第八章 疾病與人類健康(HIV與HBV)

1、病毒(bngd)疾病共五十頁(yè)第1節(jié) 人類免疫缺陷病毒 人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)是獲得性免疫缺陷綜合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)的病原體，俗稱艾滋病。HIV主要有兩型：HIV-1型：即通常稱謂的HIV，世界上的AIDS多由HIV-1所致；HIV-2型：1986年在西非發(fā)現(xiàn)一種與HIV-1不同的逆轉(zhuǎn)錄病毒，兩者的核苷酸序列差異(chy)超過(guò)40%，稱為HIV-2型，只在西非呈地區(qū)性流行。共五十頁(yè)生物學(xué)性狀形態(tài)(xngti)結(jié)構(gòu)共五十頁(yè)核衣殼 核酸：兩條ssRNA與核衣殼蛋白(dnb

2、i)(P7)結(jié)合形成雙體結(jié)構(gòu) 衣殼：雙層殼膜 內(nèi)層為衣殼蛋白（P24) 外層為內(nèi)膜蛋白（P17)包 膜 脂質(zhì)雙層刺 突 gp120,gp41 生物學(xué)性狀(xngzhung)形態(tài)結(jié)構(gòu)共五十頁(yè) 病毒基因組全長(zhǎng)約9200bp，其5端和3端各有一段相同的核苷酸序列，是長(zhǎng)末端(m dun)重復(fù)序列(LTR)，中間含有env 、pol、gag 3個(gè)結(jié)構(gòu)基因和tat、rev、nef、vif、vpu、vpr等6個(gè)調(diào)節(jié)基因。生物學(xué)性狀(xngzhung)基因組結(jié)構(gòu)與功能共五十頁(yè)結(jié)構(gòu)基因 env基因：編碼gp41：介導(dǎo)病毒包膜與宿主胞膜的融合； gp120：有病毒顆粒與NT抗體及宿主細(xì)胞表面 的CD4分子結(jié)合的部

3、位。 pol基因：編碼產(chǎn)生逆轉(zhuǎn)錄酶(p66/ p53)和整合酶(p31)，與 病毒的復(fù)制有關(guān)。 gag基因：編碼產(chǎn)生蛋白前體，經(jīng)酶解后形成3種蛋白(P17、 P24、P15)。調(diào)節(jié)基因： tat、rev、nef、vif、vpu、vpr tat、rev和nef的產(chǎn)物對(duì)HIV表達(dá)的正、負(fù)調(diào)節(jié)以及(yj)對(duì)維持 HIV在細(xì)胞中復(fù)制平衡和控制HIV潛伏有重要意義。長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTR)：對(duì)病毒轉(zhuǎn)錄的調(diào)控起關(guān)鍵作用。生物學(xué)性狀(xngzhung)基因組結(jié)構(gòu)與功能共五十頁(yè) HIV病毒體的包膜糖蛋白刺突與細(xì)胞上的特異受體結(jié)合，然后病毒包膜與細(xì)胞膜發(fā)生融合。核衣殼進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)脫殼，釋放其核心RNA進(jìn)行復(fù)制。

4、病毒(bngd)的復(fù)制生物學(xué)性狀(xngzhung)共五十頁(yè)病毒變異性 HIV基因組可發(fā)生變異，最易變異的是編碼包膜糖蛋白的env基因和調(diào)節(jié)基因nef。 估計(jì)病毒env基因核苷酸變異概率每年每個(gè)位點(diǎn)約0.1%，其變異率與流感病毒相似。 根據(jù)(gnj)nef基因序列的異同將HIV-1分為M、O、N等3組(group)12個(gè)亞型(subtype)；HIV-2型為AF等6個(gè)亞型。 在非洲主要流的是HIV-1的 A、C、D、和E亞型，我國(guó)云南省感染者主要為B和C亞型。全球流行將以C和E亞型為主，另外各亞型的流行時(shí)間和傳播情況也不同。 生物學(xué)性狀(xngzhung)共五十頁(yè) HIV僅感染表面(biomi

5、n)有CD4受體的細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)室中常用正常人T細(xì)胞分離病毒。感染病毒的細(xì)胞出現(xiàn)CPE。動(dòng)物模型可用HIV感染恒河猴和黑猩猩。 培養(yǎng)(piyng)特性生物學(xué)性狀共五十頁(yè)56加熱 30min；凍干血制品需68 72h方能保證污染病毒(bngd)的滅活；高壓蒸氣滅菌（103.4kpa/121.3）20min可被滅活；10%漂白粉液、0.5%次氯酸鈉、50%乙醇、35%異丙醇、0.3%H2O2、0.5%來(lái)蘇等消毒液中室溫10min保證完全被滅活。 抵抗力HIV的抵抗力不強(qiáng)，以下(yxi)條件可被滅活：生物學(xué)性狀共五十頁(yè)致病性與免疫性傳染源和傳播(chunb)途徑傳染源 a）HIV無(wú)癥狀攜帶者 b）艾滋病

6、患者(hunzh)共五十頁(yè) 2）血液傳播：醫(yī)源性 吸毒者 1）性傳播：STD之一 同性戀 異性戀傳播途徑 3）母致病性與免疫性嬰傳播：胎盤 產(chǎn)道(chndo) 哺乳共五十頁(yè)臨床表現(xiàn) 1)原發(fā)感染致病性與免疫性 HIV進(jìn)入機(jī)體后病毒開始復(fù)制，約在812w時(shí)出現(xiàn)病毒血癥，此期病毒在體內(nèi)廣泛播散，并開始在淋巴樣器官種植，36w在許多病人（50%70%）體內(nèi)發(fā)展成急性單核細(xì)胞(xbo)增多癥樣表現(xiàn)，其后大多數(shù)病毒以前病毒的形式整合于宿主細(xì)胞(xbo)染色體內(nèi)，進(jìn)入長(zhǎng)期的、無(wú)癥狀的潛伏感染期。 共五十頁(yè) 2) 潛伏感染致病性與免疫性 此期可長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月至10年。臨床無(wú)癥狀，有些病人可出現(xiàn)無(wú)痛性淋巴結(jié)腫大。

7、當(dāng)機(jī)體受到各種因素的激發(fā)使?jié)摲腥镜牟《?bngd)再次大量增殖而引致免疫損害時(shí)，才出現(xiàn)臨床癥狀，進(jìn)入AIDS相關(guān)綜合征期。 臨床表現(xiàn)共五十頁(yè) 3)AIDS相關(guān)綜合征致病性與免疫性臨床表現(xiàn)(AIDS-rilated complex,ARC) 早期有發(fā)熱、盜汗、全身倦怠、體重下降(xijing)、皮疹及慢性腹瀉等胃腸道癥狀，并有進(jìn)行性淋巴結(jié)病及舌上白斑等口腔損害。 共五十頁(yè)4)典型AIDS致病性與免疫性臨床表現(xiàn) 出現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患; 合并各種條件致病菌(如分枝桿菌、念珠菌、卡氏肺孢菌等)或其他病毒(如EBV，CMV、HHV-8型等)感染； 并發(fā)卡波濟(jì)肉瘤(Kaposi sarcoma) 。 在

8、感染后10年內(nèi)約有50%的人會(huì)發(fā)展(fzhn)為AIDS。AIDS的5年間死亡率約為90%，多于臨床癥狀出現(xiàn)后2年內(nèi)死亡。 共五十頁(yè)HIV的致病機(jī)制1）選擇性地侵犯CD4+T 細(xì)胞，CD4/CD8比例倒置，導(dǎo)致(dozh)免疫功能紊亂。2）HIV感染后B細(xì)胞多克隆活化，出現(xiàn)高丙球蛋白血癥，循環(huán)血中免疫復(fù)合物及自身抗體含量增高，但對(duì)新抗原刺激的應(yīng)答受到很大阻礙。3）單核巨噬細(xì)胞也表達(dá)少量CD4分子，受HIV感染后通常不被殺死，成為感染后較長(zhǎng)時(shí)期的病毒儲(chǔ)存者。4）HIV感染所致神經(jīng)細(xì)胞損害：約有4090的AIDS患者出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)異常，包括HIV腦病、脊髓病變、周圍神經(jīng)炎和嚴(yán)重的AIDS癡呆綜

9、合征。致病性與免疫性共五十頁(yè)HIV對(duì)CD4+T 細(xì)胞損害的機(jī)制 1）病毒感染對(duì)細(xì)胞的直接殺傷作用a.病毒包膜糖蛋白插入細(xì)胞膜或病毒的出芽釋放，增加了細(xì)胞膜的通透性；b.HIV增殖時(shí)可產(chǎn)生大量未整合的病毒cDNA,干擾(gnro)細(xì)胞的正常生物合成；c.感染T細(xì)胞表面gp120與非感染細(xì)胞的CD4結(jié)合，細(xì)胞融合死亡，T細(xì)胞減少。 2)免疫病理所引起的細(xì)胞損傷：a.受染細(xì)胞膜上表達(dá)病毒的包膜糖蛋白，可激活特異性CTL的識(shí)別，或與特異 性抗體結(jié)合后通過(guò)ADCC作用而破壞細(xì)胞；b.HIV的gp120與細(xì)胞膜上的MHC類分子有一同源區(qū)，抗gp120抗體能與這類 T細(xì)胞起交叉反應(yīng)，即病毒誘導(dǎo)的自身免疫使細(xì)

10、胞造成免疫病損害或功能障礙。 3)HIV感染誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡：病毒激活T細(xì)胞凋亡基因，表達(dá)FAS受體，當(dāng)其與細(xì)胞表面FAS結(jié)合后最終導(dǎo)致感染細(xì)胞死亡。 致病性與免疫性共五十頁(yè)3.機(jī)體對(duì)HIV感染的免疫應(yīng)答(yngd) 機(jī)體感染HIV后產(chǎn)生多種抗體，包括抗gp120等中和抗體。HIV感染也可刺激機(jī)體細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答，包括CTL細(xì)胞、NK細(xì)胞及ADCC的殺傷活性，但細(xì)胞免疫依然不能清除有HIV潛伏感染的細(xì)胞，這與病毒能逃逸免疫作用有關(guān)，如:HIV損傷CD4細(xì)胞，使整個(gè)免疫系統(tǒng)的功能失效；病毒基因整合于宿主細(xì)胞染色體中，細(xì)胞不表達(dá)或少表達(dá)病毒結(jié)構(gòu)蛋白，使宿主長(zhǎng)期呈“無(wú)抗原狀態(tài)；病毒包膜糖蛋白的一些區(qū)段的

11、高變異性，致使不斷出現(xiàn)新抗原而逃逸免疫系統(tǒng)的識(shí)別；HIV對(duì)各種免疫細(xì)胞均有損害。故表明機(jī)體的免疫力不足以清除病毒，HIV一經(jīng)感染便終生攜帶病毒。致病性與免疫性共五十頁(yè) HIV感染早期呈病毒血癥時(shí)，從病人血液、腦脊液和骨髓細(xì)胞中能分離到病毒，從血清中查到HIV抗原； 無(wú)癥狀的潛伏期內(nèi)一般不能或很少?gòu)耐庵苎袡z測(cè)到HIV抗原； 進(jìn)入AIDS相關(guān)(xinggun)綜合征或典型AIDS期，于外周血中均可查到病毒抗原、核酸及抗體。微生物學(xué)(wi shn w xu)檢查法共五十頁(yè)檢測(cè)抗體 ELISA、IFA、RIA: 敏感性好，應(yīng)用方便(fngbin)。尤其ELISA法目前最為常用。但由于HIV的全病毒抗

12、原與其他逆轉(zhuǎn)錄病毒（HTLV）有交叉反應(yīng)，而且病毒系芽生釋放，病毒包膜中常帶有細(xì)胞成分，故有一定的假陽(yáng)性。因此，這類試驗(yàn)僅適用于篩查HIV抗體. Western Blot（WB）: HIV抗體陽(yáng)性者進(jìn)一步用WB法予以確認(rèn)。微生物學(xué)(wi shn w xu)檢查法共五十頁(yè)檢測(cè)病毒及其組分病毒分離 ：取新鮮分離的正常人淋巴細(xì)胞或臍血淋巴細(xì)胞接種病人的 血液?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、血漿或腦脊液等標(biāo)本。培養(yǎng)24周，細(xì)胞病變出現(xiàn)后，可用間接免疫熒光法檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中的病毒抗原，或用生化方法檢測(cè)培養(yǎng)液中的逆轉(zhuǎn)錄酶活性。檢測(cè)病毒抗原 ：常用ELISA法檢測(cè)衣殼蛋白(dnbi)。P24多出現(xiàn)于HIV感染的急性期，

13、而在潛伏期中為陰性，到出現(xiàn)典型的艾滋病癥狀時(shí)，p24 又可重新升高。 檢測(cè)病毒核酸： 應(yīng)用核酸雜交法檢測(cè)整合在細(xì)胞中的前病毒DNA片段，可確定細(xì)胞中HIV潛伏感染的情況。應(yīng)用PCR檢測(cè)HIV的前病毒DNA，或用逆轉(zhuǎn)錄-PCR法檢測(cè)病毒的RNA。微生物學(xué)(wi shn w xu)檢查法共五十頁(yè)防治(fngzh)原則 WHO和包括我國(guó)在內(nèi)的許多國(guó)家都制定了控制HIV感染的措施：建立HIV感染和AIDS的監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)，控制疾病的流行蔓延(mn yn)；進(jìn)行廣泛的宣傳教育，取締娼妓，防止性傳播疾病的流行，抵制吸毒等社會(huì)弊??；檢測(cè)高危險(xiǎn)人群包括供血員、同性戀、靜脈注射毒品成癮者、血友病患者，國(guó)外旅游者和外事

14、使館人員等；禁止進(jìn)口血液制品，如凝血因子等；加強(qiáng)國(guó)境檢疫、留檢等。共五十頁(yè)疫苗研究 尚缺乏理想的疫苗,目前研究得最多的是：1.基因工程亞單位疫苗: HIV的包膜糖蛋白gp160,gp120和gp41已在細(xì)菌、酵母和真核細(xì)胞系統(tǒng)表達(dá)成功，免疫人和動(dòng)物后可誘生特異性中和抗體(kngt)和激發(fā)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)，在黑猩猩實(shí)驗(yàn)中已證明有保護(hù)作用。 2.合成寡肽疫苗 根據(jù)gp120分子中的主要中和決定簇（V3區(qū)）、與CD4受體結(jié)合區(qū)（C4區(qū)）和部分T細(xì)胞決定簇（C1、C4區(qū)）的氨基酸順序，合成各種HIV的寡肽疫苗。在實(shí)驗(yàn)中已證明V3肽可以刺激動(dòng)物和人產(chǎn)生抗HIV的中和抗體和細(xì)胞毒T細(xì)胞反應(yīng)。 3.重組

15、病毒載體活疫苗 用痘苗病毒、腺病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗株作載體，將HIV基因插入構(gòu)建成重組病毒載體疫苗。動(dòng)物試驗(yàn)已證明能產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫和中和抗體。用表達(dá)HIVgp160、gp120蛋白的重組疫苗病毒接種志愿者后，可以產(chǎn)生較強(qiáng)的T細(xì)胞免疫反應(yīng)，但體液免疫相對(duì)較弱。 防治(fngzh)原則共五十頁(yè)AIDS的治療阻止HIV吸附穿入的重組可溶性CD4分子(rsCD4)的使用；給予抑制病毒逆轉(zhuǎn)錄酶活性的核苷類似物如疊氮胸苷(azidothymidine,AZT),雙脫氧肌苷(2，,3，-dideoxyinosine,DDI)與2，,3，-雙脫氧肌苷(2，,3，- dideoxyinosine,DDC

16、)等；非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，如德拉維拉丁(Delaviradine)和耐維拉平(Nevirapine)等，國(guó)內(nèi)多用施多寧；近年來(lái)研制的蛋白酶抑制劑，如佳息患、賽科納瓦(sapuinavir)、瑞托納瓦(ritonavir)以及英迪納瓦(indinavir)等；免疫調(diào)節(jié)劑，如IFN-，IL-2和胸腺素等。 “雞尾酒療法”：聯(lián)合(linh)交替使用2種HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和1種HIV蛋白酶抑制劑，可有效地把血液中的HIV含量減少到最低(外周血中測(cè)不出HIV或其RNA)，因而能減輕癥狀及延緩生命。但無(wú)法清除整合在CD4+細(xì)胞染色體上的前病毒，因此仍不能從體內(nèi)徹底清除HIV。 防治(fngzh)原則

17、共五十頁(yè)第2節(jié) 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）屬嗜肝DNA病毒科（hepadnaviridae）。 HBV的發(fā)現(xiàn)源于表面抗原的研究。 1963年Blumberg首先在澳大利亞土著人血清中發(fā)現(xiàn)一種新抗原，稱為澳大利亞抗原（Australia antigen）；直至1968年確定這種抗原與血清型肝炎密切相關(guān)，稱為肝炎相關(guān)抗原（hepatitis associated antigen，HAA）；1970年D.S. Dane在肝炎患者血清中發(fā)現(xiàn)具有傳染性的顆粒，即Dane顆粒（Danes particle）。從而HBV被確認(rèn)。 HBV是乙型肝炎病原體，主要經(jīng)輸

18、血、注射、性行為和母嬰傳播。起病(q bn)徐緩，部分患者可轉(zhuǎn)為慢性，少數(shù)還可導(dǎo)致肝硬化和肝癌。共五十頁(yè)形態(tài)與結(jié)構(gòu) 完整的HBV顆粒亦稱Dane顆粒，直徑為42nm，具有雙層核殼結(jié)構(gòu)：核心(hxn)顆粒：直徑為28nm。 顆粒內(nèi)部：DNA和DNA多聚酶。 顆粒表面（內(nèi)衣殼）：含有HBcAg 和HBeAg 。外殼（包膜）：厚7nm。 脂質(zhì)雙層：含有HBsAg、PHSAr 和PreSAg 蛋白質(zhì)生物學(xué)性狀(xngzhung)共五十頁(yè)小球形顆粒，直徑(zhjng)22nm；管形顆粒，直徑22nm，長(zhǎng)度在50700nm之間；大球形顆粒，即Dane顆粒，直徑42nm。生物學(xué)性狀(xngzhung)形態(tài)與

19、結(jié)構(gòu)共五十頁(yè)HBV基因結(jié)構(gòu)及復(fù)制HBV基因結(jié)構(gòu) HBV DNA是由長(zhǎng)鏈L (負(fù)鏈) 和短鏈S (正鏈) 組成的不完全(wnqun)雙鏈環(huán)狀DNA(cccDNA)，短鏈的長(zhǎng)度相當(dāng)于長(zhǎng)鏈的50%85%。 HBV DNA長(zhǎng)鏈載有病毒蛋白質(zhì)的全部密碼，有4個(gè)開放讀碼框架(ORF)，分別稱為S、C、P和X區(qū) 。生物學(xué)性狀(xngzhung)共五十頁(yè)HBV基因結(jié)構(gòu)S區(qū)基因：包括S基因、PreS1與PreS2基因，分別編 碼HBsAg、PreS1和PreS2 Ag。C區(qū)基因：編碼(bin m)HBcAg，還有一個(gè)PreC區(qū)可能在病毒核 心和外殼的附著及結(jié)合中起作用。P區(qū)基因：最長(zhǎng)，編碼HBV DNA多聚酶、

20、逆轉(zhuǎn)錄酶以及 RNaseH。X區(qū)基因：編碼X 蛋白，可反式激活一些細(xì)胞的癌基因 及病毒的基因等，可能與肝癌的發(fā)生有關(guān)。生物學(xué)性狀(xngzhung)共五十頁(yè)HBV的復(fù)制(fzh)生物學(xué)性狀(xngzhung)共五十頁(yè)抗原(kngyun)組成 生物學(xué)性狀(xngzhung)外殼：HBsAg：是機(jī)體受HBV感染的主要標(biāo)志之一。 具有抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性抗體，即抗HBs 。 根據(jù)HBsAg抗原性差異，HBV可分為adr、adw、ayr、 ayw 等4種血清型。血清型分布有明顯的地區(qū)差異，并與 種族有關(guān)。如歐美主要是adr型，為A基因型；我國(guó)以 adr、ayw為多見(jiàn)。PreS1和PreS2：存

21、在吸附肝細(xì)胞受體的表位； 其抗原性比HBsAg 更強(qiáng)，抗PreS1和抗PreS2通過(guò)阻 斷HBV與肝細(xì)胞的結(jié)合而起抗病毒作用。共五十頁(yè)生物學(xué)性狀(xngzhung)衣殼HBcAg：HBcAg主要定位于感染細(xì)胞核內(nèi)，不易從患者血清中檢出。 但HBcAg也可在肝細(xì)胞膜表面表達(dá)，宿主CTL作用的主要 靶抗原。 HBcAg抗原很強(qiáng)，能刺激機(jī)體產(chǎn)生抗HBc，但無(wú)中和作用。 檢出高效價(jià)抗HBc，特別是抗HBc IgM則表示HBV在肝內(nèi) 處于復(fù)制狀態(tài)。HBeAg：HBeAg可作為(zuwi)HBV復(fù)制及血清具有傳染性的標(biāo)志。 急性乙型肝炎進(jìn)入恢復(fù)期時(shí)HBeAg消失，抗HBe陽(yáng)性；但 抗HBe亦見(jiàn)于攜帶者及慢

22、性乙型肝炎血清中。 抗原組成共五十頁(yè)易感動(dòng)物和細(xì)胞培養(yǎng)只有黑猩猩對(duì)HBV易感，接種后可發(fā)生與人類相似的急慢性感染。 體外細(xì)胞培養(yǎng)尚未成功。近年來(lái)應(yīng)用基因克隆技術(shù)，可使HBV基因轉(zhuǎn)移(zhuny)給小鼠或轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。將病毒DNA導(dǎo)入肝癌細(xì)胞后，病毒可復(fù)制并在細(xì)胞中表達(dá)HBsAg、HBcAg和HBeAg。有此細(xì)胞株可持續(xù)地產(chǎn)生Dane顆粒。這些細(xì)胞培養(yǎng)可用于抗HBV藥物的篩選、疫苗制備及HBV致病機(jī)制研究等。生物學(xué)性狀(xngzhung)共五十頁(yè)抵抗力 HBV 對(duì)理化因素的抵抗力相當(dāng)強(qiáng)： 對(duì)低溫、干燥、紫外線、醚、氯仿(l fn)、酚等均有抵抗性。 高壓滅菌 (12115min)、0.5%過(guò)氧乙酸

23、、5%次氯酸鈉、3%漂白粉液、0.2%新潔爾滅等均可使HBV失活。 但應(yīng)指出，HBV的感染性與HBsAg的抗原活性并非一致。如10010min或pH2.4處理6h均可使HBV失去感染性，但仍保持HBsAg的抗原活性。生物學(xué)性狀(xngzhung)共五十頁(yè)傳染源和傳播(chunb)途徑 傳染源 急性、慢性乙肝患者及HBsAg無(wú)癥狀攜帶者均為傳染源，特別是無(wú)癥狀的HBsAg攜帶者做為傳染源危害性更大。致病性和免疫性共五十頁(yè) 乙型肝炎主要是經(jīng)血液或注射途徑傳播即非胃腸道的感染 (parenteral infection)：1.血液、血制品傳播：有少數(shù)HBsAg陰性、而HBV DNA陽(yáng) 性的血液仍可引

24、起感染。2.醫(yī)源性傳播：通過(guò)注射、手術(shù)、采血、拔牙、內(nèi)窺鏡檢查、預(yù)防接種、針刺、紋身、各種醫(yī)療器具、甚至工作人員的手，均可傳播乙型肝炎。3.母嬰傳播主要是在圍產(chǎn)期，分娩時(shí)新生兒經(jīng)產(chǎn)道接觸或吸吞入含HBV的母血、羊水、或分泌物所致，少數(shù)可由于宮內(nèi)感染(10%)，也可通過(guò)母乳、體液或密切接觸而傳播。4.接觸傳播：日常生活中如共用牙刷、洗澡刷子、剃須刀等可引起HBV感染。通過(guò)唾液傳播的可能性也應(yīng)受到重視。性交，尤其男性同性戀亦可傳播HBV。因此，在西方國(guó)家將乙肝列為性傳播疾病(jbng)(STD)之一。尿液、鼻液、汗液和糞-口傳播的可能性很小。致病性和免疫性傳播(chunb)途徑共五十頁(yè)致病機(jī)制 乙

25、型肝炎的臨床表現(xiàn)呈多樣性，可表現(xiàn)為無(wú)癥狀病毒攜帶者、急性肝炎、慢性(mn xng)肝炎及重癥肝炎等。 HBV的致病機(jī)制，除了HBV對(duì)肝細(xì)胞直接損害外，主要是通過(guò)宿主的免疫應(yīng)答引起肝細(xì)胞的病理改變的臨床表現(xiàn)。 致病性和免疫性共五十頁(yè)1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫病理?yè)p傷 2體液(ty)免疫所致的免疫損傷 3自身免疫所致的損傷 致病性和免疫性共五十頁(yè)免疫性 體液免疫： 抗HBs：中和體液中HBV，使其失去感染性。 抗PreS2：封閉病毒與肝細(xì)胞表面的PHSA受體，阻止 病毒吸附于肝細(xì)胞。 抗Hbe：可通過(guò)與肝細(xì)胞表面HBeAg結(jié)合后，通過(guò)補(bǔ)體 介導(dǎo)而參與破壞病毒感染的肝細(xì)胞。 細(xì)胞免疫：主要依靠CTL。CTL對(duì)

26、HBV感染的肝細(xì)胞(靶細(xì) 胞)有直接殺傷(shshng)作用。據(jù)認(rèn)為，針對(duì)HBcAg的CTL在清 除HBV感染的靶細(xì)胞中有較重要的作用。致病性和免疫性NT抗體(kngt)共五十頁(yè)HBV與原發(fā)性肝癌 HBV感染與原發(fā)性肝癌的發(fā)生有密切關(guān)系，其依據(jù)是：經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查表明，乙型肝炎患者及HBsAg攜帶者的原發(fā)性肝癌發(fā)生率明顯高于未感染人群（危險(xiǎn)性高217倍）；用與HBV分子生物學(xué)相似的土撥鼠肝炎病毒(bngd) (WHV) 可誘發(fā)土撥鼠原發(fā)性肝癌。而未感染鼠則無(wú)一只發(fā)生肝癌；用HBVDNA探針與肝癌組織進(jìn)行Southern 印跡核酸雜交時(shí)，獲得陽(yáng)性結(jié)果，說(shuō)明肝癌細(xì)胞染色體上整合有HBVDNA。致病性

27、和免疫性共五十頁(yè) 最常用的是采用(ciyng)血清學(xué)方法檢測(cè)患者血清中HBV抗原、抗體，并根據(jù)這些標(biāo)志進(jìn)行分析判斷。 近年來(lái)，臨床上也常采用PCR技術(shù)對(duì)乙型肝炎進(jìn)行輔助診斷。 微生物學(xué)(wi shn w xu)檢查法共五十頁(yè)檢測(cè)HBV抗原、抗體 常用的方法有RIA、ELISA法，間接血凝、反向間接血凝，對(duì)流免疫電泳、雙向瓊脂擴(kuò)散法等，其中最敏感的方法是RIA、ELISA。 檢測(cè)的項(xiàng)目主要是HBsAg和抗HBs、HBeAg和抗HBe、以及抗HBcIgM和抗HBcIgG，必要時(shí)也可檢測(cè)PHSA、PreS1和PreS2的抗原和抗體。上述各項(xiàng)檢查(jinch)組成一套乙型肝炎病毒抗原抗體檢測(cè)系統(tǒng) (H

28、BV血清標(biāo)志) 。微生物學(xué)(wi shn w xu)檢查法共五十頁(yè)1. HBsAg：感染性（+）；傳染性（+）； 抗HBs： NT抗體，免疫力（+）；2. HBcAg：DNA復(fù)制標(biāo)志，血清(xuqng)中（-），肝細(xì)胞核內(nèi) （+）； 抗HBc：無(wú)中和作用，包括 抗HBc IgM ：急性乙肝 抗HBc IgG：恢復(fù)期3. HBeAg：感染性（+）；傳染性（+）；恢復(fù)期（-）； 抗Hbe：無(wú)中和作用，恢復(fù)期（+），攜帶者，慢性（+）；4. PreS1、PreS2和PHSA受體：新感染（+）； 抗PreS1、抗PreS2： NT抗體，恢復(fù)期（+）；微生物學(xué)(wi shn w xu)檢查法共五十頁(yè)微生

29、物學(xué)(wi shn w xu)檢查法HBV感染血清(xuqng)標(biāo)志及其臨床意義HBsAgHBeAg抗HBc 抗HBe抗HBs結(jié) 果 解 釋IgMIgG-+感染過(guò)HBV或接種過(guò)乙肝疫苗,有免疫力+-/+-肝功正常為無(wú)癥狀攜帶者;肝功異常為正患乙肝;+-+-（小三陽(yáng)）正患乙肝,肝炎趨向好轉(zhuǎn)，有傳染性+/-+-正患肝炎,或趨于恢復(fù)，有傳染性+/-（大三陽(yáng)）正患乙肝,病毒復(fù)制,傳染性強(qiáng)-+/-+乙型肝炎恢復(fù)期共五十頁(yè)血清HBV DNA檢測(cè) 核酸(h sun)分子雜交及PCR技術(shù)檢測(cè)HBV DNA可用于乙型肝炎的診斷及流行病學(xué)調(diào)查。 常用斑點(diǎn)雜交法將特異的HBV DNA探針與患者血清進(jìn)行雜交檢測(cè)血清中HBV DNA，方法敏感、特異，能測(cè)出0.1-1pg核酸。 用PCR技術(shù)檢測(cè)患者血清中HBV D