基因工程習題1：真題

1、二輪復(fù)習：基因工程（2020浙江7月選考）下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是D若受體大腸桿菌含有構(gòu)建重組質(zhì)粒時用到的限制性核酸內(nèi)切酶，則一定有利于該重組質(zhì)粒進入受體并保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某抗鹽植物獲得2個穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)基因品系，抗性鑒定為抗除草劑抗鹽和抗除草劑不抗鹽。表明一定是抗鹽性的改變與抗除草劑基因的轉(zhuǎn)入無關(guān)抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某植物獲得轉(zhuǎn)基因植株，其DNA檢測均含目的基因，抗性鑒定為抗除草劑和不抗除草劑。表明一定是前者表達了抗性蛋白而后者只表達抗性基因RNA已知不同分子量DNA可分開成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶。表明該質(zhì)粒上一定至少

2、有3個被該酶切開的位置（2019年江蘇卷）下列生物技術(shù)操作對遺傳物質(zhì)的改造，不會遺傳給子代的是D將胰島素基因表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌，篩選獲得基因工程菌將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細胞，經(jīng)組培獲得花色變異植株將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細胞后回輸患者，進行基因治療（2018年江蘇卷）為生產(chǎn)具有特定性能的a-淀粉酶，研究人員從某種海洋細菌中克隆了a-淀粉酶基因（1656個堿基對），利用基因工程大量制備a-淀粉酶，實驗流程見下圖。請回答下列問題：（1）利用PCR技術(shù)擴增a-淀粉酶基因前，需先獲得細菌的基因組DNA（2）為了便于擴增的DNA片段與表達載體

3、連接，需在目的基因片段兩側(cè)加上不同的限制性核酸內(nèi)切酶識別位點（序列），使DNA片段能定向插入表達載體，減少自連。（3）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼a-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含8-個密碼子，如虛線框后的序列未知，預(yù)測虛線框后的第一個密碼子最多有13種。（2019年江蘇卷）圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tet）和氨芐青霉素抗性基因（ampr）。請回答下列問題：圖1GATjATC-EcoRV酶切位點為匚=亡，EcoRV酶切出來的線性載體Pl為平未端。用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有

4、一個腺嘌吟脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個堿基為胸腺嘧啶(T)的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在DNA連接酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板進行篩選，得到A、B、C三類菌落，其生長情況如下表(“+”代表生長，“-”代表不生長)。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是B(填表中字母)類，另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是A類菌落含有P0、C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒。一、-_菌落類型平板類型ABC無抗生素+氨芐青霉素+一四環(huán)素+一一氨芐青霉素+四環(huán)素+一一為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計引物進行PCR鑒定。圖2

5、所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時應(yīng)選擇的一對引物是乙丙。某學生嘗試用圖中另外一對引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400bp片段，原因是目的基因反向連接圖2(2020年全國卷III)W是一種具有特定功能的人體蛋白質(zhì)。某研究小組擬仿照制備乳腺生物反應(yīng)器的研究思路，制備一種膀胱生物反應(yīng)器來獲得W,基本過程如圖所示。回答下列問題：（1）步驟中需要使用的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶。步驟和所代表的操作分別是顯微注射法和體外培養(yǎng)。步驟稱為胚胎移植（2）與乳腺生物反應(yīng)器相比，用膀胱生物反應(yīng)器生產(chǎn)W的優(yōu)勢在于不受轉(zhuǎn)基因動物的性別、年齡（答出2點即可）的限制。（3）一般來

6、說，在同一動物個體中，乳腺上皮細胞與膀胱上皮細胞的細胞核中染色體DNA所含的遺傳信息相同（填“相同”或“不同”），原因是兩種上皮細胞都是體細胞，且來源于同一個受精卵（4）從上述流程可知，制備生物反應(yīng)器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技術(shù)有體外受精、胚胎移植（答出2點即可）。1.51.00.5值對相量ANRm0II_LJ_11_LJ_野生型品系1品系2品系36（2020年山東卷）水稻胚乳中含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強。科研人員將能表達出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點編輯，從而獲得了3個突變品系。（1）將能表達出基

7、因編輯系統(tǒng)的DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時，所需的酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，重組載體進入水稻細胞并在細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為轉(zhuǎn)化（2）根據(jù)啟動子的作用推測，Wx基因啟動子序列的改變影響了RNA聚合酶與啟動子的識別和結(jié)合，從而改變了Wx基因的轉(zhuǎn)錄水平。與野生型水稻相比，3個突變品系中Wx基因控制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列不發(fā)生（填：發(fā)生或不發(fā)生）改變，原因是編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動子（3）為檢測啟動子變化對Wx基因表達的影響，科研人員需要檢測Wx基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA（WxmRNA）的量。檢測時分別提取各品系胚乳中的總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄過程獲得總cDNA。

8、通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性的擴增出Wx基因的cDNA，原因是引物是根據(jù)Wx基因的一段已知序列設(shè)計合成的（或：引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合）（4）各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果如圖所示，據(jù)圖推測糯性最強的品系為品系3,原因是品系3的WxmRNA最少，控制合成的直鏈淀粉合成酶最少，直鏈淀粉合成量最少，糯性最強7.（2019年天津卷）B基因存在于水稻基因組中，其僅在體細胞（2n）和精子中正常表達，但在卵細胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達對卵細胞的影響，設(shè)計了如下實驗。騙權(quán)器能列山詛固據(jù)圖回答：（1）B基因在水稻卵細胞中不轉(zhuǎn)錄，推測其可能的原因是卵細胞中D含B基因的染色體缺失B.DNA聚合酶失活C.B基因發(fā)生基因突變D.B基因的啟動子無法啟動轉(zhuǎn)錄（2）從水稻體細胞或精子中提取總RNA,構(gòu)建cDNA-文庫，進而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因（表達的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光）連接成融合基因（表達的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能），然后構(gòu)建重組表達載體。（3）在過程、轉(zhuǎn)化篩選時，過程中T-DNA整合到受體細胞染色體DNA上，過程在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素。（4）獲得轉(zhuǎn)基因植株過程中，以下鑒定篩選方式正確的是BCD（多選）。將隨機斷裂的B基因片段制備成探針進行DNA分子雜交以Luc基因為模板設(shè)計探針進行DNA分子雜交以B基因編碼蛋白的序