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文檔簡(jiǎn)介

1、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課堂同步1.(2018全國(guó)卷,37)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題:(1)在實(shí)驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是_。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能_。在照射前,適量噴灑_,可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過_(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),若壓力達(dá)到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度,最可能的原因是_。

2、2.(2020江蘇卷,31)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株,科研人員開展了相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問題:(1)常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中,下列物品及其滅菌方法錯(cuò)誤的是_(填編號(hào))。編號(hào)物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧(2)稱取1.0 g某土壤樣品,轉(zhuǎn)入99 mL無菌水中,制備成菌懸液,經(jīng)_后,獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1 mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上,其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長(zhǎng)出了46個(gè)酵母菌落,則該樣本中每克土壤約含酵母菌_個(gè)。(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力,對(duì)分離所得的菌株,采用射線輻照進(jìn)行_育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以_為

3、唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩,選擇直徑_的菌落,純化后獲得A、B兩突變菌株。(4)在處理含油廢水的同時(shí),可獲得單細(xì)胞蛋白,實(shí)現(xiàn)污染物資源化。為評(píng)價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能,進(jìn)行了培養(yǎng)研究,結(jié)果如圖。據(jù)圖分析,應(yīng)選擇菌株_進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究,理由是_。3.(2020清華大學(xué)中學(xué)生標(biāo)準(zhǔn)學(xué)術(shù)能力診斷)最新調(diào)查顯示手機(jī)每平方厘米就約駐扎了12萬個(gè)細(xì)菌,這個(gè)數(shù)字足以令馬桶坐墊上的細(xì)菌隊(duì)伍“汗顏”。某生物興趣小組的同學(xué),利用手機(jī)表面的細(xì)菌進(jìn)行了相關(guān)的培養(yǎng)研究。(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般含有的成分有_,另外還需滿足對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。(2)若想獲取不同菌的菌

4、落形態(tài),需用固體培養(yǎng)基培養(yǎng),培養(yǎng)基配制的基本步驟:計(jì)算_。上述操作完成,待培養(yǎng)基冷卻凝固后需將平板倒置,這樣做的目的是。(3)為研究手機(jī)表面微生物的種類,用稀釋涂布平板法進(jìn)行細(xì)菌的純化和分離。如圖四種菌落分布情況中,哪些選項(xiàng)是通過稀釋涂布平板法得到的?_。(4)研究小組用瓊脂擴(kuò)散法測(cè)定玫瑰精油對(duì)手機(jī)表面細(xì)菌的抑制情況。該方法的操作步驟如下:首先制備牛肉膏蛋白胨平板,用涂布器將5種細(xì)菌分別接種到5個(gè)平板上,得到細(xì)菌平板。然后制備直徑為5 mm的濾紙圓片,采用_滅菌法處理,將滅菌的濾紙片分別放入_中浸泡10 min,后將濾紙片放在5個(gè)細(xì)菌平板表面。最后將平板放入_中倒置培養(yǎng)48小時(shí)。通過測(cè)量_來檢

5、測(cè)玫瑰精油對(duì)5種細(xì)菌的抑制效果。4.(2021山西高三適應(yīng)考試)自然界里有多種微生物,將其進(jìn)行合理的篩選、培養(yǎng)和應(yīng)用,能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領(lǐng)域帶來巨大經(jīng)濟(jì)效益?;卮鹣铝袉栴}:(1)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),多采取_法,而對(duì)接種環(huán)或涂布器滅菌時(shí)則用_法,若要將微生物采用平板劃線法進(jìn)行分離操作,在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進(jìn)行了5次劃線,則需要對(duì)接種環(huán)灼燒_次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時(shí),要從上次劃線的_開始劃線,最后一次劃的線不能與第一次劃的線_。(2)將接種后的固體培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中_培養(yǎng),以減少培養(yǎng)基中水分的揮發(fā)。其中,培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了_。長(zhǎng)期保存菌種時(shí),應(yīng)將

6、培養(yǎng)的菌液與_充分混勻后,放在20 的冷凍箱中保存。(3)甲、乙兩組同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定某種微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下每隔一段時(shí)間記錄數(shù)據(jù)(統(tǒng)計(jì)時(shí)間內(nèi)微生物總數(shù)小于環(huán)境容納量),得到如表結(jié)果:培養(yǎng)時(shí)間/小時(shí)24487296甲組菌落均值/個(gè)18253632乙組菌落均值/個(gè)20283832據(jù)表可知,計(jì)數(shù)時(shí)最好取培養(yǎng)_小時(shí)記錄的菌落數(shù)作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果,一方面是由于培養(yǎng)時(shí)間較短,會(huì)遺漏菌落數(shù)目,另一方面是由于_。5.(2020全國(guó)卷,37)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解,會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染,只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過

7、程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基,甲的組分為無機(jī)鹽、水和S,乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y?;卮鹣铝袉栴}:(1)實(shí)驗(yàn)時(shí),盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用_的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是_。甲、乙培養(yǎng)基均屬于_培養(yǎng)基。(2)實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2107 個(gè)/mL,若要在每個(gè)平板上涂布100 L稀釋后的菌液,且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過200個(gè),則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋_倍。(3)在步驟的篩選過程中,發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí),某菌株對(duì)S的降解量反而下降,其原因可能是_(答出1點(diǎn)即可)。(4)若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù),請(qǐng)寫出主要實(shí)驗(yàn)步驟:_。(5)上述實(shí)驗(yàn)中,甲、乙

8、兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同,但都能為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供4類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),即_。6.(2021河南省九師聯(lián)盟聯(lián)考)下表為某生物興趣小組的同學(xué)在培養(yǎng)某種微生物時(shí)制定的培養(yǎng)基組分,回答下列問題:KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2OKNO3蒸餾水1.4 g2.1 g0.2 g2.0 g定容至100 mL(1)該培養(yǎng)基缺少的營(yíng)養(yǎng)成分是_,只能用來培養(yǎng)_微生物,若要分離土壤中的尿素分解菌,對(duì)該培養(yǎng)基中成分需進(jìn)行的調(diào)整是_。(2)在接種前,某同學(xué)隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,結(jié)果發(fā)現(xiàn)空白平板上出現(xiàn)了5個(gè)菌落,請(qǐng)分析兩種可能的原因:。(3)某同學(xué)取10 g土壤樣品加90 mL無菌水制成稀釋

9、液,在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為105的溶液中取0.1 mL接種到3個(gè)正常的細(xì)菌培養(yǎng)基上,該過程需要使用的接種工具是_,培養(yǎng)一段時(shí)間后,統(tǒng)計(jì)出平板上的細(xì)菌菌落數(shù)分別為156、178和191,則每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量約為_,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低,原因是。7.(2017全國(guó)卷,37)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用?;卮鹣铝袉栴}:(1)有些細(xì)菌能分解尿素,有些細(xì)菌則不能,原因是前者能產(chǎn)生_。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,原因是_,但可用葡萄糖作為碳源,進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是_(答出兩點(diǎn)即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌,在配制培養(yǎng)基

10、時(shí),應(yīng)選擇_(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是_。(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有_(答出兩點(diǎn)即可)。8.(2019全國(guó)卷,37)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物,會(huì)污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)?;卮鹣铝袉栴}。(1)要從土壤中分離目標(biāo)菌,所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_。(2)在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長(zhǎng)并形成菌落(如圖所示)。如果要得到目標(biāo)菌,應(yīng)該選擇_菌落進(jìn)一步純化,選擇的依據(jù)是_。(3)土壤中的某

11、些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?。若要設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?,?qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論,即_。(4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異,該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn),請(qǐng)完善相關(guān)內(nèi)容。在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上,A處滴加含有酶E的緩沖液,B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液,C處滴加_,三處滴加量相同。一段時(shí)間后,測(cè)量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈,說明_;若A、B處形成的透明圈直徑大小相近,說明_。9.(2021江蘇重點(diǎn)中學(xué)考試)某生物興趣小組試圖探究山羊的瘤胃中的微生物

12、對(duì)尿素是否有分解作用,設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn),并成功篩選到能降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如表所示,實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答問題:KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10 g尿素1 g瓊脂15 g溶解后用蒸餾水定容到1 000 mL(1)該實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基在成分上的特殊要求是_。培養(yǎng)基中的葡萄糖可以為細(xì)菌提供_。(2)實(shí)驗(yàn)中所用錐形瓶、試管都必須進(jìn)行滅菌,常用的滅菌方法是_。圖中接種的方法為_法。(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表,其中_倍的稀釋倍數(shù)比較適合用于觀察統(tǒng)計(jì)。用該方法統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)目與實(shí)際數(shù)目相比_(填“偏大”“基本相同”或“偏小”),其原因是。稀釋倍

13、數(shù)103104105106107菌落數(shù)500367248361810.(2019全國(guó)卷,37)回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。(1)在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是_(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原因是_。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上_(填“能夠”或“不能”)生長(zhǎng),原因是_。(2)用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板_(填“倒置”或“正置”)。(3)單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落,研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物,原因是_。(4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過_處理,這種

14、處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。11.(2019全國(guó)卷,37)已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會(huì)造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。號(hào)培養(yǎng)基:在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5 g/L)。號(hào)培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(15 g/L)。號(hào)培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(45 g/L)。回答下列問題。(1)在號(hào)培養(yǎng)基中,為微生物提供氮源的是_。、號(hào)培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機(jī)物是_。(2)若將土壤懸液接種在號(hào)液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一段時(shí)間后,不能降解X的細(xì)

15、菌比例會(huì)_,其原因是_。(3)號(hào)培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基,若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),接種時(shí),應(yīng)采用的方法是_。(4)假設(shè)從號(hào)培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌,且該菌能將X代謝為丙酮酸,則在有氧條件下,丙酮酸可為該菌的生長(zhǎng)提供_和_。答案1.(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡2. (1)(2)梯度稀釋4.6105(或460 000)(3)誘變脂肪(或油脂)較大(4)B該菌株增殖速度快,單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量高;降解脂肪能力強(qiáng),凈化效果好3. (1)水、碳源、氮源、無機(jī)鹽(2)稱量溶化調(diào)pH滅菌倒

16、平板避免水分蒸發(fā)過快,防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染(3)ABC(4)干熱適宜濃度的玫瑰精油和無菌水恒溫培養(yǎng)箱透明圈的直徑(抑菌圈的直徑)4. (1)高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌6末端相連(2)倒置作為對(duì)照組,排除培養(yǎng)基被雜菌污染甘油(3)72培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng),兩個(gè)或多個(gè)菌落連成一個(gè)菌落5. (1)高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇(2)104(3)S的濃度超過某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)(4)取淤泥加入無菌水中,涂布(或稀釋涂布)到乙培養(yǎng)基上,培養(yǎng)后計(jì)數(shù)(5)水、碳源、氮源和無機(jī)鹽6. (1)碳源自養(yǎng)型加入尿素、葡萄糖、瓊脂,去掉KNO3(2)培養(yǎng)基滅菌不合格;倒平板過程中被污染(3)涂布器1.75108當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落7. (1)脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量,為其他有機(jī)物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無機(jī)鹽離子,作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過程中pH的穩(wěn)定8. (1)W(2)乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈,說明乙菌能降解W(3)將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上,若細(xì)菌能生長(zhǎng),則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?4)緩沖液緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近

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