其他陰性桿菌及檢驗

1、其他桿菌及檢驗考點桿菌屬生物學(xué)性狀臨床意義微生物學(xué)檢查軍團菌屬、【內(nèi)容講解】菌屬、布魯菌屬其他桿菌：一些無動力，無芽胞，菌體小，形態(tài)近似球桿菌，對營養(yǎng)要求較苛刻的小桿菌。主要包括桿菌屬、菌屬、布魯菌屬等。一、桿菌屬一類無動力、無芽胞的小桿菌，常呈球桿狀，有時呈桿狀、長絲狀等多形態(tài)。與臨床有關(guān)的為 9 個種，即流感、副流感、溶血、副溶血、嗜沫、副嗜沫、埃及桿菌。人工培養(yǎng)基中加入新鮮血液才能生長，故稱桿菌。（二）流感桿菌簡稱流感桿菌，不是流感的病原菌。1.生物學(xué)性狀（1）形態(tài)與染色：急染標(biāo)本，如腦脊液中多為短小球桿菌，恢復(fù)期病灶或長期人工傳代培養(yǎng)呈球桿狀、長桿狀、絲、狀等多形態(tài)性。G-，較淺。石碳

2、酸復(fù)紅或美藍單染色，兩端濃染現(xiàn)象。毒力株（粘液型菌株）在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上，68h 有明顯莢膜，在陳舊培養(yǎng)物中莢膜無鞭毛，無芽胞。（2）培養(yǎng)特性：。需氧菌。初次分離培養(yǎng)時，最好在 5%10%C02 環(huán)境中，以促進其生長。普通培養(yǎng)基中須加入 X 和 V 因子，才能生長。巧克力瓊脂平板上生長較佳：圓形、光滑、濕潤、邊緣整齊，呈露滴狀的小菌落。48h 后可形成直徑 1.01.5mm 灰白色較大的菌落。有莢膜菌株的菌落呈輕度粘稠?，F(xiàn)象：有助于對流感桿菌的鑒定。當(dāng)流感桿菌與金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上共同培養(yǎng)時，由于后者能較多的V 因子，可促進流感桿菌的生長，在葡萄球菌菌落周圍生長的流感越小。桿菌菌落較

3、大，離葡萄球菌菌落越遠的菌落液體培養(yǎng)基中：有莢膜的菌株呈均勻混濁生長，無莢膜的 R 型菌株則為顆粒狀沉淀生長。（3）生化反應(yīng)：對糖發(fā)酵不穩(wěn)定。一般分解葡萄糖只產(chǎn)酸，不分解乳糖或甘露醇，對麥芽糖、蔗糖或糊精的發(fā)酵不穩(wěn)定。還原硝酸鹽。有莢膜菌株產(chǎn)生吲哚。典型菌株不溶血。產(chǎn)生自溶酶，可被膽汁溶解。2.致病性致病物質(zhì)為內(nèi)毒素、莢膜、菌毛和酶類。通過呼吸道，引起性或繼發(fā)染。染多由 b 型莢膜強毒株引起，為急性化膿，如腦膜炎、鼻咽炎、咽喉會厭炎、化膿性關(guān)節(jié)炎、心包炎及敗血癥等。繼發(fā)主要在流感、麻疹、百日咳、肺結(jié)核等后發(fā)生，多為無莢膜菌株引起。如慢性支氣管炎、中耳炎、鼻竇炎等。3.微生物檢驗如何提高流感桿菌

4、的陽性率：初次培養(yǎng)應(yīng)在 50%10%CO2 環(huán)境。生長需要 X、V 因子，故在培養(yǎng)基中應(yīng)添加此因子。應(yīng)用選擇性培養(yǎng)基，如巧克力瓊脂中加一定量抗生素，（三）其他桿菌桿菌分離率可達 96.7%。二、軍團菌屬1.命名和分類976 年在費城召開的全美退伍會議期間，暴發(fā)流行一種嚴(yán)重，與會者 149 人,有 34 人。從死者肺組織中分離到一種新菌，1978 年疾病控制中心將其命名為軍團菌。系統(tǒng)細菌學(xué)手冊（1984）定為軍團菌科，軍團菌屬。從分離的已有 19 種，其中主要致病菌為嗜肺軍團菌。2.生物學(xué)性狀G-桿菌，常規(guī)染色不易，有端生或鞭毛。需氧菌。含有 2.55%CO2 環(huán)境中生長良好。菌種溶血性致病性流

5、感桿菌+-性化膿染及繼發(fā)染等副流感桿菌-+-偶可引起細菌性心內(nèi)膜炎、炎埃及桿菌+-急性、亞急性眼結(jié)膜炎桿菌+-+/-軟性下疳嗜沫桿菌+-偶引起細菌性心內(nèi)膜炎或腦膿腫溶血性桿菌+很少致病營養(yǎng)要求較苛刻，且生長緩慢，初次分離需 L-半胱氨酸，培養(yǎng)基中含鐵鹽可促進生長?；钚蕴?酵母浸出液瓊脂（BCYE）培養(yǎng)基：35 天形成 12mm 圓形凸起，灰白色有光澤的菌落。觸酶陽性，部分菌株氧化酶陽性，不分解糖類，多數(shù)菌株產(chǎn) -內(nèi)酰胺酶。具有O、H 抗原，H 抗原無特異性，O 抗原具有特異性。自然界廣泛存在，人工管道的水源中常存在此菌，如醫(yī)院空調(diào)冷卻水中常有此菌，對常用化學(xué)劑敏感。3.微生物檢驗直接涂片意義不

6、大。分離培養(yǎng)后的菌落進行染色鏡檢，進行氧化酶和觸酶試驗，明膠液化試驗及 -內(nèi)酰胺酶試驗利用PCR 技術(shù)及熒光抗體染色進行鑒定。臨常利用學(xué)方法檢測軍團菌抗體 IgG、IgM。有交叉反應(yīng)，應(yīng)引起注意。4.臨床意義引起軍團病，主要由嗜肺軍團菌，輕癥型類似流感，有發(fā)燒、頭痛、無力等癥狀。重癥型是以。肺部為主要特征，常導(dǎo)致多損害，最終導(dǎo)致呼吸衰竭5.結(jié)果評價及治療原則呼吸道標(biāo)本中分離出軍團菌，應(yīng)確定為軍團菌一般治療方案為大環(huán)內(nèi)酯類加。三、菌屬G-小桿菌營養(yǎng)要求很高，血平板及巧克力平板不生長，常用鮑-金培養(yǎng)基進行分離培養(yǎng)。不發(fā)酵糖類，不產(chǎn)生 H2S、吲哚，不液化明膠，不能還原硝酸鹽，不能利用枸櫞酸鹽。該菌

7、抵抗力弱，56 30 分鐘、日光照射 1 小時可致。毒素：即百日咳毒素、絲狀血細胞凝集素和腺嘌呤環(huán)化酶毒素。百日咳菌和副百日咳菌是百日咳的病原菌。主要通過飛沫經(jīng)呼吸道，引起百日咳。傳染源主要是早期患者和帶菌者。主要癥狀為陣發(fā)性劇烈咳嗽。由于病程較長，故名百日咳。病后或預(yù)防接種后，可獲得持久免疫力，再次少見。氣管粘膜局部的 sIgA 抗作用重要。四、布魯菌屬生物學(xué)性狀：G-小桿菌或球桿菌，無動力，無芽胞和莢膜。需氧，對營養(yǎng)要求較高，在血瓊脂平板上培養(yǎng) 57 天可形成微小、灰色不溶血菌落。利用葡萄糖等糖類，尿素酶陽性，硝酸鹽還原試驗陽性。檢測：凝集反應(yīng)，PCR 檢測，抗體檢測。臨床意義：人畜共患性

8、疾病的病原菌，布魯菌可通過人類疫膚、呼吸道和消化道進入而，進入后首先局部淋，之血，再進入肝、脾、骨髓等，患者熱型呈波浪熱。治療：首選多西環(huán)素，次選 TMP/SMZ，用藥需 46 周。五、主要有土拉。菌屬和新菌，是野生動物的自然疫源性疾類多由于接觸患病動物而【例題】軍團菌病的A.食物 B.空氣 C.血液D.皮膚接觸E.動物媒介是經(jīng)答疑502389210101【正確】B【例題】分離流感 桿菌常用的培養(yǎng)基為A.血瓊脂平板培養(yǎng)基 B.巧克力瓊脂培養(yǎng)基 C.SS 培養(yǎng)基D.TCBS 培養(yǎng)基E.答疑培養(yǎng)基502389210102【正確】B【例題】慢性波浪熱患者分離布魯菌陽性率最高的標(biāo)本是A.血液 B.糞便 C.尿液 D.痰液E.骨髓答疑502389210103【正確】E【例題】培養(yǎng)分離軍團菌可以采用A.血平板B.培養(yǎng)基C.活性炭酵母浸液瓊脂 D.堿性平板E.沙保弱培養(yǎng)基答疑502389210104【正確】C【例題】三聯(lián)的組成是A.白喉類毒素、百日咳類毒素、破傷風(fēng)類毒素B.白喉類毒素、百日咳死菌苗、破傷風(fēng)類毒素 C.白喉死菌苗、百日咳死菌苗、破傷風(fēng)類毒素 D.白喉死菌苗、百日咳死菌苗、破傷風(fēng)死菌苗E.白喉類毒素、百日咳類毒素、破傷風(fēng)死菌苗答疑502389210105【正確】B【例題】屬于動物源性細菌的是A.布魯菌B.百日咳菌C.結(jié)核分枝桿菌