飼料原料 酸價的測定 編制說明

1、 中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)飼料原料 酸價的測定編 制 說 明（公開征求意見稿）2022年8月浙江省動物疫病預(yù)防控制中心（浙江省獸藥飼料監(jiān)察所）*目 錄工作簡況（一） 任務(wù)來源1（二） 制定背景1（三） 工作過程2二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則、主要技術(shù)內(nèi)容確定依據(jù)與過程 3（一）標(biāo)準(zhǔn)編制原則 3（二）主要技術(shù)內(nèi)容確定依據(jù)與過程 41.試劑和材料 4（1）試驗用樣品收集 4（2）試劑 7（3）儀器和設(shè)備 82.試驗方法的建立 8（1）試樣制備方法考察 8 （2）試樣溶解用溶劑考察 15（3）滴定液的考察 17（4）指示劑的考察 17（5）水相和非水相電極對電位滴定的影響 21（6）電位滴定法滴定方法考察 2

2、4（7）電位滴定法兩種標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的酸價比較與精密度考察 33（8）谷維素含量對米糠油中酸價測定的影響35（9）試驗稱量范圍 36（10）方法精密度試驗 37（11）方法檢出限考察443.市場采集樣品考察結(jié)果 47三、試驗驗證的分析、綜述報告，技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果 48（一）檢驗檢測機(jī)構(gòu)試驗驗證的分析、綜述報告 48（二）技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證66（三）預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果66四、國際、國內(nèi)同類標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)內(nèi)容對比情況66（一）國內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)查詢比較情況 66（二）采用本標(biāo)準(zhǔn)和國內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行對比試驗的結(jié)果67五、采標(biāo)情況以及是否合規(guī)引用或采用國際國外標(biāo)準(zhǔn)68（一）采標(biāo)情況 68（二）是否合規(guī)引用或

3、采用國際國外標(biāo)準(zhǔn)68六、與有關(guān)法律、法規(guī)的關(guān)系68七、重大分岐意見的處理經(jīng)過和依據(jù)68八、涉及專利的有關(guān)說明68九、貫徹國家標(biāo)準(zhǔn)的要求，以及組織措施、技術(shù)措施、過渡期和實施日期的建議等措施建議 68十、其他應(yīng)予說明的事項69 一 、工作簡況（一）任務(wù)來源根據(jù)農(nóng)業(yè)部農(nóng)財發(fā)201738號農(nóng)業(yè)部關(guān)于支付2017年農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管專項經(jīng)費(fèi)等項目資金的通知要求，由浙江省獸藥飼料監(jiān)察所承擔(dān)飼料原料油脂中酸價的測定標(biāo)準(zhǔn)制定工作。本項目由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局提出，全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口，項目編號為181721301092372049，項目名稱：飼料原料油脂中酸價的測定。（二）制定背景

4、在畜禽養(yǎng)殖中，油脂對動物的生長具有重要意義，除了可以為動物的生長提供必需的脂肪酸外，還是能量的重要來源，也可以高效的轉(zhuǎn)化為動物的體脂，提高生長和屠宰性能，是動物營養(yǎng)中不可缺少的組成部分。但油脂在貯藏和運(yùn)輸時，由于空氣中的氧、日光、微生物、酶和金屬離子等的作用而發(fā)生復(fù)雜的化學(xué)變化，特征表現(xiàn)為油脂散發(fā)出特殊的臭味，即油脂的酸敗。根據(jù)油脂酸敗的特征和分類，目前國際上廣泛使用酸價（AV）、過氧化值（POV）、丙二醛（TBA）、羰基值（COV）作為油脂酸敗的評價指標(biāo)。酸價是油脂中游離狀脂肪酸含量的標(biāo)志，飼料原料目錄中，酸價是許多飼料原料的強(qiáng)制性標(biāo)識要求。目前測定油脂中酸價或脂肪酸價的國際標(biāo)準(zhǔn)主要有ISO

5、 660: 2020和AOCS Official Method Cd 3d-63 Acid Value兩個標(biāo)準(zhǔn)，國內(nèi)涉及油脂中酸價測定標(biāo)準(zhǔn)主要有GB 5009.229-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中酸價的測定、LS/T 6107-2012 動植物油脂 酸值和酸度測定 自動滴定分析儀法、GB/T 5510-2011 糧油檢驗 糧食、油料脂肪酸價測定、NY/T 2333-2013 糧食、油料檢驗脂肪酸價的測定等。飼料原料油脂種類繁多，且多為粗油，雜質(zhì)較多，顏色較深，目前缺乏專屬的檢測方法。針對飼料原料的特殊性，開展飼料原料中酸價的檢測方法的研究，對于保障飼料的質(zhì)量安全，提高養(yǎng)殖動物的生長性能具

6、有重要的意義。（三）工作過程1.標(biāo)準(zhǔn)申請和立項本單位于2016年11月向全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出標(biāo)準(zhǔn)制定申請，于2017年6月獲得立項。2.成立標(biāo)準(zhǔn)起草小組2016年11月計劃任務(wù)下達(dá)后，為確保項目的順利實施，成立標(biāo)準(zhǔn)起草小組，同時對標(biāo)準(zhǔn)起草工作進(jìn)行分工，明確各自任務(wù)和職責(zé)，制定工作計劃，落實人員與任務(wù)分工，詳見表1。表1 標(biāo)準(zhǔn)主要起草人員和任務(wù)分工人員職稱任務(wù)分工任玉琴正高級獸醫(yī)師項目負(fù)責(zé)人，方案設(shè)計，制定工作總體協(xié)調(diào)王彬獸醫(yī)師試驗方法研究，標(biāo)準(zhǔn)文本和編制說明編寫陳潔高級畜醫(yī)師協(xié)助試驗方法研究，樣品收集黃娟高級畜牧師試驗方法的研究，試樣測定侯軒獸醫(yī)師樣品收集和測定羅成江獸醫(yī)師樣品測定

7、裘丞軍畜牧師樣品測定周豐超助理工程師樣品測定陳曉林畜牧師方法學(xué)驗證蔡文金獸醫(yī)師樣品測定葛孟昀/精密度試驗3.開展調(diào)研和試驗本單位于2016年11月向全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出標(biāo)準(zhǔn)制定申請，于2017年6月獲得立項。2017年9月成立項目組，明確實施方案與分工，收集國內(nèi)外相關(guān)資料、檢測標(biāo)準(zhǔn)，咨詢相關(guān)生產(chǎn)、檢測單位，到飼料生產(chǎn)企業(yè)了解產(chǎn)品生產(chǎn)工藝流程、產(chǎn)品現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行情況，項目組對標(biāo)準(zhǔn)的各項指標(biāo)修訂進(jìn)行了充分的討論，擬訂產(chǎn)品修訂指標(biāo)。2018年2月至5月，向生產(chǎn)企業(yè)征集產(chǎn)品，對飼料原料目錄中收載的品種進(jìn)行廣泛的收集與購買。2018年6月至2021年12月，組織相關(guān)技術(shù)人員對試驗方法進(jìn)行了充分

8、的試驗和驗證。4.編寫標(biāo)準(zhǔn)草案2021年12月至1月，起草組根據(jù)前期的調(diào)研、試驗結(jié)果和起草人員討論，編寫了標(biāo)準(zhǔn)草案稿和編制說明征求意見稿。5.征求意見和驗證2022年1月至2022年4月，發(fā)送“征求意見稿”的單位（專家）數(shù)36份，收到“征求意見稿”后，回函的單位（專家）數(shù)20（21）份，收到“征求意見稿后”回函并有建議或意見的單位（專家）數(shù)19（20）份，沒有回函的單位（專家）1。提出建議的檢驗機(jī)構(gòu)占35.0%，科研院校占35.0%，使用單位占33.3%。對專家意見進(jìn)行匯總，提出建議75條，采納64條，不采納7條，部分采納4條。根據(jù)專家意見對征求意見稿進(jìn)行進(jìn)一步修訂。根據(jù)征求意見的結(jié)果，將標(biāo)準(zhǔn)

9、適用范圍擴(kuò)大到酸價作為強(qiáng)制性標(biāo)識的所有飼料原料，并組織相關(guān)技術(shù)人員對擴(kuò)大范圍的樣品以及部分試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行了補(bǔ)充，形成了預(yù)審稿，同時委托3家質(zhì)檢單位進(jìn)行了驗證。6.編寫標(biāo)準(zhǔn)初審稿和預(yù)審2022年6月23日，委托全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員飼料檢測方法標(biāo)準(zhǔn)化工作組組織了標(biāo)準(zhǔn)預(yù)審會議。預(yù)審會議上，專家組提出了5條修改意見：1. 建議標(biāo)準(zhǔn)名稱更改為飼料原料 酸價的測定。2. 建議修改適用范圍，增加定量限。3. 將4.4中油脂提取內(nèi)容調(diào)整至4.5試驗步驟。4. 建議補(bǔ)充百里香酚酞指示劑、堿性藍(lán)6B指示劑測定米糠油酸價的對比試驗數(shù)據(jù)以及谷維素含量對米糠油酸價測定有無影響的試驗數(shù)據(jù)。5.按照GB/T 1.120

10、20、GB/T 20001.42015的要求規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)文本及編制說明。預(yù)審會議后，起草組按照預(yù)審專家的意見補(bǔ)充了油料籽實樣品（選擇的樣品為大豆和油菜籽）酸價測定試驗和米糠油使用不同指示劑對比試驗數(shù)據(jù)以及谷維素含量對米糠油酸價測定結(jié)果的影響試驗，并對標(biāo)準(zhǔn)文本做了幾項重要修改：1.將標(biāo)準(zhǔn)改為飼料原料 酸價的測定，英文翻譯改為“Feed materialsDetermination of acid value”。2.按照飼料原料目錄將標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍改為“油料籽實及其加工產(chǎn)品、谷物及其加工產(chǎn)品、奶油及其加工制品、陸生動物產(chǎn)品及其副產(chǎn)品、水生生物及其副產(chǎn)品”，范圍增加了大豆、油菜籽等油料籽實及其加工產(chǎn)品沒

11、有要求強(qiáng)制性標(biāo)識酸價但實際上又需要測定酸價的產(chǎn)品。3.將4.4中油脂提取內(nèi)容調(diào)整至4.5試驗步驟。4.4內(nèi)容改為了油脂提取前的粉粹、過篩等前處理環(huán)節(jié)。4.根據(jù)米糠油使用不同指示劑對比試驗數(shù)據(jù)以及谷維素含量對米糠油酸價測定結(jié)果的影響試驗數(shù)據(jù)，將米糠油、米糠、統(tǒng)糠、穩(wěn)定化米糠這類（提取后的油脂）含有谷維素含量較高的飼料原料排除在冷溶劑指示劑滴定法適用范圍內(nèi)。5.將大豆、油菜籽等非強(qiáng)制標(biāo)識酸價指標(biāo)的油料籽實類原料納入冷溶劑指示劑滴定法和冷溶劑電位滴定法的適用范圍，并補(bǔ)充了大豆、油菜籽兩類樣品的試樣制備和酸價測定試驗數(shù)據(jù)。二 、標(biāo)準(zhǔn)編制原則、主要內(nèi)容及其確定依據(jù)（一）標(biāo)準(zhǔn)編制原則本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T 1

12、.1-2020標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則、GB/T 20001.42015標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則 第部分：試驗方法標(biāo)準(zhǔn)的原則，結(jié)合資料查詢、市場調(diào)研及實驗數(shù)據(jù)對標(biāo)準(zhǔn)的范圍、試驗步驟等進(jìn)行制訂編寫。（二）主要技術(shù)內(nèi)容確定依據(jù)與過程1.試劑和材料（1）試驗用樣品收集根據(jù)中華人民共和國農(nóng)業(yè)部飼料原料目錄，涉及酸價指標(biāo)的飼料原料產(chǎn)品為：植物油；動物油脂；稻谷加工產(chǎn)品、氫化脂肪；奶油及其加工制品；魚、其它水生生物及其副產(chǎn)品、昆蟲加工產(chǎn)品、肉粉、肉骨粉等,詳見表2。表2 酸價作為強(qiáng)制性標(biāo)識要求的飼料原料類型原料編號原料名稱強(qiáng)制性標(biāo)識要求谷物及其加工產(chǎn)品1.2.12稻米油米糠油酸價、過氧化值

13、1.2.13米糠粗脂肪、酸價、粗纖維1.2.18統(tǒng)糠粗脂肪、粗纖維、酸價1.2.19穩(wěn)定化米糠粗脂肪、粗纖維、酸價1.8.3黍米糠粗脂肪、粗纖維、酸價1.11.14小麥胚芽油酸價、過氧化值1.13.19玉米油玉米胚芽油粗脂肪、酸價、過氧化值油料籽實及其加工產(chǎn)品2.1.3扁桃（杏）仁油酸價、過氧化值2.3.3大豆磷脂油（大豆磷脂油粉）粗脂肪、酸價、水分，丙酮不溶物2.2.6菜籽油（菜油）酸價、過氧化值2.3.7大豆胚芽油酸價、過氧化值2.3.12大豆油（豆油）酸價、過氧化值2.4.2番茄籽油酸價、過氧化值2.5.3橄欖油酸價、過氧化值2.6.3核桃仁油酸價、過氧化值2.7.5紅花籽油酸價、過氧化

14、值2.8.4花椒籽油酸價、過氧化值2.9.7花生油酸價、過氧化值2.10.2可可油（可可脂）酸價、過氧化值2.11.6葵花籽油酸價、過氧化值2.12.8棉籽油（棉油）酸價、過氧化值2.13.3木棉籽油酸價、過氧化值2.14.2葡萄籽油酸價、過氧化值2.15.3沙棘籽油酸價、過氧化值2.16.2酸棗油酸價、過氧化值2.17.2文冠果油酸價、過氧化值2.18.4亞麻籽油酸價、過氧化值2.19.3椰子油酸價、過氧化值2.20.5棕櫚仁油酸價、過氧化值2.20.6棕櫚油（棕櫚脂肪粉）酸價、過氧化值2.21.3月見草籽油酸價、過氧化值2.22.4芝麻油酸價、過氧化值2.23.4紫蘇油酸價、過氧化值2.2

15、4.1氫化脂肪酸價、過氧化值2.24.2琉璃苣籽油酸價、過氧化值其他籽實及其加工產(chǎn)品（5.1辣椒及其加工產(chǎn)品）5.1.4辣椒籽油酸價、過氧化值其他植物、藻類及其加工產(chǎn)品（7.5 藻類及其加工產(chǎn)品）7.5.10藻油粗脂肪、酸價、過氧化值乳制品及其副產(chǎn)品8.3.1奶油（黃油）脂肪、酸價、過氧化值、水分8.3.2稀奶油脂肪、酸價、過氧化值、水分陸生動物產(chǎn)品及其副產(chǎn)品9.1.1油粗脂肪、不皂化物、酸價、丙二醛9.2.1蠶蛹（粉）粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、酸價9.2.2蠶蛹粕脫脂蠶蛹（粉）粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、酸價9.2.7蟲（粉）粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、酸價9.6.7肉粉粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、總磷、胃蛋白酶消化率、酸價9.

16、6.8肉骨粉粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、總磷、胃蛋白酶消化率、酸價魚、其他水生生物及其副產(chǎn)品10.2.6蝦油脂肪、酸價、碘價10.3.5烏賊油粗脂肪、酸價、碘價10.3.10魷魚油粗脂肪、酸價、碘價10.4.11魚油酸價、碘價、丙二醛、粗脂肪根據(jù)上述產(chǎn)品信息及市場調(diào)研，項目組收集了以下代表性產(chǎn)品：谷物及其加工產(chǎn)品（米糠、玉米油、米糠油）；油料籽實及其加工產(chǎn)品（大豆、大豆油、油菜籽、菜籽油、大豆磷脂油、氫化脂肪、棕櫚脂肪粉）；辣椒及其加工產(chǎn)品（辣椒油）；奶油及其加工制品（奶油黃油、稀奶油）；動物油脂（雞油、豬油）；魚、其它水生生物及其副產(chǎn)品（魚油、魷魚油、鳀魚油）；昆蟲及其加工產(chǎn)品（蠶蛹粉）；肉骨及其加工

17、產(chǎn)品（雞肉粉）。樣品基本覆蓋了含油脂的飼料原料的主要類型，結(jié)果見表3。表3 收集的油脂的基本信息原料名稱來源玉米油益海嘉里米糠山東美越飼料米糠油嘉吉飼料大豆（黑龍江大豆）沈陽信昌糧食貿(mào)易有限公司大豆油益海嘉里油菜籽杭州市桐廬縣分水鎮(zhèn)播義村榨油坊菜籽油浙江常發(fā)糧油食品有限公司雞油濰坊美寶來動物蛋白有限公司豬油金燕魚油熙美諾魷魚油付達(dá)漁粉銷售中心鳀魚油五豐糧油辣椒油河北邢臺市隆堯縣旭日食品有限公司奶油 澳大利亞德運(yùn)黃油、德國安佳稀奶油雀巢淡奶油、法國總統(tǒng)（President）牌、歐德寶、妙可藍(lán)多氫化脂肪益海嘉里 大豆磷脂油安徽省中創(chuàng)工程技術(shù)有限公司大豆磷脂油粉海興正昌飼料廠棕櫚脂肪粉益海嘉里雞肉粉

18、美國蛋白公司蠶蛹粉山東美越飼料（2）試劑氫氧化鈉：上海凌峰，批號：20191210；氫氧化鉀：上海凌峰，批號：20190930 ；酚酞：阿拉丁，批號：P108715；百里香酚酞：阿拉丁，批號：T104283;堿性藍(lán)6B：麥克林，批號：C10092067; 無水硫酸鈉：江蘇強(qiáng)盛，批號：20150801；石油醚（30 60 ）：上海凌峰，批號：20181022；異丙醇：上海凌峰，批號：20130313；乙醚：國藥滬試，批號：20170622；乙醇：上海凌峰，批號：20181112；正庚烷：國藥滬試，批號：2021222。（3）儀器和設(shè)備精密電子天平 品牌：METTLER型號：XP205DU ；電位

19、滴定儀品牌：Metrohm 型號：916 Ti-Touch；恒溫干燥箱 品牌：賓德 型號：FD115；電熱恒溫振蕩水槽 品牌：上海精宏 型號：DKZ-2;超聲波清洗器 品牌：昆山市超聲儀器 型號：KQ-500E；磁力攪拌器 品牌：德國IKA 型號：RO 10；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 品牌：BUCHI 型號：R-210;離心機(jī) 品牌:sigma 型號：3K15；紫外分光光度計 品牌：島津 型號：UV3600。2.試驗方法的建立用有機(jī)溶劑提取樣品中的油脂，將油脂溶解成溶液，再用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液或氫氧化鉀乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液中和樣品溶液中的游離脂肪酸，通過指示劑的顏色變化或電位變化的等當(dāng)點(diǎn)判斷滴定終點(diǎn)，通過標(biāo)準(zhǔn)

20、滴定溶液消耗的體積計算油脂試樣中的酸價。(1)試樣制備方法考察 動植物油脂 植物籽實及其加工產(chǎn)品提煉的油脂、動物組織提煉的油脂，在不同儲存條件下，外觀形態(tài)為液態(tài)、半固態(tài)和固態(tài)。該類產(chǎn)品脂肪含量均勻，水分和雜質(zhì)含量較低，樣品制備主要是去除固體雜質(zhì)和水分，因此標(biāo)準(zhǔn)引用GB/T 15687-2008 動植物油脂 試樣的制備的方法對其進(jìn)行制備。 谷物及其加工產(chǎn)品、油料籽實及其加工產(chǎn)品、昆蟲加工產(chǎn)品、肉（骨）粉、大豆磷脂油粉谷物及其加工產(chǎn)品、油料籽實及其加工產(chǎn)品、肉（骨）粉等含油脂的飼料原料含雜質(zhì)較多，游離脂肪酸含量低，需要通過制備提取出較純的油脂，制備方法主要參考GB/T 20195-2006 動物飼

21、料 試樣的制備、GB 5009.229-2016 食品中酸價的測定中含油食品試樣的制備方法（浸出法）、GB 5009.227-2016 食品中過氧化值的測定中油脂制品試樣的制備方法（浸出法）和NY/T 2333-2013 糧食、油料檢驗 脂肪酸價的測定中樣品制備方法（振提法）。GB/T 20195-2006 動物飼料 試樣的制備中試樣的制備步驟為；研磨樣品，過1 mm的篩。食品中酸價的測定（GB 5009.229-2016）中浸出法提取步驟為：稱取樣品，加入3倍5倍體積石油醚（30 60 ），并用磁力攪拌器充分?jǐn)嚢?0 min60min,使樣品充分分散于石油醚中，然后在常溫下浸出12 h 以上

22、，再用濾紙過濾，取濾液置于水浴溫度不高于45的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中蒸干；食品中過氧化值的測定（GB 5009.227-2016）中油脂制品試樣的制備方法為： 將粉碎的樣品置于廣口瓶中, 加入 2倍3倍樣品體積的石油醚, 搖勻, 充分混合后靜置浸出 12h 以上, 經(jīng)裝有無水硫酸鈉的漏斗過濾, 取濾液, 在低于40 的水浴中, 用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸干石油醚, 殘留物即為待測試樣。在試驗中發(fā)現(xiàn)大豆、大豆磷脂油粉等飼料原料樣品油脂含量低，稱量的樣品和溶劑的體積太大（200g樣品+600mL溶劑），磁力攪拌子無法攪動樣品，只能采用玻璃棒攪拌的方式；浸出后過濾的方法不便于操作（速度慢，且溶劑揮發(fā)性強(qiáng)，不利于實驗人

23、員健康）；采用直接取上清液的方法操作簡便，即便上清液中含有一定量的固體雜質(zhì)可以在旋蒸后通過其他的方式去除。因此，浸出法提取試驗采用的具體的方法為：取代表性試樣200 g ，置于廣口瓶中，加入600 mL石油醚，用玻璃棒攪拌10min以上，靜置12h。取出提取液轉(zhuǎn)移至50 mL離心管中，8 000 r/min 離心分離5 min，取上清液置于水浴溫度不高于40 的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)，0.08 MPa0.1 MPa負(fù)壓條件下，將其中的溶劑徹底旋轉(zhuǎn)蒸干，取殘留的液體油脂作為試樣。若殘留的油脂渾濁，將油脂轉(zhuǎn)移至50 mL離心管中，8 000 r/min離心分離5 min，取上清液作為試樣。糧食、油料檢驗脂肪

24、酸價的測定（NY/T 2333-2013）中振蕩法提取的步驟是樣品經(jīng)粉粹稱量后加入6倍體積溶劑振蕩1h后測定。振蕩法提取試驗采用的具體的方法為：取代表性試樣200 g ，置于廣口瓶中，加入3倍體積石油醚（30 60 ），置于往返式振蕩器上振搖2 h，振蕩頻率為100次/min。取出提取液，8 000 r/min 離心分離5 min，取上清液置于水浴溫度不高于40 的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)，0.08 MPa0.1 MPa負(fù)壓條件下，將其中的溶劑徹底旋轉(zhuǎn)蒸干，取殘留的液體油脂作為試樣。若殘留的油脂渾濁，將提取液轉(zhuǎn)移至50 mL離心管中，8 000 r/min離心分離5 min，取上清液作為試樣。分別以米糠（

25、已粉粹）、蠶蛹粉、雞肉粉和大豆磷脂油粉作為樣品，分別按照上述浸出提取法和振蕩提取法的方法進(jìn)行提取試驗，并稱取所得油脂，采用80 mL乙醚-異丙醇混合溶液（1+1）溶解油脂，以氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液（0.1 mol/L）進(jìn)行電位滴定測定酸價，測定結(jié)果見表4。表4 浸出提取法和振蕩提取法比較試驗 樣品 提取方法油脂收率（%）酸價（mg/g）*12平均變異系數(shù)（%）*米糠浸出法9.34.694.864.73.6振蕩法16.27.347.557.42.8蠶蛹粉浸出法9.715.7715.3715.62.6 振蕩法19.78.788.948.9 1.8雞肉粉浸出法6.59.088.708.9 4.3振蕩法

26、14.27.086.967.0 1.7大豆磷脂油粉浸出法48.025.7625.1825.5 2.3振蕩法48.126.3326.0626.2 1.0大豆浸出法15.60.2050.2230.214.2振蕩法15.80.1910.2020.202.5油菜籽浸出法28.2%0.7770.7980.791.3振蕩法36.7%0.9170.8820.901.9注：酸價是以樣品所提取的油脂作為試樣計算。從表4中可以看出，對于大豆磷脂油粉和大豆樣品，采用兩種方法提取出的油脂的收率和酸價差異不明顯，但米糠、蠶蛹粉、雞肉粉和油菜籽的油脂收率和酸價差異較大，采用振蕩提取法所得油脂的收率更高，表明油脂的提取效果

27、更好。油用米糠（LS/T 3269-2020）規(guī)定的三級（最低級）粗脂肪含量為14.0，米糠中油脂與蛋白提取技術(shù)研究進(jìn)展肖信錦，李陽洋等.糧食與油脂，2016，29（3）：1-4中指出米糠含有1424的油脂，飼料原料 米糠餅（NY/T 123-2019）中規(guī)定的米糠餅的粗脂肪含量為10.0%，而米糠餅則是米糠脫油后剩余的產(chǎn)物。從以上文獻(xiàn)可知，米糠中含油脂的量應(yīng)在10%以上，因此，浸出法的油脂收率略低，振蕩法的油脂收率結(jié)果比較符合。蠶蛹粉和蠶粕的制作與應(yīng)用孫述蘭,孫元豐.中國動物保健,2002(7)34-35中指出蠶蛹粉的粗脂肪含量可達(dá)22以上，蠶蛹粕(渣)的粗脂肪含量一般僅在10左右。蠶蛹粉代

28、替70%進(jìn)口魚粉飼喂北京肉鴨試驗孫桂芝,韓桂芝.遼寧畜牧獸醫(yī),1997(5)20-20中所用蠶蛹粉所含粗脂肪含量為22.3%。飼喂變質(zhì)蠶蛹粉引起雞胃潰瘍張慶坤,劉孝剛,徐長順等.養(yǎng)禽與禽病防治,1996(10):37中指出蠶蛹粉的粗脂肪含量為。從以上文獻(xiàn)可知蠶蛹粉的粗脂肪含量應(yīng)在20%以上，因此，浸出法的油脂收率太低，振蕩法的油脂收率結(jié)果比較符合。雞肉粉樣品的粗脂肪為7%13%（所購的商品標(biāo)簽上注明）。因此，浸出法油脂收率略低，而振蕩法油脂收率比較符合。飼料添加劑 大豆磷脂（GB/T 23878-2009）中規(guī)定的指標(biāo)是磷脂酰膽堿+磷脂酰乙醇胺+磷脂酰肌醇35.0 %。因此，浸出法和振蕩法收率

29、均比較符合。GB 1352-2009 大豆規(guī)定高油大豆最低等級（3級）粗脂肪含量為20.0 %。本試驗大豆為東北大豆大豆含油率較低，大約在17.5%左右，出油率大概在12%18%，因此，浸出法和振蕩法收率均比較符合。通常，油菜籽的出油率在37.5%46.3%，GB/T 11762-2006 油菜籽規(guī)定普通油菜籽和雙低油菜籽最低等級（5級）的含油率均34.0%，由此可見，浸出法收率偏低，振蕩法收率比較符合。綜上所述，米糠、蠶蛹粉、雞肉粉、大豆磷脂油粉、油菜籽選用振蕩法制備試樣效果更好，能夠較完整的提取出油脂。擬采用的方法步驟為：先將樣品切割或分割小片或小塊,再將其放入粉碎機(jī)中粉碎至1mm，并通過

30、圓孔篩，取過篩后樣品50 g100 g(測定的樣品中油脂的酸價4mg/g10 mg/g，需要稱量油脂樣品5g,按油脂收率10%計算，至少50g)，置于廣口瓶中，加入4倍體積石油醚，用玻璃棒攪拌混勻后密塞，置于往返式振蕩器上振搖2 h。取出溶液及樣品，置于50 mL離心管中，于8 000 r/min 離心5 min，取上清液置于水浴溫度不高于40 的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)，負(fù)壓條件下，將其中的溶劑徹底旋轉(zhuǎn)蒸干，取殘留的液體油脂作為試樣。 奶油（黃油）和稀奶油奶油（黃油）常溫下為固態(tài)，需要先加熱融化混合均勻，然后去除樣品中的雜質(zhì)和水分，得到純度高的油脂。食品中酸價的測定（GB5009.229-2016）中附

31、錄C 乳化類油脂試樣的處理采用浸出法石油醚(30 60 )浸出,旋蒸，食品中過氧化值的測定（GB5007.229-2016）對人造奶油的制備是采用破乳法（60 70 加熱破乳，漏斗過濾）。由于浸出法耗時過長，而奶油樣品溶解在石油醚中后可以采用磁力攪拌或振蕩的方式縮短制備時間，因此，奶油（黃油）制備試驗設(shè)計了破乳、浸出、振蕩和磁力攪拌四種提取方法，四種方法間的差異以及試樣制備及酸價的結(jié)果見表5。表5 奶油（黃油）提取試驗中4種提取方法及試驗結(jié)果對比試驗組A組B組C組D組制備方法破乳法（60，30分鐘）浸出法(12h)振蕩法（100次/分，2h）磁力攪拌法(600轉(zhuǎn)/分，2h)樣品重量200200

32、200200融化溫度50505050提取溶劑無需溶劑，破乳后通過分液漏斗取上層油脂3倍體積石油醚(30 60 )3倍體積石油醚(3060 )3倍體積石油醚(3060 )旋蒸/是是是油脂收率（%）60.254.755.955.6酸價（mg/g）*10.4160.4370.4540.49520.4190.4450.4440.499平均0.420.440.450.50變異系數(shù)（%）0.71.82.20.8注：酸價是以樣品所提取的油脂的稱樣量計算。由表5可知，四種方法的油脂收率為55%60%，采用破乳化的油脂收率要略高于浸出法、振蕩法和磁力攪拌法。四種方法所制備的油脂的酸價無顯著差異，制備方法應(yīng)首選破

33、乳法，但考慮到破乳過程中長時間高溫可能會對樣品的酸價造成影響，在破乳后使用分液漏斗分離的操作十分繁瑣，時間稍長很容易致使樣品凝固，不易操作;浸出法耗時過長;磁力攪拌法對磁力攪拌器的功率有較高的要求（200g樣品+600mL溶劑大約600g重），因此，選用振蕩法制備較好。稀奶油為液態(tài)乳化狀或固態(tài)，脂肪含量在10%80%，水含量較高，依照奶油（黃油）制備試驗分別采用破乳、浸出、振蕩和磁力攪拌四種提取方法，四種方法間的差異以及試樣制備及酸價的結(jié)果見表6。表6 稀奶油提取試驗中4種提取方法及試驗結(jié)果對比試驗組A組B組C組D組制備方法破乳法浸出法振蕩法磁力攪拌法樣品重量200200200200融化溫度5

34、0，505050破乳80，60分鐘/提取溶劑無法破乳，停止試驗3倍體積石油醚(3060)3倍體積石油醚(3060)3倍體積石油醚(3060)提取時間/12h100次/分，2h無法攪拌，停止試驗旋蒸/是是/油脂收率（%）/27.728.4/酸價（mg/g）*1/0.7420.790/2/0.7590.774/平均/0.750.78/變異系數(shù)（%）/2.32.0/注：酸價是以樣品所提取的油脂作為試樣計算。由表6可知，稀奶油樣品無法使用破乳法和磁力攪拌法制備，浸出法和振蕩法提取油脂收率和酸價無顯著差異，油脂收率大約為33%，與樣品標(biāo)簽上標(biāo)識的脂肪含量30%相符，相比之下，采用振蕩法更易操作且時間更短

35、。綜上所述，奶油（黃油）和稀奶油的制備方法為：取代表性試樣100 g200 g(樣品酸價0.3 mg/g1 mg/g，需要稱量油脂試樣40g，按奶油油脂收率50%和稀奶油油脂收率20%計算，需要100 g200 g)，置于廣口瓶中。密塞，放入50 60 電熱恒溫干燥箱中加熱融化，加入4倍體積石油醚，用玻璃棒攪拌混勻后密塞，置于往返式振蕩器上振搖2 h，振蕩頻率為100次/min。取出溶液及樣品，置于50 mL離心管中，于8 000 r/min 離心分離5 min，取上清液置于水浴溫度不高于40 的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)，負(fù)壓條件下，將其中的溶劑徹底旋轉(zhuǎn)蒸干，取殘留的液體油脂作為試樣。若殘留的油脂渾濁，將

36、提取液轉(zhuǎn)移至離心管中，8 000 r/min離心分離5 min，取上清液作為試樣。若殘留的油脂中含有的水分無法通過離心除去，可按每10 g油脂加入1 g 2 g 的比例加入無水硫酸鈉，振蕩混合吸附脫水，再次8 000 r/min離心5 min分離，取上清液作為試樣。(2) 試樣溶解用溶劑考察現(xiàn)行國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)中酸價測定常用的溶劑為乙醚-異丙醇混合溶液（乙醚+異丙醇=1+1）和乙醚-乙醇混合溶液（乙醚+乙醇=1+1），因此選取這兩種溶液作為油脂試樣溶解用溶劑考察。溶劑過量或過少可能在溶液中產(chǎn)生渾濁和分層現(xiàn)象，影響酸堿指示劑法滴定終點(diǎn)的顏色變化；其次考慮適合的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液使用量，根據(jù)手動和電位滴定管規(guī)

37、格及節(jié)約試劑及溶劑的需要，滴定液的消耗體積以不超過10 mL為宜。試驗選取氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液（0.1mol/L）10 mL，考察兩種溶劑與標(biāo)準(zhǔn)滴定液的互溶性，結(jié)果見表7。由表7可知，溶劑的用量至少為60 mL才能確保滴定過程中液體始終不會產(chǎn)生分層，擬定溶劑的最低用量為60 mL。表7 兩種溶劑的最低用量考察溶劑名稱40mL50mL60mL70mL乙醚-異丙醇混合溶液分層分層不分層不分層乙醚-乙醇混合溶液不分層不分層不分層不分層參考ISO660及GB/T5009.229標(biāo)準(zhǔn)，油脂樣品的稱樣量為1.0g20g。稱取約20g有代表性的油脂，分別考察60mL和80mL乙醚-異丙醇混合溶液（乙醚+異丙

38、醇=1+1）和乙醚-乙醇混合溶液（1+1）在常溫下對油脂的溶解情況，結(jié)果見表8。由表8可知，兩種溶劑均不能在常溫下溶解棕櫚脂肪粉和氫化脂肪，這是由于棕櫚脂肪粉和氫化脂肪熔點(diǎn)很高，在常溫下呈固體狀態(tài)，即便熱熔后使用溶劑快速溶解，等溫度降到常溫后仍會有油脂析出，因此這兩類產(chǎn)品不適于冷溶劑滴定的方法。此外，乙醚-乙醇混合溶液（1+1）不能溶解奶油、稀奶油和大豆磷脂油，因此選擇乙醚-異丙醇混合溶液（1+1）為冷溶劑滴定方法（冷溶劑指示劑滴定法冷溶劑指示劑法和冷溶劑電位滴定法冷溶劑電位滴定法）樣品的溶劑。表8 常溫下兩種溶劑對樣品的溶解情況樣品名稱乙醚-異丙醇混合溶液（1+1）乙醚-乙醇混合溶液（1+1

39、）60mL80mL60mL80mL大豆油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解米糠油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解玉米油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解菜籽油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解雞油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解豬油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解魚油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解魷魚油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解鳀魚油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解辣椒油完全溶解完全溶解完全溶解完全溶解奶油完全溶解完全溶解析出沉淀析出沉淀稀奶油完全溶解完全溶解析出沉淀析出沉淀大豆磷脂油完全溶解完全溶解析出沉淀析出沉淀棕櫚脂肪粉上層析出油脂上層析出油脂上層析出油脂上層析出油脂氫化脂肪上層析出油

40、脂上層析出油脂上層析出油脂上層析出油脂為了考察熱溶劑法（熱溶劑指示劑滴定法）的溶劑的溶解性能，分別選取棕櫚脂肪粉和氫化脂肪，考察60mL 乙醇在 70下試樣的溶解情況，結(jié)果見表9。由表9可知，棕櫚脂肪粉和氫化脂肪在70均能被乙醇溶解，因此標(biāo)準(zhǔn)選擇乙醇為熱溶劑法（熱溶劑指示劑滴定法）試樣的溶劑。表9 70下乙醇對樣品的溶解情況樣品名稱溶解情況棕櫚脂肪粉完全溶解氫化脂肪完全溶解(3)滴定液的考察酸價滴定常用的滴定液有氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液和氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液，如GB 5009.229-2016、GB/T5510-2011均使用氫氧化鉀或氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液，NY/T 2333-2013使用氫

41、氧化鉀-乙醇滴定溶液，GB/T14415.5-2008使用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液和氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液，由于GB/T 601-2016 化學(xué)試劑 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備收錄的是氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液和氫氧化鉀乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液，因此選取氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液和氫氧化鉀乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液作為考察對象。(4)指示劑的考察酸價滴定常用指示劑分別有酚酞、百里酚酞和堿性藍(lán)6B三種指示劑，指示劑的變色范圍見表10。表10 指示劑的變色范圍指示劑變色范圍顏色變化酚酞指示劑8.310.0酸性和中性無色，堿性紫紅色百里香酚酞9.410.6無色變?yōu)樗{(lán)色堿性藍(lán)6B9.414.0酸性顯藍(lán)色，中性顯紫色，堿性顯淡紅色堿性藍(lán)6B

42、指示劑的配制方法有兩種，一種是稱取2g堿藍(lán)6B，加乙醇100mL溶解即可（冷溶法，參考GB 5009.229-2016）；另一種是稱取1g堿藍(lán)6B加入到50mL煮沸的乙醇中，水浴中回流1h,冷卻后過濾（熱溶法，參考GB/T264-83）。試驗過程中發(fā)現(xiàn)熱熔法要比冷溶法配制的堿性藍(lán)6B指示劑靈敏度更好。圖1是相同條件下分別采用當(dāng)日配制的冷溶法和熱熔法堿性藍(lán)6B指示劑在相同的使用量（4滴）下滴定米糠油樣品終點(diǎn)時的顏色對比，由圖1可知熱溶法制備的堿性藍(lán)6B指示劑能正確顯示中性環(huán)境下的紫色，而冷溶法制備的堿性藍(lán)6B指示劑則顯示為樣品溶液本身顯示的黃色（即使嚴(yán)重滴定過量也無法變?yōu)樽仙蚣t色）。圖1 米糠

43、油采用兩種方法配制的堿性藍(lán)6B指示劑的指示終點(diǎn)顏色對比項目組對比了酚酞指示劑、百里香酚酞指示劑和采用熱熔法配制的堿性藍(lán)6B指示劑儲存不同時間對酸價滴定結(jié)果靈敏度的影響，結(jié)果分別見表11表13。由表11和表12可知，酚酞指示劑和百里香酚酞指示劑在儲存期3個月內(nèi)穩(wěn)定性較好，有效期定為3個月比較合適；由表13可知，堿性藍(lán)6B指示劑在儲存2個月時已經(jīng)不能很好的指示米糠油樣品滴定終點(diǎn)時的顏色變化，有效期定為1個月比較合適。表11 酚酞指示劑儲存時間對酸價滴定結(jié)果靈敏度的影響油脂樣品當(dāng)日新配1個月2個月3個月大豆油靈敏靈敏靈敏靈敏玉米油靈敏靈敏靈敏靈敏雞油靈敏靈敏靈敏靈敏表12 百里香酚酞指示劑儲存時間對

44、酸價滴定結(jié)果靈敏度的影響油脂樣品當(dāng)日新配1個月2個月3個月大豆油靈敏靈敏靈敏靈敏玉米油靈敏靈敏靈敏靈敏米糠油靈敏靈敏靈敏靈敏表13 堿性藍(lán)6B指示劑（熱熔法配制）儲存時間對酸價滴定結(jié)果靈敏度的影響油脂樣品當(dāng)日新配1個月2個月3個月大豆油靈敏靈敏靈敏不靈敏玉米油靈敏靈敏靈敏不靈敏米糠油靈敏靈敏不靈敏完全不能使用項目組選擇具有代表性的油脂分別考察了氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液（0.1mol/L）和氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液（0.1mol/L）以及酚酞、百里酚酞和堿藍(lán)6B三種指示劑對酸價測定的影響，結(jié)果見表14。由表14可知，淺色油脂選用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液和氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液均可，三種指示劑變色均

45、靈敏，由于酚酞指示劑變色范圍的最低pH值最接近中性（8.3，見表10），因此，淺色油脂滴定的指示劑首選酚酞指示劑；米糠油、菜籽油、魚油等略深色的油脂選用氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液和百里香酚酞指示劑，滴定終點(diǎn)判定靈敏；辣椒油、魷魚油和鳀魚油等深色油脂使用兩種滴定液和三種指示劑均不靈敏，不適宜采用冷溶劑指示劑滴定方法。表14 不同指示劑的滴定樣品名稱滴定液油脂顏色酚酞指示劑百里香酚酞堿藍(lán)6B終點(diǎn)顏色是否靈敏終點(diǎn)顏色是否靈敏終點(diǎn)顏色是否靈敏大豆油氫氧化鈉黃色紫紅是藍(lán)色是紅色是氫氧化鉀-乙醇黃色紫紅是藍(lán)色是紅色是玉米油氫氧化鈉淺黃紫紅是藍(lán)色是紅色是氫氧化鉀-乙醇淺黃紫紅是藍(lán)色是紅色是菜籽油氫氧化鈉深棕

46、紅色否藍(lán)色否灰棕否氫氧化鉀-乙醇深棕棕黃否藍(lán)色是灰棕否米糠油氫氧化鈉深棕紅色否藍(lán)色否灰棕否氫氧化鉀-乙醇深棕棕黃否藍(lán)色是灰棕否辣椒油氫氧化鈉棕色棕色否藍(lán)色否褐色否氫氧化鉀-乙醇棕色棕色否藍(lán)色否褐色否豬油氫氧化鈉淺黃紫紅是藍(lán)色是紅色是氫氧化鉀-乙醇淺黃紫紅是藍(lán)色是紅色是雞油氫氧化鈉淺黃紫紅是藍(lán)色是紅色是氫氧化鉀-乙醇淺黃紫紅是藍(lán)色是紅色是魚油氫氧化鈉棕色淺黃否藍(lán)色是灰棕否氫氧化鉀-乙醇棕色淺黃否藍(lán)色是灰棕否魷魚油氫氧化鈉棕色淺黃否藍(lán)色否灰棕否氫氧化鉀-乙醇棕色淺黃否藍(lán)色否灰棕否鳀魚油氫氧化鈉黑棕黃棕否藍(lán)色否灰棕否氫氧化鉀-乙醇棕色黃棕否藍(lán)色否灰棕否奶油氫氧化鈉黃色紫紅是藍(lán)色是紅色是氫氧化鉀-乙醇

47、黃色紫紅是藍(lán)色是紅色是稀奶油氫氧化鈉黃色紫紅是藍(lán)色是紅色是氫氧化鉀-乙醇黃色紫紅是藍(lán)色是紅色是 (5)水相和非水相電極對電位滴定的影響酸堿中和滴定常用的電極是玻璃-飽和甘汞電極，它是以玻璃薄膜為電極，以飽和甘汞電極作為參比電極。目前，復(fù)合pH玻璃電極應(yīng)用已十分廣泛，它將指示電極和參比電極組裝在一起，使用起來更方便。復(fù)合pH玻璃電極根據(jù)使用介質(zhì)又可分為水相和非水相電極，油脂樣品的溶劑都是乙醚和異丙醇等電導(dǎo)率較低的有機(jī)相溶液，非水相電極的玻璃隔膜為圓球形，比表面積很大，且隔膜為可移動的套管式隔膜，能夠確保在這類低電導(dǎo)溶液中響應(yīng)快速且測量值穩(wěn)定。項目組分別選用瑞士萬通非水相玻璃-飽和甘汞電極（以下簡

48、稱非水相電極，型號：6.0229.100）和瑞士萬通水相玻璃-飽和甘汞電極（以下簡稱水相電極，型號：6.0223.100），以mv作為測量值，進(jìn)行驗證試驗，結(jié)果見表15。由表15可知，四種油脂采用兩種電極測定的酸價的結(jié)果均比較接近，但水相電極測得結(jié)果的精密度（絕對差值/算術(shù)平均值以及RSD）遠(yuǎn)大于非水相電極，且大豆油、米糠油和豬油測定值的絕對差值/算術(shù)平均值10%,RSD4%，表明采用水相電極測定的結(jié)果的可靠性較差。表15 兩種電極測定油脂中酸價的結(jié)果對比樣品名稱電極酸價值（mg/g）*絕對差值/算術(shù)平均值（%）RSD(%)1234平均值大豆油非水相0.6600.6640.6520.6590.

49、661.80.8水相0.6530.6110.6860.6490.6511.54.7米糠油非水相3.583.603.713.613.63.60.7水相3.323.633.703.693.610.65.0豬油非水相2.982.892.933.023.04.31.9水相2.753.332.933.243.118.78.8稀奶油非水相0.5350.5320.5370.5390.541.30.6水相0.5440.5360.5660.5690.565.92.7*絕對差值/算術(shù)平均值是取每組中絕對差值最大的兩次。圖2圖9為四種油脂采用兩種電極滴定的滴定曲線（電壓值-滴定體積實時變化曲線）的圖片，可知非水相電

50、極的滴定曲線滴定突躍點(diǎn)（EP1）所對應(yīng)的電壓變化的一階導(dǎo)數(shù)圖（圖中紅線）頂點(diǎn)更尖銳，即突躍點(diǎn)更易識別。 圖2 大豆油水相電極滴定曲線 圖3 大豆油非水相電極滴定曲線 圖4 米糠油水相電極滴定曲線 圖5 米糠油非水相電極滴定曲線 圖6 豬油水相電極滴定曲線 圖7 豬油非水相電極滴定曲線 圖8 稀奶油水相電極滴定曲線 圖9 稀奶油非水相電極滴定曲線 項目組又采用pH值作為測量值作對比試驗，所得結(jié)果見表16和圖10圖17。表16 兩種電極對油脂酸堿中和滴定測量值及穩(wěn)定性的影響（pH-滴定體積實時變化曲線）樣品名稱電極酸價值（mg/g）*絕對差值/算術(shù)平均值（%）RSD(%)1234平均值玉米油非水相

51、0.6490.6650.6590.6620.662.41.1水相0.6420.6770.6890.6520.667.13.3米糠油非水相3.783.723.713.693.72.41.0水相3.413.873.463.593.610.65.8豬油非水相2.812.852.762.792.83.21.3水相3.073.222.943.313.111.95.2稀奶油非水相0.5510.5430.5410.5450.541.90.8水相0.5290.5540.5570.5430.555.12.3*絕對差值/算術(shù)平均值是取每組中絕對差值最大的兩次。 圖10 玉米油水相電極滴定曲線 圖11 玉米油非水相

52、電極滴定曲線 圖12 米糠油水相電極滴定曲線 圖13 米糠油非水相電極滴定曲線 圖14 豬油水相電極滴定曲線 圖15 豬油非水相電極滴定曲線 圖16 稀奶油水相電極滴定曲線 圖17 稀奶油非水相電極滴定曲線由表16可知，采用兩種電極測定的四種油脂酸價的平均值結(jié)果均比較接近，但水相電極測得結(jié)果的精密度（絕對差值/算術(shù)平均值以及RSD）遠(yuǎn)大于非水相電極，采用水相電極所測得的結(jié)果的可靠性較差。由圖10圖17可知非水相電極的一階導(dǎo)數(shù)圖頂點(diǎn)更尖銳，即突躍點(diǎn)更易識別。由此可知，水相電極用來測定玉米油等只有一次pH突躍且樣品提煉簡單基質(zhì)對滴定無較大干擾的油脂尚可，對于米糠油、稀奶油、豬油等滴定過程中存在多次

53、pH突躍或油脂提煉過程較復(fù)雜的樣品難以確保滴定結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，電位滴定需采用非水相專用復(fù)合pH電極或性能相當(dāng)?shù)碾姌O。再對比表14和表15以及圖2圖17可知，相同電極采用電位值（mV）和pH值對檢測結(jié)果沒有顯著影響，但對于米糠油等可能會在滴定中出現(xiàn)多個突躍點(diǎn)的樣品，采用pH值作為測量值可以方便滴定過程中以pH值輔助滴定終點(diǎn)的判定。(6)電位滴定法滴定方法考察樣品滴定方法考察不同廠家的電位滴定儀對酸堿滴定的測定的參數(shù)設(shè)置不同，即便同一廠家采用不同的電極所設(shè)定的參數(shù)也不盡相同。項目組調(diào)研了國內(nèi)使用較多的幾種電位滴定儀的儀器性能參數(shù)以及推薦的酸價滴定的方法參數(shù)，分別見表17和表18。表17 5種電

54、位滴定儀的儀器性能參數(shù)型號916Orion Star T910G20SZDJ-5BZDJ-3D生產(chǎn)廠商萬通賽默飛梅特勒上海雷磁北京先驅(qū)威鋒測量范圍pH值：0.0020.00 電位：-2000+2000mvpH值：2.0020.00 電位：-2000+2000mvpH值：020.00 電位：-2000+2000mvpH值：0.0020.00 電位：-2000+2000mvpH值：020.00 電位：-2000+2000mv分辨率pH值：0.001；電位：0.1mvpH值：0.001；電位：0.1mvpH值：0.001；電位：0.1mvpH值：0.001；電位：0.01mvpH值：0.01；電位：

55、0.1mv測量精度0.2mv0.2mv0.2mv0.2mv0.2mv滴定管分辨率1/80001/200001/200001/200001/20000滴定體積精度0.1l0.1l0.1l0.1l0.625l測量模式動態(tài)滴定、等量滴定動態(tài)滴定、等量滴定動態(tài)滴定、等量滴定動態(tài)滴定、等量滴定動態(tài)滴定、等量滴定*閾值通常設(shè)定為等當(dāng)點(diǎn)處一階導(dǎo)數(shù)最大值的50%80%。表18 廠家推薦的酸價滴定方法參數(shù)型號916Orion Star T910DL50ZDJ-5BZDJ-3D生產(chǎn)廠商萬通賽默飛梅特勒上海雷磁北京先驅(qū)威鋒滴定模式動態(tài)滴定動態(tài)滴定動態(tài)滴定動態(tài)滴定等量滴定最小滴定體積（mL）0.0100.0100.0

56、100.0500.050 最大滴定體積（mL）0.1000.2000.100最大0.2 信號漂移值（mV/min）5030503030電位評估值（突躍量）（mV）50405030 30 閾值*/200/300等當(dāng)點(diǎn)個數(shù)51049591515等當(dāng)點(diǎn)確認(rèn)最大值最大值最大值最大值最大值項目組采用的儀器為萬通916型電位滴定儀，采用表18中的916型儀器的方法作為滴定方法進(jìn)行滴定試驗，所得的pH-滴定體積滴定曲線見圖18圖30。 圖18 玉米油電位滴定曲線 圖19 米糠油電位滴定曲線 圖20 菜籽油電位滴定曲線 圖21 辣椒油電位滴定曲線 圖22 雞油電位滴定曲線 圖23 豬油電位滴定曲線 圖24 魚

57、油電位滴定曲線 圖24 魷魚油電位滴定曲線 圖25 奶油電位滴定曲線 圖26 稀奶油電位滴定曲線 圖27 米糠電位滴定曲線 圖28 大豆磷脂油電位滴定曲線 圖29 蠶蛹粉電位滴定曲線 圖30 雞肉粉電位滴定曲線在電位滴定剛開始的階段（0.2mL前）由于系統(tǒng)還未穩(wěn)定，會出現(xiàn)pH值先降后升的現(xiàn)象（見圖31）或有一次突躍（見圖32）而產(chǎn)生一個較大的一階導(dǎo)數(shù)峰（等當(dāng)點(diǎn)），有時這個等當(dāng)點(diǎn)的峰值會大于滴定終點(diǎn)所對應(yīng)的等當(dāng)點(diǎn)的峰值（圖28，EP7為滴定終點(diǎn)）造成誤判（許多電位滴定方法默認(rèn)等當(dāng)點(diǎn)判定方法是取一階導(dǎo)數(shù)曲線最大峰值），因此，在滴定方法中設(shè)置預(yù)滴定體積0.2 mL以避免該處突躍的影響。許多樣品會因有

58、多個突躍導(dǎo)致出現(xiàn)多個等當(dāng)點(diǎn)（圖19，圖28等），即便同一基質(zhì)，不同的電位評估值（或閾值）也可能產(chǎn)生不同的等當(dāng)點(diǎn)，滴定終點(diǎn)的判定方法一般是選取峰值最大的等當(dāng)點(diǎn)，如果電位滴定的參數(shù)設(shè)置不當(dāng)（比如等當(dāng)點(diǎn)數(shù)量太少，閾值太小或太大），會出現(xiàn)儀器未到理論滴定終點(diǎn)前即終止滴定或誤判其他等當(dāng)點(diǎn)為滴定終點(diǎn)，參照表10 中三種指示劑開始變色的pH值范圍（因滴定采用的是非水相電極，和水相電極測定的pH值有一定的差異），采用以“pH突躍”產(chǎn)生的起點(diǎn)最符合或接近于pH 7.59.5 范圍的等當(dāng)點(diǎn)為滴定終點(diǎn)（酚酞指示劑變色的起始pH為8.3，百里香酚酞變色的起始pH為9.5）；若在一個“pH突躍”上產(chǎn)生多個等當(dāng)點(diǎn)，以峰值

59、最大的等當(dāng)點(diǎn)作為滴定終點(diǎn)。圖28和圖33為同一次試驗的滴定曲線圖和滴定結(jié)果圖，可知前6個等當(dāng)點(diǎn)(EP1EP6)所對應(yīng)的pH均小于7，此時溶液為酸性環(huán)境顯然不應(yīng)是滴定終點(diǎn)，第7個等當(dāng)點(diǎn)（EP7）所對應(yīng)的pH接近7.5且一階導(dǎo)數(shù)曲線峰值大于第8個(EP8)和第9個(EP9)，因此，選第7個等當(dāng)點(diǎn)為滴定終點(diǎn)，即滴定體積V=6.2264 mL,同時，在滴定開始時向溶液中加入了3滴百里香酚酞指示劑，溶液變色時滴定體積在6.28mL左右，也佐證了該點(diǎn)是滴定終點(diǎn)。圖31 電位滴定開始階段（米糠油）圖32 電位滴定開始階段（玉米油）圖33大豆磷脂油電位滴定結(jié)果（與圖28為同一次試驗） 空白試驗的滴定方法選擇采

60、用冷溶劑指示劑滴定法滴定時，空白試驗所測得的滴定體積結(jié)果見表19。由表19可知，采用兩種滴定液和兩種指示劑所測得的空白試驗滴定終點(diǎn)體積均比較穩(wěn)定，體積值在0.12mL0.25mL。表19 冷溶劑指示劑滴定法空白試驗滴定終點(diǎn)體積試驗編號滴定液指示劑終點(diǎn)體積（mL）1氫氧化鈉（c=0.0984mol/L）酚酞0.1420.1330.124百里香酚酞0.1950.1760.207氫氧化鉀-乙醇（c=0.0965mol/L）酚酞0.1580.1490.1510百里香酚酞0.22110.24120.25表20為使用較多的5種電位滴定儀空白試驗的推薦參數(shù)。項目組使用萬通916電位滴定儀，以100 mL乙醚