第九章 體內(nèi)藥物分析2010課件

1、第九章 體內(nèi)藥物分析2010課件體內(nèi)藥物分析的性質(zhì)和意義體內(nèi)藥物分析的對象與特點(diǎn)體內(nèi)藥物分析的常用方法體內(nèi)藥物分析方法的建立與步驟舉例說明主要內(nèi)容2022/7/192 一、體內(nèi)藥物分析的性質(zhì) 體內(nèi)藥物分析也稱體液藥物分析、生物藥物分析，是一門新興學(xué)科。旨在通過各種分析手段，了解藥物在體內(nèi)的數(shù)量與質(zhì)量變化，獲得藥物動(dòng)力學(xué)的各種參數(shù)、藥物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化、代謝方式和途徑等信息。從藥品生產(chǎn)、臨床醫(yī)療、實(shí)驗(yàn)研究等方面對所研究藥物作出估計(jì)和評價(jià)。 2022/7/193二、體內(nèi)藥物分析的意義2.1 在新藥評價(jià)和新藥開發(fā)中的意義藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究隨著醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展，人們已認(rèn)識到要達(dá)到臨床安全、有效、

2、合理用藥，不僅要從管理、生產(chǎn)、應(yīng)用等各環(huán)節(jié)對藥品進(jìn)行全面質(zhì)量管理，而且還需進(jìn)行臨床藥理學(xué)和臨床藥學(xué)的研究，給新藥一個(gè)確切的評價(jià)。2022/7/194通過分析人體或動(dòng)物體內(nèi)藥物及其代謝物的濃度及經(jīng)時(shí)變化，經(jīng)數(shù)學(xué)處理，求出各種動(dòng)力學(xué)參數(shù)，定量地說明體內(nèi)藥物濃度與生物效應(yīng)、臨床療效的關(guān)系，闡明藥物結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、劑型、生產(chǎn)工藝與療效、血液濃度、藥理作用、生物轉(zhuǎn)化等關(guān)系，了解藥物代謝途徑、作用機(jī)理等。2022/7/195新藥的研發(fā)過程2022/7/196各期臨床試驗(yàn)基本要求分期研究內(nèi)容受試者試驗(yàn)例數(shù)與要求備注I耐受性試驗(yàn)、藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)健康志愿者（必要時(shí)為患者）2030例初步人體安全性試驗(yàn)II多中心臨

3、床試驗(yàn)患者100對治療作用初步探索階段III擴(kuò)大的多中心臨床試驗(yàn)患者試驗(yàn)組 300例治療作用確證階段IV上市后監(jiān)測患者開放實(shí)驗(yàn)2000例大范圍的不良反應(yīng)觀察2022/7/197代謝物研究-為設(shè)計(jì)和發(fā)現(xiàn)新藥提供信息部分藥物生物轉(zhuǎn)化后的代謝產(chǎn)物較原型藥物活性更高，故可利用藥物代謝的知識來設(shè)計(jì)新藥或?qū)υ退幬镞M(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，從而產(chǎn)生新的作用特點(diǎn)的藥物。例：保泰松2022/7/1982022/7/199排泄快，作用不持久，但其雙萘水楊酸鹽具長效作用。活性代謝物瘧疾預(yù)防藥2022/7/19102022/7/19112022/7/1912生物前體 活性產(chǎn)物2022/7/1913生物前體 活性產(chǎn)物2022/7

4、/1914生物前體 活性產(chǎn)物2022/7/1915對藥物及其制劑的體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究，也是設(shè)計(jì)新劑型的基礎(chǔ)，如各種緩釋劑、腸溶劑、微囊劑、控釋劑等。要開展以上研究工作，首先要解決的問題是體內(nèi)微量藥物及其代謝物的分離分析方法。2022/7/19162.2 在臨床合理用藥中的意義當(dāng)藥物進(jìn)入體內(nèi)后，借助血液分布到作用部位或受體部位，當(dāng)血藥濃度達(dá)到一定水平時(shí)產(chǎn)生相應(yīng)的藥理效應(yīng)。藥物的療效和毒性往往與血藥濃度相關(guān)2022/7/1917研究證明許多藥物的療效和毒性與血藥濃度有關(guān)。例如水楊酸血濃與療效密切相關(guān)：50-100mg/L 鎮(zhèn)痛 250mg/L 抗風(fēng)濕350-400mg/L 抗炎 550mg/L 中

5、毒1600-1800mg/L 致死因此血藥濃度在擬定給藥方案上有重要意義。2022/7/1918不同種屬的動(dòng)物，血藥濃度相同，有相似的藥理效應(yīng)，有些藥物雖然有效劑量種屬間差別很大，但有效血藥濃度非常接近，如保泰松： 人 兔有效劑量 5-10mg /kg 300mg/kg血藥濃度 100-150mg/L左右同種屬個(gè)體欲獲得相近血藥濃度，劑量相差數(shù)十倍，存在著“化學(xué)上等價(jià)而生物學(xué)上不等價(jià)”的問題。2022/7/1919服藥天數(shù)10 145100200300血漿中藥物濃度去甲丙咪嗪血藥濃度個(gè)體差異9人1人1人2022/7/19202.3 治療藥物監(jiān)測 （ TDM ） 具有明確治療范圍，血藥濃度與藥效

6、關(guān)系密切，并具下列情況者，要求進(jìn)行TDM：有效血藥濃度范圍窄，劑量小，毒性大個(gè)體差異大，藥理作用強(qiáng)，不易估計(jì)給藥后血藥濃度毒性反應(yīng)與疾病癥狀相似，難以判斷是毒性反應(yīng)還是劑量不足聯(lián)合用藥時(shí)因相互作用產(chǎn)生不良反應(yīng)，需調(diào)整劑量短期內(nèi)難于判斷療效的藥物2022/7/1921苯妥英，苯巴比妥，茶堿，地高辛，奎尼丁，丙咪嗪，阿米卡星，慶大霉素等要求進(jìn)行TDM。例2：苯妥英用量與血藥濃度呈非線性動(dòng)力學(xué)關(guān)系。低濃度時(shí)微一級動(dòng)力學(xué)消除，高劑量時(shí)（超過肝藥酶的代謝能力）以零級動(dòng)力學(xué)消除，半衰期明顯延長，此時(shí)劑量稍有增加就會(huì)導(dǎo)致血藥濃度增加，出現(xiàn)中毒現(xiàn)象。與其他藥物合用易產(chǎn)生相互作用。因?yàn)椋捍x酶系統(tǒng)的飽和性質(zhì)，尤

7、其是乙?；x慢型者，苯妥英與血漿蛋白結(jié)合率高。2022/7/1922案例分析（一） 16歲，40kg，男。4月前首次出現(xiàn)癲癇大發(fā)作，服苯妥英鈉g/d。近1周來患者表現(xiàn)精神不振，懶言少語，問之不答，納差，頭暈等癥狀，入院治療，查苯妥英鈉血藥濃度g/mL（有效濃度范圍1020g/mL），停藥5天后再查血藥濃度降至g/mL，此時(shí)患者精神明顯較前好轉(zhuǎn)，能對話。出院后改服苯妥英鈉劑量g/d，1月后復(fù)診，患者精神良好，無發(fā)作，查血藥濃度為g/mL。 2022/7/1923案例分析（二） 81歲，52kg，男。近10年癲癇病史，服苯妥英鈉g/d，早晚分服，2月前大發(fā)作入院治療，查苯妥英鈉血藥濃度g/mL，

8、使用安定等藥物對癥治療后，癥狀得到控制，繼續(xù)服用苯妥英鈉，利用列線圖法調(diào)整劑量g/d，估算濃度為15g/mL，1月后實(shí)測濃度為g/mL，患者出院。 2022/7/1924案例分析（三） 25 歲，43 kg，女性。癲癇強(qiáng)直陣攣發(fā)作，醫(yī)生給予負(fù)荷劑量靜脈注射苯妥英鈉800 mg 和開始口服維持劑量250 mg/d，達(dá)穩(wěn)后測得苯妥英的總血藥濃度是26.5 mol/L (治療濃度范圍是4080 mol/L), 醫(yī)生見還沒達(dá)到治療濃度范圍，就給患者升高劑量到400 mg/d?；颊叱霈F(xiàn)了兩側(cè)肢體痙攣類似癲癇發(fā)作的癥狀。醫(yī)生依據(jù)患者新的血藥濃度在治療濃度范圍的低端（ 43.6 mol/L ），打算進(jìn)一步升

9、高苯妥英鈉的劑量。臨床藥師查得病人的白蛋白為 2.0 g/L（正常范圍 3448 g/L），知道她有低蛋白血癥，且非常的低，于是推薦檢測患者的游離苯妥英濃度。結(jié)果是19.6 mol/L (游離苯妥英治療濃度范圍是48 mol/L), 因此說服醫(yī)生降低口服苯妥英的劑量到250 mg/d。其后，患者苯妥英中毒癥狀消失，也沒有癲癇發(fā)作的活動(dòng)。 2022/7/1925案例分析（四） 45 歲，60 kg，男性。診斷為支氣管肺癌，原發(fā)性、中央型、左肺、低分化，已行3次化療。入院后患者持續(xù)高熱，體溫達(dá)39.2。血培養(yǎng)結(jié)果為金黃色葡萄球菌，給予萬古霉素，0.5 g，q8h，靜脈滴注。用藥后監(jiān)測萬古霉素血藥濃

10、度，血藥濃度結(jié)果顯示谷濃度3.3 g/mL（有效濃度范圍515g/mL），峰濃度15.3 g/mL（有效濃度范圍2540 g/mL）。藥師根據(jù)血藥濃度結(jié)果建議加大用量，將用法改為0.5 g，q6h，靜脈滴注60 min。再次監(jiān)測血藥濃度，結(jié)果顯示谷濃度10.3 g/mL，峰濃度30.3 g/mL。4 天后患者體溫恢復(fù)正常，感染得到控制。2022/7/1926案例分析（五） 75 歲，45 kg，男性。診斷為重癥肺炎，入院后痰培養(yǎng)顯示為MRSA。該病人的肌酐（Cr）高達(dá)738 mol/L，臨床醫(yī)生考慮到萬古霉素有較強(qiáng)的腎毒性而不敢使用。藥師認(rèn)為該病人雖腎功能受損，血中藥物濃度的半衰期延長，但只要

11、對其用藥量加以修正，還是可以使用的。由Cr738 mol/L，得肌酐清除率（Ccr） 5 mLmin-1kg-1，相應(yīng)計(jì)算出萬古霉素的給藥量為1.5 mgkg-1d-1。又考慮到萬古霉素的血清蛋白結(jié)合率為，而該病人每周需進(jìn)行血液透析會(huì)影響藥物吸收。因此，藥師建議萬古霉素的用法為每周0.5 g，靜脈滴注60 min，于透析后使用。經(jīng)臨床醫(yī)生采納，治療后患者感染得到控制，病情好轉(zhuǎn)。2022/7/1927案例分析（六） 46歲，70kg，男。臨床診斷：擴(kuò)張型心肌病、心臟移植術(shù)后，采用環(huán)孢素膠囊(新賽斯平，CsA )+硫唑嘌呤+甲潑尼龍的三聯(lián)免疫抑制方案抗排異反應(yīng)。初始劑量CsA 125 mg，po，

12、bid，達(dá)穩(wěn)態(tài)濃度后測定全血中CsA濃度，谷濃度Cmin 96.40 ng/mL；調(diào)整劑量為150 mg，po，bid，1周后再次測定谷濃度Cmin 190.09 ng/mL;維持上述給藥劑量, 每隔35d測定一次谷濃度Cmin 依次為，216.42 ng/mL。2022/7/1928案例分析（七） 75歲，65kg，男。診斷支氣管哮喘，氨茶堿為100mg, q8h。患者測谷濃度為19.30 g/mL。臨床表現(xiàn)為惡心、嘔吐，測峰濃度為29.66 g/mL，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了安全范圍，查閱病歷，患者由于痛風(fēng)發(fā)作同時(shí)口服別嘌呤醇g，tid，于是調(diào)整用藥方案改氨茶堿為50mg, q8h。三天后復(fù)查，峰值16

13、.42 g/mL，谷值15.37 g/mL，癥狀控制良好，別嘌呤醇抑制黃嘌呤氧化酶的活性（氨茶堿等黃嘌呤類藥物體內(nèi)代謝的酶），致使茶堿清除率降低，引起茶堿血濃度升高。2022/7/1929醉酒駕駛、藥物濫用、吸毒、運(yùn)動(dòng)員興奮劑、法醫(yī)毒物分析等領(lǐng)域均需運(yùn)用體內(nèi)藥物分析技術(shù)2022/7/1930藥代動(dòng)力學(xué)研究涉及藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄等過程，研究藥濃-時(shí)間曲線的變化。樣品中藥物濃度高、低差別大，要求分析方法必須具有足夠的靈敏度和選擇性。例3：司帕沙星人體藥動(dòng)學(xué)與生物利用度研究。色譜條件選擇、樣品處理、方法學(xué)研究、血樣測定、計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，比較有無顯著性差異。2022/7/1931司帕沙

14、星藥動(dòng)學(xué)參數(shù)（n=10）參 數(shù) 國產(chǎn)片x s進(jìn)口片x sT/lag0.280.100.190.16V/F0.220.050.200.02t1/2()3.732.912.270.85t1/2()26.61.5925.62.94t1/2(K)0.930.300.830.20AUC23.72.1123.93.18Tmax3.130.542.840.56Cmax0.700.050.730.052022/7/1932代謝分型研究例4：CYP2D6酶代謝活性分型測定右美沙芬（DM）在人體內(nèi)經(jīng)CYP2D6酶催化，氧化代謝成3-羥基-N-甲基-嗎喃（DT），可作為探針?biāo)幬铮瑴y定受試者尿中DM和DT的含量，求得

15、代謝比（MR）：MR= （DM濃度/ DTMR為慢代謝(PM) ；MR為快代謝(EM)。2022/7/19332022/7/1934體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)的測定體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)如氨基酸、激素、肌酐、兒茶酚胺、草酸、尿酸等在機(jī)體正常生理?xiàng)l件下均處在一定的濃度范圍內(nèi)，當(dāng)這些物質(zhì)在體內(nèi)的含量發(fā)生明顯變化或出現(xiàn)異常時(shí)，指示機(jī)體發(fā)生了病變。測定這些物質(zhì)的含量對疾病的診斷或預(yù)防具有重要意義。例5血清中苯丙氨酸的含量測定苯丙氨酸是人體必需氨基酸，體內(nèi)不能合成，主要由膳食供給，其在體內(nèi)用于合成蛋白質(zhì)，其主要代謝產(chǎn)物為酪氨酸，少部分氧化代謝成苯丙酮酸：2022/7/1935苯丙氨酸酪氨酸苯丙酮酸苯丙氨酸羥化酶 若先天缺陷苯丙氨酸羥化酶，血中積存過量的苯丙氨酸，經(jīng)轉(zhuǎn)氨酶作用代謝成苯丙酮酸，患者血和尿中苯丙酮酸含量升高，腎上腺素含量下降，表現(xiàn)為皮膚、毛發(fā)色淺，智力停留在兒童水平，稱為苯丙酮尿癥。臨床測定血中苯丙氨酸的水平，以確診苯丙酮尿癥。轉(zhuǎn)氨酶2022/7/1936例6 尿中肌酐的測定 肌酐是由肌酸脫去1分子水縮合而成的環(huán)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)，通過腎臟排出體外，測定尿或血中肌酐可評價(jià)腎功能好壞，尿中肌酐含量降低或血中肌酐含量升高表示腎功能下降。 肌酐的測定可采用苦味酸鈉比色法或HPLC法。2022/7/1937體內(nèi)藥物分析的對象體內(nèi)包括人體和動(dòng)物