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文檔簡介
1、T細胞亞群結(jié)果的解讀 山東省聊城市人民醫(yī)院ICU 吳鐵軍第一頁,共三十頁。淋巴細胞分化圖第二頁,共三十頁。按T細胞所處的活化階段 初始T細胞naive T cell 效應(yīng)T細胞effector T cell 記憶性T細胞memory T cell按T細胞外表受體TCR分類 + T細胞 + T細胞按T細胞CD4和CD8分子表型 CD4+ T細胞 CD8+ T細胞 按T細胞的功能分類 Th輔助T細胞 TS抑制T細胞 Tr調(diào)節(jié)T細胞T淋巴細胞的分類方法第三頁,共三十頁。外周血中各亞群占淋巴細胞總數(shù)的比例60-80%27-51%15-44%T淋巴細胞CD4T淋巴細胞CD8T淋巴細胞第四頁,共三十頁。淋
2、巴細胞監(jiān)測注重數(shù)量、比例、功能相結(jié)合血液分析常規(guī)檢測依據(jù)白細胞、淋巴細胞比例及計數(shù)綁定機體免疫狀況,無法精確判斷。T淋巴細胞亞群比例檢測臨床常用,但較片面T淋巴細胞亞群數(shù)量觀察免疫細胞數(shù)值變化,評估免疫狀況,通常采用流式細胞儀法,特別針對CD4的檢測,已成為“金標準。功能、數(shù)量、比例結(jié)合更精確評估機體免疫狀態(tài)1234第五頁,共三十頁。目前臨床主要可以做以下工程的檢測淋巴細胞亞群(T+B+NK)的比例和計數(shù)T細胞亞群(CD4+細胞、CD8+細胞、CD4+/CD8+比值MHLA-DR單核細胞HLA-DR)CD4CD25Treg調(diào)節(jié)細胞及Th17細胞我們工作目前國內(nèi)絕大多數(shù)醫(yī)院沒有開展淋巴細胞計數(shù)工
3、程第六頁,共三十頁。項 目百分含量(%淋巴細胞)Total B lymphocyte (CD19+) 5-18%NK cell (CD3-/CD16+56+) 7-40%Total T lymphocyte (CD3+) 50-84%T helper/inducer cell (CD3+/CD4+) 27-51%T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+) 15-44%CD4/CD80.71-2.78(BD)健康中國人參考范圍項 目百分含量(% T淋巴細胞)絕對含量(cells/L)Total T lymphocyte (CD3+)770-2041Thelper
4、/inducer cell (CD3+/CD4+/CD8-)34-70%414-1123Tsupressor/cytotoxic cell (CD3+/CD4-/CD8+25-54%238-874CD3+CD4+CD8+ cell0.5-4.0%6-56第七頁,共三十頁。CD4+、 CD8+ T淋巴細胞的計數(shù)方法一FCM)取100l全血,加三種不同熒光素標記的鼠抗人CD3、CD4、CD8McAb,陰性對照。加紅細胞裂解液,溶血,離心,棄上清。用PBS洗1次,PBS重懸細胞,上機檢測。FCM分析 電子計算機自動計算出陽性細胞百分率及總細胞計數(shù)。簡單、快速、相對精確第八頁,共三十頁。CD3+T細胞
5、正常范圍為:50-84%CD4+T細胞正常范圍為: 27-51% CD8+T細胞正常范圍為: 15-44%CD19+B細胞正常范圍為:5-18%與血細胞計數(shù)儀聯(lián)用,得出各淋巴細胞百分比后乘以淋巴細胞數(shù)量,得出各淋巴細胞的絕對濃度。CD4T淋巴細胞的計數(shù)方法二推算不精確、繁瑣省錢舉例如下第九頁,共三十頁?;颊哐R?guī)中淋巴細胞計數(shù)為0.63 109 /L,淋巴細胞比例測定結(jié)果CD3 為64.9%,CD4為32.5%,CD8為31.1%CD3細胞計數(shù)為0.63109/L64.9%0.41 109 /LCD4細胞計數(shù)為0.63109/L32.5%0.20 109 /LCD8細胞計數(shù)為0.63109/L
6、31.1%0.19 109 /L推算第十頁,共三十頁。第十一頁,共三十頁。單核細胞人類白細胞抗原DR CD14/HLA-DRCD14為LPS復合物受體,主要分布在單核細胞,HLA-DR為活化標志。CD14/HLA-DR可反映人體細胞免疫功能,30%提示免疫麻痹。也有人認為HLA-DR濃度如果連續(xù)兩天低于8000AB/C可認為存在免疫麻痹。廣泛應(yīng)用于臨床。第十二頁,共三十頁。T淋巴細胞亞群研究研究逐年增多第十三頁,共三十頁。淋巴細胞亞群變化的常見臨床意義CD4淋巴細胞減少:見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應(yīng)用免疫抑制劑的患者CD8淋巴細胞增多:見于自身免疫性疾病,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡SLE、
7、艾滋病初期、慢性活動性肝炎、腫瘤及病毒感染等CD4CD8比值異常: 比值降低:一般被稱為“免疫抑制狀態(tài),常見于免疫缺陷病、惡性腫瘤、再生障礙性貧血、白血病、某些病毒感染等 比值增高:說明細胞免疫功能處于“過度活潑狀態(tài),容易出現(xiàn)自體免疫反響。此外還可用于監(jiān)測器官移植的排斥反響,假設(shè)移植后CD4/CD8較移植前明顯增加,那么可能發(fā)生排異反響第十四頁,共三十頁。15The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occ
8、urs before 24 h after diagnosis of shock.膿毒癥休克期存在免疫麻痹第十五頁,共三十頁。存在免疫麻痹的Septic患者死亡率大大增加100名septic患者28天死亡無免疫麻痹免疫麻痹第十六頁,共三十頁。膿毒癥休克患者T淋巴細胞凋亡、存在免疫紊亂第十七頁,共三十頁。存活與死亡Septic中T淋巴細胞亞群的變化一項對院內(nèi)感染的老年膿毒癥患者的前瞻性對照研究第十八頁,共三十頁。Injury, Int. J. Care Injured (2007) 38, 13461357嚴重多發(fā)傷患者免疫細胞的變化特點CD4/CD8降低MHLA-DR降低T細胞及單核細胞凋亡增
9、加第十九頁,共三十頁。燒傷患者早期外周血淋巴細胞亞群的變化特點燒傷患者白細胞低于正常組早期CD3、CD4、CD8細胞計數(shù) 均明顯下降。HLA-DR表達降低。CD4/CD8比值下降。第二十頁,共三十頁。CD4T細胞亞群新分類:Th1 、Th2 、Treg 、Th17我們的研究第二十一頁,共三十頁。抗炎細胞Treg及其分泌的抗炎介質(zhì)IL-10;促炎細胞Th17及分泌的促炎介質(zhì)IL-17、IL-6在人體的炎性免疫穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。第二十二頁,共三十頁。23中國呼吸與危重監(jiān)護雜志, 2022, 09(04): 416-418.結(jié)論一:膿毒癥患者中Treg明顯升高,說明抗炎反響的增強第二十三頁,共三十
10、頁。24 結(jié)論二:在膿毒癥患者中Th17表達明顯升高吳鐵軍,亢翠翠, 中華急診醫(yī)學雜志, 2022, 21(04): 378-380.膿毒癥組對照組膿毒癥患者中Th17表達明顯升高,提示促炎反響的增強。第二十四頁,共三十頁。25重癥膿毒癥患者淋巴細胞增殖能力低下、凋亡淋巴細胞Ag-NoR在健康組中的表達 淋巴細胞Ag-NoR在Sepsis組中的表達吳鐵軍,張麗娜 中國呼吸與危重監(jiān)護雜志, 2022, 09(04): 416-418.膿毒癥組對照組第二十五頁,共三十頁。重癥膿毒癥患者存在免疫麻痹中國急救醫(yī)學雜志, 2022, 31(9): 836-838.CD14+單核細胞人類白細胞抗原-DR(
11、HLA-DR) 表達情況對照組膿毒癥組第二十六頁,共三十頁。27第二十七頁,共三十頁。T淋巴細胞亞群的研究越來越多某種T細胞亞群過高或過低,都提示存在免疫功能紊亂,主要用于了解惡性腫瘤、免疫缺陷、重癥病毒感染、自身免疫病等患者機體的免疫功能是處于什么狀態(tài)。 T細胞亞群的表達受多種因素影響 ?!白兓媚獪y,因此T細胞亞群的解讀應(yīng)細胞比例結(jié)合計數(shù)和功能狀態(tài),連續(xù)動態(tài)監(jiān)測更有意義。嚴重膿毒癥存在免疫紊亂,T淋巴細胞的凋亡,與預(yù)后有一定關(guān)系。創(chuàng)傷等應(yīng)激狀態(tài)同樣導致免疫紊亂??偨Y(jié)第二十八頁,共三十頁。謝 謝!第二十九頁,共三十頁。內(nèi)容總結(jié)T細胞亞群結(jié)果的解讀。淋巴細胞亞群(T+B+NK)的比例和計數(shù)。淋巴細胞比例
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