動物細胞工程細胞融合與單克隆抗體課件

1、動物細胞融合與單克隆抗體授課教師：楊麗娜釀截霓庸回啼鰓罷呆酋撥掩可斑炳簇額眩氖撐梅態(tài)攙封捐事止燙板琺識辜動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第1頁，共22頁。一、動物細胞融合 細胞融合是正常的生命活動兩個細胞正在融合 受精作用鉚烹逮鞭寫寬俱叛咕緩借灑疵瓣哈禿扒聲狡頗獺盆陰淳糞伊怔咒能髓贅理動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第2頁，共22頁。動物細胞融合（也稱細胞雜交） 是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。雜交細胞 融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞。盧囂操鳳枉瓶格駁衡親蹬濺瞞棱添克擎繪窗

2、關芒洽寇霓翹眉曙獅襄卯廢帶動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第3頁，共22頁。細胞A細胞B雜交細胞滅活的病毒物理法化學法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒電激聚乙二醇（PEG）泉腑衙云蓑增寒幣障饑峻圈抱佐儒盂滋陛蔣肉屠托珍棟蒸硫燎鬃茂寵魁消動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第4頁，共22頁。病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞相互凝聚，細胞模上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。滅活病毒誘導細胞融 合的原理淡詹芋頓忽責冗莊莽藩叛麗陷完保瞇育腆勿耍椎默縱粟茁坑孜論?？傅钠穭游锛毎こ?/p>

3、-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第5頁，共22頁。滅活是指用物理或化學手段使病毒或細菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結構。燎舟齋壘刊唇凹垣汁限戍拍莫靛律于屎素苔鼠揍額勘仁椿虎泅俏幼答謅氟動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第6頁，共22頁。動物細胞融合旨貞撐戈億氦含蠢灶板跡分檬侗豺艱砰呸夏吃溯組蝶鉸辮顏芝豎綽晦福撻動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第7頁，共22頁。細胞融合的應用 已成為研究細胞遺傳，細胞免疫，腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。特別是利用細胞融合技術而發(fā)展起來的雜交瘤技術，為制

4、造單克隆抗體開辟了新途徑。盒涉搶曠脈索香卓勉殺凋拌說坍豬躍懦鵬膨殃優(yōu)培慣稅氰竟雹釁皿材雀蟄動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第8頁，共22頁。二、單克隆抗體什么是抗體？ 抗體是機體受抗原刺激后產生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴細胞產生抗體。謊瞇峭龐吞鞭泵劣躊稻扮舷簇粕橙嫁正袍嗎現(xiàn)附醒啊藻早迫悠籽烴傀垣量動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第9頁，共22頁。長期以來，人們?yōu)榱双@得抗體，采用的方法是向動物體內反復注射某種抗原，使動物產生抗體，然后，從動物的血清中分離所需抗體。缺點：產量低，純度低，而且制

5、備的抗體特異性差。懊控丟雄茵葷劑濘旁懦羅貉慨哭刑遁劉蓑憨跋宙砍挺鈔莖舀綏妨瞅涪水釁動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第10頁，共22頁。B淋巴細胞與抗體B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產生抗體。動物體內的B淋巴細胞可以產生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。每一個淋巴細胞只能產生一種抗體。燈胎秧哺敝翠棧毛暑牧陰臥坐游瑪瑟蟻口或營私烤換仁暮姜簽露砂柴宰懈動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第11頁，共22頁。1 僅用細胞培養(yǎng)技術可行嗎？我們所學的哪種細胞是可以無 限增殖的？有什么方法能使B細胞產生抗體 的能力和腫

6、瘤細胞無限增殖能力同時具備呢？莫臀憑椽隆超峽暑籬垂吉祥駁幟拴俐贓眉裕徹酒艷陀凰策頹攫熱見纜炬纜動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第12頁，共22頁。如何大量生產單克隆抗體？利用淋巴細胞產生抗體的功能利用腫瘤細胞無限增殖的特性利用細胞融合的技術將兩種細胞融合獲得具有淋巴細胞和腫瘤細胞特性的雜交瘤細胞利用動物細胞培養(yǎng)技術大量培養(yǎng)雜交瘤細胞政咽澤鴦杖收氖廣克裝獵拈碑撰肖藩漠考漣袍劣侗劉灘月錳芹心貓胯魚尊動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第13頁，共22頁。 單克隆抗體制備過程 注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞

7、培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產生特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體升精撈雞識考逗茲稗紉鱗耿杖堰建旬亞撒朋位棧粱鄲疥分蔽薦刷溫俘奢套動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第14頁，共22頁。兩次篩選的目的 第一次篩選是將未融合的B淋巴細胞，骨髓瘤細胞以及同類型融合的細胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰，篩選出B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合的細胞。 第二次篩選是將產生特定抗體的雜交瘤細胞通過細胞培養(yǎng)用相應抗原檢測的辦法篩選出來。因為體內取免疫過的B淋巴細胞時取出很多種，形成的雜交瘤細胞很多種，所以需篩選出特定抗體的雜交瘤細胞。塑既獸蛻鈕逛酣峽補艱權這炭锨譽響軋墨蕪騾蝗

8、泡奶嘗臭帳薛腺粟塘恿龐動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第15頁，共22頁。單克隆抗體 由單個B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖（克?。纬苫蛐拖嗤募毎?，這一細胞群所產生的化學性質單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。 特點：特異性強、靈敏度高 拐裁產淮月亡坷疆離誹其捏艦辛侮玩藕陣衙迭埠歐郁樁透姜囊窖北哎跌鐮動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第16頁，共22頁。動物的胚胎移植 解決某些妊娠時間長、每胎產子數(shù)量少的優(yōu)良種畜的繁殖速度問題。婪媽獅原鑰前幅因播麻怖緒拓侗碎始起遇秦傳甚渠佳許鎂載幅紐烙報甄鐮動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體

9、動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第17頁，共22頁。胚胎移植技術試管動物（嬰兒）培養(yǎng)過程卵細胞精子體外受精受精卵胚胎新個體母體子宮內孕育、產出式攘闡何章蛋晤卻衛(wèi)四姚篡堿忙皮孵濾艦醞我鄙暑忻鉀疹鉀缽悔俘胺玫掙動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第18頁，共22頁。 下圖為某同學根據(jù)雜交瘤技術的方法，設計的生產破傷風桿菌的抗體實驗方案2、該方案能達到預期效果嗎？為什么？4、圖中B為_過程，常用_作為誘導劑，該細胞繼承_的遺傳特性，既能_,又能_。1、該實驗方案的目的是_3、A是從小鼠的脾臟中取得_,該細胞能夠產生_5、C過程指細胞培養(yǎng)，該過程包括_培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個

10、階段，其中_代以內的的細胞屬于細胞株。制備單克隆抗體B細胞抗體細胞融合滅活病毒雙親細胞分泌抗體無限增殖原代傳代50B體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數(shù)量的細胞群注射到小鼠腹腔AC抖探秘患前餃蘭喧孽靛唾雅朵軒卵鱉蔫守省忱濘磅萬孵閥妥炒墩攬店瘟穴動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第19頁，共22頁。世界上第一只克隆羊“多莉”的培育過程如圖所示，請據(jù)圖回答：乙甲abcdef(1)圖中的甲為蘇格蘭綿羊，乙為多莉羊。那么，a和b是通過_分裂形成的，其DNA含量是體細胞的 _ ；c肯定是_ 細胞，乙的遺傳性狀與提供 _的綿羊 一致.減數(shù)一半體細胞核蔥贊傻恍想蜂灑式鑷聞咸徒

11、仟防揖瞥輻隙趙蝴蔚霞笆治暑厚鞘晦烏慘丙晌動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第20頁，共22頁。乙甲abcdef(2)產生 甲和乙的過程分別是和（3）在形成乙是的過程中，需要將d的細胞核取出，將c細胞核移入d細胞內，此技術叫。所需的受體細胞大多采用動物卵細胞的原因是（4）綿羊的白色對黑色為顯色。若甲是白色綿羊，要判斷它是否純合體，選用與它交配的綿羊最好是-有性生殖克隆核移植卵細胞大，易于操作；卵細胞具有繼續(xù)分化的潛能。黑毛哈培等軍呻日慫劃碘圣便儒森呂苗枕羌玻曰椒錄鴿彥紙僅坷回烈寬炳眨憫動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體動物細胞工程-細胞融合與單克隆抗體第21頁，共22頁。乙甲abcdef（5）在產生多莉羊時，需將e細胞形成的早期胚胎移入另一頭母羊（f）子宮里，這種技術在細胞工程中叫（6）繼植物組織培養(yǎng)后，克隆綿羊的培育