實驗四病源性球菌和桿菌

1、關于實驗四病源性球菌與桿菌第一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月二、實驗內容1.自己動手觀察鏈球菌、腦膜炎雙球菌的形態(tài);示教觀察結核桿菌、白喉桿菌的形態(tài)。2.觀察腸道桿菌的雙糖發(fā)酵，鑒別培養(yǎng)基（ss培養(yǎng)基）的生化反應。3.化膿性球菌的鑒定三種葡萄球菌的色素觀察乙型鏈球菌的溶血現象觀察抗“O”實驗。第二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月三、作業(yè)：1.鏡下繪出4種形態(tài)圖2.根據生化特性及產生色素，葡萄球菌分為哪幾種類型？第三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月實驗四 病原性球菌1. 五類病原性球菌的形態(tài)、排列及染色性2. 葡萄球菌、鏈球菌的培養(yǎng)物3. 血漿凝固酶試驗-玻片法

2、4、抗鏈球菌溶血素”O(jiān)”（ASO）乳膠試驗示教（操作，1人/組）示教示教示教第四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 G+球菌：金葡菌鏈球菌肺炎雙球菌1. 五類病原性球菌的形態(tài)、排列及染色性示教第五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 G-球菌： 淋球菌 腦膜炎球菌第六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2. 葡萄球菌、鏈球菌的培養(yǎng)物示教 普通瓊脂平板 血平板 菌落形狀 色素 溶血性 金葡 圓形凸起光滑中等大小 金黃色 +檸葡 同上 檸檬色 - 白葡 同上 白色 - 表1第七張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 血平板甲型鏈球菌 針尖小菌落、草綠色狹窄溶血環(huán)乙型鏈球菌

3、針尖小菌落、透明寬大溶血環(huán) 巧克力血平板腦膜炎雙球菌 菌落透明似露滴狀 表2 表3第八張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月血漿凝固酶試驗 ：凝固酶分類游離凝固酶：為分泌到菌體外的類似凝血酶原樣物質，被血漿中的協(xié)同因子激活而作用于纖維蛋白原使血漿凝固。（試管法測定）結合凝固酶：是一種結合于菌體胞壁的凝固酶，是一種纖維蛋白原受體，使細菌凝聚成團成塊塊。（玻片法測定）第九張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 血漿凝固酶試驗-玻片法（操作，1人/組）方法： 兔血漿 兔血漿 生理鹽水 123金葡 白葡 金葡 + + +凝集（+）不凝集（-）不凝集（-）第十張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于20

4、22年6月4、抗鏈球菌溶血素“O”（ASO） 快速膠乳法 高滴度病人血清被適量溶血素中和了正常水平 的抗體后，還有多余ASO，這些多余抗體即與SLO膠乳 試劑反應，出現清晰、均勻的凝集顆粒。 （操作，1人/組） 原理：第十一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 陽性對照 陰性對照 待測血清 各加溶血素“O” 1滴輕搖1min 再加SLO膠乳1滴輕搖3min 觀察結果 方法：第十二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月稀釋度 ASO （IU/ml）1：15 4001：30 8001：60 1600ASO250 IU/ml 陰性 結果判定：第十三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月

5、注意事項：液體量要一樣，菌量一樣。血漿多挑幾環(huán)（一滴的量），菌少挑點， 不能干。3. 涂菌時間一樣，出現凝集為陽性，再涂 凝集物可被涂散，變陰性。第十四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月腸道桿菌一、腸道桿菌的形態(tài)及染色性 二、腸道桿菌的培養(yǎng)特性 三、腸道桿菌的生化反應特點 四、Widal實驗第十五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月腸道桿菌的形態(tài)及染色片第十六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月腸道菌的菌落形態(tài)EMB 大腸：菌落呈紫黑色，有金屬光澤。 傷寒 痢疾：菌落無色半透明。 SS D大腸：大而不透明的紅色菌落。 傷寒 痢疾：中等大小淡黃色菌落。第十七張，PPT共三十九

6、頁，創(chuàng)作于2022年6月大腸桿菌（EMB培養(yǎng)基）第十八張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月腸道致病菌（SS培養(yǎng)基）第十九張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月糞便標本中致病性腸道桿菌的分離與鑒定 第二十張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月生化反應1單糖發(fā)酵葡萄糖及乳糖發(fā)酵 一）實驗目的與原理 了解糖發(fā)酵試驗方法 二）實驗材料 1、菌種：大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌培養(yǎng)物 2、培養(yǎng)基：乳糖及葡萄糖發(fā)酵管 三）實驗方法 、用接種環(huán)將大腸桿菌、傷寒桿菌分別各接種于葡萄糖及乳糖發(fā)酵管中（方法同前）。 2、37孵育1824小時，取出觀察結果。 第二十一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022

7、年6月動力檢測第二十二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月菌名 葡萄糖 甘露醇 乳糖 靛基質 甲基紅 VP 試驗 枸椽 酸鹽 硫化氫 尿素 分解 動力 福氏志賀菌 + + /+ + 傷寒沙門菌 + + + /+ + + 乙型副傷寒沙門菌 + + + 大腸桿菌 + + + 產氣桿菌 + + + 普通變形桿菌 + + /+ + + + 常見腸道桿菌的生化反應鑒別表 第二十三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月斜面 底部 H2S 初步鑒定 + + 非病原菌 非病原菌 + +/ 副傷寒桿菌及其他沙門氏菌 + + 傷寒桿菌 + 痢疾桿菌 鐵質雙糖瓊脂基上各種腸道桿菌的生長情況 第二十四張，P

8、PT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月腸道桿菌在KI培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特性第二十五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月Indol實驗生化反應2Indol實驗第二十六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2. 腸道桿菌在SS培養(yǎng)基上的生長現象示教 大腸桿菌 傷寒桿菌SS平板 紅色大菌落 無色透明小菌落 基礎培養(yǎng)基，乳糖(底物)，膽鹽、煌綠(抑制非致病菌)，中性紅（指示劑）。SS培養(yǎng)基：第二十七張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 五類腸道桿菌的生化反應及動力 示教大腸桿菌 - - + + + /變形桿菌 - + + +/- + - /乙型副傷寒桿菌 - + - - + -/傷寒桿菌

9、 + - +/- - - + -/+痢疾桿菌 + - - - +/- - -/+葡萄糖 乳糖 H2S 尿素 靛基質 動力 雙糖鐵第二十八張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月4. 腸道桿菌未知菌1和未知菌2的鑒定（操作，2人/組）未知菌雙糖鐵培養(yǎng)基(乳糖/固體/上，葡萄糖/半固體/下)生化反應葡萄糖發(fā)酵乳糖發(fā)酵尿素酶試驗H2S試驗靛基質試驗（蛋白胨水液體培養(yǎng)基）動力試驗（半固體培養(yǎng)基）（微量發(fā)酵管） 方法：血清學鑒定（玻片凝集反應）（371824h）第二十九張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月傷寒診斷血清 傷寒診斷血清 + + 未知菌1 未知菌2血清學鑒定（玻片凝集反應）？ ？第三十

10、張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 結果： 雙糖鐵 葡 乳 尿 H2S 靛 動力 血清學 未知菌1未知菌2 結論：未知菌1：？未知菌2：？第三十一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 管號加入物12345血清（Ab）1：250血清0.25ml1:500血清0.25ml1:750血清0.25ml緩沖液0.25ml0.25ml溶血素“O”(Ag)0.25ml0.25ml0.25ml0.25ml2%兔RBC0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml結果第三十三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月Salmonella -Shigella Mediun主要成分 基礎營養(yǎng) 乳糖 指示劑 抑制劑分解乳糖不分解乳糖產酸PH指示劑變紅色紅色大菌落大腸桿菌等無明顯變化無色半透明小菌落志賀菌等第三十四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022