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1、 “變廢為寶” 的探險(xiǎn)家 -分解纖維素的微生物的分離 “變廢為寶” 的探險(xiǎn)家 -分解纖維素的微生物的分離北師大燕化附中生物組 彭伶俐我國(guó)是一個(gè)農(nóng)業(yè)大國(guó),全國(guó)秸稈每年的產(chǎn)量達(dá)到9億多噸大豆秸稈水稻秸稈玉米秸稈秸稈焚燒露天焚燒秸稈是一種嚴(yán)重違法行為。環(huán)境保護(hù)法、大氣污染防治法、治安管理處罰法、消防法等有關(guān)法律規(guī)定,禁止露天焚燒秸稈,違者將依法處以5002000元罰款,情節(jié)嚴(yán)重的,將依法予以行政拘留;對(duì)造成他人人身、交通、火災(zāi)等安全事故,由司法機(jī)關(guān)依法嚴(yán)懲。秸稈用途“種出來(lái)” 的 生物質(zhì)能源飼料肥料能源其它纖維素是葡萄糖首尾相連的高分子化合物,是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)纖維素 纖維二糖 葡萄糖C
2、1酶CX酶葡萄糖苷酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即C1酶,Cx酶和葡萄糖苷酶纖維素酶對(duì)照組:卷煙紙 滅菌的土壤實(shí)驗(yàn)組:卷煙紙 未滅菌的土壤2018年11月11日2018年11月21日結(jié)論:土壤中有分解纖維素的微生物。提出課題:從土壤中篩選分解纖維素的微生物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):如何取樣地點(diǎn)?方法?如何篩選設(shè)置對(duì)照?培養(yǎng)基?如何培養(yǎng)溫度?時(shí)間?移液槍錐形瓶酒精燈培養(yǎng)皿試管若干槍頭濾紙鏟子接種環(huán)涂布器如何取樣?(地點(diǎn)?方法?)如何篩選?(培養(yǎng)基?設(shè)置對(duì)照)如何培養(yǎng)?(溫度?時(shí)間?)如何設(shè)置培養(yǎng)條件?32恒溫培養(yǎng)箱如何設(shè)置實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組?實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組選擇培養(yǎng)基(纖維素為碳源)涂布0.1ml菌液全營(yíng)
3、養(yǎng)培養(yǎng)基(LB培養(yǎng)基)涂布0.1ml菌液(1)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。(2)纖維素分解菌能產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素,從而使菌落周圍形成透明圈。透明圈剛果紅染色法如何鑒別纖維素分解菌?土壤取樣選擇培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)方案流程圖:該培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基?目的是什么?土壤取樣選擇培養(yǎng)基梯度稀釋實(shí)驗(yàn)方案流程圖:土壤取樣選擇培養(yǎng)基梯度稀釋涂布到鑒別培養(yǎng)基上實(shí)驗(yàn)方案流程圖:剛果紅鑒別培養(yǎng)基的配方纖維素 5-10g酵母膏 1gKH2PO4 0.25g瓊脂 15g土豆汁 100ml剛果紅溶液 10mg/ml將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000ml。土壤取樣選擇培養(yǎng)基梯度稀釋涂布到鑒別培養(yǎng)基上挑選菌落實(shí)驗(yàn)方案流程圖:視頻展示:生物興趣小組實(shí)驗(yàn)過(guò)程實(shí)驗(yàn)結(jié)果:透明圈剛果紅染色法鑒定纖維素分解菌先在培養(yǎng)基中加剛果紅再篩選鑒定方法一先篩選細(xì)菌再加剛果紅鑒定方法二優(yōu)缺點(diǎn)?缺點(diǎn):有些細(xì)菌可以分解色素,也會(huì)出現(xiàn)透明圈缺點(diǎn):出現(xiàn)菌落的混雜,不可分離純化動(dòng)手操作:平板劃線法分離純化纖維素分解菌課題延伸(一)挑選出有透明圈的菌落一定是纖維素分解菌嗎?如何驗(yàn)證?(二)土壤中篩選的菌種可以直接發(fā)酵降解秸稈,用于工業(yè)生產(chǎn)嗎?課題延伸工藝應(yīng)用:秸稈纖維素發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇根據(jù)現(xiàn)有年產(chǎn)1萬(wàn)噸纖維素酶和5000噸秸稈乙醇生產(chǎn)線試運(yùn)行情況來(lái)看,每生產(chǎn)1
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