病毒感染檢查方法和防治原則

1、關(guān)于病毒感染的檢查方法與防治原則第一張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 病毒感染的檢查第二張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月病毒感染的檢查檢測(cè)內(nèi)容查病毒查特異性抗體 病毒顆粒 病毒抗原 病毒核酸 病毒酶類：如逆轉(zhuǎn)錄酶 電鏡直接觀察 光鏡檢查包含體 分離培養(yǎng)第三張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月一、標(biāo)本的采集與送檢原則基本與細(xì)菌相似，但應(yīng)注意： 1.標(biāo)本用“雙抗”或兩性霉素B處理 2.低溫保存，盡快送檢 3.血清學(xué)診斷采雙份血清第四張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月二、病毒的分離與鑒定（一）病毒的分離培養(yǎng) 細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture） 雞胚接種（eg

2、g inoculation） 動(dòng)物接種（animal inoculation）第五張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月二、病毒的分離與鑒定一般程序：標(biāo)本無菌處理動(dòng)物接種雞胚培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)指標(biāo)陽性指標(biāo)陰性 病毒鑒定 盲傳23代指標(biāo)陰性病毒陰性第六張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）病毒的分離培養(yǎng) 1.細(xì)胞培養(yǎng) 單層細(xì)胞培養(yǎng)（monolayer cell culture） 分類 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)（suspended cell culture） 原代細(xì)胞（primary cell）細(xì)胞種類 二倍體細(xì)胞（diploid cell） 傳代細(xì)胞系（continuous cell line）第七

3、張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月病毒的細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)瓶單層細(xì)胞第八張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月1.細(xì)胞培養(yǎng)(1)原代和次代細(xì)胞培養(yǎng)組織 組織塊 分散的單個(gè)細(xì)胞 單層細(xì)胞 剪碎 培養(yǎng)基(原代細(xì)胞)單層細(xì)胞(次代細(xì)胞)傳代培養(yǎng)蛋白酶 第九張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月特點(diǎn)：對(duì)多種病毒敏感 生長能力有限, 獲取成本高 可攜帶潛伏病毒1.細(xì)胞培養(yǎng)(1)原代和次代細(xì)胞培養(yǎng)第十張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月(2)二倍體細(xì)胞培養(yǎng) 體外分裂50100代仍保持二倍體染色體數(shù)目，可用于病毒分離和疫苗生產(chǎn)。特點(diǎn)：對(duì)多種病毒敏感 不帶異種蛋白(人源性) 不帶病毒，無致

4、瘤潛能 可傳50代左右1.細(xì)胞培養(yǎng)第十一張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月(3) 傳代細(xì)胞培養(yǎng)特點(diǎn)：對(duì)多種病毒敏感性高 繁殖能力高，傳代時(shí)間長 有致癌危險(xiǎn)，不能用于疫苗生產(chǎn)1.細(xì)胞培養(yǎng)第十二張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月2.雞胚培養(yǎng) 采用孵化914天的雞胚 絨毛尿囊膜（allantocherion） 痘苗病毒、人類皰疹病毒 尿囊腔（allantoic cavity）接種部位 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔（amniotic cavity） 流感病毒的初次分離 卵黃囊（yolk sac） 嗜神經(jīng)病毒 第十三張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月第十四張，PPT共四十四頁，創(chuàng)

5、作于2022年6月2、雞胚培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)：易管理，不帶微生物，成本較低缺點(diǎn)：操作程序復(fù)雜第十五張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月第十六張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月3.動(dòng)物接種 應(yīng)用：尚無敏感細(xì)胞的病毒培養(yǎng) 動(dòng)物：兔、鼠、黑猩猩、猴等 優(yōu)點(diǎn)：結(jié)果易觀察，可建立動(dòng)物模型 缺點(diǎn)：有飼養(yǎng)條件要求，費(fèi)用高，動(dòng)物 體內(nèi)常帶有潛伏病毒第十七張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月1病毒增殖鑒定 (1)細(xì)胞病變效應(yīng)（cytopathic effect, CPE ） 細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等（多數(shù)病毒）； 形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞（麻疹病毒、巨細(xì)胞病毒、呼吸道合胞病毒等）； 在培養(yǎng)

6、細(xì)胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。 （二）病毒的鑒定 第十八張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月第十九張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落(1)細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathic effect, CPE)第二十張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月麻疹病毒感染細(xì)胞呼吸道合胞病毒感染細(xì)胞形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞(1)細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathic effect, CPE)第二十一張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月形成包涵體(inclusion body)(1)細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathic effect, CPE)第二十

7、二張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月腮腺炎病毒感染細(xì)胞(2)紅細(xì)胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)紅細(xì)胞表面HA受體第二十三張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月(3)干擾現(xiàn)象（interference）風(fēng)疹病毒人胚腎細(xì)胞 病毒增殖，CPE()埃可病毒人胚腎細(xì)胞 病毒增殖，CPE()人胚腎細(xì)胞風(fēng)疹病毒？?？刹《綜PE(-)風(fēng)疹病毒(+) ?？刹《?-)CPE(+)風(fēng)疹病毒(-) 埃可病毒(+)第二十四張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月(4)細(xì)胞代謝改變 細(xì)胞代謝變慢 pH變化減慢第二十五張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月2.病毒形態(tài)學(xué)鑒定

8、電子顯微鏡：設(shè)備、操作復(fù)雜，應(yīng)用受限光學(xué)顯微鏡：可見大病毒（痘類病毒）， 對(duì)一般病毒檢測(cè)意義不大第二十六張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月3.病毒血清學(xué)鑒定 鑒定病毒種、型、亞型 (1)血凝抑制試驗(yàn)（hemagglutination inhibition test）正粘病毒型與亞型鑒定 病毒雞紅細(xì)胞凝集（血凝試驗(yàn)） 病毒特異性抗體雞紅細(xì)胞不凝集 （血凝抑制試驗(yàn)） 第二十七張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月(2)免疫標(biāo)記法（FIA、EIA、RIA） 多種病毒鑒定(3)凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)(gel immuno- diffusion test) 多種病毒鑒定3.病毒血清學(xué)鑒定第二十八張

9、，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月4.病毒分子生物學(xué)鑒定抗原變異病毒基因的鑒定 核酸擴(kuò)增 核酸雜交 基因芯片 基因測(cè)序第二十九張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）病毒數(shù)量與感染性測(cè)定1.血凝試驗(yàn)：病毒總量（活病毒死病毒）2.蝕斑形成試驗(yàn) （plaque formation test） 3.50組織細(xì)胞感染量 （50 tissue culture infectious dose, TCID50）感染性病毒量第三十張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月(四) 新病毒的鑒定核酸類型的測(cè)定 理化性狀的檢測(cè) 形態(tài)學(xué)鑒定 血清學(xué)鑒定 基因測(cè)序和生物對(duì)比第三十一張，PPT共四十四頁，創(chuàng)

10、作于2022年6月三、病毒感染的血清學(xué)診斷應(yīng)用：采取標(biāo)本分離病毒為時(shí)已晚目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒為證實(shí)所分離的病毒的臨床意義進(jìn)行血清流行病學(xué)調(diào)查等第三十二張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月1.中和試驗(yàn)（neutralizing test）病毒中和抗體 病毒失去感染性 特點(diǎn)：特異性高，抗體維持時(shí)間長應(yīng)用：人群免疫情況的調(diào)查 臨床診斷少用第三十三張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月2.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) （complement fixation test） 用已知病毒可溶性補(bǔ)體抗原檢測(cè)病人血清中相應(yīng)的補(bǔ)體抗體 特點(diǎn)：特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快 應(yīng)用：近期感染指標(biāo)。第三十四

11、張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月四、病毒感染的快速診斷數(shù)小時(shí)內(nèi)出結(jié)果病毒顆粒病毒成分（抗原或核酸） 早期抗體檢測(cè)（IgM）第三十五張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）形態(tài)學(xué)檢查電鏡和免疫電鏡檢查 普通光學(xué)顯微鏡檢查 包涵體第三十六張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）病毒成分檢測(cè)1.病毒蛋白抗原檢測(cè) 免疫標(biāo)記技術(shù)2.病毒核酸檢測(cè) 核酸擴(kuò)增技術(shù) 核酸雜交技術(shù) 基因芯片技術(shù) 基因測(cè)序第三十七張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）早期抗體檢測(cè) 可診斷急性感染 特異性IgM抗體：孕婦感染風(fēng)疹病毒 EBV早期抗原抗體 EAV核心抗原抗體 早期抗原的抗體 EAV衣

12、殼抗原抗體第三十八張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 病毒感染的特異性預(yù)防 微生物及其代謝產(chǎn)物 生物制品 動(dòng)物免疫血清（biological products） 免疫細(xì)胞 細(xì)胞因子 防治和診斷感染性疾病第三十九張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月滅活疫苗（inactivated vaccine）活疫苗（living vaccine）重組載體疫苗（recombinant carrier vaccine）亞單位疫苗（subunit vaccine） 化學(xué)提取或人工合成疫苗 重組疫苗（recombinant vaccine）核酸疫苗（nucleic acid vaccine）一、人工主動(dòng)免疫常用生物制品第四十張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月二、人工被動(dòng)免疫常用生物制品 免疫球蛋白 血清丙種球蛋白 細(xì)胞免疫制劑 IFN-、 細(xì)胞因子 IL-2、IL-6、IL-12 TNF 、CSF 淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞 LAK細(xì)胞 第四十一張，PPT共四十四頁，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 病毒感染的治療 核苷類藥物 非核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 蛋白酶抑制劑 其他抗病毒藥物 干擾素和干擾素誘生劑 中草藥 基因治