反應(yīng)陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)報告HIV-2血清學(xué)陽性反應(yīng)報告必要時測核酸陰性報告免疫印跡法(HIV-2)每3個月隨訪一次,共2次,仍屬可疑,則作陰性報告如隨訪期間出現(xiàn)陽性反應(yīng)則報告陽性陰性反應(yīng)陰性報告第四十一張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月 P24抗原測定(一)適用范圍
10、HIV-1抗體不確定或窗口期的輔助診斷。HIV-1陽性母親所生嬰兒的鑒別診斷。第四代HIV-1抗原/抗體ELISA試劑檢測呈陽性反應(yīng), 但HIV-1抗體確認(rèn)陰性者的診斷。監(jiān)測病程進展和抗病毒治療效果。第四十二張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月(三)結(jié)果報告和解釋1、HIV-1 P24抗原的陽性結(jié)果必須經(jīng)過中和試驗確認(rèn)。2、HIV-1 P24抗原陽性僅作為HIV感染的輔助診斷依據(jù),不能依此確診。3、HIV-1 P24抗原陰性結(jié)果只表示在本試驗中無反應(yīng),不能排除HIV感染。第四十三張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月HIV核酸檢測第四十四張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月第四
11、十五張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月 PCR對與縮短窗口期病毒抗體試驗PCR縮短HCV82天23天72HBV59天34天41HIV22天11天50第四十六張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月1、輔助診斷某些非典型的抗體反應(yīng),特別是不確定反應(yīng)時,RNA的測定可提供非常有用的證據(jù)。單純使用RNA測定不能完全確定感染與否,但當(dāng)RNA測定出現(xiàn)較高拷貝數(shù)的陽性結(jié)果時(1000)提示感染發(fā)生的可能性非常大。使用此指標(biāo)應(yīng)綜合其他檢測數(shù)據(jù)和樣品背景情況進行綜合分析與判斷。 第四十七張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2、窗口期輔助診斷在窗口期抗原峰出現(xiàn)前后通常出現(xiàn)一個病毒載量的高峰,通常
12、此高峰高于發(fā)病時的血漿病毒水平,早期病毒RNA測定具有特殊的意義。目前國際上正在嘗試使用這種檢測對采供血樣品進行多個樣品混合后的RNA檢測以降低窗口期傳播的殘余危險度。第四十八張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月3、病程監(jiān)控由于HIV感染發(fā)生后病毒載量的變化具有一定規(guī)律,并且這種變化與疾病的進程有著密切的相關(guān)性。通常在感染后無癥狀期內(nèi)發(fā)生的臨床癥狀很難與AIDS發(fā)病時的癥狀區(qū)別,病毒載量測定可以幫助醫(yī)生判斷一個剛發(fā)生的癥狀是否與HIV感染有關(guān)。第四十九張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月4、指導(dǎo)治療方案及療效測定并非在任何情況下感染者都應(yīng)該進行抗病毒治療,這不但是經(jīng)濟上的原因,更重
13、要的是在于抗病毒藥物的副作用和療效。通常在病毒載量達到一定水平后(如35000-50000拷貝/毫升)才具有良好的效果。只有通過治療后病毒水平的檢測才能確定治療是否有效,通常治療后病毒水平降低50%才被認(rèn)為臨床有效。第五十張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月艾滋病免疫指標(biāo)的檢測第五十一張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月隨著政府加速對國產(chǎn)抗艾滋病藥物上市的批準(zhǔn),我國艾滋病人的治療已經(jīng)出現(xiàn)了曙光。艾滋病臨床治療中各種免疫指標(biāo)(CD4+、CD8+T細(xì)胞 等)對于確定感染狀態(tài)、預(yù)測發(fā)病、評價藥物療效及新藥開發(fā)具有重要的作用。 第五十二張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月CD4 T淋
14、巴細(xì)胞:(流式細(xì)胞術(shù))CD4 T細(xì)胞是HIV的主要靶細(xì)胞,感染后隨著病程進展,CD4 T細(xì)胞不斷下降 500/mm3有臨床診斷意義 200/mm3AIDS病程進展, AIDS診斷和療效觀察的指標(biāo)第五十三張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月HIV感染幾周內(nèi),出現(xiàn)類流感癥狀,也稱為血清陽轉(zhuǎn)期, CD4細(xì)胞的數(shù)量降低。隨之出現(xiàn)的免疫應(yīng)答可以控制急性癥狀,恢復(fù)CD4細(xì)胞的數(shù)量,但并不能清除病毒。隨著CD4細(xì)胞不斷下降,當(dāng)降至500/ul左右時,開始出現(xiàn)機會性感染或其它疾病,進入癥狀期。當(dāng)CD4低于200/ul時,即進入艾滋病期。第五十四張,PPT共六十一頁,創(chuàng)作于2022年6月CD4+T淋巴細(xì)胞小于350/ul(結(jié)合病毒載量,確定治療時機)有效治療8周后CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量增加50/ulHAART無效CD4+T細(xì)胞數(shù)量
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