
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文檔簡(jiǎn)介
1、植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)材料一、名詞解釋1植物組織培養(yǎng)(planttissueculture):植物地離體器官、組織或細(xì)胞在人工制備地培養(yǎng)基上進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng),并在人工控制地環(huán)境條件下,使其發(fā)育成完整植株地科學(xué)技術(shù)2、脫分化(dedifferentiation):指失去分裂能力地細(xì)胞回復(fù)到分生性狀態(tài)并進(jìn)行分裂,形成無(wú)分化地細(xì)胞即愈傷組織地現(xiàn)象3、再分化(redifferentiation):愈傷組織形成不定芽或不定根或胚狀體4、外植體(explant):植物組織培養(yǎng)過(guò)程中從活體植株上切去下來(lái)地用于離體培養(yǎng)地一切材料.(如器官、組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體、種子等)5、愈傷組織(callus):原本指植物在受傷后于
2、其傷口表面形成地一團(tuán)薄壁細(xì)胞.在組培中,則指人工培養(yǎng)基上由外植體形成地一團(tuán)無(wú)序生長(zhǎng)地薄壁細(xì)胞.6、器官發(fā)生:胚胎時(shí)期由胚層器官原基發(fā)育成器官地過(guò)程.包括細(xì)胞分化和器官形成.7、胚狀體發(fā)生:在植物細(xì)胞、組織或器官體外培養(yǎng)過(guò)程中,由一個(gè)或一些體細(xì)胞經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生和發(fā)育過(guò)程,形成地與合子胚相類似地結(jié)構(gòu).可進(jìn)一步發(fā)育成植株.8、細(xì)胞全能性(celltotipotency):指植物地每一個(gè)細(xì)胞都攜帶有一完整地基因組,并具有發(fā)育成完整植株地潛在能力9、細(xì)胞分化:一個(gè)尚未特化地細(xì)胞發(fā)育出特征性結(jié)構(gòu)和功能地過(guò)程10、極性:細(xì)胞(也可指器官或植株)內(nèi)地一端與另一端在形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理生化上地差異.11、試管苗:通過(guò)組
3、織培養(yǎng)產(chǎn)生地植株.12、看護(hù)培養(yǎng):是指用一塊活躍生長(zhǎng)地愈傷組織來(lái)看護(hù)單個(gè)細(xì)胞,使其持續(xù)分裂和增殖地一種培養(yǎng)方法.這塊愈傷組織被稱為看護(hù)組織.13、固相化培養(yǎng):將細(xì)胞或原生質(zhì)體固著在瓊脂糖、藻(月元)酸鹽或多聚賴氨酸中,然后將他們放入液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng).這種培養(yǎng)方法既利用了振蕩培養(yǎng)室營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氣體易于交換地優(yōu)點(diǎn),有利用了固相化使細(xì)胞免受振蕩時(shí)剪切力地作用.14、懸浮細(xì)胞培養(yǎng):將單個(gè)游離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增值地技術(shù).適用于大規(guī)模地培養(yǎng),使細(xì)胞工程地基本平臺(tái).15、植板效率=(每個(gè)平板中新形成地細(xì)胞團(tuán)數(shù)/每個(gè)平板中接種地細(xì)胞數(shù))*10016、實(shí)驗(yàn)室地組成及功能:1.基本實(shí)驗(yàn)室(1
4、)準(zhǔn)備室(2)接種室(3)培養(yǎng)室輔助實(shí)驗(yàn)室(1)細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室(2)攝影室及暗室(3)生化分析室(無(wú)菌操作室、化學(xué)實(shí)驗(yàn)室、培養(yǎng)室、細(xì)胞學(xué)觀察室、暗室)17、植物種質(zhì):物親代通過(guò)生殖細(xì)胞或體細(xì)胞傳遞給后代地遺傳物質(zhì),植物種質(zhì)資源即為攜帶各種不同遺傳物質(zhì)地植物總稱.18、玻璃化現(xiàn)象:指試管苗地一種生長(zhǎng)失調(diào)癥狀,當(dāng)植物材料進(jìn)行離體繁殖時(shí),有些培養(yǎng)物地嫩莖、葉片往往會(huì)出現(xiàn)半透明狀和水漬狀,這種現(xiàn)象稱為玻璃化.其苗稱為玻璃化苗.19、基本培養(yǎng)基:包括大量元素和微量元素(無(wú)機(jī)鹽類)、維生素和氨基酸,還有糖和水等.20、完全培養(yǎng)基:在基本培養(yǎng)基基礎(chǔ)上,根據(jù)各種不同試驗(yàn)要求,添加各種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)以及其他復(fù)雜
5、有機(jī)附加物,包括有些成分尚不完全清楚地天然提取物.21、外植體褐變:在組織培養(yǎng)過(guò)程中,外植體向培養(yǎng)基中釋放褐色地物質(zhì)(醌類)致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色,培養(yǎng)材料也隨之變成褐色而逐漸死亡地現(xiàn)象22、微體快繁:利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行地一種營(yíng)養(yǎng)繁殖方法.23、微體嫁接:把極?。ㄐ∮?.2mm地莖尖作為接穗嫁接到實(shí)生木上,然后將嫁接后地砧木接種到新培養(yǎng)基上培養(yǎng).24、敏感植物:有些植物對(duì)病毒極為敏感,一旦感染病毒就會(huì)在其葉片乃至全株上表現(xiàn)特殊地病斑,如馬鈴薯病毒一千日紅、黃煙花、心煙葉、毛葉蔓陀羅.菊花病毒一矮牽牛.25、固相化地方法:凝膠包埋、表面吸附、網(wǎng)格及泡沫固定、膜固定.26、懸浮細(xì)胞培養(yǎng):將單
6、個(gè)游離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增殖地技術(shù).27、固相化細(xì)胞培養(yǎng):把細(xì)胞固定在一種惰性基質(zhì),如瓊脂、藻鹽酸、聚丙烯酰胺、纖維或膜上面或里面,細(xì)胞不能運(yùn)動(dòng),而營(yíng)養(yǎng)液可以在細(xì)胞間流動(dòng),供應(yīng)其營(yíng)養(yǎng).28、條件培養(yǎng):在選用地培養(yǎng)基中,加入一定量以生長(zhǎng)過(guò)組織或細(xì)胞地培養(yǎng)液(離心去除組織或細(xì)胞)稱條件培養(yǎng)液.用條件培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞,即使接種地細(xì)胞密度低于最低有效密度,這些細(xì)胞也能生長(zhǎng)和分裂.30、再分化培養(yǎng):31、液體培養(yǎng):指在進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中不加瓊脂等凝固劑,一般需要通過(guò)振蕩等方法解決培養(yǎng)基地通氣情況.32、細(xì)胞培養(yǎng):指從植物體中分離了單細(xì)胞,無(wú)人工條件下進(jìn)行培養(yǎng),使其生長(zhǎng)增殖,甚至發(fā)育成完
7、整植株地技術(shù).33、無(wú)病毒苗:指不含該種植物主要危害病毒地苗木.34、原生質(zhì)體融合:指使分離下來(lái)地不同親本地原生質(zhì)體,在人工控制地條件下,像性細(xì)胞受精作用那樣互相融合成一體,又稱體細(xì)胞雜交.35、胚狀體:體細(xì)胞在一定條件下所誘導(dǎo)形成地胚稱為體細(xì)胞胚,即胚狀體36、原生質(zhì)體:指去掉細(xì)胞壁地由質(zhì)膜包裹有生命活力地裸細(xì)胞37、單倍體植株:只含有配子體染色體組數(shù)地植株.38人工種子:指通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù),將植物地體細(xì)胞誘導(dǎo)在形態(tài)上和生理上均與合子胚相似地體細(xì)胞胚,然后將它包埋于有一定營(yíng)養(yǎng)成分和保護(hù)功能地介質(zhì)中,組成便于播種地類似種子地單位.39、離體授粉:將未授粉地胚珠或子房從母體上分離下來(lái),進(jìn)行無(wú)菌培
8、養(yǎng),并以一定地方式授以無(wú)菌花粉,使之在試管內(nèi)實(shí)現(xiàn)受精地技術(shù),又稱為離體受精或試管受精40、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑:植物中調(diào)節(jié)生長(zhǎng)及其他功能地激素類物質(zhì).主要分為三類:植物生長(zhǎng)素類、細(xì)胞分裂素類和赤霉素類TOCo1-5hz41、器官培養(yǎng):指植物地根、莖、葉、花器和幼小果實(shí)地?zé)o菌培養(yǎng).42、植物胚胎培養(yǎng):指對(duì)植物地胚、胚胎、胚珠和子房地培養(yǎng).二、不定項(xiàng)選擇(每題2分,共10分)1、下列不屬于生長(zhǎng)素類地植物激素是_AD.AKt;BIAA;CNAA;DZT2、影響培養(yǎng)基凝固程度因素有_ABCD.A瓊脂地質(zhì)量好壞;B高壓滅菌地時(shí)間;C高壓滅菌地溫度;D培養(yǎng)基地PHTOCo1-5hz3、第一次提出植物細(xì)胞具有全能
9、性地理論概念地科學(xué)家是:BAMorel;BHaberland;CSchleiden;DWhite4、下列不屬于大量元素地鹽是C.ANH4NO3;BKNO3;CZnSO4.7HO2;DMgSO4.7HO25、下列實(shí)驗(yàn)中可能獲得單倍體植株地是BCD.A小麥地莖尖培養(yǎng);B番茄花藥培養(yǎng);C玉米胚乳培養(yǎng);D玉米花粉培養(yǎng)6、活性炭在組織培養(yǎng)中地作用有ABC.A吸附有毒物質(zhì);B減少褐變,防止玻璃化;C創(chuàng)造黑暗環(huán)境,增加培養(yǎng)基地通透性利于根地生長(zhǎng);D增加培養(yǎng)基中地養(yǎng)分7、下列具有細(xì)胞全能性地細(xì)胞是:_ABCDA成熟地老細(xì)胞;B幼嫩地組織細(xì)胞;C愈傷組織細(xì)胞D番茄地受精合子8、下列培養(yǎng)基中C無(wú)機(jī)鹽地濃度最低.A
10、MS培養(yǎng)基;BB培養(yǎng)基;CWhite培養(yǎng)基;DN6培養(yǎng)基9、從單個(gè)細(xì)胞或一塊外植體形成典型地愈傷組織,大致經(jīng)歷ACD_2個(gè)時(shí)期A誘導(dǎo)期;B潛伏期;C分化期;D分裂期10、植物組織培養(yǎng)地特點(diǎn)是_ABCD_:A培養(yǎng)條件可人為控制;B生長(zhǎng)周期短,繁殖率高;C管理方便;D取材少11、高溫易被破壞分解地植物激素是ABD_.AIAA;BGA;CNAA;DZt12、同一植株下列B_部位病毒地含量最低A葉片細(xì)胞;B莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞;C莖節(jié)細(xì)胞;D根尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞13、在原生質(zhì)體地培養(yǎng)中,滲透穩(wěn)定劑地作用是-A-:A穩(wěn)定原生質(zhì)體地形態(tài)而不使其被破壞B支持作用C提供營(yíng)養(yǎng)D調(diào)節(jié)PH值14、下列實(shí)驗(yàn)中不可能獲得單倍體植株
11、地是ACA水稻莖尖培養(yǎng);B草莓花藥培養(yǎng);C玉米葉片培養(yǎng);D棉花胚乳培養(yǎng)15、適合花粉培養(yǎng)地最適時(shí)期是-B-:A單核早期B單核靠邊期C二核期D三核期16、IAA需要用_C法滅菌A灼燒滅菌;B干熱滅菌;C過(guò)濾滅菌D高壓濕熱滅菌17、能打破種子休眠,促進(jìn)種子、塊莖、鱗莖等提前萌發(fā)地激素是-AB-:AGA;BIAA;CNAA;DZT18、下列實(shí)驗(yàn)中可能獲得單倍體植株地是_BCDA小麥地莖尖培養(yǎng);B番茄花藥培養(yǎng);C玉米胚乳培養(yǎng);D玉米花粉培養(yǎng)19、下面屬于處于愈傷組織分裂期地特征是_ABCDA細(xì)胞分裂加快B正在分裂地細(xì)胞體積小,內(nèi)無(wú)液泡C細(xì)胞地核和核仁增至最大D細(xì)胞中地RNA含量減少,而DNA含量保持不
12、變20、赤霉素(GA)需要用C法滅菌A灼燒滅菌;B干熱滅菌;C過(guò)濾滅菌D高壓濕熱滅菌TOCo1-5hz21、第一次提出植物細(xì)胞具有全能性地理論概念地科學(xué)家是_B:AMorel;BHaberland;CSchleiden;DWhite22下列那種方法不能脫除感染植株體內(nèi)地病毒AC莖段培養(yǎng);微莖尖培養(yǎng);愈傷組織地繼代培養(yǎng);珠心胚培養(yǎng)23.適合外植體材料表面消毒地方法是B紫外線消毒;熏蒸消毒不能確定高壓蒸汽;適宜濃度地消毒劑浸泡;24、經(jīng)咼溫火菌后.培養(yǎng)基地pH會(huì)AA降低B升高C不變D25、在植物組織培養(yǎng)中,培養(yǎng)基地PH值一般為BA低于7.0D高于7.026、下列有關(guān)細(xì)胞全能性地含義,正確地是CA每
13、個(gè)生物體內(nèi)地所有細(xì)胞都具有相同地功能B生物體內(nèi)地任何一個(gè)細(xì)胞可以完成該個(gè)體地全部功能C生物體地每一個(gè)活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個(gè)體地潛能D生物體地每個(gè)細(xì)胞都經(jīng)過(guò)產(chǎn)生、分裂、分化、生長(zhǎng)、衰老、死亡地全過(guò)程27、下列那種方法不能脫除感染植株體內(nèi)地病毒(AC)A莖段培養(yǎng);B微莖尖培養(yǎng).C愈傷組織地繼代培養(yǎng);D珠心胚培養(yǎng).28、下列不屬于生長(zhǎng)素類地植物激素是_A.A6-BA;BIAA;CNAA;DIBA三、填空題(每空1分,共20分)1、去除植物病毒地主要方法是_組培法和_理化法兩種方法,當(dāng)把二者結(jié)合起來(lái)脫毒效果最好2、原生質(zhì)體地融合可實(shí)現(xiàn)體細(xì)胞地雜交,其融合地方式分為_(kāi)自然融合和一人工誘導(dǎo)融合_兩類3、
14、在組織培養(yǎng)中,非洲菊是靠_叢生芽_地方式進(jìn)行繁殖地,而蝴蝶蘭是以原球莖增殖_地方式進(jìn)行快繁地4、單細(xì)胞培養(yǎng)地方法主要有-看護(hù)培養(yǎng)-、-微室培養(yǎng)-及-平板培養(yǎng)-.5、在通過(guò)微莖尖培養(yǎng)脫毒時(shí),外植體地大小應(yīng)以成苗率和脫毒率綜合確定,一般以_0.30.5_mm、帶_12個(gè)葉原基為好.6、植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)過(guò)程中是否需要光,可分為光_培養(yǎng)和暗培養(yǎng).7、細(xì)胞地再分化有-器官發(fā)生-和-體胚發(fā)生-兩種形式.8、連續(xù)培養(yǎng)有-濁度恒定法-和-化學(xué)恒定法-兩種方法.9、通過(guò)莖尖培養(yǎng)脫毒苗地過(guò)程中,切取莖尖地大小與其成活率成正比_,而與脫毒效果成_反比_.10、一個(gè)已停止分裂地成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài),并形成未分化
15、地愈傷組織地現(xiàn)象稱為”脫分化.11、植物地胚胎培養(yǎng),包括胚_(dá)培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng)以及離體授粉地12、在組織培養(yǎng)中,!AA、ZT和GA必須用過(guò)濾滅菌法滅菌,而接種室空間采用紫外線照射或甲醛熏蒸法滅菌13、幼胚培養(yǎng)時(shí),其發(fā)育過(guò)程有早熟萌發(fā)_、_呸性發(fā)育、形成愈傷三種方式.14、原生質(zhì)體地分離有機(jī)械法和_酶降解法兩種方法15、莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目地和取材大小可分為_(kāi)普通莖尖培養(yǎng)培養(yǎng)和莖尖分生組織_培養(yǎng)兩種類型16、花藥培養(yǎng)是器官_培養(yǎng),花粉培養(yǎng)屬于細(xì)胞_培養(yǎng),但二者地培養(yǎng)目地一樣,都是要誘導(dǎo)花粉細(xì)胞發(fā)育成單倍體細(xì)胞,最后發(fā)育成單倍體植株_.17、不同地滅菌劑其滅菌地機(jī)理一般不一樣,次氯酸
16、鈣和次氯酸鈉都是利用分解產(chǎn)生CIO-來(lái)殺菌地;升汞是靠_重金屬來(lái)達(dá)到滅菌目地.18、一個(gè)已停止分裂地成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)開(kāi)分生狀態(tài),并形成_未分化地愈傷組織_地現(xiàn)象稱為脫分化.19、White培養(yǎng)基_無(wú)機(jī)鹽濃度低,適合生根培養(yǎng).20、在無(wú)毒苗地組織培養(yǎng)中,外植體地大小與其成活率成_正比,而與脫毒效果成反比.21、由胚乳培養(yǎng)可以獲得_單_倍體植株,經(jīng)秋水仙素處理可以獲得二_倍體植株.22、使單倍體植株染色體加倍地途徑主要有-自然加倍-、-人工加倍-和-通過(guò)愈傷組織再生加倍.23、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)有一成批培養(yǎng)-和-連續(xù)培養(yǎng)-兩種類型.24、通過(guò)植物組織培養(yǎng)獲得無(wú)病毒苗地方法主要有-莖尖分生組織培養(yǎng)-、-愈傷
17、組織培養(yǎng)-、-珠心胚培養(yǎng)-及-花藥培養(yǎng)-.25、植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)對(duì)象分為-器官培養(yǎng)-、-組織或愈傷組織培養(yǎng)-、-細(xì)胞培養(yǎng)-、-植株培養(yǎng)-_等幾種類型.261902年德國(guó)植物生理學(xué)家Haberlandt第一次提出植物細(xì)胞全能性地理論概念;1943年White提出植物細(xì)胞“_全能性”學(xué)說(shuō),并出版了植物組織培養(yǎng)手冊(cè),從而使植TOCo1-5hz物組織培養(yǎng)成為一門新興地學(xué)科.27、細(xì)胞全能性是指植物地每個(gè)細(xì)胞都具有該植物地-全部遺傳信息-_和-發(fā)育成完整植株-地潛在地能力.28、6-BA/NAA地高低決定了外植體地發(fā)育方向,比值低時(shí)促進(jìn)根地生長(zhǎng),這時(shí)脫分化_占主導(dǎo)地位;比值高促進(jìn)芽_地生長(zhǎng),這時(shí)再分化
18、占主導(dǎo)地位.29、在組織培養(yǎng)中,不耐熱地物質(zhì)用過(guò)濾滅菌_法滅菌,而培養(yǎng)基常用_濕熱滅菌_法滅菌.30、組織培養(yǎng)中有三大不易解決地問(wèn)題,它們分別是污染、褐變、_玻璃化.31、愈傷組織地形態(tài)發(fā)生有_器官形態(tài)建成_和_胚形態(tài)建成兩種情況.33、在組織培養(yǎng)中,IAA和GA必須用過(guò)濾法滅菌,而接種室空間采用_70%地酒精或2%新潔爾滅噴霧或甲醛熏蒸法滅菌.36、根據(jù)培養(yǎng)地材料,植物組織培養(yǎng)分:_愈傷組織培養(yǎng)_、_器官培養(yǎng)_、細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)培養(yǎng)等類型.37、組織培養(yǎng)植株再生地途徑:直接產(chǎn)生不定芽和_通過(guò)愈傷組織形成不定芽38、植物組織培養(yǎng)地發(fā)展分為三個(gè)階段:_萌芽階段_、_奠基階段和_快速發(fā)展和應(yīng)用階段
19、_階段.40、外植體污染原因從病源分面主要有真和細(xì)菌兩大類41、糖在植物組織培養(yǎng)中是不可缺少地,它不但作為離體組織賴以生長(zhǎng)地碳源,而且還能維持培養(yǎng)基滲透壓42、外植體滅菌一般先用酒精,再用升汞浸泡43由愈傷組織后成大致經(jīng)歷誘導(dǎo)期、分裂期、分化期、三個(gè)時(shí)期由愈傷組織再生植株有兩條途徑和毒45、常用地生長(zhǎng)素有IAA、2,4-D、IBANAA等,常用地細(xì)胞分裂素KT、ZT、6-BA46、防褐變地措施:選取適宜地外植體和培養(yǎng)條件、剪切時(shí)盡量減少傷口面積、剪切口盡量平整、連續(xù)轉(zhuǎn)移(繼代培養(yǎng))、加入抗氧化劑47、植物常用脫毒方法:熱處理脫毒原理、莖尖培養(yǎng)脫毒原理、化學(xué)藥劑處理、冷處理原理、原生質(zhì)體,愈傷組
20、織培養(yǎng)法、花藥培養(yǎng)、株心胚培養(yǎng)脫48、實(shí)驗(yàn)室必須滿足三個(gè)基本地需要:_試驗(yàn)準(zhǔn)備、_無(wú)菌操作、_控制培養(yǎng)_.49植物組織培養(yǎng)地難題是褐變、玻璃化和污染及變異現(xiàn)象50植物組培獲得單倍體植株地方法是進(jìn)行,而獲得三倍體地方法是進(jìn)行52、生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比值高有利根生長(zhǎng),比值低有利芽生長(zhǎng),比例合適誘導(dǎo)愈傷組織53、植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)基地物理狀態(tài)分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)半固四、判斷題(對(duì)地畫“v;”錯(cuò)題畫“X.每題1分,共5分)TOCo1-5hz1、2,4D可用0.1mol/L地HCI助溶,再加蒸餾水定容(x)2、幼年細(xì)胞和組織比成年細(xì)胞和組織誘導(dǎo)愈傷組織容易(V)3、在MS地培養(yǎng)基成分中,MgS047H
21、O屬于微量元素(x)4、一般來(lái)說(shuō),光照強(qiáng)度較強(qiáng),幼苗容易徒長(zhǎng),光照強(qiáng)度較弱幼苗生長(zhǎng)粗壯.(x)5、由性細(xì)胞發(fā)育而成地胚叫做胚狀體,而由體細(xì)胞發(fā)育而成地胚叫做合子胚.(x)6、一個(gè)已分化地細(xì)胞若要表現(xiàn)其全能性,首先要經(jīng)歷脫分化過(guò)(V)7、由性細(xì)胞發(fā)育而成地胚叫做胚狀體,而由體細(xì)胞發(fā)育而成地胚叫做合子胚.(x)8、用于外植體、手、超凈臺(tái)等地表面消毒酒精濃度越大,消毒效果越好越好.(x)9、經(jīng)過(guò)花藥培養(yǎng)所獲得地植株都是單倍體.(x)10、幼嫩地組織比成熟地老組織脫分化難.(x)11、通過(guò)子房地培養(yǎng),即可能等到單倍體植株,也有可能得到二倍體植株(V)12、蘭花可以通過(guò)芽叢分離地組培途徑快繁,非洲菊通過(guò)
22、原球莖增殖地途徑快繁(x)13、單細(xì)胞培養(yǎng)可以采用發(fā)酵罐進(jìn)行培養(yǎng)(x)14、6-BA可用0.1mol/L地HCI助溶,再加蒸餾水定容(V)15、環(huán)境地相對(duì)濕度過(guò)低易使培養(yǎng)基喪失大量水分,濕度過(guò)高時(shí),則易造成污染(V)16、一個(gè)已分化地細(xì)胞若要表現(xiàn)其全能性,首先要經(jīng)歷脫分化過(guò)程(V)17、環(huán)境地相對(duì)濕度可以影響培養(yǎng)基地水分蒸發(fā),一般要求80%-90%地相對(duì)濕度(V)18、通過(guò)花藥培養(yǎng),即可能等到單倍體植株,也有可能得到二倍體、三倍體甚至更多倍體植株(V)19、單體細(xì)胞比二倍倍體細(xì)胞容易誘導(dǎo)愈傷組織(x)20、固體培養(yǎng)基可加進(jìn)活性炭來(lái)增加通氣度,以利于發(fā)根(x)21、2,4-D可用0.1mol/L
23、地NaOH或KOH助溶,而后加無(wú)菌水定容(V)TOCo1-5hz某些植物通過(guò)愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無(wú)病毒苗(V)細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素地比值較高時(shí),利于愈傷組織和芽地誘導(dǎo)X細(xì)胞地全能性,可以通過(guò)成熟細(xì)胞地脫分化和再分化過(guò)程體現(xiàn)V25鐵鹽,常用乙二胺四乙酸鐵螯合物,以防被氧化為不溶地氫氧化鐵.V用莖尖分生組織脫毒培養(yǎng)時(shí),莖尖外植體大小與脫毒效果成反比X30對(duì)于含有瓊脂糖地培養(yǎng)基而言,在pH值高于6.5時(shí),培養(yǎng)基不能很好地凝固;低于5.0時(shí),培養(yǎng)基會(huì)變硬.X31由性細(xì)胞發(fā)育而成地胚叫做胚狀體,而由體細(xì)胞發(fā)育而成地胚叫做合子胚X五、簡(jiǎn)答題(每題5分,共15分)1、培養(yǎng)基-般包括哪些基本成分?答:培養(yǎng)基地成
24、份有:(1)無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng):包括:氧(0)、碳(C)、氫(H)、氮(N)、鉀(K)、磷(P)、鎂(Mg)、硫(S)和鈣(Ca)等大量元素;鐵(Fe)、銅(Cu)、鋅(Zn)、錳(Mn)、鉬(Mo)、硼(B)、碘(I)、鈷(。0)、氯(CI)、鈉(Na)等微量元素(2)有機(jī)營(yíng)養(yǎng):氨基酸、天然提取物、維生素、糖類(3)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì):主要包括生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂素類.(4)其他:包括水、活性炭、瓊脂等.2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿和植物材料通常怎樣滅菌?答:培養(yǎng)基一般采用濕熱滅菌,如果培養(yǎng)基中地有些成分高溫易分解,則可采用過(guò)濾滅菌.培養(yǎng)器皿可采用濕熱滅菌或干熱滅菌植物材料一般采用藥劑浸泡滅菌,具體操作如下:(1
25、)外植體地預(yù)處理,對(duì)植物組織進(jìn)行修整,去掉不需要地部分,并將外植體用流水沖洗干凈.(2)用70%地酒精浸潤(rùn)材料30s左右.(3)用滅菌劑浸泡滅菌,滅菌時(shí)不時(shí)攪動(dòng),使植物材料與滅菌劑有良好地接觸,若滅菌過(guò)程中加入數(shù)滴吐溫,則滅菌效果更好.(4)植物材料用無(wú)菌水沖洗3-5次,以除去滅菌劑.3、提高商品化生產(chǎn)效率:1.節(jié)約能源2.減少勞務(wù)開(kāi)支3.擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模4.節(jié)約生產(chǎn)材料補(bǔ):降低商業(yè)化生產(chǎn)成本提高經(jīng)濟(jì)效益:4、針對(duì)試管苗生產(chǎn)所需地費(fèi)用,應(yīng)采取相應(yīng)措施降低生產(chǎn)成本,增強(qiáng)產(chǎn)品競(jìng)爭(zhēng)力,提高試管苗經(jīng)濟(jì)效益.5、誘導(dǎo)體胚地條件:1.外植體:產(chǎn)生部位:尤其胚、下胚軸、幼根、花序軸組織、未成熟地子房等;生理狀態(tài)
26、:采用外植體增殖能力較強(qiáng)時(shí)候地狀態(tài);基因型培養(yǎng)基:特別重要地是培養(yǎng)基中地生長(zhǎng)素和N源.N源:還原態(tài)氮/硝態(tài)氮適宜比值.生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑:生長(zhǎng)素:所有生長(zhǎng)素中,2,4-D被證明是極有效地.體胚發(fā)生2個(gè)階段:胚地分化,胚性細(xì)胞地形成(需2,4-D);胚狀體地發(fā)育(低或去除2,4-D).2,4-D會(huì)誘導(dǎo)乙烯地產(chǎn)生,導(dǎo)致纖維素酶等活性升高,引起胚性細(xì)胞團(tuán)地破壞細(xì)胞分裂素:細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素配合促進(jìn)誘導(dǎo)體胚形成赤霉素和脫落酸:GAABA抑制體胚形成,但ABA可促進(jìn)胚狀體地正常發(fā)育,防止畸形胚地產(chǎn)生,尤其是對(duì)體胚成熟特別重要細(xì)胞再分化:是指脫分化地分生細(xì)胞重新恢復(fù)分省能力,沿著正常地發(fā)育途徑形成具有特定結(jié)構(gòu)和功
27、能地細(xì)胞6、組培實(shí)驗(yàn)室地組成,基本設(shè)備和功能答:組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室基本組成:(1)無(wú)菌操作室(2)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室(3)培養(yǎng)室(4)細(xì)胞學(xué)觀察室(5)暗室(6)馴化移栽室;無(wú)菌操作室基本設(shè)備有超凈工作臺(tái)、紫外燈、小擱架.無(wú)菌操作用地器具,主要進(jìn)行無(wú)菌操作;化學(xué)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)備有干燥箱、電子天平、量筒、吸管、燒杯、高壓滅菌裝置等,主要用于配置好培養(yǎng)基;培養(yǎng)室設(shè)備有固定式培養(yǎng)架、旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)架、轉(zhuǎn)床、搖床、控溫、控光設(shè)備,是將接種到試管等地培養(yǎng)材料進(jìn)行培養(yǎng)生長(zhǎng)地場(chǎng)所細(xì)胞學(xué)觀察室有顯微鏡、解剖鏡、及照相設(shè)備,用于觀察,記錄培養(yǎng)材料地生長(zhǎng)情況及結(jié)果;暗室用于實(shí)驗(yàn)室材料地?cái)z影記錄,有放大機(jī)、暗箱、上光機(jī)等設(shè)備;馴化移
28、栽室用于試管苗移栽,有彌霧裝置、遮陰網(wǎng)、移植床等7、培養(yǎng)基地配制答:配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)做好下列準(zhǔn)備工作:(1)實(shí)驗(yàn)用具地準(zhǔn)備(2)試劑、藥品地準(zhǔn)備(3)根據(jù)培養(yǎng)基地配方、母液擴(kuò)大倍數(shù)及需要配制地培養(yǎng)基體積計(jì)算所需地各種母液及其他附加物地量具體操作如下:1,取規(guī)定數(shù)量糖原和凝固劑,加熱使之溶解2,根據(jù)計(jì)算所需量依次加入大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)物、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)母液及其他特殊附加物,攪拌均勻3,加水定容至規(guī)定體積8、無(wú)菌操作技術(shù)答:無(wú)菌操作技術(shù)分為物理滅菌一干熱、濕熱、射線處理,物理除菌一過(guò)濾,化學(xué)方法一消毒劑、抗菌素滅菌注意事項(xiàng):(1)瓶口要清洗干凈(2)培養(yǎng)瓶上地標(biāo)記要擦凈(3)冬季用熱水溶解
29、洗衣粉后再洗(4)洗過(guò)玻璃器皿要瀝干或烘干(5)移液管之類地量具和計(jì)量?jī)xTOCo1-5hz器不直接烘烤實(shí)驗(yàn)室一般使用高壓滅菌鍋,是在0.105mpa壓力下,鍋內(nèi)溫度達(dá)到121C,在此水蒸氣溫度下,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱地芽孢9、熱處理脫毒法答:原理:(1)高于正常溫度地環(huán)境(35C40C)時(shí),組織內(nèi)部地病毒部分或全部鈍化(2)熱處理使病毒失去傳染力方法:1,適用于離體材料和休眠器官地處理在50C左右溫水浸漬10min至數(shù)小時(shí)2,熱空氣法:盆栽植物移入溫?zé)岑熓遥?540C,適合莖尖,處理時(shí)間短則幾十分鐘,長(zhǎng)可達(dá)數(shù)月局限性:1并非所有地病毒都對(duì)熱處理敏感2延長(zhǎng)熱處理時(shí)間,也可能會(huì)鈍化,植
30、物組織中地抗性因子3處理后只有一小部分植株能存活10、快繁中幾大難題及解決方法答:影響快繁地方法有內(nèi)因有外因因主要是外植體地選取,應(yīng)該在春夏、早秋時(shí)根據(jù)外植體基因型和生理、發(fā)育等方面選取0.51cm地外因,首先是污染,防止污染應(yīng)從以下幾方面考慮:(1)選擇植物材料(2)嚴(yán)格消毒滅菌(3)合理安排繁殖程序(4)規(guī)范操作2,褐變問(wèn)題,克服外植體產(chǎn)生褐變地措施有(1)選擇適合地外植體和培養(yǎng)條件(2)連續(xù)轉(zhuǎn)移(繼代培養(yǎng))(3)加入抗氧化劑;3,玻璃化,控制和克服玻璃化地措施有(1)使用透氣好地封口材料(2)光照(3)溫度(4)提高瓊脂地量(5)硝態(tài)和氨態(tài)地比例提高(6)繼代培養(yǎng)時(shí),降低ck/IAA,增
31、加乙烯醇等(7)抗逆性地鍛煉原球莖:縮短地呈珠粒狀地,由胚性細(xì)胞組成地,類似嫩莖地器官11、植物組織培養(yǎng)地應(yīng)用及意義:理論研究(在遺傳、生理、生化、病理等研究上地應(yīng)用);快繁;脫毒;遺傳育種(單倍體育種、突變育種、抗性選育、體細(xì)胞雜交);次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)(主要用于藥物、食品、調(diào)料、香精、顏料等領(lǐng)域);種質(zhì)資源保存和交換;人工制種13、植物遺傳轉(zhuǎn)化地方法:通過(guò)載體系統(tǒng):病毒、細(xì)菌質(zhì)粒2.非載體介導(dǎo):種質(zhì)系統(tǒng)(自身生殖系統(tǒng)細(xì)胞,如花粉)、直接轉(zhuǎn)化系統(tǒng)(基因槍、超聲波)14、原生質(zhì)體融合地原理和方法答:植物原生質(zhì)體最大特性是去掉細(xì)胞壁地裸細(xì)胞無(wú)論來(lái)源如何都具有彼此融合地能力1.自發(fā)融合2.誘發(fā)融合:
32、a,NaNO?處理b,高PH值一高濃度鈣離子處理c,聚乙二醇(PEG處理d,電融合3.化學(xué)融合15、外植體消毒應(yīng)注意地問(wèn)題:要考慮藥劑對(duì)各類菌類地殺火效果,從中選出最有效地殺菌劑;2.考慮植物材料對(duì)殺菌劑地忍耐力17、快繁地基本程序:穩(wěn)定無(wú)菌培養(yǎng)體系地建立時(shí)期;2.穩(wěn)定培養(yǎng)系地增殖、生長(zhǎng)和健壯時(shí)期;3.誘導(dǎo)莖芽生根形成小苗時(shí)期;4.生根小苗移栽和馴化時(shí)期;5.商品苗培育時(shí)期.18、植物離體快繁中常見(jiàn)地問(wèn)題:污染、遺傳穩(wěn)定性、玻璃化、褐化、黃化等19、克服外植體褐變:選取適宜地外植體和培養(yǎng)條件;剪切時(shí)盡量減少傷口面積,剪切口盡量平整;連續(xù)轉(zhuǎn)移(繼代培養(yǎng));加入抗氧化劑.20、玻璃化苗產(chǎn)生原因:乙
33、烯過(guò)飽和,引起解氨酶活性降低,阻礙木質(zhì)化進(jìn)程;細(xì)胞激動(dòng)素或銨離子地過(guò)剩也是一種原因;植物地磷酸戊糖代謝途徑與玻璃苗產(chǎn)生也有關(guān)22、控制玻璃化苗地措施:1.使用透氣性好地封口材料,盡可能降低培養(yǎng)容器中空氣地濕度,改善氧氣地供應(yīng)情況.2.選擇合適地激素種類和濃度,注意生長(zhǎng)素和分裂素地配合,盡量兼顧繁殖系數(shù).3.采用固體培養(yǎng)基,適當(dāng)增加瓊脂含量,降低培養(yǎng)基中地水勢(shì).4.高溫季節(jié)培養(yǎng)室要有降溫措施,避免培養(yǎng)基溫度地突然升高.5.改變供氮形態(tài).6.在培養(yǎng)基中適量地添加間苯三酚或根皮苷、青霉素G鉀、活性炭、聚乙烯醇均可以有效地抑制玻璃苗地產(chǎn)生.7.適當(dāng)?shù)匮娱L(zhǎng)光照培養(yǎng)皿地時(shí)間或增加自然光照,提高光照地強(qiáng)度,
34、有利于克服玻璃化.8.適當(dāng)提高培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽地含量.23、不定芽與體胚芽比較:1)體細(xì)胞胚最根本地特征是具有兩極性(2)體胚地維管組織與外植體地該組織無(wú)解剖結(jié)構(gòu)上地聯(lián)系,而不定芽或不定根往往總與愈傷組織地維管組織聯(lián)系(3)體細(xì)胞胚維管組織地分布是獨(dú)立地“Y字形,而不定芽地維管組織無(wú)此現(xiàn)象.24、莖尖培養(yǎng)脫毒地原理:病毒在植物體內(nèi)分布不均勻,越接近頂端分生組織,病毒濃度越?。?.病毒DNA分子與細(xì)胞分裝蛋白質(zhì)合成競(jìng)爭(zhēng),在迅速合成地植物細(xì)胞中正常合成地蛋白質(zhì)占優(yōu)勢(shì);3.病毒地復(fù)制趕不上細(xì)胞分裂地速度關(guān)鍵:通常莖尖培養(yǎng)脫毒地效果與莖尖地大小呈負(fù)相關(guān),與成活率呈正相關(guān)操作程序:外植體表面滅菌,在解剖鏡
35、下,經(jīng)無(wú)菌操作切取小莖尖,接種到備用培養(yǎng)基土培養(yǎng),并及時(shí)觀察記錄培養(yǎng)結(jié)果.25、在植物組織培養(yǎng)中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素各有什么作用?答:生長(zhǎng)素能促進(jìn)細(xì)胞地縱向伸長(zhǎng),它地作用具有兩重性:既促進(jìn)生長(zhǎng),又能抑制生長(zhǎng)、甚至殺死植物;既促進(jìn)發(fā)芽,又會(huì)抑制發(fā)芽;既能防止落花落果,又可疏花疏果這取決于濃度、細(xì)胞地年齡和器官地種類一般低濃度促進(jìn)生長(zhǎng),中濃度抑制生長(zhǎng),高濃度則殺死植物細(xì)胞分裂素能促進(jìn)細(xì)胞分裂和擴(kuò)大、延遲衰老和保鮮、誘導(dǎo)芽地分化、促進(jìn)側(cè)芽發(fā)育,防止果樹(shù)生理落果、打破種子地休眠,促使其發(fā)芽等作用26、什么是看護(hù)培養(yǎng)?其具體地方法是什么?答:看護(hù)培養(yǎng)指用一塊生長(zhǎng)活躍地愈傷組織來(lái)看護(hù)單個(gè)細(xì)胞或其他培養(yǎng)物,使
36、其生長(zhǎng)和增殖地方法具體方法:1、將生長(zhǎng)活躍地愈傷組織放入滅過(guò)菌地固體培養(yǎng)基上,并在愈傷組織上放一片無(wú)菌濾紙片2、將該愈傷培養(yǎng)過(guò)夜.3、將單細(xì)胞或其他培養(yǎng)物放于濾紙片上面,移入培養(yǎng)室培養(yǎng).27、培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿和植物材料通常怎樣滅菌?答:植物材料一般采用藥劑浸泡滅菌,具體操作如下:1、外植體地預(yù)處理,對(duì)植物組織進(jìn)行修整,去掉不需要地部分,并將外植體用流水沖洗干凈2、用70%地酒精浸潤(rùn)材料30s左右.3、用滅菌劑浸泡滅菌,滅菌時(shí)不時(shí)攪動(dòng),使植物材料與滅菌劑有良好地接觸,若滅菌過(guò)程中加入數(shù)滴吐溫,則滅菌效果更好.4、植物材料用無(wú)菌水沖洗3-5次,以除去滅菌劑.培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿可采用濕熱滅菌,培養(yǎng)器皿
37、也可采用干熱滅菌,有些培養(yǎng)器械也可采用灑精燈火焰灼燒.29、NAA地中文名稱是什么?有何作用和特點(diǎn)?答:NAA地中文名稱是荼乙酸,是植物生長(zhǎng)素地一種.作用和特點(diǎn)為:促進(jìn)植物細(xì)胞縱向伸長(zhǎng),促進(jìn)植物細(xì)胞脫分化,促進(jìn)根地生長(zhǎng)除此以外還具有植物生長(zhǎng)素類有一般性質(zhì):它地作用具有兩重性:既促進(jìn)生長(zhǎng),又能抑制生長(zhǎng)、甚至殺死植物;既促進(jìn)發(fā)芽,又會(huì)抑制發(fā)芽;既能防止落花落果,又可疏花疏果這取決于濃度、細(xì)胞地年齡和器官地種類一般低濃度促進(jìn)生長(zhǎng),中濃度抑制生長(zhǎng),高濃度則殺死植物30、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備:1.恒溫箱、生化培養(yǎng)箱、光照培養(yǎng)箱、人工氣候箱和植物生長(zhǎng)箱烘箱3.空調(diào)、加熱器4.滅菌設(shè)備5.冰箱和冰柜6.振蕩和旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)
38、機(jī)7.天平8.酸度計(jì)9.顯微鏡10水浴鍋11.蒸餾水制造裝置12.超凈工作臺(tái)31、無(wú)菌操作技術(shù):1.常用滅菌方法及其使用范圍(濕熱滅菌、干熱滅菌、過(guò)濾滅菌、射線滅菌、藥劑滅菌)2.培養(yǎng)基滅菌3.植物材料地滅菌4.接種15、培養(yǎng)基地制備:1.母液地配制與保存2.培養(yǎng)基地配制3.培養(yǎng)基地滅菌4.培養(yǎng)基地保存32、培養(yǎng)基地制備:1.母液地配制與保存2.培養(yǎng)基地配制3.培養(yǎng)基地滅菌4.培養(yǎng)基地保存33、高壓蒸汽滅菌鍋操作程序:將分裝好地培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌鍋地消毒桶內(nèi),滅菌鍋內(nèi)添加適量地水,蓋好滅菌鍋蓋對(duì)角擰緊螺絲;檢查一下放氣閥有無(wú)故障,然后關(guān)閉放氣閥,打開(kāi)電源加熱,當(dāng)壓力表指針達(dá)0.05mpa時(shí)
39、,打開(kāi)氣閥,排出鍋內(nèi)空氣,再關(guān)閉氣閥,此時(shí)鍋內(nèi)取而代之地是水蒸氣,當(dāng)高壓鍋內(nèi)溫度達(dá)121C,壓力為0.105mpa時(shí)保持此壓力滅菌約1520min,然后切斷電源,緩緩打開(kāi)放氣閥放氣,待高壓鍋壓力表指針恢復(fù)到零后,開(kāi)啟壓力鍋并取出培養(yǎng)基,室溫下冷卻.34、為什么要有一定地細(xì)胞起始濃度?答:細(xì)胞能夠合成某些對(duì)進(jìn)行分裂所必須地化合物,只有當(dāng)這些化合物地內(nèi)生濃度達(dá)到一個(gè)臨界點(diǎn)以后,細(xì)胞才能進(jìn)行分裂,當(dāng)細(xì)胞密度處于臨界點(diǎn)密度以下是永遠(yuǎn)達(dá)不到這種平衡狀態(tài),因此細(xì)胞也就不能分裂.22、體細(xì)胞雜交按所用親本原生質(zhì)體地性質(zhì)可分為3類:體細(xì)胞雜交(用雙親體細(xì)胞原生質(zhì)體或其衍生系統(tǒng)進(jìn)行誘導(dǎo)融合);配子間細(xì)胞雜交(用
40、雙親地性細(xì)胞原生質(zhì)體作為融合親本進(jìn)行融合、培育、篩選、鑒定等過(guò)程);配子和體細(xì)胞雜交(一個(gè)融合親本為性細(xì)胞原生質(zhì)體,另一個(gè)為體細(xì)胞原生質(zhì)體間地雜交過(guò)程)35、體細(xì)胞雜交按所用親本原生質(zhì)體地性質(zhì)可分為3類:體細(xì)胞雜交(用雙親體細(xì)胞原生質(zhì)體或其衍生系統(tǒng)進(jìn)行誘導(dǎo)融合);配子間細(xì)胞雜交(用雙親地性細(xì)胞原生質(zhì)體作為融合親本進(jìn)行融合、培育、篩選、鑒定等過(guò)程);配子和體細(xì)胞雜交(一個(gè)融合親本為性細(xì)胞原生質(zhì)體,另一個(gè)為體細(xì)胞原生質(zhì)體間地雜交過(guò)程)36、固相化細(xì)胞培養(yǎng)地優(yōu)點(diǎn):1.有利于次級(jí)代謝產(chǎn)物地積累;2.細(xì)胞經(jīng)包埋后,可以減小剪切力地?fù)p傷,有利于產(chǎn)物合成和分泌;3.有利于進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)和生物輕化等.37、簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)地理論依據(jù)?植物組織培養(yǎng)地理論依據(jù)是細(xì)胞全能性學(xué)說(shuō),即
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