醫(yī)院檢驗中心血常規(guī)檢驗操作規(guī)程

1、醫(yī)院檢驗中心血常規(guī)檢驗操作規(guī)程（1）標(biāo)本用EDTA-K20.2ul抗凝靜脈血1ml,門診病人在2CD-1700儀器上做三分類測定，住院病人在COULTERHMX儀器上做五分類測定。（2）試劑及儀器COULTERHMX五分類血球分析儀及配套試劑，質(zhì)控用COULTER4CPLUS全血質(zhì)控品，COULTERHMX五分類血分析儀及配套試劑，質(zhì)控用COULTER5C全血質(zhì)控品。（血液細(xì)胞自動化分析儀介紹）（3）操作1）門診：a）收到血常規(guī)標(biāo)本后，查看核對檢驗項目，立即編號，放混勻器上混勻3分鐘。b）如有血型立即用玻片法和試管法測定血型，輸入電腦。c）血標(biāo)本在ABBOTCD-1700上檢測，結(jié)果入庫。d)

2、對于中間細(xì)胞比較多的應(yīng)當(dāng)手工涂片染色分類，對于血小板等圖形不好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查。e)結(jié)果核對后，在半小時內(nèi)報告。2)病房：a)采集血常規(guī)標(biāo)本后，立即編號，試管加蓋后放于專用試管架上放入HMX上自動混勻，b)如有血型用玻片法和試管法測定血型，輸入電腦。c)血標(biāo)本在COULTERHMX上機檢測，結(jié)果入庫。d)對于分類圖形不好的結(jié)果應(yīng)當(dāng)手工涂片染色分類，對于血小板等結(jié)果圖形不好或結(jié)果異常較大的應(yīng)手工復(fù)查。(復(fù)查條件)e)結(jié)果核對后，簽發(fā)報告單。如果急診則電話報告，有血型的話，通知病房來拿報告單。(血液項目)4)項目代號中文名單位WBC白細(xì)胞計數(shù)X109/LLY%(LY)淋巴細(xì)胞分類%MO%

3、單核細(xì)胞分類%NE%(GR)中性細(xì)胞分類%LY#淋巴細(xì)胞計數(shù)X109/LMO#單核細(xì)胞計數(shù)X109/LNE#中性細(xì)胞計數(shù)X109/LRBC紅細(xì)胞計數(shù)X1012/LHGB血紅蛋白g/LHCT紅細(xì)胞壓積MCV平均紅細(xì)胞體積flMCH平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量PgMCHC平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度g/LRDW紅細(xì)胞分布寬度PLT血小板計數(shù)X109/LMPV平均血小板體積flPCT血小板比積%PDW血小板分布寬度EO%嗜酸性細(xì)胞分類%BO%嗜堿性細(xì)胞分類%EO#嗜酸性細(xì)胞計數(shù)X109/LBO#嗜堿性細(xì)胞計數(shù)X109/L（5）特殊規(guī)定在檢驗血常規(guī)時,科室所有工作人員及同志如發(fā)現(xiàn)以下樣本結(jié)果過高可過低,務(wù)必作登記

4、,復(fù)查和及時報告,以備查詢。血紅蛋白低于100g/L.白細(xì)胞低于3000/ul.血小板低于8萬/ul.發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞分類異常圖形時.發(fā)現(xiàn)其中一項過高時,或是臨床指定要鏡檢時6)臨床意義(61)WBC計數(shù)參考范圍4-10X109/L1、增加(l)生理性：初生兒、妊娠末期、分娩期、經(jīng)期、飯后、劇烈運動后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。(2)病理性：大部分化膿性細(xì)菌所引起的炎癥、尿毒癥、嚴(yán)重?zé)齻?、傳染性單核?xì)胞增多癥、傳染性淋巴細(xì)胞增多癥、急性出血、組織損傷、手術(shù)創(chuàng)傷后、白血病等。2減少病毒感染、傷寒、副傷寒、黑熱病、瘧疾、再生障礙性貧血、極度嚴(yán)重感染、X線及鐳照射、腫瘤化療后、非白血性白血病等。62）白

5、細(xì)胞分類計數(shù)（6.2.1）染色液1.瑞氏姬姆薩復(fù)合染色液I液取瑞氏染粉lg、姬姆薩染粉lg,加入甲醇（分析純），充分振搖，第二天加甘油10ml,混勻即能使用。II液pH646.8磷酸鹽緩沖液（或用H2O替代緩沖液）磷酸二氫鉀（無水）6.648磷酸氫二鈉（無水）256g加少量蒸餾水溶解，用磷酸鹽調(diào)整pH,加水至1000ml。染置玻片于染色架上，滴加染液35滴，使其迅速蓋色滿血膜，約lmin后，滴加緩沖液5一10滴，輕輕搖動玻片或?qū)?zhǔn)血片吹氣，與染液充分混和，5一lOmin后用水沖去染液，待干。或染色液蓋滿血片后半分鐘即可水洗鏡檢。2快速染色液I液:磷酸二氫鉀6648磷酸氫二鈉256g水溶性伊紅Y

6、4g（或伊紅B2.5g）蒸餾水1000ml石炭酸40ml煮沸，待冷備用。II亞甲藍(lán)4g蒸餾水1000ml高錳酸鉀2.48g煮沸，待冷備用。染色把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s,水洗，再浸入II液30s，水洗待干。注：本染色法除了能快速用于急癥外，對玻片質(zhì)量要求也不高。隨著染液多次使用，可適當(dāng)延長染色時間或更換新液。330s快速單一染色液貯存液瑞氏染粉20g姬姆薩染粉068天青E06g甘油100ml聚乙烯D比咯烷酮(PVP)20.0g甲醇1000mI磷酸鹽緩磷酸二氫鉀6.648沖液磷酸氫二鈉0.268(pH6.2-6.8)石炭酸4.0ml蒸餾水加至1000mI應(yīng)用液1液、2液按3：1比例混

7、合放置14天后備用。將染液鋪滿血膜或?qū)⒀肴旧變?nèi)，30s后用自來染色水沖洗。注：加表面活性劑PVP可增加染料的溶解度并起穩(wěn)定作用，加入天青E可縮短染色時間。(6.2.2)參考范圍LY#：(1.033)x109LY:187-47LMO#：(0207)x109MO:35-79LGR#：(1864)x109GR:460一765L1增多中性粒細(xì)胞：急性化膿感染、粒細(xì)胞白血病、急性出血、溶血、手術(shù)后、尿毒癥、酸中毒、急性汞中毒、急性鉛中毒等。嗜酸性粒細(xì)胞：變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲病、某些皮膚病、某些血液病、手術(shù)后、燒傷等。嗜堿性粒細(xì)胞：慢性粒細(xì)胞白血病、何杰金病、癌轉(zhuǎn)移、鉛及鉍中毒等。淋巴細(xì)胞：百日咳、傳

8、染性單核細(xì)胞增多癥、慢性淋巴細(xì)胞白血病、麻疹、腮腺炎、結(jié)核、傳染性肝炎等。單核細(xì)胞：結(jié)核、傷寒、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病、單核細(xì)胞白血病、急性傳染病的恢復(fù)期等。2減少中性粒細(xì)胞：傷寒、副傷寒、瘧疾、流感、化學(xué)藥物中毒、X線和鐳照射、抗癌藥物化療、極度嚴(yán)重感染、再障、粒細(xì)胞缺乏等。嗜酸性粒細(xì)胞：傷寒、副傷寒以及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素后。淋巴細(xì)胞：多見于傳染病急性期、放射病、細(xì)胞免疫缺陷等。6.3)常見的異常白細(xì)胞形態(tài)的變化在外周血象中，除了各類白血病幼稚細(xì)胞外，通常能見到一些細(xì)胞形態(tài)上的異常變化。中性粒細(xì)胞1核象變化：反映中性粒細(xì)胞的成熟程度。正常血象中有少量桿狀核細(xì)胞出現(xiàn)，它與分葉核細(xì)胞

9、之間的比值約占1：13。核左移：是指桿狀核細(xì)胞增多，常見于感染。如晚幼粒、中幼粒等細(xì)胞增多為核象極度左移，多見于類白血病反應(yīng)或白血病。伴白細(xì)胞總數(shù)增高的核左移：稱再生性左移，常見于急性化膿性感染，如大葉性肺炎等。白細(xì)胞總數(shù)不增加或減低的核左移：稱退行性左移，常見于嚴(yán)重感染、機體抵抗力低下時，如傷寒、伴感染中毒性休克的敗血癥等。核右移：是指不僅分葉核粒細(xì)胞增多，且分葉過多，常見4葉、5葉(正常時多分3葉)，這是造血功能衰退或造血物質(zhì)缺乏的表現(xiàn)。常見于營養(yǎng)性巨幼細(xì)胞性貧血和使用抗代謝藥物后。此外，在疾病進(jìn)行期突然出現(xiàn)核象右移，表示預(yù)后不良。毒性變化：嚴(yán)重感染、惡性腫瘤、各種重金屬或藥物中毒、大面積

10、燒傷等癥時，中性粒細(xì)胞可出現(xiàn)形態(tài)變異。細(xì)胞大小不均：為骨髓內(nèi)幼稚粒細(xì)胞發(fā)生不規(guī)則的分裂增殖所致。毒性顆粒：胞漿中部分或全部顆粒變粗，著色深，顆粒的分布及大小不等。可能為中性顆粒成熟過程中發(fā)生變性所致?？张荩嚎稍诎麧{或核中出現(xiàn)，常為多個，被認(rèn)為是細(xì)胞脂肪變性后未能著色所致。Dohle體：腦漿內(nèi)出現(xiàn)嗜堿性點、線、梨形或云霧狀物質(zhì)，可能為核漿發(fā)育不平衡所致，為細(xì)胞嚴(yán)重毒性變的表現(xiàn)。核棘突：胞核有各種形態(tài)的芽狀突出，臨床意義尚不明確，可能與中毒、癌轉(zhuǎn)移、嚴(yán)重放射損傷等有關(guān)。退行性變：表現(xiàn)為胞體腫大，結(jié)構(gòu)模糊，邊緣不清。胞核可呈固縮、腫脹、破碎、溶解等變化，退行變可以是細(xì)胞衰老死亡的表現(xiàn)。淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)

11、胞形態(tài)變異在多種疾病如各種病毒感染、傳染性單核細(xì)胞增多癥最為常見。此外，瘧疾、過敏性疾病、淋巴結(jié)炎等亦可見，統(tǒng)稱為異型淋巴細(xì)胞。傳染性單核細(xì)胞增多癥患者血液中?？沙霈F(xiàn)3種異型淋巴細(xì)胞，即空泡型、不規(guī)則型和幼稚型。(6.4)血紅蛋白參考值男：120-160g/L女：110-150g/L6.5)紅細(xì)胞分布寬度RDW為反映紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù)，常以所測得紅細(xì)胞體積大小的變異系數(shù)(CV%)來表示。它比血涂片上紅細(xì)胞形態(tài)大小不均的觀察更為客觀、準(zhǔn)確。RDW增大時有臨床意義。用于缺鐵性貧血(IDA)的診斷與療效觀察：缺鐵性貧血時RDW增大，尤其是MCV尚處于參考值范圍時(缺鐵性貧血時MCV應(yīng)下降)RDW

12、增大更是早期缺鐵的指征；MCV減小時，RDW增大更為顯著，當(dāng)給予鐵劑治療有效時，RDW將比給藥前更大，以后逐漸降至正常水平。產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因，主要是因補鐵后產(chǎn)生網(wǎng)織紅細(xì)胞，及正常紅細(xì)胞生成并釋放人血與給藥前的小紅細(xì)胞并存，故RDW先增大，隨著正常紅細(xì)胞的增多和小紅細(xì)胞的減少，RDW便逐漸降至參考范圍。用于小細(xì)胞低色素性貧血的鑒別診斷：IDA和輕型地中海性貧血時，MCV均可減小。但I(xiàn)DA時RDW增大，而輕型地中海性貧血時RDW正常。（3）用于貧血的分類（Bessman分類法）:MCV只能反映紅細(xì)胞平均體積的大小，不能代表紅細(xì)胞體積大小的異質(zhì)性，對紅細(xì)胞體積大小的評價，過去靠血涂片上紅細(xì)胞形態(tài)的

13、觀察，這種觀察常受血涂片制作以及觀察者的主觀因素的影響較大，而且不能定量，RDW能較好地反映紅細(xì)胞體積的異質(zhì)性，把MCV和RDW結(jié)合用于對貧血的分類將更為完善（表ll2）。表l-1-2BessmanMCVRDW貧血分類類另MCVRDW正常缺鐵性貧血T巨幼細(xì)胞性貧血TT溶血性貧血TT鐵粒幼細(xì)胞貧血T再生障礙性貧血單純小細(xì)胞性貧血注：f無變化；f增大；(減少6.6)平均血小板體積MPV的臨床意義要結(jié)合PLT變化才有價值。鑒別血小板減少的原因：當(dāng)骨髓造血功能損傷致血小板減少時，MPV減少；當(dāng)血小板在周圍血液中破壞增多時，導(dǎo)致血小板減少，MPV增大；血小板分布異常致血小板減少時，MPV正常。MPV增大

14、可作為骨髓造血功能恢復(fù)的較早期指征：骨髓造血功能衰竭時，MPV與PLT同時持續(xù)下降；造血功能抑制越嚴(yán)重，功能恢復(fù)時，MPV增大常先于PI。T升高。MPV越小；當(dāng)造血其他方面應(yīng)用：MPV增大：見于骨髓纖維化、原發(fā)性血小板減少性紫痰(ITP)、血栓性疾病及血栓前狀態(tài)、脾切除、慢粒、巨大血小板綜合征、鐮刀細(xì)胞性貧血等。MPV減小：見于脾亢、化療后、再障、巨幼細(xì)胞性貧血等。血小板比積(plateletcrit，PCT)IFi目男0108-0272女0114一0282PCT與PLT和MPV正相關(guān)，所以PLT、MPV的增減均可使PCT發(fā)生變化。增高：見于骨髓纖維化、脾切除、慢粒等。減低：見于再障、化療后、

15、血小板減少癥等。（6.8）血小板體積分布寬度（plateletvolumedistributionwidth，PDW）參考范圍0155-0181（155-181）（以血小板體積變異系數(shù)CV%表示）PDW是反映血小板體積大小的異質(zhì)性參數(shù)。增大：急非淋化療后、巨幼細(xì)胞性貧血、慢粒、脾切除、巨大血小板綜合征、血栓性疾病等。（6.9）血細(xì)胞體積分布直方圖的應(yīng)用（l）紅細(xì)胞體積分布直方圖：將MCV和RDW配合直方圖分析，可直接觀察紅細(xì)胞體積的分布情況。只現(xiàn)一個峰：見于正常人、缺鐵性貧血（峰左移）巨幼細(xì)胞性貧血（峰右移）?？涩F(xiàn)兩個峰：缺鐵性貧血給予鐵劑治療有效時，可出現(xiàn)一個小紅細(xì)胞峰和另一個正紅細(xì)胞（或網(wǎng)

16、織紅細(xì)胞）峰。巨幼（紅）細(xì)胞性貧血給予葉酸、維生素Bl2治療有效時亦可見兩個峰。（2）白細(xì)胞體積分布直方圖：靜脈血比毛細(xì)管血白細(xì)胞數(shù)量略低。中檔的血細(xì)胞分析儀一般為三分群，它是根據(jù)加入溶血劑后，白細(xì)胞膜通透性改變而發(fā)生皺縮，不同類型的白細(xì)胞皺縮后體積有明顯差別，每個皺縮白細(xì)胞通過血細(xì)胞分析儀的微孔時產(chǎn)生的脈沖信號經(jīng)放大、甄別后，微機處理數(shù)據(jù)得到其體積分布直方圖。淋巴細(xì)胞群為3590fI大小中間細(xì)胞群為90一160fl大小粒細(xì)胞群為160450fI大小三群細(xì)胞的百分比與白細(xì)胞數(shù)量的乘積為其絕對數(shù)正常人白細(xì)胞體積分布直方圖，可見兩個明顯分離的峰，左峰為小細(xì)胞群（淋巴細(xì)胞），右峰為大細(xì)胞群（粒細(xì)胞）

17、，兩峰之間為中間細(xì)胞群的分布。急性白血病時，由于異常的原始、幼稚細(xì)胞增多，可見中間細(xì)胞明顯增高，這時直方圖上見一個峰，峰值常在90一160fl之間。這時必須推片染色鏡檢。（3）血小板體積分布直方圖：正常人血小板體積主要分布在220fl之間，2130fl之間有少量大血小板，一般儀器以30fl為最大的分析界標(biāo)。血小板體積增大時，直方圖會出現(xiàn)明顯拖尾現(xiàn)象。有小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片干擾時，直方圖尾部會抬高。（6.10）三種紅細(xì)胞參數(shù)平均值的計算1、原理根據(jù)紅細(xì)胞、血紅蛋白濃度和紅細(xì)胞比積，計算紅細(xì)胞平均容量、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度，用作貧血的形態(tài)學(xué)分類。2、計算方法平均紅細(xì)胞體積(

18、meancorpuscularvolume,MCV)：是指每個紅細(xì)胞的平均體積，以飛升(fl)為單位。每L血液中紅細(xì)胞體積(L)xl0i5MCV=xxfl每L血液紅細(xì)胞數(shù)(個)平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(meanCorpuscularhemoglobin，MCH)：是指每個紅細(xì)胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量，以皮克(pg)為單位。每L血液中血紅蛋白濃度(g)xl0l2MCH=xxpg每L血液紅細(xì)胞數(shù)(個)平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(meanCorpuscularhemoglobinconcentration,MCHC):是指平均每L紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃度(g/L)。每L血液中血紅蛋白g數(shù)(g/L)MCHC=xxg/L每L血液紅細(xì)胞比積