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1、 病毒學(xué)1 形態(tài)最微小,結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單病毒分布廣,可寄居于人、動(dòng)植物和微生物內(nèi)可引起世界大流行75%的人類傳染病由病毒引起 概 述2 3000BC,埃及孟非思壁畫中長(zhǎng)老患小兒麻痹癥病毒與疾病的關(guān)系3 關(guān)于人痘和牛痘接種預(yù)防天花的歷史 中國(guó)從宋朝起用人痘接種預(yù)防天花古代中醫(yī)書籍上的小兒出天花圖4 命中注定 天命所歸 康熙帝,名玄燁,生于一六五四年,幼年時(shí)患上天花病,此癥乃滿洲人克星,就連順治皇帝、和碩豫親王多鐸等亦是死于天花。玄燁命硬,竟熬過(guò)了此絕癥,活了下來(lái)。順治與孝莊皇太后認(rèn)為玄燁既天資聰敏,又能戰(zhàn)勝惡疾,從鬼門關(guān)返回人間,必定有天予大任。后來(lái),順治病逝,玄燁繼承大統(tǒng),八歲登上皇位,是為康熙。清
2、朝第一位“麻子皇帝”康熙 5 小兒麻痹癥-曾造成3000萬(wàn)/年兒童患病, 約1/100麻痹!乙型肝炎-全球最嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題!流行性感冒-發(fā)生過(guò)多次世界性大流行!麻疹、水痘、腮腺炎、皰疹、狂犬病病原體病毒病毒與疾病的關(guān)系6 近20年來(lái)肆虐的病毒性疾病病原體 病毒!SARSAIDS禽流感甲流7 病毒性疾病的特點(diǎn)傳播快病死率高易引起持續(xù)感染與某些腫瘤的發(fā)生有關(guān)8 人類如何揭開(kāi)病毒秘密?9 實(shí)驗(yàn)一 健康煙草發(fā)病,肯定病原在患病煙葉中(1886 德國(guó) mayer)勻漿患病煙葉健康煙葉患病病毒的發(fā)現(xiàn)過(guò)程10 實(shí)驗(yàn)二 會(huì)不會(huì)是細(xì)菌產(chǎn)生的毒素呢?煙草仍然發(fā)病結(jié)論:可能是細(xì)菌毒素Chamberland氏濾器
3、伊凡諾夫斯基,俄羅斯,1892年發(fā)現(xiàn)煙草花葉病病原的濾過(guò)性11 貝杰林克(1851-1931)荷蘭著名科學(xué)家,1898年發(fā)現(xiàn)病毒實(shí)驗(yàn)三 感染煙草的物質(zhì)置于凝膠中勻漿瓊脂凝膠塊 現(xiàn)象:感染煙草的物質(zhì)凝膠中以適度速度擴(kuò)散細(xì)菌仍滯留于瓊脂的表面 結(jié)論:“有感染性的活的流質(zhì)”,并取名為病毒,拉丁名叫“Virus”。 12 實(shí)驗(yàn)四 分離提純煙草花葉病毒斯坦利(1904-1971)美國(guó)著名化學(xué)家,1935年提純了煙草花葉病毒,1946年獲得諾貝爾獎(jiǎng)13 德國(guó)科學(xué)家考施1939年,第一次在電子顯微鏡下觀察到煙草花葉病毒的形狀 實(shí)驗(yàn)五 觀察到煙草花葉病毒14 病毒的特點(diǎn)體積微小結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單只含一種類型核酸嚴(yán)格活細(xì)
4、胞內(nèi)寄生以復(fù)制方式繁殖非細(xì)胞型微生物15 病毒(virus)體積最小的一類微生物,能通過(guò)除菌濾器,無(wú)典型細(xì)胞結(jié)構(gòu)和能產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng),只含有一種核酸,僅能在活細(xì)胞內(nèi)以復(fù)制方式進(jìn)行增殖的一類非細(xì)胞型微生物。16 病毒體(virion)具有病毒的典型形態(tài)、結(jié)構(gòu)和傳染性完整成熟的病毒顆粒是病毒在細(xì)胞外的結(jié)構(gòu)形式17 第22章 病毒的基本性狀 第一節(jié) 病毒的大小與形態(tài) 第二節(jié) 病毒結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成 第三節(jié) 病毒的增殖 第四節(jié) 病毒的遺傳變異 第五節(jié) 理化因素對(duì)病毒的影響 第六節(jié) 病毒的分類18 第一節(jié) 病毒的大小與形態(tài)19 病毒的大小與形態(tài) - 大小測(cè)量單位 納米(nm) 1nm = 1/1000 m
5、最?。?0nm 最大:300nm20 葡萄球菌(1000nm) 牛痘病毒300250nmABCDEFG立克次體450nm衣原體390nmA、大腸桿菌噬菌體 ( 65 95nm )B、腺病毒 (70nm )C、脊髓灰質(zhì)炎病毒 (30nm )D、乙腦病毒 ( 40nm )E、蛋白分子 (10nm )F、流感病毒 ( 100nm )G、煙草花葉病毒21 病毒的大小與形態(tài) - 形態(tài)病毒形態(tài)多樣,大致可分為五類 球形或近似球形 桿(絲)狀 蝌蚪形 磚形 彈狀22 Spherical球形(多見(jiàn)人或動(dòng)物病毒)23 Rod-shaped 桿狀或絲狀(多見(jiàn)植物病毒)24 Brick-shaped 磚塊狀(pox
6、 virus 痘病毒)25 Bullet-shaped 子彈狀(Rabies virus狂犬病毒)26 Tadpole-shaped蝌蚪狀phage噬菌體27 第二節(jié) 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成28 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成基本結(jié)構(gòu)Core核心+Capsid衣殼Nucleocapsid(naked virus)核衣殼(裸露病毒)Core核心+Capsid衣殼+Envelope包膜Envelope virus包膜病毒29 病毒基因組,由核酸組成(DNA / RNA)決定病毒的復(fù)制、遺傳、變異具有感染性病毒的結(jié)構(gòu) 核心 core30 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 - 結(jié)構(gòu)衣殼:蛋白質(zhì)形態(tài)亞單位:殼粒螺旋對(duì)稱型20面
7、體對(duì)稱型復(fù)合對(duì)稱型有抗原性保護(hù)核酸介導(dǎo)進(jìn)入宿主細(xì)胞(與致病性有關(guān))31 螺旋對(duì)稱型32 20面體立體對(duì)稱33 五鄰體六鄰體34 復(fù)合對(duì)稱35 包膜:根據(jù)有無(wú)包膜,可將病毒分為 包膜病毒 裸露病毒病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 - 結(jié)構(gòu) 病毒核衣殼在成熟過(guò)程中穿過(guò)宿主細(xì)胞以出芽方式向外釋放時(shí)獲得的,化學(xué)組成為脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和少量糖類。36 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 含有宿主細(xì)胞膜的化學(xué)成分有的有包膜子粒/刺突、VAP有的有基質(zhì)蛋白包膜的組成37 病毒的結(jié)構(gòu)38 核酸蛋白質(zhì)脂質(zhì)和糖類 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 - 化學(xué)組成 39 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 - 化學(xué)組成病毒只含有一種核酸,DNA或RNA據(jù)此可將病毒分為RN
8、A病毒及DNA病毒兩種核酸40 核酸的功能 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 - 化學(xué)組成病毒復(fù)制的模板決定病毒的特性部分核酸具有感染性 41 感染性核酸 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 - 化學(xué)組成特點(diǎn): 除去蛋白衣殼后,若裸露的病毒核酸仍能進(jìn)入宿主細(xì)胞內(nèi)增殖,叫感染范圍廣感染性低42 蛋白質(zhì)保護(hù)核酸抗原性參與感染過(guò)程衣殼蛋白包膜蛋白間質(zhì)蛋白酶蛋白包括作用 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 - 化學(xué)組成結(jié)構(gòu)蛋白功能蛋白43 脂質(zhì)和糖類 病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 - 化學(xué)組成 主要存在于包膜中,脂質(zhì)對(duì)干燥、熱、酸、脂溶劑敏感。 包膜破壞后,病毒失去感染性,可用于病毒的鑒定。 44 第三節(jié) 病毒的增殖45 病毒的增殖 增殖方式:復(fù)制
9、( replication) 以病毒基因?yàn)槟0?,在宿主?xì)胞內(nèi)經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)釋、合成、裝配等程序,最終釋放出子代病毒的過(guò)程。46 病毒的增殖 - 復(fù)制周期吸附脫殼生物合成組裝成熟與釋放病毒穿入47 宿主細(xì)胞吸附靜電吸附真正吸附非特異性可逆特異性不可逆 病毒的增殖 - 復(fù)制周期48 吸附49 穿入胞飲(裸露病毒)融合(包膜病毒)直接進(jìn)入(噬菌體) 病毒的增殖 - 復(fù)制周期50 51 脫殼核酸游離 病毒的增殖 - 復(fù)制周期 細(xì)胞內(nèi)無(wú)完整病毒體52 生物合成核酸游離m m m m m m早期mRNA轉(zhuǎn)錄早期蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)譯病毒DNA復(fù)制m m m m m mm m m m m m晚期mRNA轉(zhuǎn)錄晚期蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)譯
10、 用一切血清學(xué)方法和電鏡檢查均不能查見(jiàn)處于生物合成階段的病毒顆粒,故這個(gè)階段叫隱蔽期(eclipse) 病毒的增殖 - 復(fù)制周期53 按照病毒基因組不同,生物合成過(guò)程有所區(qū)別:dsDNA(雙鏈DNA病毒) ssDNA(單鏈DNA病毒) + ssRNA(單正鏈RNA病毒) ssRNA (單負(fù)鏈RNA病毒) dsRNA(雙鏈RNA病毒) 逆轉(zhuǎn)錄病毒 病毒的增殖 -復(fù)制周期 - 生物合成54 雙鏈DNA病毒生物合成早期蛋白質(zhì)合成-功能蛋白步驟子代DNA復(fù)制晚期蛋白質(zhì)合成-結(jié)構(gòu)蛋白55 早期蛋白的合成 早期蛋白是功能蛋白,能抑制宿主細(xì)胞自身的代謝過(guò)程并提供病毒核酸復(fù)制所需的酶類病毒核酸早期mRNA早期
11、蛋白 雙鏈DNA病毒生物合成56 核酸的復(fù)制病毒核酸早期蛋白半保留復(fù)制子代核酸 雙鏈DNA病毒生物合成57 晚期蛋白的合成 晚期蛋白是結(jié)構(gòu)蛋白,主要為病毒衣殼蛋白病毒子代核酸晚期mRNA晚期蛋白 雙鏈DNA病毒生物合成58 雙股DNA病毒的生物合成DNA轉(zhuǎn)錄mRNA翻譯早期蛋白功能蛋白解鏈酶DNADNA大量子代DNA半保留復(fù)制轉(zhuǎn)錄mRNA翻譯晚期蛋白子代病毒體結(jié)構(gòu)蛋白59 單鏈DNA病毒生物合成 需在DNA聚合酶作用下先復(fù)制出互補(bǔ)鏈,再?gòu)?fù)制出子代DNA和翻譯出病毒蛋白60 RNA病毒生物合成+ssRNA病毒(單正鏈RNA) 本身 +ssRNA 可作為mRNA,可直接翻譯早期蛋白ssRNA病毒(
12、單負(fù)鏈RNA) 本身ssRNA 不可作為mRNA,需在RNA聚合酶作用下復(fù)制出互補(bǔ)的正鏈RNA,再翻譯出早期蛋白61 RNA病毒生物合成雙鏈RNA病毒 不是半保留復(fù)制,子代RNA全部為新合成RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒 在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以病毒RNA為模板,合成互補(bǔ)DNA62 逆轉(zhuǎn)錄病毒生物合成m m m m m m互補(bǔ)負(fù)鏈DNA轉(zhuǎn)錄mRNA轉(zhuǎn)錄子代RNA晚期蛋白早期蛋白R(shí)NA:DNA中間體逆轉(zhuǎn)錄酶RNA降解雙鏈DNA63 病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄酶RNADNARNA酶HDNA聚合酶雙鏈DNA整合入細(xì)胞染色體前病毒(provirus)轉(zhuǎn)錄子代mRNA子代RNA翻譯子代蛋白質(zhì)特點(diǎn):逆轉(zhuǎn)錄酶,逆向轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄病毒的生
13、物合成64 反轉(zhuǎn)錄65 前病毒形成66 組裝成熟DNA病毒在核內(nèi)RNA病毒在漿內(nèi)不同方式 釋放 病毒的增殖 - 組裝成熟與釋放67 溶細(xì)胞型細(xì)胞裂解(裸露病毒)穩(wěn)定型細(xì)胞本身不破壞,以出芽方式釋放(包膜病毒)細(xì)胞間傳播(巨細(xì)胞病毒)病毒從細(xì)胞內(nèi)釋放方式68 69 穩(wěn)定型釋放出芽(有包膜病毒釋放方式)不破壞細(xì)胞,但可使細(xì)胞表面出現(xiàn)病毒抗原-靶細(xì)胞70 流感病毒在細(xì)胞表面出芽釋放電鏡照片71 病毒的復(fù)制周期吸附 穿入脫殼生物合成組裝、成熟與釋放早期蛋白質(zhì)合成核酸復(fù)制晚期蛋白質(zhì)合成溶細(xì)胞型穩(wěn)定型細(xì)胞間橋72 復(fù)制周期73 頓挫感染:病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后,有的細(xì)胞缺乏病毒復(fù)制所需的酶或其他條件,致使該病
14、毒在其中不能生物合成;或者雖合成了病毒的成分,但不能組裝成熟為有感染性的病毒體,叫非容納細(xì)胞:不能為某病毒復(fù)制提供 必要條件的細(xì)胞,對(duì)該病毒是病毒的增殖 - 異常增殖74 缺陷病毒:因病毒基因不完整或基因位點(diǎn)改變,病毒不能正常增殖,復(fù)制不出完整有感染性的病毒顆粒,叫輔助病毒:與缺陷病毒共同培養(yǎng)時(shí)能輔助缺陷病毒增殖出完整的有感染性的病毒體,這種有輔助作用的病毒叫病毒的增殖 - 異常增殖75 兩種病毒感染同一機(jī)體或細(xì)胞時(shí),一種病毒抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象稱干擾現(xiàn)象病毒的干擾現(xiàn)象 - 概念滅活病毒同/不同種、型、株的活病毒同/不同種、型、株的活病毒76 干擾素破壞吸附與穿入阻止生物合成缺陷性干擾顆粒
15、的存在病毒的干擾現(xiàn)象 - 干擾機(jī)理77 病毒的干擾現(xiàn)象 -干擾機(jī)理缺陷性干擾顆粒(defective inhibition particle,DIP):基因組有缺陷但結(jié)構(gòu)蛋白衣殼完整的病毒顆粒,其抗原性與完整病毒相同,可與完整病毒一樣吸附于相應(yīng)的靶細(xì)胞,從而干擾完整病毒的復(fù)制78 阻止、中斷發(fā)病自身及同型間干擾病毒的干擾現(xiàn)象 - 干擾意義79 第四節(jié) 病毒的遺傳與變異基因突變基因重組與重配基因整合病毒基因產(chǎn)物的相互作用80 病毒在增殖過(guò)程中堿基序列發(fā)生置換、缺失、插入,引起由基因突變產(chǎn)生的病毒表型性狀改變的毒株稱突變株基因突變81 條件致死突變株 只能在某種條件下增殖,而在另一種條件下不能增殖
16、的病毒株。如:溫度敏感突變株(ts突變株)僅能在容納性溫度28-31下增殖,在非容納性溫度/限制性溫度下不能增殖。Ts株一般毒力明顯降低,常用來(lái)制備疫苗基因突變82 缺陷型干擾突變株 由于基因缺陷不能單獨(dú)復(fù)制,必須在輔助病毒(野生株)存在時(shí)才能進(jìn)行復(fù)制,并能干擾野生株的增殖。 與慢性持續(xù)性感染發(fā)生有關(guān),如SSPE83 宿主范圍突變株 基因突變而擴(kuò)大了感染宿主細(xì)胞范圍,及時(shí)發(fā)現(xiàn)有利于監(jiān)控疾病。如禽流感病毒 人耐藥突變株 分析病毒酶編碼區(qū)基因,有利于發(fā)現(xiàn)變異與耐藥的關(guān)系84 基因重組與重配基因重組 兩種病毒感染同一宿主細(xì)胞,病毒之間交換基因,產(chǎn)生新子代病毒,并能繼續(xù)增殖,如:交叉復(fù)活、多重復(fù)活活病
17、毒活病毒滅活病毒滅活病毒85 基因重組交叉復(fù)活: 滅活病毒與活病毒感染同一宿主細(xì)胞時(shí),因基因重組而使滅活病毒復(fù)活。多重復(fù)活: 兩種或兩種以上滅活病毒感染同一細(xì)胞時(shí),經(jīng)過(guò)基因重組而出現(xiàn)有感染性的子代病毒。 86 基因重組與重配基因重配 基因分節(jié)段的RNA病毒,交換RNA片段的基因重組,如:流感病毒87 兩個(gè)不同的流感病毒株通過(guò)抗原轉(zhuǎn)移或基因重排,形成新的病毒株。88 基因整合 病毒感染宿主細(xì)胞過(guò)程中,將其DNA插入到宿主染色體DNA中,這種病毒基因組與細(xì)胞基因組的重組過(guò)程稱為整合。如溶原性噬菌體,逆轉(zhuǎn)錄病毒等89 病毒基因產(chǎn)物的相互作用表型混合: 二株病毒共同感染同一細(xì)胞時(shí),在成熟裝配階段,發(fā)生
18、了錯(cuò)誤裝配而導(dǎo)致的子代病毒表型改變。90 同一細(xì)胞A病毒B病毒A病毒B病毒表型混合變異株91 第五節(jié) 理化因素對(duì)病毒的影響92 滅活(inactivation)病毒受理化因素作用后失去感染性,叫理化因素對(duì)病毒的影響滅活的病毒仍保留抗原性紅細(xì)胞吸附血凝細(xì)胞溶解93 物理因素 溫度:病毒耐冷不耐熱 pH: pH 68穩(wěn)定; 射線:射線和X射線以及紫外線都能 滅活病毒化學(xué)因素 病毒對(duì)的抵抗力比細(xì)菌強(qiáng); 病毒對(duì)氧化劑、鹵素及其化合物敏感理化因素對(duì)病毒的影響94 第六節(jié) 病毒的分類病毒分類依據(jù) 核酸的性質(zhì)與結(jié)構(gòu) 病毒體的大小、形狀 衣殼對(duì)稱性和殼粒數(shù)目 有無(wú)包膜 對(duì)理化因素的敏感性 抗原性 生物學(xué)特性95 DNA病毒科分類及重要病毒單純皰疹病毒I型和II型,水痘帶狀皰疹病毒,EB病毒,巨細(xì)胞病毒,人皰疹病毒6、7、8型 皰疹病毒科 乳頭瘤病毒 乳多空病毒科腺病毒
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